血常規(guī)及BC-5200血球計(jì)數(shù)儀作業(yè)指導(dǎo)書(shū).doc

黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)全血細(xì)胞分析文件編號(hào)：LJ-SOP-001版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平1 目的全血細(xì)胞分析可以對(duì)感染、炎癥、手術(shù)后、血液系統(tǒng)疾病、肝脾病等進(jìn)行輔助診斷、監(jiān)測(cè)治療效果等。2 標(biāo)本采集與要求2.1 靜脈采血方法用真空采血針取肘靜脈血2ml放入含有干燥抗凝劑(含EDTAK23.04.0mg) 的抗凝管中，立即將試管輕輕顛倒混勻58次，使其充分抗凝，并在試管上做好標(biāo)識(shí)，2小時(shí)內(nèi)送檢。該采血管一支可同時(shí)用于全血細(xì)胞分析、血型正定型、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和瘧原蟲(chóng)涂片的檢測(cè)。2.2 毛細(xì)血管采血方法2.2.1 器材一次性采血針、75%乙醇棉球、消毒干棉球、加有EDTAK2干燥后的抗凝試管(約含EDT AK2 1.0mg)、一次性薄膜手套。2.2.2 采血操作采血部位：成人以左手無(wú)名指指端內(nèi)側(cè)為宜，半歲以上兒童以中指為好，半歲以下嬰幼兒通常自拇指或足跟采血。操作人員戴上新的薄膜手套，輕輕按摩采血部位，使其自然充血，用75%乙醇棉球消毒局部皮膚，再用消毒干棉球擦干。緊捏采血部位，用無(wú)菌采血針迅速刺破皮膚，深度約23mm，以稍加擠壓血液能流出為宜。擦去第一滴血，從穿刺處遠(yuǎn)端向指尖方向輕輕擠壓，用干燥后的抗凝試管取血0. 30.5ml。采血完畢，用消毒干棉球壓住傷口片刻。注意事項(xiàng)： 末梢采血時(shí)，擠壓力不能過(guò)大，以免過(guò)多組織液混入； 同時(shí)要避開(kāi)凍瘡、發(fā)炎、水腫等部位，以免影響結(jié)果； 采集下一個(gè)病人須換新的薄膜手套； 為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，盡可能使用靜脈采血方法，而不用毛細(xì)血管采血方法；到病房采血時(shí)，應(yīng)戴好口罩、帽子和手套等防護(hù)用品。2.3 標(biāo)本的驗(yàn)收和處理對(duì)臨床收集來(lái)的標(biāo)本進(jìn)行驗(yàn)收：對(duì)有凝塊、溶血、采血量不符合要求、無(wú)標(biāo)識(shí)或標(biāo)識(shí)不清楚、不完整等不合格的標(biāo)本，按程序文件標(biāo)本采集與管理的控制程序處理。采集后的標(biāo)本可室溫保存，但須在4小時(shí)內(nèi)測(cè)定。末梢血標(biāo)本采集后，半小時(shí)內(nèi)測(cè)定，測(cè)定后不保存。檢測(cè)后的標(biāo)本下午下班前，收集并保存（如果沒(méi)有特殊要求）3天，然后按照棄置的醫(yī)療垃圾處理。冷藏保存的全血細(xì)胞分析標(biāo)本，主要用于血型和血紅蛋白的復(fù)查，計(jì)數(shù)結(jié)果在一周內(nèi)較穩(wěn)定，其他項(xiàng)目(特別是白細(xì)胞分類)結(jié)果不穩(wěn)定。3 分析檢測(cè)前的準(zhǔn)備黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)全血細(xì)胞分析文件編號(hào)：LJ-SOP-001版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平在進(jìn)行質(zhì)控物和病人標(biāo)本分析檢測(cè)前，進(jìn)行儀器狀態(tài)和試劑檢查，確保準(zhǔn)備完好后才能進(jìn)行分析，并將檢查結(jié)果記錄在相應(yīng)的儀器設(shè)備使用記錄表上。4 質(zhì)控分析4.1 質(zhì)控物準(zhǔn)備將質(zhì)控物從冰箱取出，室溫放置15分鐘后，輕輕顛倒混勻50次(約2分鐘)，直至沉積的血細(xì)胞完全分散開(kāi)。4.2 上機(jī)檢測(cè)具體操作見(jiàn)相應(yīng)儀器作業(yè)指導(dǎo)書(shū)。4.3 質(zhì)控規(guī)則4.3.1 質(zhì)控圖正常分布規(guī)律各點(diǎn)應(yīng)分布在均值的兩側(cè)，95.45%數(shù)據(jù)落在X2S內(nèi)，99.73%數(shù)據(jù)落在X3S內(nèi)。4.3.2 質(zhì)控圖失控規(guī)則1) 一個(gè)質(zhì)控物的測(cè)定結(jié)果超過(guò)X土3S (13s規(guī)則)； 2) 一個(gè)質(zhì)控物的測(cè)定結(jié)果連續(xù)2次超過(guò)X +2S或X -2S (22S規(guī)則)； 3) 一個(gè)質(zhì)控物的測(cè)定結(jié)果連續(xù)2次測(cè)定其中1次超過(guò)X +2S另1次超過(guò)X -2S (R4S規(guī)則) ；4) 一個(gè)質(zhì)控物的測(cè)定結(jié)果連續(xù)4次超過(guò)X +1S或X -IS (41S規(guī)則)； 5) 連續(xù)10次質(zhì)控物結(jié)果都在均數(shù)的同一側(cè)(10X規(guī)則)； 6) 連續(xù)5次測(cè)定結(jié)果漸增或漸減(5T規(guī)則)。4.4 室內(nèi)質(zhì)控分析與失控處理4.4.1 質(zhì)控結(jié)果分析檢測(cè)人員對(duì)質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行分析，在發(fā)現(xiàn)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)違背質(zhì)控規(guī)則后，通知組長(zhǎng)，協(xié)助處理。組長(zhǎng)分析該失控信號(hào)的真?zhèn)?，并做出是否發(fā)出與測(cè)定質(zhì)控品相關(guān)的那批病人標(biāo)本檢驗(yàn)報(bào)告的決定，必要時(shí)由檢驗(yàn)科主任處理。檢測(cè)人員填寫(xiě)失控報(bào)告。4.4.2 失控原因分析及其處理過(guò)程失控信號(hào)的出現(xiàn)受多種因素的影響，包括操作上的失誤，試劑、校準(zhǔn)品或質(zhì)控品的失效，儀器維護(hù)不良以及采用的質(zhì)控規(guī)則、控制限范圍、一次測(cè)定的質(zhì)控標(biāo)本數(shù)等。全血細(xì)胞分析質(zhì)控要注意混勻的手法和均一性，操作時(shí)間嚴(yán)格按作業(yè)指導(dǎo)書(shū)進(jìn)行。所以，室內(nèi)質(zhì)控失控時(shí)，首先要查明失控原因，然后隨機(jī)挑選出一定比例的病人標(biāo)本進(jìn)行重新測(cè)定，對(duì)失控做出恰當(dāng)?shù)呐袛?。失控的處理原則見(jiàn)程序文件內(nèi)部質(zhì)量控制程序。4.5 質(zhì)控檢測(cè)完畢后，及時(shí)將質(zhì)控物放回冰箱原位。5 病人標(biāo)本的檢測(cè)5.1 標(biāo)本的登記與編號(hào)收到標(biāo)本后，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行驗(yàn)收確認(rèn)，帶血型的標(biāo)本需要分開(kāi)編號(hào)處理。對(duì)于有標(biāo)簽的標(biāo)本，要登記接收并計(jì)費(fèi)；對(duì)于無(wú)標(biāo)簽的標(biāo)本，檢測(cè)人員須按病人診療卡號(hào)或黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)全血細(xì)胞分析文件編號(hào)：LJ-SOP-001版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平姓名進(jìn)行接收；在驗(yàn)收、編號(hào)過(guò)程中，檢查標(biāo)本是否合格。對(duì)不合格的標(biāo)本，按照程序文件標(biāo)本采集與管理的控制程序處理。5.2 血型檢查血型檢查的具體操作見(jiàn)血型檢查作業(yè)指導(dǎo)書(shū)。注意事項(xiàng)： 1) 對(duì)全血細(xì)胞分析加血型檢測(cè)的標(biāo)本，先上機(jī)進(jìn)行全血細(xì)胞分析，然后做血型檢查。 2) 血型檢查必須有第二人復(fù)檢，并在專用登記表上登記。 3) 血型標(biāo)本的初檢采用試管法，復(fù)檢可采用玻片法。但是當(dāng)一個(gè)人值班期間單獨(dú)簽名發(fā)報(bào)告時(shí)，須兩種方法都做，第二人復(fù)檢可用玻片法。4) 實(shí)習(xí)/進(jìn)修生必須在帶教老師監(jiān)督下操作，不能單獨(dú)操作及填發(fā)報(bào)告。 5) 復(fù)檢日期或其他事項(xiàng)可以在“備注”欄注明。 6) 血型標(biāo)本的復(fù)檢必要時(shí)在交班登記表上登記。5.3 全血細(xì)胞分析上機(jī)檢測(cè)具體操作見(jiàn)相應(yīng)的儀器作業(yè)指導(dǎo)書(shū)。6 血細(xì)胞的顯微鏡檢查6.1 鏡檢的條件滿足下列條件之一，必須鏡檢：1) 醫(yī)生明確要求涂片鏡檢的； 2) 儀器的圖形分析提示異常者，如幼稚細(xì)胞、未成熟粒細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、血小板聚集等；3) WBC 20109 /L或500109 /L或80109 /L；5) Hb180g/L；6) 中性粒細(xì)胞90% ；7) 淋巴細(xì)胞50% ；8) 中間細(xì)胞（MID）15% ；9) 單核細(xì)胞15%；10) 嗜酸性粒細(xì)胞10%；11) 嗜堿性粒細(xì)胞2%；12) 大而不染色細(xì)胞（LUC） 8%。注：明確為血液病者，可以不對(duì)白細(xì)胞分類進(jìn)行鏡檢，但要注意血小板形態(tài)、有無(wú)聚集等。6.2 鏡檢的目的通過(guò)顯微鏡檢查，核實(shí)儀器出現(xiàn)的各類報(bào)警是否真實(shí)存在，有無(wú)原始及幼稚細(xì)胞， 有無(wú)血細(xì)胞形態(tài)異常，有無(wú)小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、微小血凝塊、巨大血小板、血小板聚集等，并估計(jì)白細(xì)胞、血小板數(shù)量，必要時(shí)對(duì)結(jié)果進(jìn)行校正后才能發(fā)出報(bào)告(如有核紅細(xì)胞存在時(shí)對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行校正)。黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)全血細(xì)胞分析文件編號(hào)：LJ-SOP-001版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平6.3 鏡檢的步驟6.3.1 血涂片的制作1) 在距載玻片的一端1cm的位置加抗凝血(約51)。手指血?jiǎng)t直接用干凈玻片蘸血一滴。2) 用手拿好載玻片，使血液沿推片邊緣展開(kāi)。3) 推玻片與載玻片呈3045度角，平穩(wěn)地向前推進(jìn)，將血液推動(dòng)展開(kāi)。 4) 涂片完后立即在空氣中揮動(dòng)干燥。5) 一張良好的血膜片，要求厚薄適宜，邊緣整齊，兩側(cè)邊有空隙，頭、體、尾分明。6.3.2 血涂片的染色6.3.2.1染色試劑染液名稱：瑞氏-姬姆薩染色液染色原理：細(xì)胞的染色既有物理的吸附作用又有化學(xué)的親和作用。各種細(xì)胞和細(xì)胞的各種成分化學(xué)性質(zhì)不同，對(duì)各種染料的親和力也不一樣。因此，用染色液染色后，在同一血片上可以看到不同的著色。例如血紅蛋白嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì)與酸性染料伊紅結(jié)合染成粉紅色稱為嗜酸性物質(zhì)；細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞漿為酸性，與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合，染藍(lán)色或紫色稱為嗜堿性物質(zhì)；中性顆粒成等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合，染紫紅色，稱中性物質(zhì)。生產(chǎn)商：珠海貝索生物技術(shù)有限公司試劑保存：室溫6.3.2.2 染色步驟1) 滴加瑞氏-姬姆薩A液(約0. 50. 8m!)于干后的血涂片上染色1分鐘； 2) 再加約為兩倍的瑞氏-姬姆薩B液于玻片上，用吸耳球輕輕吹動(dòng)染液或輕輕搖動(dòng)玻片，使兩染液充分混勻，染色310分鐘；3) 水洗、干燥、鏡檢。6.3.3 鏡檢觀察的要求1) 將濕片在高倍鏡下觀察涂片、染色是否良好，否則重新涂片染色；2) 選擇涂片體尾交界、細(xì)胞分布均勻不重疊的部分進(jìn)行鏡檢；3) 當(dāng)在高倍鏡下辨認(rèn)細(xì)胞不清楚時(shí)，必須待玻片干后用油鏡檢查。 4) 在油鏡下觀察白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板的形態(tài)特點(diǎn)，同時(shí)估計(jì)細(xì)胞的數(shù)量。重點(diǎn)是根據(jù)鏡檢的條件，有針對(duì)性的進(jìn)行鏡檢。6.3.4 鏡檢觀察的處理6.3.4.1 根據(jù)儀器報(bào)警提示的內(nèi)容,確認(rèn)鏡下觀察結(jié)果是否與儀器提示一致，如是假報(bào)警，則直接發(fā)出報(bào)告；如是真報(bào)警，則必須做校正。6.3.4.2 發(fā)現(xiàn)原始及幼稚白細(xì)胞，則必須進(jìn)行手工分類；如不能確定細(xì)胞種類，則報(bào)告異常細(xì)胞(或分類不明細(xì)胞)的比例。6.3.4.3如果鏡下發(fā)現(xiàn)有核紅細(xì)胞，則必須對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行校正。校正方法：計(jì)數(shù) 100個(gè)白細(xì)胞過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有核紅細(xì)胞數(shù)為A，儀器計(jì)數(shù)的白細(xì)胞數(shù)為B，則校正的黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)全血細(xì)胞分析文件編號(hào)：LJ-SOP-001版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平白細(xì)胞數(shù)為B100/(100+ A)。6.3.4.4 小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片對(duì)阻抗法血小板計(jì)數(shù)有影響，可采用下列方法之一處理：1) 采用BC-5200血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)； 2) 手工充池計(jì)數(shù)血小板，具體方法參考全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程； 3) 用“間接法”來(lái)?yè)Q算血小板數(shù)(但不能用于有血小板聚集的標(biāo)本)：血液涂片，瑞氏-姬姆薩染色，計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞所見(jiàn)到的血小板數(shù)，求出血小板/紅細(xì)胞之比值，則校正的血小板數(shù)為比值儀器紅細(xì)胞數(shù)1000。6.3.4.5 如果鏡下觀察有血小板聚集，則必須手工充池計(jì)數(shù)血小板；如果是由EDTAK2 引起的血小板聚集，可用109mmol/L拘橡酸納(1：9)抗凝劑采集標(biāo)本，結(jié)果需要進(jìn)行換算。6.3.4.6 在多發(fā)性骨髓瘤、冷球蛋白血癥等疾病時(shí)血液中由于球蛋白或纖維蛋白原增高，易引起紅細(xì)胞聚集，影響紅細(xì)胞和血小板的計(jì)數(shù)。處理方法：將血液用血細(xì)胞分析儀稀釋液稀釋3倍，然后放37水浴箱中10分鐘后，立即上機(jī)測(cè)定，結(jié)果需要換算。7 結(jié)果編輯和報(bào)告簽發(fā)全血細(xì)胞分析標(biāo)本上機(jī)檢測(cè)完畢后，自動(dòng)打印結(jié)果；血型結(jié)果需要手工填寫(xiě)。經(jīng)審核后簽發(fā)報(bào)告。8 參考值(均為成人參考值)血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果參考值 測(cè)定項(xiàng)目 男 女WBC(109/L) 4.010.0 4.010.0RBC(1012/L) 4.05.5 3.55.0Hb(g/L) 120160 110150HCT(%) 40.050.0 35.045.0MCV(fl) 80100 80100MCH(pg) 27.034.0 27.034.0MCHC(g/L) 320360 320360RDW(%) 11.015.0 11.015.0PLT(109/L) 100300 100300MPV(fl) 6.512.5 6.512.5PDW(%) 15.518.1 15.518.1PCT(%) 0.1000.280 0.1000.280黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)全血細(xì)胞分析文件編號(hào)：LJ-SOP-001版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平白細(xì)胞分類參考值 分 類 百分率% 絕對(duì)值（109/L） 中性粒細(xì)胞 5070 27 淋巴細(xì)胞 20400.84.0 單核細(xì)胞 380.120.8 嗜酸性粒細(xì)胞 150.050.5嗜堿性粒細(xì)胞 0100.1 中間細(xì)胞 3.57.90.20.7 大而不染色細(xì)胞 0400.49 危急值全血細(xì)胞分析危急值測(cè)定項(xiàng)目 小于或等于 大于或等于WBC(109/L) 1.5 50Hb(g/L) 60 200PLT(109/L) 50 60010 臨床意義10.1.1 中性粒細(xì)胞的變化10.1.1.1 中性粒細(xì)胞生理性增多1) 年齡：新生兒白細(xì)胞較高，一般在15109/L左右，主要為中性粒細(xì)胞，到6 9天逐漸下降至與淋巴細(xì)胞大致相等。以后淋巴細(xì)胞逐漸增多，整個(gè)嬰兒期淋巴細(xì)胞數(shù)均較高，比例可達(dá)70%。到23歲后，淋巴細(xì)胞逐漸下降，中性粒細(xì)胞逐漸上升，到 45歲二者又基本相等，形成中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞變化曲線的兩次交叉，至青春期時(shí)與成人基本相同。2) 日間變化：在靜息狀態(tài)時(shí)白細(xì)胞數(shù)較低，活動(dòng)和進(jìn)食后較高；早晨較低，下午較高；一日之間最高值與最低值之間可相差一倍。劇烈運(yùn)動(dòng)、劇痛和激動(dòng)可使白細(xì)胞數(shù)顯著增多。如劇烈運(yùn)動(dòng)，可于短時(shí)間內(nèi)使白細(xì)胞數(shù)高達(dá)35109/L，以中性粒細(xì)胞為主。3) 妊娠與分娩：妊娠期白細(xì)胞常見(jiàn)增多，特別是最后一個(gè)月，常波動(dòng)于(l217) 109/L之間，分娩時(shí)可高達(dá)34109 /L。10.1.1.2 中性粒細(xì)胞病理性增多1) 急性感染：急性化膿性感染時(shí)，中性粒細(xì)胞增高程度取決于感染微生物的種類、 感染灶的范圍、感染的嚴(yán)重程度、患者的反應(yīng)能力。如局部感染且很輕微，白細(xì)胞總數(shù)仍可正常，但分類檢查時(shí)可見(jiàn)分葉核百分率有所增高；中度感染時(shí)，白細(xì)胞總數(shù)常增高大于10109 /L，并伴有輕度核象左移；嚴(yán)重感染時(shí)總數(shù)常明顯增高，可黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)全血細(xì)胞分析文件編號(hào)：LJ-SOP-001版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平達(dá)20109/L以上，且伴有明顯的核象左移。2) 嚴(yán)重的組織損傷或大量血細(xì)胞破壞：在較大手術(shù)后1236h，白細(xì)胞數(shù)常達(dá)20109/L以上，以中性分葉核粒細(xì)胞為主；急性心肌梗死后12天內(nèi)，常見(jiàn)白細(xì)胞數(shù)明顯增高，而心絞痛則不增高；急性溶血反應(yīng)時(shí)，也可見(jiàn)白細(xì)胞數(shù)增多。 3) 急性大出血：在脾破裂或?qū)m外孕輸卵管破裂后，白細(xì)胞數(shù)迅速增高，常達(dá)(20 30)109 /L，主要是中性分葉核粒細(xì)胞。4) 急性中毒：化學(xué)藥物如安眠藥、敵敵畏等中毒時(shí)，常見(jiàn)白細(xì)胞數(shù)增高，甚至可達(dá)20109/L或更高。5) 代謝性中毒：如糖尿病酮癥酸中毒及慢性腎炎尿毒癥時(shí)，也常見(jiàn)白細(xì)胞數(shù)增多， 均以中性分葉核粒細(xì)胞為主。6) 腫瘤性增多：白細(xì)胞長(zhǎng)期持續(xù)增多，最常見(jiàn)于粒細(xì)胞性白血病，其次也可見(jiàn)于各種惡性腫瘤的晚期，此時(shí)不但總數(shù)常達(dá)(1020)109 /L或更多，且可有較明顯的核象左移現(xiàn)象，呈所謂類白血病反應(yīng)。10.1.1.3 中性粒細(xì)胞減少1) 某些感染：某些革蘭氏陰性桿菌如傷寒桿菌感染，一些病毒感染如流感，可使白細(xì)胞數(shù)均減少甚至可低到2109/L以下。2) 某些血液?。喝绲湫偷脑偕系K性貧血時(shí)，呈全血細(xì)胞“三少”表現(xiàn)。此時(shí)白細(xì)胞數(shù)可少于1109/L，分類時(shí)淋巴細(xì)胞比例增高，乃因中性粒細(xì)胞嚴(yán)重減少所致的淋巴細(xì)胞相對(duì)增多。小部分急性白血病其白細(xì)胞總數(shù)不高反而減低，稱非白血性白血病 (aleukenic leukaemia)，白細(xì)胞數(shù)可1109 /L，分類時(shí)也呈淋巴細(xì)胞相對(duì)增多，此時(shí)只有骨髓檢查才能明確診斷。3) 慢性理化損傷：電離輻射(如X線等)、長(zhǎng)期服用氯霉素后，可因抑制骨髓細(xì)胞的有絲分裂而致白細(xì)胞減少。3) 自身免疫性疾?。喝缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡等。4) 脾功能亢進(jìn)：各種原因所致的脾腫大，如門(mén)脈肝硬化、班替綜合征等。10.1.1.4 中性粒細(xì)胞形態(tài)變化1) 核象左移：指外周血中桿狀核粒細(xì)胞增多(5%以上)或出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒、 早幼粒，常伴有明顯的中毒顆粒、空泡變性等。核左移常見(jiàn)于急性化膿性感染、急性中毒、急性溶血、白血病等。2) 核象右移：指中性粒細(xì)胞核分葉5葉以上超過(guò)3%，主要見(jiàn)于巨幼細(xì)胞性貧血、惡性貧血、抗代謝藥物應(yīng)用之后，或疾病恢復(fù)期的一過(guò)性出現(xiàn)。10.1.2 淋巴細(xì)胞的變化10.1.2.1 淋巴細(xì)胞增多1) 某些病毒或細(xì)菌感染所致的急性傳染病，如風(fēng)疹、流行性腮腺炎、傳染性淋巴細(xì)胞增多癥、傳染性單核細(xì)胞增多癥等。2) 某些慢性感染，如結(jié)核病。3) 腎移植后的排斥反應(yīng)。4) 血液系統(tǒng)疾病：淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴瘤、再障、粒細(xì)胞缺乏癥等。黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)全血細(xì)胞分析文件編號(hào)：LJ-SOP-001版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平10.1.2.2 淋巴細(xì)胞減少主要見(jiàn)于接觸放射線及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上腺皮質(zhì)激素時(shí)。10.1.2.3 淋巴細(xì)胞的形態(tài)變化1) 異型淋巴細(xì)胞：分為I型(空泡型)、型(不規(guī)則型)、型(幼稚型)，主要見(jiàn)于傳染性單核細(xì)胞增多癥、病毒性肝炎、病毒性肺炎、過(guò)敏性疾病等。2) 放射線損傷后淋巴細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化：核固縮、核碎裂、微核、雙核淋巴細(xì)胞等。10.1.3 單核細(xì)胞數(shù)量變化10.1.3.1 單核細(xì)胞生理性增多兒童外周血中單核細(xì)胞較成人稍多，平均為9%。10.1.3.2 單核細(xì)胞病理性增多1) 某些感染，如亞急性心內(nèi)膜炎、瘧疾、黑熱病、活動(dòng)性肺結(jié)核、急性感染恢復(fù)期等。2) 某些血液病，如粒細(xì)胞缺乏癥恢復(fù)期、淋巴瘤、MDS等。10.1.4 嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量變化10.1.4.1 嗜酸性粒細(xì)胞生理性變化正常人嗜酸性粒細(xì)胞白天較低，晚上較高。在勞動(dòng)、寒冷、饑餓、精神因素剌激下，可減少。10.1.4.2 嗜酸性粒細(xì)胞病理性增多1) 過(guò)敏性疾病，如支氣管哮喘、血管性神經(jīng)水腫、食物過(guò)敏、血清病、腸道寄生蟲(chóng)病(鉤蟲(chóng)病患者，嗜酸性粒細(xì)胞可達(dá)90%以上)。b) 某些傳染病，如猩紅熱。3) 某些血液病，如嗜酸性粒細(xì)胞性白血病、慢性粒細(xì)胞性白血病、霍奇金病等。 10.1.4.3 嗜酸性細(xì)粒胞減少見(jiàn)于傷寒、副傷寒、手術(shù)后嚴(yán)重組織損傷以及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上腺皮質(zhì)激素后。10.1.5 嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)量變化增多見(jiàn)于：慢粒白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、粘液性水腫、潰瘍性結(jié)腸炎、變態(tài)反應(yīng)、甲狀腺功能減退等。10.1.6 大而未染色細(xì)胞(LUC)包括大淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、原始和幼稚細(xì)胞等。10.1.7 中間細(xì)胞(MID)包括大淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、原始和幼稚細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等。10.2 紅細(xì)胞與血紅蛋白檢測(cè)的臨床意義10.2.1 紅細(xì)胞增多1) 生理性增多：新生兒、精神緊張或興奮、劇烈的體力勞動(dòng)。 2) 相對(duì)性增多：因脫水血液濃縮所致。常見(jiàn)于劇烈嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、大面積燒傷、大量出汗、多尿和水的攝入量顯著不足的患者。黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)全血細(xì)胞分析文件編號(hào)：LJ-SOP-001版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平3) 絕對(duì)性增高：與組織缺氧有關(guān)?？梢鹄^發(fā)性紅細(xì)胞增多，如慢性肺源性心臟病、發(fā)紺性先天性心臟病、慢性一氧化碳中毒等。4) 真性紅細(xì)胞增多癥：以紅細(xì)胞增多、面色磚紅、肝脾腫大為特征，紅細(xì)胞可達(dá) （7 -10）1012 /L。10.2.2 紅細(xì)胞減少1) 生理性貧血：妊娠期因血漿量相對(duì)增多，故紅細(xì)胞相對(duì)減少。3個(gè)月的嬰兒至 15歲的兒童，因生長(zhǎng)發(fā)育迅速而致造血原料相對(duì)不足，紅細(xì)胞和血紅蛋白可較正常人低10%20%。老年人由于骨髓造血功能逐漸減低，均可導(dǎo)致紅細(xì)胞和血紅蛋白含量減少。2) 病理性減少： 紅細(xì)胞生成減少所致的貧血：一是因骨髓造血功能衰竭，如再 生障礙貧血、骨髓纖維化等；二是因造血物質(zhì)缺乏或利用障礙引起的貧血，如缺鐵性貧血、鐵粒幼細(xì)胞性貧血、葉酸及維生素B12缺乏所致的巨幼細(xì)胞性貧血。 因紅細(xì)胞膜、酶遺傳性的缺陷或外來(lái)因素造成紅細(xì)胞破壞過(guò)多導(dǎo)致的貧血，如遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、地中海貧血、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、異常血紅蛋白病、免疫性溶血性貧血、心臟體外循環(huán)的大手術(shù)及一些化學(xué)、生物因素等引起的溶血性貧血。 失血：急性失血或消化道潰瘍、鉤蟲(chóng)病等慢性失血所致貧血。10.2.3 血紅蛋白測(cè)定的臨床意義血紅蛋白增減的臨床意義大致與紅細(xì)胞增減的意義相似，但血紅蛋白更準(zhǔn)確反映貧血的程度。血紅蛋白的減少與紅細(xì)胞的減少程度不一定呈比例。一是在小紅細(xì)胞性貧血時(shí)，血紅蛋白減少的程度較紅細(xì)胞減少的程度更為明顯，如缺鐵性貧血、消化性潰瘍、腸息肉、痔瘡、月經(jīng)過(guò)多、鉤蟲(chóng)病等慢性反復(fù)出血等；二是在大紅細(xì)胞性貧血時(shí)，紅細(xì)胞減少的程度較血紅蛋白更為嚴(yán)重，如缺乏維生素B12或葉酸引起的營(yíng)養(yǎng)不良性貧血及肝硬化性貧血等；三是在大出血時(shí)，血紅蛋白減少的程度基本上與紅細(xì)胞減少相一致，如消化道、肺部大出血及其他原因引起的大出血，再生障礙性貧血、純紅細(xì)胞再生障礙性貧血。10.2.4 MCV、MCH及MCHC檢測(cè)的臨床意義見(jiàn)附表1：10.2.5 紅細(xì)胞體積分布寬度的臨床意義1) 鑒別診斷貧血：缺鐵性貧血紅細(xì)胞明顯大小不均，RDW明顯增高；輕型地中海貧血紅細(xì)胞大小較均勻，RDW不增高。2) 缺鐵性貧血的早期診斷：在缺鐵性貧血臨床癥狀出現(xiàn)前，RDW即明顯增高。RDW只能作為IDA篩選指標(biāo)，即RDW升高不應(yīng)排除其他貧血的可能，但RDW正常者IDA的可能性不大(尤其是小細(xì)胞低色素性貧血)。3) 貧血的形態(tài)學(xué)分類見(jiàn)附表210.3 血小板參數(shù)的臨床意義10.3.1 生理變化1) 午后血小板高于晨間，冬季高于夏季，動(dòng)脈血高于靜脈血，靜脈血高于末梢血。b) 婦女月經(jīng)期血小板降低，經(jīng)期后升高。3) 新生兒血小板較少，3個(gè)月后才達(dá)到成人水平。黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)全血細(xì)胞分析文件編號(hào)：LJ-SOP-001版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平10.3.2 病理變化10.3.2.1 血小板數(shù)減少1) 血小板生成障礙：如急性白血病、再生障礙性貧血、某些藥物性損害等。2) 血小板破壞過(guò)多：如脾功能亢進(jìn)、藥物中毒、特發(fā)性血小板減少性紫癜、免疫性血小板減少性紫癜、血栓性血小板減少性紫癜、X射線照射等。3) 血小板消耗過(guò)多：如DIC、血栓性血小板減少性紫癜等。 10.3.2.2 血小板增多1) 骨髓增生性疾?。郝！⒄婕t、原發(fā)性血小板增多癥等。2) 急性大出血、急性溶血、急性化膿性感染等。3) 脾切除術(shù)后。10.3.3 平均血小板體積(MPV)的臨床意義 MPV是反應(yīng)骨髓造血功能的一個(gè)良好指標(biāo)，但須與血小板計(jì)數(shù)聯(lián)合應(yīng)用。1) PLT低、MPV增高：骨髓造血功能正常，外周血血小板破壞增多，MPV反應(yīng)性增高。2) PLT高、MPV正常：骨髓增生性疾病。3) PLT、MPV均減低：艾滋病、骨髓纖維化、骨髓占位性病變、再障、骨髓瘤、白血病化療后、敗血癥。4) PLT、MPV均增高：反應(yīng)性血小板增多癥。5) 提示骨髓功能恢復(fù)的預(yù)后價(jià)值。MPV增加是白血病化療后骨髓恢復(fù)的第一征候。在感染病人，局部炎癥時(shí)MPV正常，敗血癥時(shí)有半數(shù)MPV減低。如果MPV隨血小板數(shù)持續(xù)下降，則為骨髓衰竭的征兆。MPV越小，提示骨髓抑制越嚴(yán)重， MPV上升后，血小板數(shù)才逐步上升。10.4 網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)的臨床意義10.4.1 判斷骨髓紅系造血情況溶血性貧血，網(wǎng)織紅可達(dá)20%以上，急性失血后510天達(dá)高峰，高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅(HFR)和/或中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅(MFR)升高早而明顯。典型再障，網(wǎng)織紅常低于0.5% ，絕對(duì)值低于15109/L是診斷再障的標(biāo)準(zhǔn)之一。10.4.2 體內(nèi)缺鐵評(píng)估網(wǎng)織紅內(nèi)血紅蛋白含量(CHr)可用于評(píng)估紅細(xì)胞的鐵含量、觀察鐵及EPG治療進(jìn)展、兒童及腎透析病人缺鐵的診斷。10.4.3 作為貧血療效觀察的指標(biāo)骨髓增生功能良好的患者，給予抗貧血藥物后，高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅(HFR)和/ 或中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅(MFR)最先升高。缺鐵性貧血，在給予鐵劑治療后，網(wǎng)織紅內(nèi)血紅蛋白含量(CHr)最先升高，其次是高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅(HFR)和/或中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅(MFR)升高。網(wǎng)織紅細(xì)胞總數(shù)最后升高，1周左右達(dá)高峰。若網(wǎng)織紅不增高，提示治療無(wú)效或骨髓造血功能障礙。網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是貧血患者隨訪檢查項(xiàng)目之一。11 病人結(jié)果的可報(bào)告區(qū)間超過(guò)相應(yīng)儀器的線性范圍，用其相應(yīng)的稀釋液稀釋后上機(jī)測(cè)定。最終結(jié)果需要乘黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)全血細(xì)胞分析文件編號(hào)：LJ-SOP-001版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平以稀釋倍數(shù)的參數(shù)為WBC、RBC、Hb、Het、PLT、Pet、白細(xì)胞分類的絕對(duì)值和網(wǎng)織紅的絕對(duì)值及其分類絕對(duì)值，其余參數(shù)不用乘以稀釋倍數(shù)。12 報(bào)告時(shí)間在收到標(biāo)本后，急診和門(mén)診的標(biāo)本1小時(shí)發(fā)報(bào)告,非急診和門(mén)診的標(biāo)本1個(gè)工作日發(fā)報(bào)告。13 參考資料1） 葉應(yīng)撫，王毓三主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版。 2） 寇麗筠主編.臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn).第二版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1999.14 記錄表格黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科血細(xì)胞鏡檢登記表 表格編號(hào)：LJ-001日 期編號(hào)患者姓名性別年齡科室床號(hào)結(jié)果操作者鏡檢條件 附表1： MCV、MCH、MCHC檢測(cè)臨床意義 形態(tài)學(xué)分類 參考范圍 病 因 診斷方法 MCV80100fl 再生障礙性貧血 RET計(jì)數(shù) 骨髓檢查 正細(xì)胞性貧血 MCH2734pg 溶血性貧血站 RET計(jì)數(shù) 骨髓檢查 生化 MCHC320360g/L 免疫檢查 急性失血 病史及其他實(shí)驗(yàn)診斷 妊娠生理性貧血 小細(xì)胞 MCV80 fl 缺鐵性貧血 骨髓涂片 骨髓鐵染色 血清低色素貧血 MCH27 pg 鐵粒幼細(xì)胞性貧血 鐵蛋白檢查 MCHC320 g/L 地中海貧血 血紅蛋白電泳 MCV100 fl 巨幼細(xì)胞性貧血 骨髓涂片檢查大細(xì)胞性貧血 MCH34 pg 慢性再生障礙 骨髓涂片檢查 RET計(jì)數(shù) MCHC360 g/L 貧血 MCV80 fl 慢性感染 病史及其他實(shí)驗(yàn)診斷 單純小細(xì)胞 MCH27 pg 慢性腎炎性貧血 MCHC320360g/L 附表2： 貧血的形態(tài)學(xué)分類 RDW MCV減低 MCV正常 MCV增高正常 小細(xì)胞均一性 正細(xì)胞均一性 大細(xì)胞均一性增高 小細(xì)胞不均一性 正細(xì)胞不均一性 大細(xì)胞不均一性黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)邁瑞B(yǎng)C-5200血細(xì)胞分析儀文件編號(hào)：LJ-SOP-002版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平1 儀器簡(jiǎn)介 本分析儀采用電阻抗法檢測(cè)紅細(xì)胞和血小板的數(shù)目以及體積分布；采用比色法測(cè)量血紅蛋白濃度；采用半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞技術(shù)獲得白細(xì)胞總數(shù)和五類白細(xì)胞的分類統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)。在此基礎(chǔ)之上，分析儀計(jì)算出其余參數(shù)的結(jié)果。2 工作原理2.1 吸取樣本 本分析儀提供三種進(jìn)樣方式。分別為：開(kāi)放進(jìn)樣方式、封閉進(jìn)樣方式、自動(dòng)進(jìn)樣方式。其中，開(kāi)放進(jìn)樣方式支持全血和預(yù)稀釋模式，封閉進(jìn)樣和自動(dòng)進(jìn)樣方式支持全血模式。 在全自動(dòng)或封閉進(jìn)樣方式下，分析儀將吸取180uL的全血樣本。 在開(kāi)放進(jìn)樣的全血工作模式下，分析儀將吸取120 uL的全血樣本。 在開(kāi)放進(jìn)樣的預(yù)稀釋工作模式下，應(yīng)先將40uL的未梢血樣本和120uL的稀釋液在機(jī)外混合，形成稀釋比為14的稀釋樣本，然后再將此稀釋樣本送至分析儀進(jìn)行采樣。此時(shí)，分析儀將吸入120uL的稀釋樣本。2.2 稀釋樣本 待測(cè)樣本采集到分血閥后，根據(jù)檢測(cè)的需要快速準(zhǔn)確地被分為四份。然后，在并行的四個(gè)稀釋流程中經(jīng)過(guò)不同的試劑作用，分別形成用于紅細(xì)胞/血小板測(cè)量、血紅蛋白測(cè)量以及白細(xì)胞分類測(cè)量和白細(xì)胞計(jì)數(shù)測(cè)量的檢測(cè)樣本。 根據(jù)不同的需要，分析儀提供兩種工作模式全血工作模式和預(yù)稀釋工作模式。2.2.1 全血模式 紅細(xì)胞/血小板稀釋流程全血樣本8.3uL稀釋比約為1361的樣本稀釋比約為118050的紅細(xì)胞/血小板檢測(cè)樣本稀釋液2.992 mL稀釋液2.94 mL黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)邁瑞B(yǎng)C-5200血細(xì)胞分析儀文件編號(hào)：LJ-SOP-002版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平 血紅蛋白稀釋流程全血樣本6uL稀釋液1.994mLM-50LH溶血?jiǎng)?.0mL稀釋比約為1500的血紅蛋白檢測(cè)樣本 白細(xì)胞分類稀釋流程全血樣本20 uLM-50LEO()溶血?jiǎng)?.02 mLM-50LEO()溶血?jiǎng)?.32 mL稀釋比約為168的白細(xì)胞檢測(cè)樣本黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)邁瑞B(yǎng)C-5200血細(xì)胞分析儀文件編號(hào)：LJ-SOP-002版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平 白細(xì)胞計(jì)數(shù)稀釋流程全血樣本20 uLM-50LBA溶血?jiǎng)?.02 mL稀釋比約為152的白細(xì)胞檢測(cè)樣本2.2.2 預(yù)稀釋模式 紅細(xì)胞/血小板稀釋流程40 uL未梢血樣本稀釋液120 uL稀釋比約為14的樣本稀釋液2.992 mL稀釋比約為11444的樣本稀釋液2.94 mL稀釋比約為172200的紅細(xì)胞/血小板計(jì)數(shù)樣本取8.3 uL取60 uL黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)邁瑞B(yǎng)C-5200血細(xì)胞分析儀文件編號(hào)：LJ-SOP-002版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平 血紅蛋白稀釋流程40 uL未梢血樣本稀釋液120 uL稀釋比約為14的樣本取6 uL稀釋液1.994 mLM-50LH溶血?jiǎng)?.0 mL稀釋比約為12000的血紅蛋白檢測(cè)樣本 白細(xì)胞分類稀釋流程40 uL未梢血樣本稀釋液120 uL稀釋比約為14的樣本取20 uLM-50LEO() 溶血?jiǎng)?.02mLM-50LEO() 溶血?jiǎng)?.32mL稀釋比約為1272的白細(xì)胞檢測(cè)樣本黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)邁瑞B(yǎng)C-5200血細(xì)胞分析儀文件編號(hào)：LJ-SOP-002版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平 白細(xì)胞計(jì)數(shù)稀釋流程40 uL未梢血樣本稀釋液120 uL稀釋比約為14的樣本取20 uLM-50LB溶血?jiǎng)?.02mL稀釋比約為1208的白細(xì)胞檢測(cè)樣本2.3 白細(xì)胞測(cè)量2.3.1 激光流式細(xì)胞技術(shù) 當(dāng)一定量的血細(xì)胞被吸入并經(jīng)過(guò)特定量的試劑作用后，血樣經(jīng)噴嘴注入充滿稀釋液的圓錐形流動(dòng)室中。在稀釋液形成的鞘液包裹下，細(xì)胞單個(gè)排列成行地穿過(guò)流動(dòng)室的中央。當(dāng)懸浮在鞘液中的血細(xì)胞經(jīng)過(guò)二次加速后通過(guò)激光檢測(cè)區(qū)時(shí)，血細(xì)胞受到激光束的照射，產(chǎn)生的散射光性質(zhì)與細(xì)胞的大小、細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的折射率有關(guān)。低角前向散射光反映了細(xì)胞的大小，高角前向散射光則反映細(xì)胞內(nèi)部精細(xì)結(jié)構(gòu)和顆粒物質(zhì)。光電二極管接收這些散射光信號(hào)并將其轉(zhuǎn)化為電脈沖，根據(jù)采集到的這些電脈沖數(shù)據(jù)，可以得到血細(xì)胞大小及細(xì)胞內(nèi)部信息的二維分布圖，稱為散點(diǎn)圖，橫坐標(biāo)反映細(xì)胞的內(nèi)部復(fù)雜信息，縱坐標(biāo)反映細(xì)胞體積。 從DIFF通道散點(diǎn)圖可得到淋巴細(xì)胞，單核細(xì)胞，嗜酸性粒細(xì)胞，中性粒細(xì)胞+嗜堿性粒細(xì)胞各自占白細(xì)胞總數(shù)的百分比。 從BAS通道散點(diǎn)圖可得到白細(xì)胞數(shù)目、嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)目以及嗜酸性粒細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的百分比。2.3.2 白細(xì)胞參數(shù) 分析儀通過(guò)對(duì)BAS通道散點(diǎn)圖以及其中Bas區(qū)域的分析得到白細(xì)胞數(shù)目(WBC)和嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)目(Bas)，并進(jìn)一步計(jì)算出嗜堿性粒細(xì)胞百分比(Bas%)。通過(guò)對(duì)DIFF通道散點(diǎn)圖以及其中Lym區(qū)域、Neu +Bas區(qū)域、Mos區(qū)域和Eos區(qū)域的分析得到淋巴細(xì)胞百分比(Lym%)、中性粒細(xì)胞百分比（Neu%）+嗜堿性細(xì)胞(Bas%)、黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)邁瑞B(yǎng)C-5200血細(xì)胞分析儀文件編號(hào)：LJ-SOP-002版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平單核細(xì)胞百分比（Mon%）以及嗜酸性粒細(xì)胞百分比(Eos%)。再結(jié)合BAS通道中獲得的白細(xì)胞數(shù)目進(jìn)行計(jì)算，得到淋巴細(xì)胞數(shù)目(Lym)、中性粒細(xì)胞數(shù)目(Neu)、單核細(xì)胞數(shù)目(Mos)以及嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)目(Eos)。細(xì)胞數(shù)目的單位均為109/L。 白細(xì)胞數(shù) WBCBASO通道中除ghost區(qū)域外的所有粒子的計(jì)數(shù)總和 嗜堿性粒細(xì)胞數(shù) BasBASO通道中落在Bas區(qū)域中的粒子數(shù) 嗜堿性粒細(xì)胞百分比 Bas%Bas/WBC100% 淋巴細(xì)胞百分比 Lym%DIFF通道中落在Lym區(qū)域中的粒子數(shù)/DIFF通道中除ghost區(qū)域外的所有粒子的計(jì)數(shù)總和100% 淋巴細(xì)胞數(shù) LymWBVLym% 中性粒細(xì)胞百分比 Neu%DIFF通道中落在Neu+ Bas區(qū)域中的粒子數(shù)/ DIFF通道中除ghost區(qū)域外的所有粒子的計(jì)數(shù)總和100% 中性粒細(xì)胞數(shù) NeuWBCNeu% 單核細(xì)胞百分比 Mos% DIFF通道中落在Mos區(qū)域中的粒子數(shù)/ DIFF通道中除ghost區(qū)域黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)邁瑞B(yǎng)C-5200血細(xì)胞分析儀文件編號(hào)：LJ-SOP-002版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平外的所有粒子的計(jì)數(shù)總和100% 單核細(xì)胞數(shù) MosWBCMos% 嗜酸性粒細(xì)胞百分比 Eos%DIFF通道中落在Eos區(qū)域中的粒子數(shù)/ DIFF通道中除ghost區(qū)域外的所有粒子的計(jì)數(shù)總和100% 嗜酸性粒細(xì)胞數(shù) EosWBCEos%2.4 血紅蛋白濃度測(cè)定2.4.1 比色法 在比色池中,被稀釋的樣本加入溶血?jiǎng)┖?，紅細(xì)胞溶解，釋放出血紅蛋白，后者與溶血?jiǎng)┙Y(jié)合后形成血紅蛋白復(fù)合物，在比色池的一端讓LED光管通過(guò)波長(zhǎng)為525nm的單色發(fā)光管后照射血紅蛋白復(fù)合物溶液，在另一端通過(guò)光電管接收透射光，并將光強(qiáng)信號(hào)放大后轉(zhuǎn)換為電壓信號(hào)，通過(guò)與比色池中測(cè)得的本底透射光強(qiáng)產(chǎn)生的電壓比較，得到樣本的血紅蛋白濃度。此測(cè)量和計(jì)算過(guò)程由分析儀自動(dòng)完成，結(jié)果顯示在“計(jì)數(shù)”界面的分析結(jié)果區(qū)。2.4.2 血紅蛋白濃度參數(shù) 血紅蛋白濃度(HGB)由以下公式計(jì)算得到,單位為g/LHGB=常數(shù)Ln(本底透射光強(qiáng)/樣本透射光強(qiáng))2.5 紅細(xì)胞/血小板測(cè)量2.5.1 電阻抗法 本分析儀利用電阻抗法對(duì)紅細(xì)胞/血小板進(jìn)行計(jì)數(shù)。紅細(xì)胞/血小板檢測(cè)樣本經(jīng)過(guò)二次稀釋后進(jìn)入RBC檢測(cè)單元。檢測(cè)單元有一個(gè)小的檢測(cè)小孔。小孔兩側(cè)有一對(duì)正負(fù)電極，連接恒流電源。由于細(xì)胞具有不良導(dǎo)體的特性，樣本中的細(xì)胞在恒定負(fù)壓的作用下通過(guò)檢測(cè)小孔的時(shí)候，電極間的直流電阻就會(huì)發(fā)生變化，從而在電極兩端產(chǎn)生一連串的電脈沖。脈沖的個(gè)數(shù)與通過(guò)小孔的細(xì)胞數(shù)相當(dāng)，脈沖的幅度與細(xì)胞的體積成正比。 將采集到的電脈沖放大后與正常紅細(xì)胞/血小板體積范圍所對(duì)應(yīng)的通道電壓閾值相比較，計(jì)算出電脈沖幅度落在紅細(xì)胞/血小板通道內(nèi)的電脈沖個(gè)數(shù)。由此，所有采集到的電脈沖根據(jù)不同的通道電壓閾值進(jìn)行分類，落在紅細(xì)胞/血小板通道內(nèi)的電脈沖個(gè)數(shù)就是紅細(xì)胞/血小板的個(gè)數(shù)。依據(jù)脈沖電壓幅度劃分的每一個(gè)通道范圍黃平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書(shū)邁瑞B(yǎng)C-5200血細(xì)胞分析儀文件編號(hào)：LJ-SOP-002版本：A/0生效日期：2010-01-01編寫(xiě)者：譙正權(quán)審核者：吳瓊晟批準(zhǔn)人：唐惠平內(nèi)的細(xì)胞個(gè)數(shù)決定了細(xì)胞的體積分布。用橫坐標(biāo)表示細(xì)胞體積，縱坐標(biāo)細(xì)胞相對(duì)數(shù)量的二維圖就是反映細(xì)胞群體分布情況的直方圖。2.5.2 體積計(jì)量法 本分析儀通過(guò)體積行量單元對(duì)行數(shù)期間通過(guò)檢測(cè)小孔的樣本量進(jìn)行控制,以獲得定量樣本中血細(xì)胞的準(zhǔn)確計(jì)數(shù)結(jié)果.體積計(jì)量單元包括計(jì)量管和兩個(gè)光電傳感器。 當(dāng)儀器準(zhǔn)備計(jì)數(shù)時(shí)，首先排空計(jì)量管。樣本流經(jīng)檢測(cè)小孔的過(guò)程中，計(jì)量管中的液面緩慢上升，當(dāng)液面經(jīng)過(guò)計(jì)理管下部的開(kāi)始傳感器時(shí)，產(chǎn)生一個(gè)電信號(hào)，分析儀開(kāi)始計(jì)數(shù)；當(dāng)液面到達(dá)上部的結(jié)束傳感器時(shí)，再產(chǎn)生一個(gè)電信號(hào)，計(jì)數(shù)結(jié)束。如果在這個(gè)過(guò)程中，液路中有氣泡或其他不正常的流動(dòng)情況，儀器將產(chǎn)生“氣泡”或“堵孔”報(bào)警，處理方法參照BC5200使用說(shuō)明書(shū)“故障處理”的相關(guān)內(nèi)容。2.5.3 紅細(xì)胞參數(shù) 紅細(xì)胞數(shù) 分析儀通過(guò)直接測(cè)量紅細(xì)胞對(duì)應(yīng)的電脈沖個(gè)數(shù)獲取紅細(xì)胞數(shù)量(RBC)，單位為1012/L。 平均紅細(xì)胞體積 根據(jù)紅細(xì)胞分布直方圖，計(jì)算出平均紅細(xì)胞體積(MCV)，單位為fL。 紅細(xì)胞壓積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度 按以下公式計(jì)算出紅細(xì)胞壓積(HCT)，單位為%；平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)，單位為pg；平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)，單位為g/L。 HCT=(RBCNCV)/10 MCH=HGB/RBC MCHC=(HGB/HCT)100 紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù) 紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)(RDW-CV)由紅細(xì)胞分布直方圖得到。它是用百分比表示體積分布的變異系數(shù)。 紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差 紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差(RDW-SD)是相對(duì)紅細(xì)胞分布直方圖峰值20%處的直方圖寬度，單位為fL。2.5.4 血小板參數(shù) 血小板數(shù)分析儀通過(guò)測(cè)量紅細(xì)胞對(duì)應(yīng)的電脈沖個(gè)數(shù)獲取血小板數(shù)量(PLT)，單位為109/L。 PLT=N109/L 平均血小板體積 根據(jù)血小板分布直方圖，計(jì)算出平均血小板體積(MPV)，單位為fL。 血小板分布寬度 血小板分布寬度(PDW)由血小板分布直方