大鼠麻醉ppt課件.ppt

實(shí)驗(yàn)大鼠的麻醉,2014年3月5日,1,2,引言,麻醉(anesthesia)的基本任務(wù)是消除實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所致的疼痛和不適感覺(jué)，保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的安全，使動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)中服從操作，確保實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。,3,(一)常用的麻醉劑由于動(dòng)物種屬間的差異等情況，所采用的麻醉方法和選用的麻醉劑亦有不同。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的麻醉劑分為三類(lèi)，即揮發(fā)性麻醉劑、非揮發(fā)性麻醉劑和中藥麻醉劑。1揮發(fā)性麻醉劑這類(lèi)麻藥包括乙醚、氯仿等。機(jī)制：抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)。乙醚吸入麻醉適用于各種動(dòng)物，其麻醉量和致死量差距大，所以安全度亦大，動(dòng)物麻醉深度容易掌握，而且麻醉后蘇醒較快。其缺點(diǎn)是對(duì)局部刺激作用大，可引起上呼吸道粘膜液體分泌增多，再通過(guò)神經(jīng)反射可影響呼吸、血壓和心跳活動(dòng)，并且容易引起窒息，故在乙醚吸入麻醚時(shí)必需有人照看，以防麻醉過(guò)深而出現(xiàn)上情況。,4,2非揮發(fā)性麻醉劑這類(lèi)麻醉劑種類(lèi)較多，包括苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉等巴比妥類(lèi)的衍生物，氨基甲酸乙脂和水合氯醛。這些麻醉劑使用方便，一次給藥可維持較長(zhǎng)的麻醉時(shí)間，麻醉過(guò)程較平衡，動(dòng)物無(wú)明顯掙扎現(xiàn)象。但缺點(diǎn)是蘇醒較慢。,5,3中藥麻醉劑動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)有時(shí)也用到象洋金花和東莨菪堿等中藥麻醉劑。特點(diǎn)：作用不夠穩(wěn)定，而且常需加佐劑麻醉效果才能理想。因而，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室不選用這類(lèi)麻醉劑進(jìn)行麻醉。,6,乙醚,(1)藥理學(xué)作用：乙醚在簡(jiǎn)便裝置中也容易揮發(fā)。乙醚的使用是比較安全的，因?yàn)樗苌僖驗(yàn)檫^(guò)量而致動(dòng)物死亡。(2)不良反應(yīng)：動(dòng)物誘導(dǎo)時(shí)不舒服，而且乙醚對(duì)粘膜的刺激可導(dǎo)致咳嗽、大量的支氣管和唾液腺分泌物，偶爾還會(huì)導(dǎo)致喉痙攣。乙醚還能在動(dòng)物的麻醉蘇醒期后誘發(fā)既有的慢性呼吸系統(tǒng)疾病急性發(fā)作，特別是兔和嚙齒類(lèi)動(dòng)物。乙醚是可燃的，和空氣或氧氣構(gòu)成爆炸性混合物。,7,巴比妥類(lèi),硫噴妥鈉：超短效巴比妥類(lèi)戊巴比妥鈉：短效巴比妥類(lèi)，多用3溶液。靜脈一次注射，犬用40mg/kg，兔、鼠用30mgkg，腹腔注射劑量增加20，可維持持2小時(shí)有效全麻，在外科麻醉中，對(duì)呼吸和循環(huán)系統(tǒng)都有嚴(yán)重抑制。用于兔、鼠死亡率較高；用于大等較大動(dòng)物，亦需要輔助呼吸和其他復(fù)蘇措施，且完全蘇醒需要68小時(shí)。苯巴比妥鈉：長(zhǎng)效巴比妥類(lèi),8,氯胺酮,適用于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。肌肉、腹腔或靜脈注射皆可。對(duì)犬等體型較大動(dòng)物，呼吸抑制不明顯，但對(duì)鼠類(lèi)則常有嚴(yán)重呼吸抑制，對(duì)免和鼠的鎮(zhèn)痛效果不可靠。單獨(dú)使用氯胺酮亦有骨骼肌緊張、唾液和氣管支氣管分泌物增多以及咽反射消失過(guò)遲等缺點(diǎn)，與安定合用可糾正此類(lèi)缺點(diǎn)。靜注誘導(dǎo)劑量，為1氯胺酮溶液25ml/kg，復(fù)合安定12mg/kg。維持劑量每次用誘導(dǎo)量的1/31/2。肌肉或腹腔注射氯胺酮用510溶液410m1誘導(dǎo)。,9,神經(jīng)安定鎮(zhèn)痛藥,神經(jīng)安定鎮(zhèn)痛合劑由強(qiáng)麻醉性鎮(zhèn)痛藥和神經(jīng)安定藥組成。如氟芬合劑。神經(jīng)安定鎮(zhèn)痛合劑對(duì)大多數(shù)動(dòng)物可產(chǎn)生良好的麻醉作用，給藥途徑有肌肉、腹腔或靜脈注射，單獨(dú)使用神經(jīng)安定鎮(zhèn)痛合劑，適用于無(wú)需肌肉松弛的表淺外科小手術(shù)。,10,烏拉坦,用20溶液靜脈注射，劑量1g/kg；亦可作腹腔、肌肉或皮下注射，劑量11.5g/kg，宜用于鼠類(lèi)。作用溫和持久，有效麻醉時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)610小時(shí)，對(duì)于深度外科麻醉，呼吸及循環(huán)均無(wú)明顯抑制。但此藥本身有致癌作用，不能用作與腫瘤有關(guān)的實(shí)驗(yàn)。工作人員亦應(yīng)小心，禁止長(zhǎng)期接觸。使用此藥的動(dòng)物，用后即作為有害廢棄物，嚴(yán)格按照規(guī)定深埋或作其他無(wú)害處理。,11,水合氯醛,用5溶液；犬靜脈注射100mg/kg，腹腔注射150mg/kg，兔和鼠用后常有肌肉緊張，宜與烏拉坦合用；臨用前將兩藥等量混合，用60等滲鹽水配制成510注射液，按12m1/kg靜脈注射。麻醉持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，深度較淺，蘇醒期常有激惹現(xiàn)象。一般只用于不要求存活的刺激較輕的手術(shù)。,12,（二）麻醉方法分類(lèi)1全身麻醉包括：吸入法和腹腔、靜脈給藥麻醉法。,（1）吸入法用一塊圓玻璃板和一個(gè)鐘罩或一個(gè)密閉的玻璃箱作為揮發(fā)性麻醉劑的容器，多選用乙醚作麻藥。麻醉時(shí)用幾個(gè)棉球，將乙醚倒可其中，迅速放入鐘罩或箱內(nèi)，讓其揮發(fā)，然后把待麻醉動(dòng)物投入，約隔4-6分鐘即可麻醉，麻醉后應(yīng)立即取出，并準(zhǔn)備一個(gè)蘸有乙醚的棉球小燒杯，在動(dòng)物麻醚變淺時(shí)給套在鼻上使其補(bǔ)吸麻藥。,13,（2）腹腔和靜脈給藥麻醉法非揮發(fā)性和中藥麻醉劑均可用作腹腔和靜脈注射麻醉，操作簡(jiǎn)便，是實(shí)驗(yàn)室最常采用的方法之一。腹腔給藥麻醉多用于大鼠和豚鼠，較大的動(dòng)物如兔、狗等則多用靜脈給藥進(jìn)行麻醉。由于各麻醉劑的作用長(zhǎng)短以及毒性的差別，所以在腹腔和靜脈麻醉時(shí)，一定控制藥物的濃度和注射量。,下腹部腹中線兩側(cè)。,14,2局部麻醉浸潤(rùn)麻醉。根據(jù)手術(shù)，按皮下、筋膜、肌肉、腹膜、骨膜等順序逐步深入注射到術(shù)野周?chē)?.麻醉的基本原則注意不同個(gè)體的耐受性及時(shí)判斷麻醉的深淺靜脈麻醉堅(jiān)持先快后慢原則補(bǔ)充麻醉,15,(三)麻醉前準(zhǔn)備：禁食812h，防止嘔吐，可飲水。犬、豬、猴等大動(dòng)物可在麻醉前給予一些藥物以減少動(dòng)物緊張，減少支氣管分泌。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，首先應(yīng)當(dāng)根據(jù)實(shí)際條件，確定動(dòng)物的藥物用量。劑量太小，作用不明顯，劑量太大，又可能引起動(dòng)物死亡。,16,17,(四)麻醉時(shí)的注意事項(xiàng)靜脈注射必須緩慢，同時(shí)觀察肌肉緊張性、角膜反射和對(duì)皮膚夾捏的反應(yīng)，當(dāng)這些活動(dòng)明顯減弱或消失時(shí)，立即停止注射。（配制的藥液濃度要適中，不可過(guò)高，以免麻醉過(guò)急；但也不能過(guò)低，以減少注入溶液的體積。）,18,麻醉時(shí)需注意保溫。麻醉期間，動(dòng)物的體溫調(diào)節(jié)機(jī)能往往受到抑制，出現(xiàn)體溫下降，可影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。此時(shí)常需采取保溫措施。保溫的方法有，實(shí)驗(yàn)桌內(nèi)裝燈，電褥，臺(tái)燈照射等。無(wú)論用哪種方法加溫都應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的肛門(mén)體溫而定。大鼠為39.30.5。,19,作慢性實(shí)驗(yàn)時(shí)，在寒冷冬季，麻醉劑在注射前應(yīng)加熱至動(dòng)物體溫水平。,20,（五）麻醉效果的觀察動(dòng)物的麻醉效果直接影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。麻醉過(guò)淺，動(dòng)物會(huì)因疼痛而掙扎，甚至出現(xiàn)興奮狀態(tài)，呼吸心跳不規(guī)則，影響觀察。麻醉過(guò)深，可使機(jī)體的反應(yīng)性降低，甚至消失，更為嚴(yán)重的是抑制延髓的心血管活動(dòng)中樞和呼吸中樞，使呼吸、心跳停止，導(dǎo)致動(dòng)物死亡。因此，在麻醉過(guò)程中必須善于判斷麻醉程度，觀察麻醉效果。判斷麻醉程度的指標(biāo)有：,21,22,（六）不同麻醉方法操作,1.吸入麻醉法將乙醚棉球投入密閉容器中，放入大鼠。計(jì)時(shí)觀察與判斷大鼠的麻醉程度及蘇醒時(shí)間。當(dāng)大鼠倒下，四肢緊張明顯減輕，皮膚痛覺(jué)消失，則表示其已進(jìn)入麻醉狀態(tài)。注意事項(xiàng)1.乙醚易揮發(fā)，易燃，應(yīng)遠(yuǎn)離火源。2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中避免大鼠逃脫。,23,2.注射麻醉法實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，應(yīng)先稱(chēng)重，確定大鼠的藥物用量。10%水合氯醛溶液經(jīng)預(yù)試確定麻醉劑量為4.5ml/kg;按文獻(xiàn)(劉忠和等,2006)戊巴比妥鈉配制為1%溶液,麻醉劑量為6ml/kg。麻醉方法均為腹腔注射。將大鼠固定，腹腔注射。計(jì)時(shí)觀察與判斷大鼠的麻醉程度及蘇醒時(shí)間。水合氯醛麻醉起效時(shí)間3.31.9分鐘，麻醉維持時(shí)間為85.325.3分鐘，麻醉死亡率為10.0%，總死亡率為15.0。,24,（七）大鼠麻醉后生化指標(biāo)變化,初次采血后肝功能指標(biāo)ALT、AST、TP、ALB、AKP出現(xiàn)不同程度波動(dòng),可能與呼吸系統(tǒng)抑制造成組織缺氧,肝功能繼發(fā)性損傷有關(guān)。腎功能指標(biāo)BUN水平隨麻醉時(shí)間延長(zhǎng)增加,而CREA水平無(wú)波動(dòng),提示機(jī)體由于蛋白質(zhì)分解代謝加快使血漿尿素濃度增加,從而發(fā)生腎前性氮質(zhì)血癥。GLU水平隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加,可能與麻醉方法和采血操作引起糖相關(guān)激素變化從而影響糖的代謝有關(guān)。而TG、CHOL水平則出現(xiàn)先下降后反彈,可能與腹腔注射麻醉劑使血容量增加有關(guān)。,25,ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）、AST（天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶）、TP（總蛋白）、ALB（白蛋白）、AKP（堿性磷酸酶）、CREA（肌酐）、GLU（血糖）、TG（甘油三酯）、CHOL（總膽固醇）,26,水合氯醛和戊巴比妥鈉對(duì)SD大鼠麻醉效果的比較,戊巴比妥鈉對(duì)大鼠的呼吸頻率、體溫抑制較強(qiáng),并能抑制大鼠的心肌收縮性,表現(xiàn)為+dp/dtmaxt值降低,t-dp/dtmax值增大,心室峰壓及心率下降;水合氯醛對(duì)大鼠呼吸頻率和體溫的抑制作用較少,但與前者比較,維持相同麻醉時(shí)間,使用劑量對(duì)心功能的抑制作用明顯時(shí)間均達(dá)3h左右,戊巴比妥鈉組動(dòng)物在麻醉潛伏期內(nèi)有較劇烈的四肢強(qiáng)直、痙攣等表現(xiàn),需進(jìn)入深度麻醉期后上述情況才能消失;水合氯醛組動(dòng)物未有發(fā)現(xiàn),且其麻醉潛伏期明顯短于戊巴比妥鈉,麻醉起效迅速。水合氯醛腹腔注射PO2、血樣飽和度、Hct（紅細(xì)胞壓積）、Hb（血紅蛋白濃度）、血氧含量、aPA均顯著高于戊巴比妥鈉腹腔注射組細(xì)胞外剩余堿、剩余堿、標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫根濃度、靜脈血氧分壓均顯著低于戊巴比妥鈉腹腔注射組。,27,（八）其他,