食品安全性毒理學(xué)評價程序

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 食品安全性毒理學(xué)評價程序 1主題內(nèi)容與適用范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品安全性毒理學(xué)評價的程序。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于評價食品生產(chǎn)、加工、保藏、運(yùn)輸和銷售過程中使用的化學(xué)和生物物質(zhì)以及在這些過程中產(chǎn)生和污染的有害物質(zhì)，食物新資源及其成分和新資源食品。也適用于食品中其他有害物質(zhì)。2受試物的要求2.1提供受試物（必要時包括雜質(zhì)）的物理、化學(xué)性質(zhì)（包括化學(xué)結(jié)構(gòu)、純度、穩(wěn)定性等）。 2.2受試物必須是符合既定的生產(chǎn)工藝和配方的規(guī)格化產(chǎn)品，其純度應(yīng)與實(shí)際應(yīng)用的相同，在需要檢測高純度受試物及其可能存在的雜質(zhì)的毒性或進(jìn)行特殊試驗(yàn)時可選用純品，或以純品及雜質(zhì)分別進(jìn)行毒性檢驗(yàn)。3食品安全性毒理學(xué)評價試驗(yàn)的四個階段和內(nèi)容及選用原則3.1毒理試驗(yàn)的四個階段和內(nèi)容 3.1.1第一階段：急性毒性試驗(yàn)。 經(jīng)口急性毒性：LD50，聯(lián)合急性毒性。 3.1.2第二階段：遺傳毒性試驗(yàn)，傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)，短期喂養(yǎng)試驗(yàn)。 遺傳毒性試驗(yàn)的組合必須考慮原核細(xì)胞和真核細(xì)胞、生殖細(xì)胞與體細(xì)胞、體內(nèi)和體外試驗(yàn)相結(jié)合的原則。 3.1.2.1細(xì)菌致突變試驗(yàn)：鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗(yàn)（Ames試驗(yàn)）為首選項(xiàng)目，必要時可另選和加選其他試驗(yàn)。 3.1.2.2小鼠骨髓微核率測定或骨髓細(xì)胞染色體畸變分析。 3.1.2.3小鼠精子畸形分析和睪丸染色體畸變分析。 3.1.2.4其他備選遺傳毒性試驗(yàn)：V79/HGPRT基因突變試驗(yàn)、顯性致死試驗(yàn)果蠅伴性隱性致死試驗(yàn)，程序外DNA修復(fù)合成（UDS）試驗(yàn)。 3.1.2.5傳統(tǒng)致畸試驗(yàn) 3.1.2.6短期喂養(yǎng)試驗(yàn)：30d喂養(yǎng)試驗(yàn)。如受試物需進(jìn)行第三、四階段毒性試驗(yàn)者，可不進(jìn)行本試驗(yàn)。 3.1.3第三階段：亞慢性毒性試驗(yàn)90d喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)、代謝試驗(yàn)。 3.1.4第四階段：慢性毒性實(shí)驗(yàn)（包括致癌試驗(yàn)）。 3.2對不同受試物選擇毒性試驗(yàn)的原則 3.2.1凡屬我國創(chuàng)新的物質(zhì)一般要求進(jìn)行四個階段的試驗(yàn)。特別是對其中化學(xué)結(jié)構(gòu)提示有慢性毒性、遺傳毒性或致癌性可能者或產(chǎn)量大、使用范圍廣、攝入機(jī)會多者，必須進(jìn)行全部四個階段的毒性試驗(yàn)。 3.2.2凡屬與已知物質(zhì)（指經(jīng)過安全性評價并允許使用者）的化學(xué)結(jié)構(gòu)基本相同的衍生物或類似物，則根據(jù)第一、二、三階段毒性試驗(yàn)結(jié)果判斷是否需進(jìn)行第四階段的毒性試驗(yàn)。 3.2.3凡屬已知的化學(xué)物質(zhì)，世界衛(wèi)生組織已公布每人每日容許攝入量（ADI,以下簡稱日許量）者，同時申請單位又有資料證明我國產(chǎn)品的質(zhì)量規(guī)格與國外產(chǎn)品一致，則可先進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)，若試驗(yàn)結(jié)果與國外產(chǎn)品的結(jié)果一致，一般不要求進(jìn)行進(jìn)一步的毒性試驗(yàn)，否則應(yīng)進(jìn)行第三階段毒性試驗(yàn)。 3.2.4農(nóng)藥、食品添加劑、食品新資源和新資源食品、輻照食品、食品工具及設(shè)備用清洗消毒劑的安全性毒理學(xué)評價試驗(yàn)的選擇。 3.2.4.1農(nóng)藥 按衛(wèi)生部和農(nóng)業(yè)部頒布的農(nóng)藥安全性毒理學(xué)評價程序進(jìn)行。對于由一種原藥配制的各種商品，其中未加入其他未允許使用的成分時，一般不要求分別對各種商品進(jìn)行毒性試驗(yàn)。凡將兩種或兩種以上已經(jīng)國家批準(zhǔn)使用的原藥混合配制的農(nóng)藥或農(nóng)藥商品的制劑中添加了未經(jīng)批準(zhǔn)的其他具有較大毒性的化學(xué)物質(zhì)作為重要成分，則應(yīng)先進(jìn)行急性聯(lián)合毒性試驗(yàn)，如結(jié)果表明無協(xié)同作用，則按已頒布的個別農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行管理，并對所用的未經(jīng)批準(zhǔn)的化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行安全性評價。如有協(xié)同作用，則需完成混合制品的第一、二、三階段毒性試驗(yàn)。 3.2.4.2食物添加劑 3.2.4.2.1.1凡屬世界衛(wèi)生組織已建議批準(zhǔn)使用或已制定日許量者，以及香料生產(chǎn)者協(xié)會（FEMA）、歐洲理事會（COE）和國際香料工業(yè)組織（IOFI）四個國際組織中的兩個或兩個以上允許使用的，在進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)后，參照國外資料或規(guī)定進(jìn)行評價。 3.2.4.2.1.2凡屬資料不全或只有一個國際組織批準(zhǔn)的，先進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)和本程序所規(guī)定的致突變試驗(yàn)中的一項(xiàng)，經(jīng)初步評價后，再決定是否需進(jìn)行進(jìn)一步試驗(yàn)。 3.2.4.2.1.3凡屬尚無資料可查、國際組織未允許使用的，先進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)，經(jīng)初步評價后，決定是否需進(jìn)行進(jìn)一步試驗(yàn)。 3.2.4.2.1.4從食用動植物可食部分提取的單一高純度天然香料，如其化學(xué)結(jié)構(gòu)及有關(guān)資料并未提示具有不安全性的，一般不要求進(jìn)行毒性試驗(yàn)。 3.2.4.2.2其他食品添加劑 3.2.4.2.2.1凡屬毒理學(xué)資料比較完整，世界衛(wèi)生組織已公布日許量或不需規(guī)定日許量者，要求進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)和一項(xiàng)致突變試驗(yàn)，首選Ames試驗(yàn)或小鼠骨髓微核試驗(yàn)。 3.2.4.2.2.2凡屬有一個國際組織或國家批準(zhǔn)使用，但世界衛(wèi)生組織未公布日許量，或資料不完整者，在進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)后作初步評價，以決定是否需進(jìn)行進(jìn)一步的毒性試驗(yàn)。3.2.4.2.2.3對于由天然植物制取的單一組分，高純度的添加劑，凡屬新產(chǎn)品需先進(jìn)行第一、二、三階段毒性試驗(yàn)，凡屬國外已批準(zhǔn)使用的，則進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)。 3.2.4.2.3進(jìn)口食品添加劑：要求進(jìn)口單位提供毒理學(xué)資料及出口國批準(zhǔn)使用的資料，由省、直轄市、自治區(qū)一極食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)提出意見報(bào)衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所審查后決定是否需要進(jìn)行毒性試驗(yàn)。 3.2.4.3食品新資源和新資源食品 食品新資源及其食品原則上應(yīng)進(jìn)行第一、二、三個階段毒性試驗(yàn)，以及必要的人群流行病學(xué)調(diào)查。必要時應(yīng)進(jìn)行第四階段試驗(yàn)。若根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)資料及成分分析，未發(fā)現(xiàn)有或雖有但量甚少，不至構(gòu)成對健康有害的物質(zhì)，以及較大數(shù)量人群有長期食用歷史而未發(fā)現(xiàn)有害作用的天然動植物（包括作為調(diào)料的天然動植物的粗提制品）可以先進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)，經(jīng)初步評價后，決定是否需要進(jìn)行進(jìn)一步的毒性試驗(yàn)。 3.2.4.4輻照食品 按輻照食品衛(wèi)生管理辦法要求提供毒理學(xué)試驗(yàn)資料。 3.2.4.5食品工具設(shè)備用清洗消毒劑：按衛(wèi)生部頒發(fā)的消毒管理辦法進(jìn)行4食品安全性毒理學(xué)評價試驗(yàn)的目的和結(jié)果判定 4.1毒理學(xué)試驗(yàn)的目的 4.1.1急性毒性試驗(yàn)：測定LD50，了解受試物的毒性強(qiáng)度、性質(zhì)和可能的靶器官，為進(jìn)一步進(jìn)行毒性試驗(yàn)的劑量和毒性判定指標(biāo)的選擇提供依據(jù)。 4.1.2遺傳毒性試驗(yàn) 對受試物的遺傳毒性以及是否具有潛在致癌作用進(jìn)行篩選。 4.1.3致畸試驗(yàn) 了解受試物對胎仔是否具有致畸作用。 4.1.4短期喂養(yǎng)試驗(yàn) 對只需進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)的受試物，在急性毒性試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，通過30d喂養(yǎng)試驗(yàn)，進(jìn)一步了解其毒性作用，并可初步估計(jì)最大無作用劑量。 4.1.5亞慢性毒性試驗(yàn)-90d喂養(yǎng)試驗(yàn)，繁殖試驗(yàn) 觀察受試物以不同劑量水平經(jīng)較長期喂養(yǎng)后對動物的毒性作用性質(zhì)和靶器官，并初步確定最大作用劑量；了解受試物對動物繁殖及對仔代的致畸作用，為慢性毒性和致癌試驗(yàn)的劑量選擇提供依據(jù)。 4.1.6代謝試驗(yàn) 了解受試物在體內(nèi)的吸收、分布和排泄速度以及蓄積性，尋找可能的靶器官；為選擇慢性毒性試驗(yàn)的合適動物種系提供依據(jù)；了解有無毒性代謝產(chǎn)物的形成。 4.1.7慢性毒性試驗(yàn)（包括致癌試驗(yàn)） 了解經(jīng)長期接觸受試物后出現(xiàn)的毒性作用，尤其是進(jìn)行性或不可逆的毒性作用以及致癌作用；最后確定最大無作用劑量，為受試物能否應(yīng)用于食品的最終評價提供依據(jù)。 4.2各項(xiàng)毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的判定 4.2.1急性毒性試驗(yàn) 如LD50劑量小于人的可能攝入量的10倍，則放棄該受試物用于食品，不再繼續(xù)其他毒理學(xué)試驗(yàn)。如大于10倍者，可進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)。凡LD50在人的可能攝入量的10倍左右時，應(yīng)進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)，或用另一種方法進(jìn)行驗(yàn)證。 4.2.2遺傳毒性試驗(yàn) 根據(jù)受試物的化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)以及對遺傳物質(zhì)作用終點(diǎn)的不同，并兼顧體外和體內(nèi)試驗(yàn)以及體細(xì)胞和生殖細(xì)胞的原則，在3.1.2.1，3.1.2.2和3.1.2.3中所列的遺傳毒性試驗(yàn)中選擇四項(xiàng)試驗(yàn)，根據(jù)以下原則對結(jié)果進(jìn)行判斷。 4.2.2.1如其中三項(xiàng)試驗(yàn)為陽性，則表示該受試物很可能具有遺傳毒性作用和致癌作用，一般應(yīng)放棄該受試物應(yīng)用于食品；毋需進(jìn)行其他項(xiàng)目的毒理學(xué)試驗(yàn)。 4.2.2.2如其中兩項(xiàng)試驗(yàn)為陽性，而且短期喂養(yǎng)試驗(yàn)顯示該受試物具有顯著的毒性作用，一般應(yīng)放棄該受試物用于食品；如短期喂養(yǎng)試驗(yàn)顯示有可疑的毒性作用，則經(jīng)初步評價后，根據(jù)受試物的重要性和可能攝入量等，綜合權(quán)衡利弊再作出決定。 4.2.2.3如其中一項(xiàng)試驗(yàn)為陽性，則再選擇3.1.2.4中的兩項(xiàng)遺傳毒性試驗(yàn)；如再選的兩項(xiàng)試驗(yàn)均為陽性，則無論短期喂養(yǎng)試驗(yàn)和傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)是否顯示有毒性與致畸作用，均應(yīng)放棄該受試物用于食品；如有一項(xiàng)為陽性，而在短期喂養(yǎng)試驗(yàn)和傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)中未見有明顯毒性與致畸作用，則可進(jìn)入第三階段毒性試驗(yàn)。 4.2.2.4如四項(xiàng)試驗(yàn)均為陰性，則可進(jìn)入第三階段毒性試驗(yàn)。 4.2.3短期喂養(yǎng)試驗(yàn) 在只要求進(jìn)行兩階段毒性試驗(yàn)時，若短期喂養(yǎng)試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)有明顯毒性作用，綜合其他各項(xiàng)試驗(yàn)即可作出初步評價；若試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)有明顯毒性作用，尤其是有劑量-反應(yīng)關(guān)系時，則考慮進(jìn)一步的毒性試驗(yàn)。 4.2.490d喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)、傳統(tǒng)致畸試驗(yàn) 根據(jù)這三項(xiàng)試驗(yàn)中所采用的最敏感指標(biāo)所得的最大無作用劑量進(jìn)行評價，原則是： 4.2.4.1最大無作用劑量小于或等于人的可能攝入量的100倍者表示毒性較強(qiáng)，應(yīng)放棄該受試物用于食品。 4.2.4.2最大無作用劑量大于100倍而小于300倍者，應(yīng)進(jìn)行毒性試驗(yàn)。 4.2.4.3大于或等于300倍者則不必進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)，可進(jìn)行安全性評價。 4.2.5慢性毒性（包括致癌）試驗(yàn) 根據(jù)慢性毒性試驗(yàn)所得的最大無作用劑量進(jìn)行評價，原則是： 4.2.5.1最大無作用劑量小于或等于人的可能攝入量的50倍者，表示毒性較強(qiáng)，應(yīng)放棄該受試物用與食品。 4.2.5.2最大無作用劑量大于50倍而小于100倍者，經(jīng)安全性評價后，決定該受試物可否用于食品。 4.2.5.3最大無作用劑量大于或等于100倍者，則可考慮允許使用于食品。 4.2.6新資源食品、復(fù)合配方的飲料等在試驗(yàn)中，若試樣的最大加入量（一般不超過飼料的5%）或液體試樣最大可能的濃縮物加入量仍不能達(dá)到最大無作用劑量為人的可能攝入量的規(guī)定倍數(shù)時，則可以綜合其他的毒性試驗(yàn)結(jié)果和實(shí)際食用或飲用量進(jìn)行安全性評價。5進(jìn)行食品安全性評價時需要考慮的因素 5.1人的可能攝入量：除一般人群的攝入量外，還應(yīng)考慮特殊和敏感人群（如兒童、孕婦及高攝入量人群）。 5.2人體資料：由于存在著動物與人之間的種族差異，在將動物試驗(yàn)結(jié)果推論到人時，應(yīng)盡可能收集人群接觸受試物后反應(yīng)的資料，如職業(yè)性接觸和意外事故接觸等。志愿受試者體內(nèi)的代謝資料對于將動物試驗(yàn)結(jié)果推論到人具有重要意義。在確保安全的條件下，可以考慮按照有關(guān)規(guī)定進(jìn)行必要的人體試食試驗(yàn)。 5.3動物毒性試驗(yàn)和體外試驗(yàn)資料：本程序所列的各項(xiàng)動物毒性試驗(yàn)和體外試驗(yàn)系統(tǒng)雖然仍有待完善，卻是目前水平下所得到的最重要的資料，也是進(jìn)行評價的主要依據(jù)。在試驗(yàn)得到陽性結(jié)果，而且結(jié)果的判定涉及到受試物能否應(yīng)用于食品時，需要考慮結(jié)果的重要性和劑量-反應(yīng)并系。 5.4由動物毒性試驗(yàn)結(jié)果推論到人時，鑒于動物、人的種屬和個體之間的生物特性差異，一般采用安全系數(shù)的方法，以確保對人的安全性。安全系數(shù)通常為100倍，但可根據(jù)受試物的理化性質(zhì)、毒性大小、代謝特點(diǎn)、接觸的人群范圍、食品中的使用量及使用范圍等因素，綜合考慮增大或減小安全系數(shù)。 5.5代謝試驗(yàn)的資料：代謝研究是對化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行毒理學(xué)評價的一個重要方面，因?yàn)椴煌瘜W(xué)物質(zhì)、劑量大小，在代謝方面的差別往往對毒性作用影響很大。在毒性試驗(yàn)中，原則上應(yīng)盡量使用與人具有相同代謝途徑和模式的動物種系來進(jìn)行試驗(yàn)。研究受試物在實(shí)驗(yàn)動物和人體內(nèi)吸收、分布、排泄和生物轉(zhuǎn)化方面的差別，對于將動物試驗(yàn)結(jié)果比較正確地推論到人具有重要意義。 5.6綜合評價：在進(jìn)行最后評價時，必須在受試物可能對人體健康造成的危害以及其可能的有益作用之間進(jìn)行權(quán)衡。評價的依據(jù)不僅是科學(xué)試驗(yàn)資料，而且與當(dāng)時的科學(xué)水平、技術(shù)條件，以及社會因素有關(guān)。因此，隨著時間的推移，很可能結(jié)論也不同。隨著情況的不斷改變，科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和研究工作的不斷進(jìn)展，對已通過評價的化學(xué)物質(zhì)需進(jìn)行重新評價，作出新的結(jié)論。對于已在食品中應(yīng)用了相當(dāng)長時間的物質(zhì)，對接觸人群進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查具有重大意義，但往往難以獲得劑量-反應(yīng)關(guān)系方面的可靠資料，對于新的受試物質(zhì)，則只能依靠動物試驗(yàn)和其他試驗(yàn)研究資料。然而，即使有了完整和詳盡的動物試驗(yàn)資料和一部分人類接觸者的流行病學(xué)研究資料，由于人類的種族和個體差異，也很難作出能保證每個人都安全的評價。所謂絕對的安全實(shí)際上是不存在的。根據(jù)上述材料，進(jìn)行最終評價時，應(yīng)全面權(quán)衡和考慮實(shí)際可能。從確保發(fā)揮該受試物的最大效益，以及對人體健康和環(huán)境造成