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-淀粉酶在畜禽生產(chǎn)中的作用機理及應(yīng)用進展摘 要隨著近代酶技術(shù)及生物技術(shù)的發(fā)展,高效能生物活性物質(zhì)酶制劑已能大規(guī)模地工業(yè)化生產(chǎn),并被應(yīng)用于飼料工業(yè)中,許多實驗和實際應(yīng)用結(jié)果都表明,飼用酶制劑作為一種飼料添加劑能有效地提高飼料的利用率、促進動物生長和防治動物疾病的發(fā)生,與抗生素和激素類物質(zhì)相比,具有卓越的安全性,引起了全球范圍內(nèi)飼料行業(yè)的高度重視。飼用酶種類繁多,淀粉酶作為其中的一種,在畜禽生產(chǎn)中取得了相當(dāng)好的效果。本文主要介紹淀粉酶的組成、基本性質(zhì)以及在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用。關(guān) 鍵 詞:-淀粉酶 畜禽生產(chǎn) 作用機理 應(yīng)用進展正 文:1、-淀粉酶的簡介1.1 -淀粉酶的定義淀粉酶是一類能分解淀粉糖苷鍵的酶的總稱,廣泛存在于動植物和微生物中,是利用最早、用途最廣、工業(yè)產(chǎn)量最大的酶制劑品種。按照水解淀粉酶的方式,淀粉酶主要可分為四大類:-淀粉酶(-amylase)、-淀粉酶(-amylase)、葡萄糖淀粉酶(glucoamylase)和異淀粉酶(isoamylase)。1其中,-淀粉酶(-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖苷酶,EC3.2.1.1)多是胞外酶,其作用于淀粉時可從分子內(nèi)部隨機地切開淀粉鏈的-1,4糖苷鍵,而生成糊精和還原糖,產(chǎn)物的末端殘基碳原子構(gòu)型為-構(gòu)型,故稱-淀粉酶。2-3 1.2 -淀粉酶的分類和結(jié)構(gòu) 依-淀粉酶產(chǎn)物不同可將它們分為糖化型和液化型兩種:液化型-淀粉酶,能將淀粉酶快速液化,其終產(chǎn)物為寡聚糖和糊精:糖化型-淀粉酶有較強的酶切活性,在水解可溶性淀粉時,隨著水解時間的延長而產(chǎn)生寡聚糖,麥芽糖直至葡萄糖。按照其使用條件可以分為低溫型、中溫型、高溫型、耐酸耐堿型。按產(chǎn)生菌不同又可以分為細菌、真菌、植物和動物淀粉酶。4研究表明所有-淀粉酶均為分子量在50ku左右的單體,由經(jīng)典的三個區(qū)域(A、B、C)組成:中心區(qū)域A由一個(/)8圓筒構(gòu)成;區(qū)域B由一個小的-折疊突出于3和3之間構(gòu)成;而C-末端球型區(qū)域C則由一個Greek-key基序組成,為該酶的活性部位,負責(zé)正確識別底物并與之結(jié)合。為保持-淀粉酶的結(jié)構(gòu)完整性和活性,至少需要一個能與之緊密結(jié)合的Ca2+,而Cl-往往是-淀粉酶的變構(gòu)激活因子,并且在所有Cl-依賴性的-淀粉酶中,組成催化三聯(lián)體的殘基都是嚴格保守的。5-6 具有淀粉結(jié)合位點(SBD)的-淀粉酶的三維模型圖71.3 -淀粉酶的基本性質(zhì) 微生物-淀粉酶在pH 5.5-8穩(wěn)定,pH 4以下容易失去活性,酶活性的最適pH為5-6,每分子酶含1克原子Ca2+,Ca2+對淀粉酶有穩(wěn)定作用,可減少因加熱、加酸所引起的變性,還可保護淀粉酶不受蛋白酶的水解,但Ca2+濃度過高對酶的活性有抑制作用。-淀粉酶中含一定量的糖類殘基,對維持酶的穩(wěn)定性有重要影響;一些微生物酶蛋白中缺乏暴露的SH鍵或二硫鍵,這可能使酶具有耐熱、耐酸堿的特性。82、-淀粉酶的作用機理-淀粉酶(-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖苷酶,EC3.2.1.1),以糖原或淀粉為底物,從分子內(nèi)部切開-1,4鍵而生成糊精和還原糖,產(chǎn)物的末端的葡萄糖殘基C1碳原子為-構(gòu)型。-淀粉酶對于直鏈淀粉的作用,第一步是將直鏈淀粉任意地迅速降解為小分子糊精、麥芽糖和麥芽三糖,第二步緩慢地將第一步生成的低聚糖水解為葡萄糖和麥芽糖。由于-淀粉酶不能切開支鏈淀粉分支點-1,6鍵,也不能切開-1,6鍵附近的-1,4鍵,但能越過分支點而切開內(nèi)部的-1,4鍵,因此水解產(chǎn)物中除了含葡萄糖、麥芽糖以外,還殘留系列具有-1,6鍵的極限糊精和含四個或更多葡萄糖殘基的-1,6鍵的低聚糖。93、-淀粉酶在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用 畜禽生產(chǎn)實際上是高度組織化了的體內(nèi)合成和分解的結(jié)果,它包含消化、吸收、代謝、同化等一系列生理生化現(xiàn)象。因此,在畜牧業(yè)生產(chǎn)中,首先面臨著如何解決營養(yǎng)物質(zhì)進入體內(nèi)后,盡可能多的被機體所消化、吸收。近年來,酶制劑的應(yīng)用被看做是提高畜牧業(yè)生產(chǎn)效率的有效手段之一。3.1 -淀粉酶在豬生產(chǎn)中的應(yīng)用3.1.1 -淀粉酶在斷奶仔豬中的應(yīng)用斷奶仔豬體內(nèi)消化酶系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟,斷奶后從吸收易消化的初乳,轉(zhuǎn)為以谷物為主的日糧,常造成消化不良引起的腹瀉,因此,在仔豬飼料中添加以淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶為主的外源酶制劑,對內(nèi)源酶進行調(diào)整。彌補仔豬早期各種消化酶的缺乏,保證仔豬正常消化吸收功能。前蘇聯(lián)科學(xué)家在早期斷奶仔豬日糧中添加淀粉糊精酶,使得日增重提高14.6%,碳水化合物消化率提高77.2%。據(jù)美國有關(guān)資料報道,Collier在早期斷奶仔豬日糧中補充酶制劑(含蛋白酶、淀粉酶、葡聚糖酶)。結(jié)果實驗組比對照組日增重提高了25%,飼料轉(zhuǎn)化率提高了15.5%。103.1.2 -淀粉酶在育肥豬中的應(yīng)用在生長肥育豬飼料中添加以淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶為主的外源酶制劑,其主要作用是改善飼料的營養(yǎng)價值。西德學(xué)者曾多次進行育肥豬添加復(fù)合酶制劑的實驗研究,在以大麥為主的日糧中,添加0.1%的復(fù)合酶制劑,結(jié)果為:實驗組比對照組生長速度提高5.1%,飼料利用率提高4.1%。3.2 -淀粉酶在養(yǎng)禽業(yè)中的應(yīng)用3.2.1 -淀粉酶在肉雞生產(chǎn)中的應(yīng)用在中國,肉雞飼料以玉米和豆粕為主,玉米豆粕型日糧屬于低粘度日糧。過去多數(shù)的研究認為玉米較其他禾谷類飼料容易消化吸收,且不會引起肉雞食糜粘度升高,因而其在肉雞中不存在消化不良的問題,研究認為玉米中淀粉消化率高達98%。但Pack(1995)測定玉米淀粉、脂肪在肉雞回腸消化率時發(fā)現(xiàn)其淀粉消化率只有82%(421日齡),同時發(fā)現(xiàn)玉米中許多營養(yǎng)物質(zhì)的消化發(fā)生在后腸,而后腸養(yǎng)分的吸收率較低,只能提供少量可利用能量。Noy(1995)在顯微鏡下觀察到肉雞回腸末端存在大量未消化的玉米胚乳微粒,這說明肉雞對玉米的消化率并不象想象中的那么高。豆粕中除含蛋白酶抑制劑、植物凝集素之外,還含有約7%的非淀粉多糖,如:阿拉伯木聚糖、果膠以及-半乳糖苷類寡聚糖,這些物質(zhì)不能被家禽消化道酶消化。在IRTA,S進行的一個肉雞實驗表明,當(dāng)肉雞日糧中豆粕含量為40%時,添加-半乳糖苷酶(5009/t),豆粕的代謝能提高了11%。Fransiseo等(1999)在飼料中添加-半乳糖苷酶,家禽對大豆粕中氨基酸和蛋白質(zhì)消化率提高了35%,可消化氨基酸提高了68%。生產(chǎn)型日糧中添加有淀粉酶、中性蛋白酶和脂肪酶組成的復(fù)合酶制劑,提高日糧總能代謝率37%,粗蛋白代謝率1622%,肉雞日增重提高5.713.5%,飼料轉(zhuǎn)化率改善2.358.63%。歐洲51個實驗結(jié)果表明玉米豆粕型日糧中添加一種叫“愛維生1500”的商品酶制劑(含蛋白酶、淀粉酶和木聚糖酶)可使肉雞的體增重提高2.2%,F(xiàn)CR改善2.8%。123.2.2 -淀粉酶在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用在蛋雞日糧中添加適量的酶制劑,有利于雞體內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的沉積,提高蛋雞的生產(chǎn)性能。在蛋雞日糧中添加一定比例的酶制劑(淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶)能使可溶性非淀粉多糖(NSP),如纖維素、半纖維素、-葡聚粉、木聚粉、果膠分解成可利用的多糖類,并能有效破壞細胞壁中非水溶性屏障性抗?fàn)I養(yǎng)因子,進而有利于細胞內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的釋放,同時有效緩解水溶性NSP導(dǎo)致的食糜粘度過大,從而提高飼料利用率,降低糞便粘度,有效減少臟蛋數(shù)量,腸道內(nèi)有害微生物的繁殖及降低排泄物中有機物的含量,具有一定的經(jīng)濟效益和環(huán)保效益。133.3 -淀粉酶在反芻動物中的應(yīng)用粗飼料是全世界反芻動物生產(chǎn)的支柱,但由于粗飼料細胞壁消化率的限制,由粗飼料轉(zhuǎn)化為肉和奶制品的效率有限。植物細胞壁占常規(guī)粗飼料干物質(zhì)含量的4070%。即使在非常理想的飼喂條件下,細胞壁在整個消化消化道的降解率仍低于65%。因此,粗飼料消化率低下是限制反芻動物生產(chǎn)性能充分發(fā)揮的一個重要因素。14從20世紀(jì)60年代開始,人們就試圖通過添加外源酶制劑來改善粗飼料的消化率。現(xiàn)如今,取得了比較顯著的效果。大量的實驗結(jié)果和生產(chǎn)實踐已表明,在飼料中添加外源酶制劑(淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等)可改善肉牛的日增重和飼料轉(zhuǎn)化率,明顯提高奶牛的產(chǎn)奶量,對反芻動物生產(chǎn)性能的提高有明顯的促進作用。但是,由于反芻動物消化道內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)消化和代謝的復(fù)雜性,這些結(jié)果具有很大的不穩(wěn)定性。3.4 -淀粉酶在水產(chǎn)動物中的應(yīng)用目前,酶制劑的研究主要集中在外源酶在畜禽飼料中的應(yīng)用,在水產(chǎn)動物生產(chǎn)中的應(yīng)用還處于摸索階段。魚類對蛋白質(zhì)的要求特別高,蛋白質(zhì)水平一般要求在4050%,這是因為魚類體內(nèi)蛋白酶的活性高,淀粉酶的活性低。據(jù)營養(yǎng)學(xué)方面的研究,魚類對蛋白質(zhì)的消化利用率為7893%,對淀粉的消化利用率只有2646%。因此,大多數(shù)魚類不能充分利用淀粉作為能量,于是蛋白質(zhì)除了構(gòu)成魚體蛋白以外,還要作為能源消耗掉,會造成蛋白質(zhì)的浪費,由于蛋白質(zhì)是昂貴的飼料原料,因此魚蝦飼料價格都比較昂貴。在飼料中添加淀粉酶和糖化酶后,可以補充水產(chǎn)動物嚴重缺乏的淀粉酶,將淀粉的消化吸收率提高到80%以上,從而起到增加飼料能量、提高飼料利用率、減少蛋白質(zhì)作為能量消耗的作用,進而達到降低飼料成本的目的。154、-淀粉酶的發(fā)展前景我國人均占有糧食不足400kg,糧食的短缺是困擾我國飼料工業(yè)發(fā)展的主要因素。因此,要選擇有利于節(jié)約糧食資源的畜牧業(yè)發(fā)展道路,提高飼料利用率,充分利用有限的糧食資源獲得盡可能多的畜產(chǎn)品。-淀粉酶等酶制劑的使用,能有效的解決這個問題,從目前在生產(chǎn)、實驗中的實際應(yīng)用效果可以看出,其作為飼料添加劑用于畜牧業(yè)生產(chǎn)中已成為必然。近年來我國酶制劑工業(yè)蓬勃發(fā)展,品種和產(chǎn)量也在不斷增加。但是同國外酶制劑行業(yè)相比尚有一定的差距。國外-淀粉酶發(fā)酵水平達到900U/ml,而我國常溫-淀粉酶活力為300500U/ml,并且我國-淀粉酶劑型、品種和生產(chǎn)菌株都很單一。為適應(yīng)畜牧業(yè)經(jīng)濟發(fā)展的需要,應(yīng)加強-淀粉酶以下幾個方面的研究:-淀粉酶下游工程的研究,研制不同酶制以及不同劑型的酶制劑;加強菌種的篩選和誘變育種工作;加強基礎(chǔ)理論的研究,如-淀粉酶的飼喂方式及最佳用量與其他添加劑間的相互作用等。15小結(jié):在畜禽飼料中添加-淀粉酶,能顯著提高畜禽對飼料的消化吸收,促進生長,降低飼料成本,并且作為一種綠色飼料添加劑,它的使用具有安全性,有利于畜牧業(yè)生產(chǎn)走上經(jīng)濟節(jié)約型的發(fā)展道路,在畜牧業(yè)生產(chǎn)中具有里程碑式的意義。參考文獻:1 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