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文檔簡(jiǎn)介
微生物學(xué)基礎(chǔ)概念,呂文廷2013.8,一、微生物簡(jiǎn)介二、微生物的分布三、微生物的作用及危害四、微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)五、微生物污染及消毒滅菌六、潔凈區(qū)微生物的控制,一、微生物簡(jiǎn)介,1、微生物的定義(microorganism,microbe):微生物是存在于自然界中的個(gè)體微小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼看不見,必須借助于顯微鏡才能看清它們外形的一群低等的、原始的微小生物,如細(xì)菌。2、微生物的分類按其結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成可分為:原核類:僅有原始核質(zhì),無(wú)核仁或核膜,細(xì)胞器很不完善。如細(xì)菌、放線菌、支原體、立克次氏體。真核類:細(xì)胞核的分化程度較高,有核膜、核仁和染色體,細(xì)胞器完整。如真菌(酵母菌和霉菌)、原生動(dòng)物、藻類非細(xì)胞類:體積微小,能通過(guò)除菌過(guò)濾器。如病毒和朊病毒,按其致病性可分為:病原性微生物:有致病性非病原性微生物:無(wú)致病性3.微生物的五大特點(diǎn):個(gè)體小,面積大:小于0.1mm。肉眼不可見。分布廣,種類多(10萬(wàn)多種):自然界中到處都有,如水、空氣、土壤等,土壤中的數(shù)量最多。代謝強(qiáng),轉(zhuǎn)化快:發(fā)酵乳糖的細(xì)菌在1小時(shí)內(nèi)可分解其自重100010000倍的乳糖;產(chǎn)朊假絲酵母合成蛋白質(zhì)的能力比食用公牛強(qiáng)10萬(wàn)倍生長(zhǎng)旺,繁殖快:微生物有驚人的繁殖速度,大多數(shù)微生物幾十分鐘內(nèi)就可以繁殖一代適應(yīng)性強(qiáng),易變異(耐藥性產(chǎn)生的原因),二、微生物的分布,1.微生物在自然界的分布:土壤:是微生物生活的最適環(huán)境,土壤中的微生物又可分為如下幾類:細(xì)菌:占土壤微生物總數(shù)的70%90%。放線菌:占土壤中微生物含量的5%30%。霉菌:主要生活在靠近地面的土壤中,在通氣良好的土壤中,霉菌數(shù)量很多。酵母菌:普通土壤中酵母菌含量很少。水:僅次于土壤的微生物分布、定居的第二場(chǎng)所,90%為革蘭氏陰性菌,主要有假單胞菌、黃桿菌等。,空氣:空氣中的微生物主要來(lái)源于帶有微生物菌體及孢子的灰塵(這類微生物大多數(shù)是腐生性的,)還來(lái)源于人和動(dòng)物,它們大多數(shù)是通過(guò)呼吸道排出的,其中也包含有病原微生物,懸浮在大氣中。2.微生物在人體中的分布:在正常人體皮膚、粘膜及外界相通的各種腔道(如口腔、鼻咽腔、腸道和泌尿道)等部位,存在著對(duì)人體無(wú)害的微生物群.,人體中常見微生物,呂文廷2013.8,部位常見菌種皮膚表皮葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌、綠膿桿菌、恥垢桿菌等口腔鏈球菌(甲型或乙型)、乳酸桿菌、螺旋體、梭形桿菌、白色念球菌、(真菌)表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、類白喉?xiàng)U菌胃正常一般無(wú)菌腸道類桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、厭氧性鏈球菌、糞鏈球菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸桿菌、變形桿菌、破傷風(fēng)桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌等鼻咽腔甲型鏈球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感桿菌、乙型鏈球菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等眼結(jié)膜皮表葡萄球菌、結(jié)膜干燥桿菌、類白喉?xiàng)U菌等,人體中的微生物,三、微生物的作用及危害,1.微生物的作用絕大多數(shù)微生物對(duì)人和動(dòng)物是有益的。微生物已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、釀造、化工、制革、石油等行業(yè),發(fā)揮了越來(lái)越重要的作用。例如與我們?nèi)粘I蠲芮邢嚓P(guān)的如酸奶、酒類、抗生素、疫苗等。2.微生物的危害微生物中也有一部分能引起人及動(dòng)、植物發(fā)生病害,如人類的許多傳染病,如傷寒、結(jié)核、病毒性肝炎,鼠疫等。從藥品生產(chǎn)的而言,微生物對(duì)藥品的原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品的污染是造成生產(chǎn)失敗、成品不合格的重要因素。,四、微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu),(一)、細(xì)菌細(xì)菌是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌,以二分裂方式無(wú)性繁殖的原核微生物,分布廣泛。細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)(1)球菌多數(shù)球菌直徑在1微米左右,外觀呈球形或近似球形。常見的有雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等。(2)桿菌形態(tài)多數(shù)呈直桿狀,也有的菌體稍彎,多數(shù)呈分散存在,也有的呈鏈狀排列,分為棒狀桿菌、鏈狀桿菌、球桿菌等。(3)螺形菌菌體彎曲,呈弧形或螺旋形。如幽門螺桿菌。細(xì)菌雖小,仍具有一定的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)是細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)。,大腸菌群,大腸菌群為人和動(dòng)物腸道中的常居菌,在一定條件下可引起腸道外感染。生存環(huán)境大腸菌群在自然界中分布廣泛,在1546均可生長(zhǎng),最適生長(zhǎng)溫度為37。在水和土壤中大量存在,對(duì)自然環(huán)境有較強(qiáng)的抵抗力。主要污染的食品是肉類、水產(chǎn)品、蔬菜等。85熱水13分鐘滅菌。300ppm次氯酸納溶液13分鐘內(nèi)殺滅本菌。,金黃色葡萄球菌在自然界中分布廣泛,空氣、水、地面、物體表面、人和動(dòng)物的體表、粘膜等處均有存在。食品藥品中生長(zhǎng)有金黃色葡萄球菌,是食品藥品衛(wèi)生的一種潛在危險(xiǎn),因?yàn)榻瘘S色葡萄球菌可以產(chǎn)生腸毒素,食后能引起食品中毒。,金黃色葡萄球菌,金黃色葡萄球菌,繁殖條件金黃色葡萄球菌能在1245生長(zhǎng)繁殖,最適生長(zhǎng)溫度為37,特征傷口化膿的地方、口、鼻子等處繁殖;污染來(lái)源于手指的可能性很高;產(chǎn)生的毒素,非常耐熱;預(yù)防:手指處有傷口、化膿口的人,不要直接接觸產(chǎn)品;徹底對(duì)手指進(jìn)行洗凈消毒,佩戴手套,要戴帽子、戴口罩;殺滅條件加熱8030分鐘才能殺死,煮沸可迅速使它死亡,沙門氏菌,呂文廷2013.8,沙門氏菌,沙門氏菌常在動(dòng)物中廣泛傳播,人的沙門氏菌感染也非常普遍。世界上沙門氏菌的食物中毒占首位,因此,檢查食品藥品中的沙門氏菌非常重要。生存環(huán)境沙門氏菌在水中不易繁殖,但可生存23周,冰箱中可生存34個(gè)月,在25可存活10個(gè)月,在自然環(huán)境的糞便中可存活12個(gè)月。繁殖條件沙門氏菌最適繁殖溫度為37,在20以上即能大量繁殖,因此,低溫儲(chǔ)存食品是一項(xiàng)重要預(yù)防措施。,污染渠道沙門氏菌的來(lái)源主要是患病的人和動(dòng)物,及人和動(dòng)物的帶菌者,其中在肉類中最為多見。殺滅條件沙門氏菌對(duì)熱及外界環(huán)境的抵抗力屬于中等,602030分鐘755分鐘即被殺死,100立即被殺死。,沙門氏菌,(二)、真菌,真菌是一類有細(xì)胞壁,無(wú)葉綠素,以寄生或腐生方式生存,少數(shù)為單細(xì)胞,多數(shù)為多細(xì)胞,能進(jìn)行無(wú)性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生物。真菌包括單細(xì)胞與多細(xì)胞兩類。單細(xì)胞真菌呈圓形或卵圓形,稱為酵母菌;多細(xì)胞真菌由菌絲和孢子組成,并交織成團(tuán),稱絲狀菌或霉菌。真菌生長(zhǎng)的最適的溫度為2228,最適的pH值為46。其繁殖能力強(qiáng),但生長(zhǎng)速度比細(xì)菌慢,常需1-4周才形成菌落。真菌對(duì)熱的抵抗力不強(qiáng),一般加熱60701小時(shí)即被殺死,但對(duì)干燥、日光、紫外線和一些化學(xué)消毒劑有抵抗力,但對(duì)2.5碘酒、10甲醛則較敏感。,(三)、病毒,病毒屬非細(xì)胞型微生物,在自然界分布非常廣泛,可在人、動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的微生物,它僅有一種核酸(DNA或RNA)作其遺傳物質(zhì)。病毒必須在宿主活細(xì)胞內(nèi)寄生,依靠細(xì)胞提供的能量、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及生物大分子合成機(jī)制,完成病毒的復(fù)制過(guò)程。病毒與人類的關(guān)系極為密切,人類的傳染病約75是由病毒引起的。有些病毒傳染性強(qiáng),可引起世界大流行(如流感、艾滋病等)。,(四)、熱原與內(nèi)毒素,熱原:是微量即可引起恒溫動(dòng)物體溫異常升高的物質(zhì)的總稱。內(nèi)毒素:是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁上的一種脂多糖和微量蛋白的復(fù)合物,具有多種生物活性。熱原包括內(nèi)毒素,內(nèi)毒素是主要的熱原物質(zhì)。在產(chǎn)品檢測(cè)中,細(xì)菌內(nèi)毒素是檢測(cè)熱原的方法之一。我廠產(chǎn)品,脯氨酸檢測(cè)內(nèi)毒素-鱟試劑法。中國(guó)藥典10EU/gAJI20026EU/g肌苷檢測(cè)熱原-動(dòng)物試驗(yàn)法(家兔法)。,消除細(xì)菌內(nèi)毒素的方法高溫破壞法:可用180干烤34h或250干烤至少60min。吸附法:一般選用活性炭?;瘜W(xué)酸堿和氧化法。離子交換法。反滲透法。凝膠過(guò)濾法。注:在產(chǎn)品微檢中,無(wú)菌生長(zhǎng),不代表無(wú)內(nèi)毒素,細(xì)菌死亡后會(huì)產(chǎn)生大量?jī)?nèi)毒素。,微生物的污染及消毒滅菌,呂文廷2013.8,1.藥品微生物污染:藥品微生物污染:微生物的產(chǎn)生、附著而給藥品帶來(lái)不良影響。藥品的微生物污染也稱染菌。污染藥品的細(xì)菌:常見污染藥品的細(xì)菌是一些生命力較強(qiáng)的細(xì)菌,如:葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、枯草桿菌及一些霉菌,抵抗力弱的細(xì)菌一般不易造成污染。藥品的微生物污染源:空氣、水、廠房與設(shè)備、藥品生產(chǎn)用原輔料、包裝材料、昆蟲、生產(chǎn)操作人員等,2.消毒與滅菌消毒:殺死物體上病源微生物的方法,并不一定能殺死細(xì)菌的芽胞。消毒所用的試劑稱為消毒劑。滅菌:殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高,包括殺滅細(xì)菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌:抑制體內(nèi)或體外細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖。常用的抑菌劑為各種抗生素,可抑制細(xì)菌的繁殖。防腐:防止或抑制體外細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法,細(xì)菌一般不死亡。同一種化學(xué)藥品在高濃度時(shí)為消毒劑,低濃度時(shí)常為防腐劑。無(wú)菌:不存在活的細(xì)菌。防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù),為無(wú)菌操作。,3、常用的消毒滅菌法:物理滅菌法和化學(xué)消毒法物理滅菌方法熱力滅菌法輻射殺菌法濾過(guò)除菌法超聲波殺菌法干燥與低溫抑菌法,熱力滅菌法:使蛋白質(zhì)、酶及核酸永久性破環(huán),細(xì)胞膜溶解,導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的死亡。干熱滅菌法:采用灼燒或干熱空氣滅菌。常用方式是把待滅菌的物品均勻的放入烘箱,升溫至160,恒溫1h。此方法適合玻璃皿,金屬用具的滅菌。濕熱滅菌法利用熱蒸汽殺死微生物。相同條件下,濕熱滅菌效果比干熱滅菌效果好。這是因?yàn)橐环矫婕?xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)含水量高,容易變性,另一方面高溫水蒸氣對(duì)蛋白質(zhì)有高度的穿透力,從而加速蛋白質(zhì)變性,死亡。高壓蒸汽滅菌:濕熱滅菌法的一種。高壓蒸汽滅菌是最可靠、最適用、最廣泛的滅菌方法。,輻射滅菌法:是采用輻射進(jìn)行滅菌消毒。包括可見光、紅外線、紫外線、X射線和射線等。紫外線:波長(zhǎng)200-300nm的紫外線具有殺菌作用,265266nm波段殺菌能力最前。紫外線穿透物質(zhì)的能力差,一般用于空氣及物體表面消毒。電離輻射:高速電子、X射線、射線,適用于不耐熱物品的滅菌,常用于藥品和醫(yī)療用品的滅菌。微波:波長(zhǎng)1mm1m。,濾過(guò)除菌法用物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌除去,以達(dá)到除菌目的。濾菌器含有微細(xì)小孔0.22微米,只允許液體或氣體通過(guò),而大于孔徑的細(xì)菌等顆粒不能通過(guò)。適用范圍:血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌。,化學(xué)消毒法法:一般化學(xué)藥劑無(wú)法殺死所有的微生物,而只能殺死其中的病原微生物,所以是消毒的作用,而不是滅菌的作用。消毒劑:能迅速殺滅病原微生物的藥物。防腐劑:能抑制或阻止微生物生長(zhǎng)繁殖的藥物。消毒劑、防腐劑沒有選擇性,對(duì)一切活細(xì)胞都有毒性,不僅能殺死或抑制病原微生物,而且對(duì)人體組織細(xì)胞也有損傷作用,所以常用于器械,體表、環(huán)境的消毒。常用的化學(xué)消毒劑有:來(lái)蘇水、碘酒、酒精等,化學(xué)滅菌法常用消毒劑種類和用途:,潔凈區(qū)微生物的控制,呂文廷2013.8,潔凈區(qū)的主要污染源:空氣、制藥用水、操作人員、設(shè)備,原輔料等,其中操作人員是主要的污染源。藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范中明確規(guī)定:潔凈區(qū)內(nèi)的人員應(yīng)嚴(yán)格控制,其工作人員應(yīng)定期進(jìn)行衛(wèi)生和微生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)、潔凈區(qū)作業(yè)等方面的培訓(xùn)和考核;進(jìn)進(jìn)入潔凈區(qū)的臨時(shí)外來(lái)人員因進(jìn)行指導(dǎo)和監(jiān)督。防止微生物污染的措施:了解污染源、杜絕污染途徑潔凈區(qū)潔凈技術(shù)的的應(yīng)用及衛(wèi)生管理制藥用水的質(zhì)量控制進(jìn)行微生物限度檢查,控制藥品質(zhì)量潔凈區(qū)防污染必須以塵埃粒子和微生物為環(huán)境監(jiān)控對(duì)象。,六、潔凈區(qū)微生物的控制,潔凈區(qū)的污染源:塵埃及細(xì)菌污染來(lái)自人的塵粒污染占潔凈室污染的80%生產(chǎn)工具和設(shè)備引起的污染占15%潔凈區(qū)本身和過(guò)濾器的缺陷引起的污染占5%1.1操作人員帶來(lái)的塵埃粒子:a.成年人產(chǎn)生的皮屑:10萬(wàn)1000萬(wàn)粒子/min;b.操作人員身穿工作服,劇烈活動(dòng):產(chǎn)生100萬(wàn)個(gè)粒徑0.1m的微粒20萬(wàn)個(gè)粒徑0.5m的微粒c.交談1min,產(chǎn)生1.52.0萬(wàn)粒子d.咳嗽:70萬(wàn)個(gè)粒子,噴嚏:140萬(wàn)個(gè)粒子,1.2人體微生物分布情況:,在潔凈區(qū)內(nèi)的人員數(shù)量應(yīng)盡量少,應(yīng)嚴(yán)格按照SOP要求操作以減少塵埃粒子,要有自我約束的概念。,1.3人體帶菌及皮屑情況,為保證生產(chǎn)環(huán)境的潔凈度,應(yīng)認(rèn)清人體產(chǎn)生污染的部位,做好措施出入潔凈區(qū)的無(wú)菌服應(yīng)盡可能覆蓋全身,皮膚暴露部分越少越好,以盡量減少產(chǎn)品的污染。在潔凈區(qū)從事藥品生產(chǎn)的人員須每年至少進(jìn)行一次身體檢查,有皮膚疾病者、傳染病者、體表有傷口者不得進(jìn)入潔凈區(qū)。,2.1潔凈室的設(shè)計(jì):表面應(yīng)光滑平整易于清潔消毒、無(wú)死角、無(wú)裂縫,不易藏灰塵;不同潔凈度級(jí)別的房間應(yīng)有足夠的壓差天花板應(yīng)密封、穿墻的管道與墻體之間應(yīng)密封100級(jí)潔凈區(qū)內(nèi)應(yīng)無(wú)地漏、其它區(qū)域地漏應(yīng)液封設(shè)置更衣室、緩沖間,并安裝過(guò)濾器,門設(shè)計(jì)成連鎖空氣流動(dòng)一般為雜流,上送風(fēng)下排風(fēng),100級(jí)為層流更衣室的潔凈度級(jí)別應(yīng)與高級(jí)別的房間相同。,2.潔凈區(qū)潔凈技術(shù)的應(yīng)用,2.2潔凈區(qū)污染的控制保持房間正壓:潔凈級(jí)別不同的相鄰房間,之間的靜壓差5Pa潔凈區(qū)對(duì)外界的靜壓差10Pa空氣總是由潔凈級(jí)別高的房間向低的房間流動(dòng)對(duì)潔凈區(qū)空氣進(jìn)行凈化:保持空調(diào)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)符合潔凈區(qū)潔凈度要求。保持空調(diào)系統(tǒng)的凈化功能符合要求。按規(guī)定對(duì)潔凈區(qū)進(jìn)行消毒、滅菌保持潔凈室聯(lián)鎖裝置的正常:,3.潔凈區(qū)操作注意事項(xiàng):3.1潔凈區(qū)人流管理操作人員進(jìn)入潔凈區(qū)應(yīng)嚴(yán)格按照SOP程序:存放個(gè)人物品換鞋穿上潔凈拖鞋脫去外衣洗手穿上潔凈服戴上口罩檢查手消毒戴上潔凈手套進(jìn)入潔凈區(qū)人員離開潔凈區(qū)程序:潔凈區(qū)緩沖間更衣室(脫下工作鞋、換穿拖鞋、脫下口罩、衣、帽)存衣室(洗手、穿上外衣)換鞋間(脫下拖鞋、走出換鞋間)換鞋存放室,維修人員進(jìn)入潔凈區(qū)維修工作要求:必須按進(jìn)入潔凈區(qū)的SOP要求進(jìn)入潔凈區(qū)。將工具清潔后從傳遞窗傳入。在生產(chǎn)狀態(tài)下,不得從事可能影響產(chǎn)品質(zhì)量的維修維修工具必須為專用工具,存放在專用地點(diǎn),并有標(biāo)識(shí)。維修用具在使用完后必須馬上清潔,并放回指定地點(diǎn)。不得裸手直接接觸藥品。不得高聲談笑,必須戴口罩。不可穿著潔凈服走出更衣室外面,然后再回到潔凈區(qū)。,潔凈區(qū)人員工作要求:個(gè)人衛(wèi)生要求不得化妝不得在潔凈區(qū)內(nèi)吃飯、喝水。不得在潔凈區(qū)內(nèi)抽煙不得有可見傷口不得留長(zhǎng)手指甲、戴首飾、傳染病患者不得進(jìn)入潔凈區(qū)。平時(shí)生產(chǎn)工作中,如患有腹瀉、感冒、咳嗽、不明原因發(fā)熱或體表有傷口等輕微疾病,不得進(jìn)入潔凈區(qū)。,潔凈區(qū)人員工作要求:正確的行為和操作:保持在潔凈區(qū)內(nèi)工作,不隨意出入潔凈區(qū)不隨便說(shuō)話,必要時(shí)才說(shuō)話不要通過(guò)傳遞窗說(shuō)話,使用電話總是戴上口罩以減少來(lái)自口腔的污染機(jī)械和設(shè)備的維修保養(yǎng)必須有規(guī)律的進(jìn)行定期對(duì)潔凈室和潔凈室內(nèi)物品進(jìn)行清潔始終保持潔凈區(qū)的清潔和整齊良好的行為很關(guān)鍵,請(qǐng)記住:穿著正確、移動(dòng)正確、行動(dòng)正確、工作正確,防止不正確的行為和操作:防止著裝不正確而散播身體的粒子,引起污染防止不戴手套接觸物料,引起交叉污染防止在潔凈室內(nèi)脫去潔凈室工作服防止用手指接觸頭發(fā)或身體的其他部位防止在患感冒或其他疾病期間進(jìn)潔凈室工作防止在潔凈室內(nèi)吃、喝、抽煙或讀報(bào)等防止在潔凈室內(nèi)戴首飾、手表防止在潔凈室使用錯(cuò)誤清潔物料防止在潔凈室內(nèi)快速地走、移動(dòng)、轉(zhuǎn)身防止靠在工作臺(tái)、產(chǎn)品或其它物料上防止把手、手臂和手肘放在超凈工作臺(tái)上休息防止搬運(yùn)物料的頂部防止在工
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