安捷倫1260 6120液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程

Agilent 1260/6120液質(zhì)聯(lián)用-單四級桿質(zhì)譜操作規(guī)程文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標準操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 1 頁起 草 人：審 核 人：批 準 人：生效日期起草日期：審核日期：批準日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號 批準日期 執(zhí)行日期一、 目的建立Agilent LCMS的標準操作規(guī)程，使分析人員的操作具有規(guī)范性和確保檢測數(shù)據(jù)的準確可靠性。二、 應(yīng)用范圍所有參與Agilent LCMS操作的分析人員和操作人員。三、 使用標準 Agilent LCMS 化學工作站標準操作培訓 中文版四、 責任人分析部負責制作規(guī)程； 分析部主管審核； 研發(fā)部總監(jiān)批準；研發(fā)部分析人員和操作人員負責執(zhí)行五、 概述：A、 工作原理LCMS的工作原理是用高壓輸液泵，將具有不同特性的單一溶液或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相，用泵壓入裝有固定相的色譜柱，經(jīng)進樣閥注入供試品，由流動相帶入色譜柱內(nèi)，在色譜柱內(nèi)各成分被分離后，依次進入檢測器，進入離子源后，試樣被離子化，然后聚焦于質(zhì)譜的質(zhì)量分析器中，根據(jù)質(zhì)荷比不同而被分離檢測，獲得各種色譜和質(zhì)譜數(shù)據(jù)。色譜信號由色譜工作站進行記錄處理。B、 儀器的主要組成部分Agilent 1260 6120液質(zhì)聯(lián)用色譜儀主要由G1311B四元泵、G1329B自動控溫自動進樣器、G1316A柱溫箱、G4212B二極管陣列檢測器、6120單四極桿質(zhì)譜檢測器和Open LAB色譜工作站等部件組成。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標準操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 2 頁起 草 人：審 核 人：批 準 人：生效日期起草日期：審核日期：批準日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號 批準日期 執(zhí)行日期六、 操作規(guī)程：6.1. 開機6.1.1 打開載氣鋼瓶控制閥，設(shè)置分壓閥壓力為0.56-0.69Mpa。6.1.2 準備LC流動相，泵柱塞沖洗溶劑，檢查管線連接狀態(tài)，確認粗真空泵和噴霧室的廢氣排到實驗室外部。6.1.3 打開計算機，并依次打開LC各模塊電源及質(zhì)譜電源，等待各模塊自檢完成(各模塊右上角指示燈為黃色或者無色，質(zhì)譜有“嘟”一聲聲音) 。6.1.4雙擊桌面圖標，進入化學工作站 。顏色說明：顏色位置無色黃色綠色紅色藍色灰色模塊右上角狀態(tài)燈未開電源或者模塊準備就緒模塊未準備就緒正在進樣分析模塊出錯；所有模塊紅色，儀器有漏液工作站圖形顏色模塊未準備就緒模塊準備就緒出錯或者不能聯(lián)機正在進樣分析此模塊沒啟用文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標準操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 3 頁起 草 人：審 核 人：批 準 人：生效日期起草日期：審核日期：批準日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號 批準日期 執(zhí)行日期6.2. 調(diào)諧開始抽真空之后至少要等4個小時或更長時間才能進行調(diào)諧或操作LC/MSD。建議每周進行一次檢驗調(diào)諧，當檢驗調(diào)諧失敗時，應(yīng)該進行一次自動調(diào)諧。調(diào)諧應(yīng)該不需要超過每月一次或最多每星期一次。一般情況下調(diào)諧一次可以穩(wěn)定三個月。6.2.1 單擊MSD調(diào)諧,進入儀器調(diào)諧。6.2.2 選擇調(diào)諧文件，一般選擇ATUNES.TUN文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標準操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 4 頁起 草 人：審 核 人：批 準 人：生效日期起草日期：審核日期：批準日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號 批準日期 執(zhí)行日期6.2.3 自動調(diào)諧雙極性調(diào)諧會先做正模式調(diào)諧，再做負模式調(diào)諧，第一次調(diào)諧必須是雙極性調(diào)諧。自動調(diào)諧一般在檢驗調(diào)諧失敗后做，也可以每個月或在做完儀器維護后執(zhí)行。6.2.4 檢驗調(diào)諧檢驗調(diào)諧可以每天進行（不關(guān)機情況下，每周1次就可以），檢查峰寬，質(zhì)量軸和調(diào)諧離子豐度是否達標。如果失敗工作站會提示對失敗的項目重新校正。如果校正仍然失敗則需要做自動調(diào)諧。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標準操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 5 頁起 草 人：審 核 人：批 準 人：生效日期起草日期：審核日期：批準日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號 批準日期 執(zhí)行日期6.2.5 保存調(diào)諧文件，指定文件名和路徑，將調(diào)諧文件保存到atunes.tun中。6.2.6 最后點擊方法和運行控制，返回到儀器控制界面。6.3. 樣品測定6.3.1 方法建立從編輯整個方法開始，如圖所示。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標準操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 6 頁起 草 人：審 核 人：批 準 人：生效日期起草日期：審核日期：批準日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號 批準日期 執(zhí)行日期從方法菜單中選擇“編輯完整方法”項，選擇要編輯的項目，點擊“確定”。編輯關(guān)于該方法的注釋，然后點擊“確定”。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標準操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 7 頁起 草 人：審 核 人：批 準 人：生效日期起草日期：審核日期：批準日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號 批準日期 執(zhí)行日期系統(tǒng)默認選擇自動進樣。6.3.2 編輯LC采集參數(shù)文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標準操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 8 頁起 草 人：審 核 人：批 準 人：生效日期起草日期：審核日期：批準日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號 批準日期 執(zhí)行日期6.3.3 編輯MSD采集參數(shù)其中Fragmentor的值是碰撞解離誘導的電壓值。對于大分子需要更大的fragmentor值才能使離子進入skimmer。這個參數(shù)對于檢測到的離子豐度影響很大，需要優(yōu)化。選擇scan模式需要設(shè)定掃描的分子量范圍，選擇sim摸式則需要設(shè)定被檢測的離子的質(zhì)核比（小數(shù)點后一位的分子量）。6.3.4 報告的設(shè)定簡短報告包含了信號詳細信息對話框中設(shè)置的所有積分信號的定量文本結(jié)果。 LCMS定性報告中，顯示各個積分的色譜峰的質(zhì)譜圖，可以自動扣背景，并對色譜峰中主要離子自動提取EIC。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標準操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 9 頁起 草 人：審 核 人：批 準 人：生效日期起草日期：審核日期：批準日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號 批準日期 執(zhí)行日期6.3.5 方法的保存文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標準操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 10 頁起 草 人：審 核 人：批 準 人：生效日期起草日期：審核日期：批準日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號 批準日期 執(zhí)行日期6.4. 數(shù)據(jù)分析6.4.1. 點擊圖標，打開分析軟件，使用導航欄可以查看數(shù)據(jù)所在的位置。6.4.2. 使用下拉菜單可以選擇想查看的通道。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標準操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 11 頁起 草 人：審 核 人：批 準 人：生效日期起草日期：審核日期：批準日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號 批準日期 執(zhí)行日期6.4.3. 光譜工具欄介紹6.4.4.顯示質(zhì)譜圖打開色譜圖，選擇光譜工具，從光譜工具欄里先提取離子色譜，然后平均一組選定的光譜，就可以看到質(zhì)譜圖。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標準操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 12 頁起 草 人：審 核 人：批 準 人：生效日期起草日期：審核日期：批準日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號 批準日期 執(zhí)行日期6.5. 關(guān)機6.5.1 進入