中西醫(yī)結(jié)合(中醫(yī)師承制)專(zhuān)業(yè)畢業(yè)論文 [精品論文] 中藥補(bǔ)骨脂素在自體骨髓移植中的應(yīng)用——黃世林教授治療急性粒細(xì)胞白血病的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

中西醫(yī)結(jié)合中醫(yī)師承制專(zhuān)業(yè)畢業(yè)論文精品論文中藥補(bǔ)骨脂素在自體骨髓移植中的應(yīng)用黃世林教授治療急性粒細(xì)胞白血病的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)關(guān)鍵詞骨髓移植細(xì)胞凋亡中藥補(bǔ)骨脂素白血病摘要目的導(dǎo)師黃世林教授從軍從醫(yī)60余年，他埋首岐黃，勤求故訓(xùn)，不斷地繼承發(fā)揚(yáng)，博采眾長(zhǎng)，至今中西合璧，學(xué)養(yǎng)精深，在中醫(yī)，中西醫(yī)藥結(jié)合治療血液系統(tǒng)疾病等方面造詣?lì)H深。他提出以“驅(qū)邪復(fù)正”為治則治療急性白血病，率先在臨床中應(yīng)用純中藥補(bǔ)骨脂PSORALEAFRUITS提取物補(bǔ)骨脂素PSORALEN，PSO加長(zhǎng)波紫外線(xiàn)LONGWAVEULTRAVIOLETA，UVA，又稱(chēng)PUVA，體外凈化骨髓，采用自體骨髓移植AUTOLOGOUSBONEMARROWTRANSPLANTATION，ABMT治療急性粒細(xì)胞白血病ACUTEGRANULOCYTICLEUKEMIA，AGL。本研究的目的在于全面總結(jié)臨床療效、系統(tǒng)整理老師可貴的臨床經(jīng)驗(yàn)，并探討PUVA法抗白血病的部分作用機(jī)制。方法臨床研究分析1991年10月至2005年11月于我單位接受PUVA體外凈化ABMT的28例AGL病例的臨床資料。實(shí)驗(yàn)研究選擇人類(lèi)白血病HL60、NB4和K562細(xì)胞為研究對(duì)象，AFFYMETRIXHUMANU13320基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)PUVA對(duì)人白血病細(xì)胞基因表達(dá)的影響；流式細(xì)胞儀FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM測(cè)定PUVA后24小時(shí)細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平的變化、細(xì)胞FAS、FASL蛋白表達(dá)情況；熒光定量RTPCR技術(shù)檢測(cè)PUVA后4小時(shí)細(xì)胞FAS、FASLMRNA的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)法IMMUNOCYTOCHEMISTRY，ICC檢測(cè)CASPASE8、CASPASE3蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS115軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1、28例患者凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中位數(shù)分別為865109和993109個(gè)P0418005。其中25例凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中CD34細(xì)胞中位百分?jǐn)?shù)分別為196和177P0543005。2、28例患者有27例獲得造血重建，中性粒細(xì)胞恢復(fù)至05109/L的中位時(shí)間為13天；血小板恢復(fù)至40109/L的中位時(shí)間為16天。3、在預(yù)處理過(guò)程中，28例患者均有不同程度的胃腸道反應(yīng)，其中11例患者出現(xiàn)嘔吐；在ABMT恢復(fù)過(guò)程中，3例患者合并感染而出現(xiàn)發(fā)熱，2例合并出血。4、28例患者中有8例在ABMT后中位時(shí)間7個(gè)月復(fù)發(fā)，總復(fù)發(fā)率為2857，1年復(fù)發(fā)概率為2222，2、3、5，7、10年復(fù)發(fā)概率均為2963。5、隨訪(fǎng)中位時(shí)間525月，28例患者平均生存期為143751563月，95可信區(qū)間為11311，17439；實(shí)際1年生存率為8214，2年生存率為75，3、5、7、10年生存率均為7143；1年生存概率為8174，2年生存概率為7322，3、5、7、10年生存概率均為7143。6、基因芯片結(jié)果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及與細(xì)胞凋亡有關(guān)的蛋白代謝、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的折疊與修飾以及細(xì)胞表面受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，細(xì)胞體現(xiàn)出凋亡及其相關(guān)功能基因的激活7、FCM結(jié)果示PUVA作用后24小時(shí)HL60、NB4和K562細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平、FASL蛋白表達(dá)明顯下降，F(xiàn)AS蛋白表達(dá)明顯升高。8、熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果示PUVA作用后4小時(shí)FASMRNA表達(dá)升高，F(xiàn)ASLMRNA表達(dá)下降。9、ICC檢測(cè)結(jié)果示PUVA可促進(jìn)細(xì)胞CASPASE8、CASPASE3蛋白表達(dá)。結(jié)論1、依據(jù)PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在國(guó)內(nèi)外率先將PSO應(yīng)用于ABMT臨床治療AGL，具有創(chuàng)新性。2、PUVA體外凈化ABMT治療AGL，對(duì)骨髓正常造血細(xì)胞損傷較小，可降低復(fù)發(fā)率，延長(zhǎng)無(wú)病生存期。3、PUVA可激活白血病細(xì)胞凋亡及與其相關(guān)功能基因。4、PUVA誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的途徑之一是作用于FAS/FASL系統(tǒng)，激活下游的CASPASE8、3，線(xiàn)粒體跨膜電位參與了凋亡的過(guò)程。正文內(nèi)容目的導(dǎo)師黃世林教授從軍從醫(yī)60余年，他埋首岐黃，勤求故訓(xùn)，不斷地繼承發(fā)揚(yáng)，博采眾長(zhǎng)，至今中西合璧，學(xué)養(yǎng)精深，在中醫(yī)，中西醫(yī)藥結(jié)合治療血液系統(tǒng)疾病等方面造詣?lì)H深。他提出以“驅(qū)邪復(fù)正”為治則治療急性白血病，率先在臨床中應(yīng)用純中藥補(bǔ)骨脂PSORALEAFRUITS提取物補(bǔ)骨脂素PSORALEN，PSO加長(zhǎng)波紫外線(xiàn)LONGWAVEULTRAVIOLETA，UVA，又稱(chēng)PUVA，體外凈化骨髓，采用自體骨髓移植AUTOLOGOUSBONEMARROWTRANSPLANTATION，ABMT治療急性粒細(xì)胞白血病ACUTEGRANULOCYTICLEUKEMIA，AGL。本研究的目的在于全面總結(jié)臨床療效、系統(tǒng)整理老師可貴的臨床經(jīng)驗(yàn)，并探討PUVA法抗白血病的部分作用機(jī)制。方法臨床研究分析1991年10月至2005年11月于我單位接受PUVA體外凈化ABMT的28例AGL病例的臨床資料。實(shí)驗(yàn)研究選擇人類(lèi)白血病HL60、NB4和K562細(xì)胞為研究對(duì)象，AFFYMETRIXHUMANU13320基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)PUVA對(duì)人白血病細(xì)胞基因表達(dá)的影響；流式細(xì)胞儀FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM測(cè)定PUVA后24小時(shí)細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平的變化、細(xì)胞FAS、FASL蛋白表達(dá)情況；熒光定量RTPCR技術(shù)檢測(cè)PUVA后4小時(shí)細(xì)胞FAS、FASLMRNA的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)法IMMUNOCYTOCHEMISTRY，ICC檢測(cè)CASPASE8、CASPASE3蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS115軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1、28例患者凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中位數(shù)分別為865109和993109個(gè)P0418005。其中25例凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中CD34細(xì)胞中位百分?jǐn)?shù)分別為196和177P0543005。2、28例患者有27例獲得造血重建，中性粒細(xì)胞恢復(fù)至05109/L的中位時(shí)間為13天；血小板恢復(fù)至40109/L的中位時(shí)間為16天。3、在預(yù)處理過(guò)程中，28例患者均有不同程度的胃腸道反應(yīng)，其中11例患者出現(xiàn)嘔吐；在ABMT恢復(fù)過(guò)程中，3例患者合并感染而出現(xiàn)發(fā)熱，2例合并出血。4、28例患者中有8例在ABMT后中位時(shí)間7個(gè)月復(fù)發(fā)，總復(fù)發(fā)率為2857，1年復(fù)發(fā)概率為2222，2、3、5，7、10年復(fù)發(fā)概率均為2963。5、隨訪(fǎng)中位時(shí)間525月，28例患者平均生存期為143751563月，95可信區(qū)間為11311，17439；實(shí)際1年生存率為8214，2年生存率為75，3、5、7、10年生存率均為7143；1年生存概率為8174，2年生存概率為7322，3、5、7、10年生存概率均為7143。6、基因芯片結(jié)果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及與細(xì)胞凋亡有關(guān)的蛋白代謝、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的折疊與修飾以及細(xì)胞表面受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，細(xì)胞體現(xiàn)出凋亡及其相關(guān)功能基因的激活7、FCM結(jié)果示PUVA作用后24小時(shí)HL60、NB4和K562細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平、FASL蛋白表達(dá)明顯下降，F(xiàn)AS蛋白表達(dá)明顯升高。8、熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果示PUVA作用后4小時(shí)FASMRNA表達(dá)升高，F(xiàn)ASLMRNA表達(dá)下降。9、ICC檢測(cè)結(jié)果示PUVA可促進(jìn)細(xì)胞CASPASE8、CASPASE3蛋白表達(dá)。結(jié)論1、依據(jù)PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在國(guó)內(nèi)外率先將PSO應(yīng)用于ABMT臨床治療AGL，具有創(chuàng)新性。2、PUVA體外凈化ABMT治療AGL，對(duì)骨髓正常造血細(xì)胞損傷較小，可降低復(fù)發(fā)率，延長(zhǎng)無(wú)病生存期。3、PUVA可激活白血病細(xì)胞凋亡及與其相關(guān)功能基因。4、PUVA誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的途徑之一是作用于FAS/FASL系統(tǒng)，激活下游的CASPASE8、3，線(xiàn)粒體跨膜電位參與了凋亡的過(guò)程。目的導(dǎo)師黃世林教授從軍從醫(yī)60余年，他埋首岐黃，勤求故訓(xùn)，不斷地繼承發(fā)揚(yáng)，博采眾長(zhǎng)，至今中西合璧，學(xué)養(yǎng)精深，在中醫(yī)，中西醫(yī)藥結(jié)合治療血液系統(tǒng)疾病等方面造詣?lì)H深。他提出以“驅(qū)邪復(fù)正”為治則治療急性白血病，率先在臨床中應(yīng)用純中藥補(bǔ)骨脂PSORALEAFRUITS提取物補(bǔ)骨脂素PSORALEN，PSO加長(zhǎng)波紫外線(xiàn)LONGWAVEULTRAVIOLETA，UVA，又稱(chēng)PUVA，體外凈化骨髓，采用自體骨髓移植AUTOLOGOUSBONEMARROWTRANSPLANTATION，ABMT治療急性粒細(xì)胞白血病ACUTEGRANULOCYTICLEUKEMIA，AGL。本研究的目的在于全面總結(jié)臨床療效、系統(tǒng)整理老師可貴的臨床經(jīng)驗(yàn)，并探討PUVA法抗白血病的部分作用機(jī)制。方法臨床研究分析1991年10月至2005年11月于我單位接受PUVA體外凈化ABMT的28例AGL病例的臨床資料。實(shí)驗(yàn)研究選擇人類(lèi)白血病HL60、NB4和K562細(xì)胞為研究對(duì)象，AFFYMETRIXHUMANU13320基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)PUVA對(duì)人白血病細(xì)胞基因表達(dá)的影響；流式細(xì)胞儀FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM測(cè)定PUVA后24小時(shí)細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平的變化、細(xì)胞FAS、FASL蛋白表達(dá)情況；熒光定量RTPCR技術(shù)檢測(cè)PUVA后4小時(shí)細(xì)胞FAS、FASLMRNA的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)法IMMUNOCYTOCHEMISTRY，ICC檢測(cè)CASPASE8、CASPASE3蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS115軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1、28例患者凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中位數(shù)分別為865109和993109個(gè)P0418005。其中25例凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中CD34細(xì)胞中位百分?jǐn)?shù)分別為196和177P0543005。2、28例患者有27例獲得造血重建，中性粒細(xì)胞恢復(fù)至05109/L的中位時(shí)間為13天；血小板恢復(fù)至40109/L的中位時(shí)間為16天。3、在預(yù)處理過(guò)程中，28例患者均有不同程度的胃腸道反應(yīng)，其中11例患者出現(xiàn)嘔吐；在ABMT恢復(fù)過(guò)程中，3例患者合并感染而出現(xiàn)發(fā)熱，2例合并出血。4、28例患者中有8例在ABMT后中位時(shí)間7個(gè)月復(fù)發(fā)，總復(fù)發(fā)率為2857，1年復(fù)發(fā)概率為2222，2、3、5，7、10年復(fù)發(fā)概率均為2963。5、隨訪(fǎng)中位時(shí)間525月，28例患者平均生存期為143751563月，95可信區(qū)間為11311，17439；實(shí)際1年生存率為8214，2年生存率為75，3、5、7、10年生存率均為7143；1年生存概率為8174，2年生存概率為7322，3、5、7、10年生存概率均為7143。6、基因芯片結(jié)果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及與細(xì)胞凋亡有關(guān)的蛋白代謝、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的折疊與修飾以及細(xì)胞表面受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，細(xì)胞體現(xiàn)出凋亡及其相關(guān)功能基因的激活7、FCM結(jié)果示PUVA作用后24小時(shí)HL60、NB4和K562細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平、FASL蛋白表達(dá)明顯下降，F(xiàn)AS蛋白表達(dá)明顯升高。8、熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果示PUVA作用后4小時(shí)FASMRNA表達(dá)升高，F(xiàn)ASLMRNA表達(dá)下降。9、ICC檢測(cè)結(jié)果示PUVA可促進(jìn)細(xì)胞CASPASE8、CASPASE3蛋白表達(dá)。結(jié)論1、依據(jù)PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在國(guó)內(nèi)外率先將PSO應(yīng)用于ABMT臨床治療AGL，具有創(chuàng)新性。2、PUVA體外凈化ABMT治療AGL，對(duì)骨髓正常造血細(xì)胞損傷較小，可降低復(fù)發(fā)率，延長(zhǎng)無(wú)病生存期。3、PUVA可激活白血病細(xì)胞凋亡及與其相關(guān)功能基因。4、PUVA誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的途徑之一是作用于FAS/FASL系統(tǒng)，激活下游的CASPASE8、3，線(xiàn)粒體跨膜電位參與了凋亡的過(guò)程。目的導(dǎo)師黃世林教授從軍從醫(yī)60余年，他埋首岐黃，勤求故訓(xùn)，不斷地繼承發(fā)揚(yáng)，博采眾長(zhǎng)，至今中西合璧，學(xué)養(yǎng)精深，在中醫(yī)，中西醫(yī)藥結(jié)合治療血液系統(tǒng)疾病等方面造詣?lì)H深。他提出以“驅(qū)邪復(fù)正”為治則治療急性白血病，率先在臨床中應(yīng)用純中藥補(bǔ)骨脂PSORALEAFRUITS提取物補(bǔ)骨脂素PSORALEN，PSO加長(zhǎng)波紫外線(xiàn)LONGWAVEULTRAVIOLETA，UVA，又稱(chēng)PUVA，體外凈化骨髓，采用自體骨髓移植AUTOLOGOUSBONEMARROWTRANSPLANTATION，ABMT治療急性粒細(xì)胞白血病ACUTEGRANULOCYTICLEUKEMIA，AGL。本研究的目的在于全面總結(jié)臨床療效、系統(tǒng)整理老師可貴的臨床經(jīng)驗(yàn)，并探討PUVA法抗白血病的部分作用機(jī)制。方法臨床研究分析1991年10月至2005年11月于我單位接受PUVA體外凈化ABMT的28例AGL病例的臨床資料。實(shí)驗(yàn)研究選擇人類(lèi)白血病HL60、NB4和K562細(xì)胞為研究對(duì)象，AFFYMETRIXHUMANU13320基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)PUVA對(duì)人白血病細(xì)胞基因表達(dá)的影響；流式細(xì)胞儀FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM測(cè)定PUVA后24小時(shí)細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平的變化、細(xì)胞FAS、FASL蛋白表達(dá)情況；熒光定量RTPCR技術(shù)檢測(cè)PUVA后4小時(shí)細(xì)胞FAS、FASLMRNA的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)法IMMUNOCYTOCHEMISTRY，ICC檢測(cè)CASPASE8、CASPASE3蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS115軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1、28例患者凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中位數(shù)分別為865109和993109個(gè)P0418005。其中25例凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中CD34細(xì)胞中位百分?jǐn)?shù)分別為196和177P0543005。2、28例患者有27例獲得造血重建，中性粒細(xì)胞恢復(fù)至05109/L的中位時(shí)間為13天；血小板恢復(fù)至40109/L的中位時(shí)間為16天。3、在預(yù)處理過(guò)程中，28例患者均有不同程度的胃腸道反應(yīng)，其中11例患者出現(xiàn)嘔吐；在ABMT恢復(fù)過(guò)程中，3例患者合并感染而出現(xiàn)發(fā)熱，2例合并出血。4、28例患者中有8例在ABMT后中位時(shí)間7個(gè)月復(fù)發(fā)，總復(fù)發(fā)率為2857，1年復(fù)發(fā)概率為2222，2、3、5，7、10年復(fù)發(fā)概率均為2963。5、隨訪(fǎng)中位時(shí)間525月，28例患者平均生存期為143751563月，95可信區(qū)間為11311，17439；實(shí)際1年生存率為8214，2年生存率為75，3、5、7、10年生存率均為7143；1年生存概率為8174，2年生存概率為7322，3、5、7、10年生存概率均為7143。6、基因芯片結(jié)果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及與細(xì)胞凋亡有關(guān)的蛋白代謝、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的折疊與修飾以及細(xì)胞表面受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，細(xì)胞體現(xiàn)出凋亡及其相關(guān)功能基因的激活7、FCM結(jié)果示PUVA作用后24小時(shí)HL60、NB4和K562細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平、FASL蛋白表達(dá)明顯下降，F(xiàn)AS蛋白表達(dá)明顯升高。8、熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果示PUVA作用后4小時(shí)FASMRNA表達(dá)升高，F(xiàn)ASLMRNA表達(dá)下降。9、ICC檢測(cè)結(jié)果示PUVA可促進(jìn)細(xì)胞CASPASE8、CASPASE3蛋白表達(dá)。結(jié)論1、依據(jù)PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在國(guó)內(nèi)外率先將PSO應(yīng)用于ABMT臨床治療AGL，具有創(chuàng)新性。2、PUVA體外凈化ABMT治療AGL，對(duì)骨髓正常造血細(xì)胞損傷較小，可降低復(fù)發(fā)率，延長(zhǎng)無(wú)病生存期。3、PUVA可激活白血病細(xì)胞凋亡及與其相關(guān)功能基因。4、PUVA誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的途徑之一是作用于FAS/FASL系統(tǒng)，激活下游的CASPASE8、3，線(xiàn)粒體跨膜電位參與了凋亡的過(guò)程。目的導(dǎo)師黃世林教授從軍從醫(yī)60余年，他埋首岐黃，勤求故訓(xùn)，不斷地繼承發(fā)揚(yáng)，博采眾長(zhǎng)，至今中西合璧，學(xué)養(yǎng)精深，在中醫(yī)，中西醫(yī)藥結(jié)合治療血液系統(tǒng)疾病等方面造詣?lì)H深。他提出以“驅(qū)邪復(fù)正”為治則治療急性白血病，率先在臨床中應(yīng)用純中藥補(bǔ)骨脂PSORALEAFRUITS提取物補(bǔ)骨脂素PSORALEN，PSO加長(zhǎng)波紫外線(xiàn)LONGWAVEULTRAVIOLETA，UVA，又稱(chēng)PUVA，體外凈化骨髓，采用自體骨髓移植AUTOLOGOUSBONEMARROWTRANSPLANTATION，ABMT治療急性粒細(xì)胞白血病ACUTEGRANULOCYTICLEUKEMIA，AGL。本研究的目的在于全面總結(jié)臨床療效、系統(tǒng)整理老師可貴的臨床經(jīng)驗(yàn)，并探討PUVA法抗白血病的部分作用機(jī)制。方法臨床研究分析1991年10月至2005年11月于我單位接受PUVA體外凈化ABMT的28例AGL病例的臨床資料。實(shí)驗(yàn)研究選擇人類(lèi)白血病HL60、NB4和K562細(xì)胞為研究對(duì)象，AFFYMETRIXHUMANU13320基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)PUVA對(duì)人白血病細(xì)胞基因表達(dá)的影響；流式細(xì)胞儀FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM測(cè)定PUVA后24小時(shí)細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平的變化、細(xì)胞FAS、FASL蛋白表達(dá)情況；熒光定量RTPCR技術(shù)檢測(cè)PUVA后4小時(shí)細(xì)胞FAS、FASLMRNA的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)法IMMUNOCYTOCHEMISTRY，ICC檢測(cè)CASPASE8、CASPASE3蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS115軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1、28例患者凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中位數(shù)分別為865109和993109個(gè)P0418005。其中25例凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中CD34細(xì)胞中位百分?jǐn)?shù)分別為196和177P0543005。2、28例患者有27例獲得造血重建，中性粒細(xì)胞恢復(fù)至05109/L的中位時(shí)間為13天；血小板恢復(fù)至40109/L的中位時(shí)間為16天。3、在預(yù)處理過(guò)程中，28例患者均有不同程度的胃腸道反應(yīng)，其中11例患者出現(xiàn)嘔吐；在ABMT恢復(fù)過(guò)程中，3例患者合并感染而出現(xiàn)發(fā)熱，2例合并出血。4、28例患者中有8例在ABMT后中位時(shí)間7個(gè)月復(fù)發(fā)，總復(fù)發(fā)率為2857，1年復(fù)發(fā)概率為2222，2、3、5，7、10年復(fù)發(fā)概率均為2963。5、隨訪(fǎng)中位時(shí)間525月，28例患者平均生存期為143751563月，95可信區(qū)間為11311，17439；實(shí)際1年生存率為8214，2年生存率為75，3、5、7、10年生存率均為7143；1年生存概率為8174，2年生存概率為7322，3、5、7、10年生存概率均為7143。6、基因芯片結(jié)果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及與細(xì)胞凋亡有關(guān)的蛋白代謝、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的折疊與修飾以及細(xì)胞表面受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，細(xì)胞體現(xiàn)出凋亡及其相關(guān)功能基因的激活7、FCM結(jié)果示PUVA作用后24小時(shí)HL60、NB4和K562細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平、FASL蛋白表達(dá)明顯下降，F(xiàn)AS蛋白表達(dá)明顯升高。8、熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果示PUVA作用后4小時(shí)FASMRNA表達(dá)升高，F(xiàn)ASLMRNA表達(dá)下降。9、ICC檢測(cè)結(jié)果示PUVA可促進(jìn)細(xì)胞CASPASE8、CASPASE3蛋白表達(dá)。結(jié)論1、依據(jù)PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在國(guó)內(nèi)外率先將PSO應(yīng)用于ABMT臨床治療AGL，具有創(chuàng)新性。2、PUVA體外凈化ABMT治療AGL，對(duì)骨髓正常造血細(xì)胞損傷較小，可降低復(fù)發(fā)率，延長(zhǎng)無(wú)病生存期。3、PUVA可激活白血病細(xì)胞凋亡及與其相關(guān)功能基因。4、PUVA誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的途徑之一是作用于FAS/FASL系統(tǒng)，激活下游的CASPASE8、3，線(xiàn)粒體跨膜電位參與了凋亡的過(guò)程。目的導(dǎo)師黃世林教授從軍從醫(yī)60余年，他埋首岐黃，勤求故訓(xùn)，不斷地繼承發(fā)揚(yáng)，博采眾長(zhǎng)，至今中西合璧，學(xué)養(yǎng)精深，在中醫(yī)，中西醫(yī)藥結(jié)合治療血液系統(tǒng)疾病等方面造詣?lì)H深。他提出以“驅(qū)邪復(fù)正”為治則治療急性白血病，率先在臨床中應(yīng)用純中藥補(bǔ)骨脂PSORALEAFRUITS提取物補(bǔ)骨脂素PSORALEN，PSO加長(zhǎng)波紫外線(xiàn)LONGWAVEULTRAVIOLETA，UVA，又稱(chēng)PUVA，體外凈化骨髓，采用自體骨髓移植AUTOLOGOUSBONEMARROWTRANSPLANTATION，ABMT治療急性粒細(xì)胞白血病ACUTEGRANULOCYTICLEUKEMIA，AGL。本研究的目的在于全面總結(jié)臨床療效、系統(tǒng)整理老師可貴的臨床經(jīng)驗(yàn)，并探討PUVA法抗白血病的部分作用機(jī)制。方法臨床研究分析1991年10月至2005年11月于我單位接受PUVA體外凈化ABMT的28例AGL病例的臨床資料。實(shí)驗(yàn)研究選擇人類(lèi)白血病HL60、NB4和K562細(xì)胞為研究對(duì)象，AFFYMETRIXHUMANU13320基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)PUVA對(duì)人白血病細(xì)胞基因表達(dá)的影響；流式細(xì)胞儀FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM測(cè)定PUVA后24小時(shí)細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平的變化、細(xì)胞FAS、FASL蛋白表達(dá)情況；熒光定量RTPCR技術(shù)檢測(cè)PUVA后4小時(shí)細(xì)胞FAS、FASLMRNA的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)法IMMUNOCYTOCHEMISTRY，ICC檢測(cè)CASPASE8、CASPASE3蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS115軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1、28例患者凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中位數(shù)分別為865109和993109個(gè)P0418005。其中25例凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中CD34細(xì)胞中位百分?jǐn)?shù)分別為196和177P0543005。2、28例患者有27例獲得造血重建，中性粒細(xì)胞恢復(fù)至05109/L的中位時(shí)間為13天；血小板恢復(fù)至40109/L的中位時(shí)間為16天。3、在預(yù)處理過(guò)程中，28例患者均有不同程度的胃腸道反應(yīng)，其中11例患者出現(xiàn)嘔吐；在ABMT恢復(fù)過(guò)程中，3例患者合并感染而出現(xiàn)發(fā)熱，2例合并出血。4、28例患者中有8例在ABMT后中位時(shí)間7個(gè)月復(fù)發(fā)，總復(fù)發(fā)率為2857，1年復(fù)發(fā)概率為2222，2、3、5，7、10年復(fù)發(fā)概率均為2963。5、隨訪(fǎng)中位時(shí)間525月，28例患者平均生存期為143751563月，95可信區(qū)間為11311，17439；實(shí)際1年生存率為8214，2年生存率為75，3、5、7、10年生存率均為7143；1年生存概率為8174，2年生存概率為7322，3、5、7、10年生存概率均為7143。6、基因芯片結(jié)果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及與細(xì)胞凋亡有關(guān)的蛋白代謝、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的折疊與修飾以及細(xì)胞表面受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，細(xì)胞體現(xiàn)出凋亡及其相關(guān)功能基因的激活7、FCM結(jié)果示PUVA作用后24小時(shí)HL60、NB4和K562細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平、FASL蛋白表達(dá)明顯下降，F(xiàn)AS蛋白表達(dá)明顯升高。8、熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果示PUVA作用后4小時(shí)FASMRNA表達(dá)升高，F(xiàn)ASLMRNA表達(dá)下降。9、ICC檢測(cè)結(jié)果示PUVA可促進(jìn)細(xì)胞CASPASE8、CASPASE3蛋白表達(dá)。結(jié)論1、依據(jù)PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在國(guó)內(nèi)外率先將PSO應(yīng)用于ABMT臨床治療AGL，具有創(chuàng)新性。2、PUVA體外凈化ABMT治療AGL，對(duì)骨髓正常造血細(xì)胞損傷較小，可降低復(fù)發(fā)率，延長(zhǎng)無(wú)病生存期。3、PUVA可激活白血病細(xì)胞凋亡及與其相關(guān)功能基因。4、PUVA誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的途徑之一是作用于FAS/FASL系統(tǒng)，激活下游的CASPASE8、3，線(xiàn)粒體跨膜電位參與了凋亡的過(guò)程。目的導(dǎo)師黃世林教授從軍從醫(yī)60余年，他埋首岐黃，勤求故訓(xùn)，不斷地繼承發(fā)揚(yáng)，博采眾長(zhǎng)，至今中西合璧，學(xué)養(yǎng)精深，在中醫(yī)，中西醫(yī)藥結(jié)合治療血液系統(tǒng)疾病等方面造詣?lì)H深。他提出以“驅(qū)邪復(fù)正”為治則治療急性白血病，率先在臨床中應(yīng)用純中藥補(bǔ)骨脂PSORALEAFRUITS提取物補(bǔ)骨脂素PSORALEN，PSO加長(zhǎng)波紫外線(xiàn)LONGWAVEULTRAVIOLETA，UVA，又稱(chēng)PUVA，體外凈化骨髓，采用自體骨髓移植AUTOLOGOUSBONEMARROWTRANSPLANTATION，ABMT治療急性粒細(xì)胞白血病ACUTEGRANULOCYTICLEUKEMIA，AGL。本研究的目的在于全面總結(jié)臨床療效、系統(tǒng)整理老師可貴的臨床經(jīng)驗(yàn)，并探討PUVA法抗白血病的部分作用機(jī)制。方法臨床研究分析1991年10月至2005年11月于我單位接受PUVA體外凈化ABMT的28例AGL病例的臨床資料。實(shí)驗(yàn)研究選擇人類(lèi)白血病HL60、NB4和K562細(xì)胞為研究對(duì)象，AFFYMETRIXHUMANU13320基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)PUVA對(duì)人白血病細(xì)胞基因表達(dá)的影響；流式細(xì)胞儀FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM測(cè)定PUVA后24小時(shí)細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平的變化、細(xì)胞FAS、FASL蛋白表達(dá)情況；熒光定量RTPCR技術(shù)檢測(cè)PUVA后4小時(shí)細(xì)胞FAS、FASLMRNA的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)法IMMUNOCYTOCHEMISTRY，ICC檢測(cè)CASPASE8、CASPASE3蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS115軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1、28例患者凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中位數(shù)分別為865109和993109個(gè)P0418005。其中25例凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中CD34細(xì)胞中位百分?jǐn)?shù)分別為196和177P0543005。2、28例患者有27例獲得造血重建，中性粒細(xì)胞恢復(fù)至05109/L的中位時(shí)間為13天；血小板恢復(fù)至40109/L的中位時(shí)間為16天。3、在預(yù)處理過(guò)程中，28例患者均有不同程度的胃腸道反應(yīng)，其中11例患者出現(xiàn)嘔吐；在ABMT恢復(fù)過(guò)程中，3例患者合并感染而出現(xiàn)發(fā)熱，2例合并出血。4、28例患者中有8例在ABMT后中位時(shí)間7個(gè)月復(fù)發(fā)，總復(fù)發(fā)率為2857，1年復(fù)發(fā)概率為2222，2、3、5，7、10年復(fù)發(fā)概率均為2963。5、隨訪(fǎng)中位時(shí)間525月，28例患者平均生存期為143751563月，95可信區(qū)間為11311，17439；實(shí)際1年生存率為8214，2年生存率為75，3、5、7、10年生存率均為7143；1年生存概率為8174，2年生存概率為7322，3、5、7、10年生存概率均為7143。6、基因芯片結(jié)果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及與細(xì)胞凋亡有關(guān)的蛋白代謝、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的折疊與修飾以及細(xì)胞表面受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，細(xì)胞體現(xiàn)出凋亡及其相關(guān)功能基因的激活7、FCM結(jié)果示PUVA作用后24小時(shí)HL60、NB4和K562細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平、FASL蛋白表達(dá)明顯下降，F(xiàn)AS蛋白表達(dá)明顯升高。8、熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果示PUVA作用后4小時(shí)FASMRNA表達(dá)升高，F(xiàn)ASLMRNA表達(dá)下降。9、ICC檢測(cè)結(jié)果示PUVA可促進(jìn)細(xì)胞CASPASE8、CASPASE3蛋白表達(dá)。結(jié)論1、依據(jù)PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在國(guó)內(nèi)外率先將PSO應(yīng)用于ABMT臨床治療AGL，具有創(chuàng)新性。2、PUVA體外凈化ABMT治療AGL，對(duì)骨髓正常造血細(xì)胞損傷較小，可降低復(fù)發(fā)率，延長(zhǎng)無(wú)病生存期。3、PUVA可激活白血病細(xì)胞凋亡及與其相關(guān)功能基因。4、PUVA誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的途徑之一是作用于FAS/FASL系統(tǒng)，激活下游的CASPASE8、3，線(xiàn)粒體跨膜電位參與了凋亡的過(guò)程。目的導(dǎo)師黃世林教授從軍從醫(yī)60余年，他埋首岐黃，勤求故訓(xùn)，不斷地繼承發(fā)揚(yáng)，博采眾長(zhǎng)，至今中西合璧，學(xué)養(yǎng)精深，在中醫(yī)，中西醫(yī)藥結(jié)合治療血液系統(tǒng)疾病等方面造詣?lì)H深。他提出以“驅(qū)邪復(fù)正”為治則治療急性白血病，率先在臨床中應(yīng)用純中藥補(bǔ)骨脂PSORALEAFRUITS提取物補(bǔ)骨脂素PSORALEN，PSO加長(zhǎng)波紫外線(xiàn)LONGWAVEULTRAVIOLETA，UVA，又稱(chēng)PUVA，體外凈化骨髓，采用自體骨髓移植AUTOLOGOUSBONEMARROWTRANSPLANTATION，ABMT治療急性粒細(xì)胞白血病ACUTEGRANULOCYTICLEUKEMIA，AGL。本研究的目的在于全面總結(jié)臨床療效、系統(tǒng)整理老師可貴的臨床經(jīng)驗(yàn)，并探討PUVA法抗白血病的部分作用機(jī)制。方法臨床研究分析1991年10月至2005年11月于我單位接受PUVA體外凈化ABMT的28例AGL病例的臨床資料。實(shí)驗(yàn)研究選擇人類(lèi)白血病HL60、NB4和K562細(xì)胞為研究對(duì)象，AFFYMETRIXHUMANU13320基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)PUVA對(duì)人白血病細(xì)胞基因表達(dá)的影響；流式細(xì)胞儀FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM測(cè)定PUVA后24小時(shí)細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平的變化、細(xì)胞FAS、FASL蛋白表達(dá)情況；熒光定量RTPCR技術(shù)檢測(cè)PUVA后4小時(shí)細(xì)胞FAS、FASLMRNA的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)法IMMUNOCYTOCHEMISTRY，ICC檢測(cè)CASPASE8、CASPASE3蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS115軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1、28例患者凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中位數(shù)分別為865109和993109個(gè)P0418005。其中25例凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中CD34細(xì)胞中位百分?jǐn)?shù)分別為196和177P0543005。2、28例患者有27例獲得造血重建，中性粒細(xì)胞恢復(fù)至05109/L的中位時(shí)間為13天；血小板恢復(fù)至40109/L的中位時(shí)間為16天。3、在預(yù)處理過(guò)程中，28例患者均有不同程度的胃腸道反應(yīng)，其中11例患者出現(xiàn)嘔吐；在ABMT恢復(fù)過(guò)程中，3例患者合并感染而出現(xiàn)發(fā)熱，2例合并出血。4、28例患者中有8例在ABMT后中位時(shí)間7個(gè)月復(fù)發(fā)，總復(fù)發(fā)率為2857，1年復(fù)發(fā)概率為2222，2、3、5，7、10年復(fù)發(fā)概率均為2963。5、隨訪(fǎng)中位時(shí)間525月，28例患者平均生存期為143751563月，95可信區(qū)間為11311，17439；實(shí)際1年生存率為8214，2年生存率為75，3、5、7、10年生存率均為7143；1年生存概率為8174，2年生存概率為7322，3、5、7、10年生存概率均為7143。6、基因芯片結(jié)果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及與細(xì)胞凋亡有關(guān)的蛋白代謝、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的折疊與修飾以及細(xì)胞表面受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，細(xì)胞體現(xiàn)出凋亡及其相關(guān)功能基因的激活7、FCM結(jié)果示PUVA作用后24小時(shí)HL60、NB4和K562細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平、FASL蛋白表達(dá)明顯下降，F(xiàn)AS蛋白表達(dá)明顯升高。8、熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果示PUVA作用后4小時(shí)FASMRNA表達(dá)升高，F(xiàn)ASLMRNA表達(dá)下降。9、ICC檢測(cè)結(jié)果示PUVA可促進(jìn)細(xì)胞CASPASE8、CASPASE3蛋白表達(dá)。結(jié)論1、依據(jù)PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在國(guó)內(nèi)外率先將PSO應(yīng)用于ABMT臨床治療AGL，具有創(chuàng)新性。2、PUVA體外凈化ABMT治療AGL，對(duì)骨髓正常造血細(xì)胞損傷較小，可降低復(fù)發(fā)率，延長(zhǎng)無(wú)病生存期。3、PUVA可激活白血病細(xì)胞凋亡及與其相關(guān)功能基因。4、PUVA誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的途徑之一是作用于FAS/FASL系統(tǒng)，激活下游的CASPASE8、3，線(xiàn)粒體跨膜電位參與了凋亡的過(guò)程。目的導(dǎo)師黃世林教授從軍從醫(yī)60余年，他埋首岐黃，勤求故訓(xùn)，不斷地繼承發(fā)揚(yáng)，博采眾長(zhǎng)，至今中西合璧，學(xué)養(yǎng)精深，在中醫(yī)，中西醫(yī)藥結(jié)合治療血液系統(tǒng)疾病等方面造詣?lì)H深。他提出以“驅(qū)邪復(fù)正”為治則治療急性白血病，率先在臨床中應(yīng)用純中藥補(bǔ)骨脂PSORALEAFRUITS提取物補(bǔ)骨脂素PSORALEN，PSO加長(zhǎng)波紫外線(xiàn)LONGWAVEULTRAVIOLETA，UVA，又稱(chēng)PUVA，體外凈化骨髓，采用自體骨髓移植AUTOLOGOUSBONEMARROWTRANSPLANTATION，ABMT治療急性粒細(xì)胞白血病ACUTEGRANULOCYTICLEUKEMIA，AGL。本研究的目的在于全面總結(jié)臨床療效、系統(tǒng)整理老師可貴的臨床經(jīng)驗(yàn)，并探討PUVA法抗白血病的部分作用機(jī)制。方法臨床研究分析1991年10月至2005年11月于我單位接受PUVA體外凈化ABMT的28例AGL病例的臨床資料。實(shí)驗(yàn)研究選擇人類(lèi)白血病HL60、NB4和K562細(xì)胞為研究對(duì)象，AFFYMETRIXHUMANU13320基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)PUVA對(duì)人白血病細(xì)胞基因表達(dá)的影響；流式細(xì)胞儀FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM測(cè)定PUVA后24小時(shí)細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平的變化、細(xì)胞FAS、FASL蛋白表達(dá)情況；熒光定量RTPCR技術(shù)檢測(cè)PUVA后4小時(shí)細(xì)胞FAS、FASLMRNA的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)法IMMUNOCYTOCHEMISTRY，ICC檢測(cè)CASPASE8、CASPASE3蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS115軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1、28例患者凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中位數(shù)分別為865109和993109個(gè)P0418005。其中25例凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中CD34細(xì)胞中位百分?jǐn)?shù)分別為196和177P0543005。2、28例患者有27例獲得造血重建，中性粒細(xì)胞恢復(fù)至05109/L的中位時(shí)間為13天；血小板恢復(fù)至40109/L的中位時(shí)間為16天。3、在預(yù)處理過(guò)程中，28例患者均有不同程度的胃腸道反應(yīng)，其中11例患者出現(xiàn)嘔吐；在ABMT恢復(fù)過(guò)程中，3例患者合并感染而出現(xiàn)發(fā)熱，2例合并出血。4、28例患者中有8例在ABMT后中位時(shí)間7個(gè)月復(fù)發(fā)，總復(fù)發(fā)率為2857，1年復(fù)發(fā)概率為2222，2、3、5，7、10年復(fù)發(fā)概率均為2963。5、隨訪(fǎng)中位時(shí)間525月，28例患者平均生存期為143751563月，95可信區(qū)間為11311，17439；實(shí)際1年生存率為8214，2年生存率為75，3、5、7、10年生存率均為7143；1年生存概率為8174，2年生存概率為7322，3、5、7、10年生存概率均為7143。6、基因芯片結(jié)果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及與細(xì)胞凋亡有關(guān)的蛋白代謝、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的折疊與修飾以及細(xì)胞表面受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，細(xì)胞體現(xiàn)出凋亡及其相關(guān)功能基因的激活7、FCM結(jié)果示PUVA作用后24小時(shí)HL60、NB4和K562細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平、FASL蛋白表達(dá)明顯下降，F(xiàn)AS蛋白表達(dá)明顯升高。8、熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果示PUVA作用后4小時(shí)FASMRNA表達(dá)升高，F(xiàn)ASLMRNA表達(dá)下降。9、ICC檢測(cè)結(jié)果示PUVA可促進(jìn)細(xì)胞CASPASE8、CASPASE3蛋白表達(dá)。結(jié)論1、依據(jù)PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在國(guó)內(nèi)外率先將PSO應(yīng)用于ABMT臨床治療AGL，具有創(chuàng)新性。2、PUVA體外凈化ABMT治療AGL，對(duì)骨髓正常造血細(xì)胞損傷較小，可降低復(fù)發(fā)率，延長(zhǎng)無(wú)病生存期。3、PUVA可激活白血病細(xì)胞凋亡及與其相關(guān)功能基因。4、PUVA誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的途徑之一是作用于FAS/FASL系統(tǒng)，激活下游的CASPASE8、3，線(xiàn)粒體跨膜電位參與了凋亡的過(guò)程。目的導(dǎo)師黃世林教授從軍從醫(yī)60余年，他埋首岐黃，勤求故訓(xùn)，不斷地繼承發(fā)揚(yáng)，博采眾長(zhǎng)，至今中西合璧，學(xué)養(yǎng)精深，在中醫(yī)，中西醫(yī)藥結(jié)合治療血液系統(tǒng)疾病等方面造詣?lì)H深。他提出以“驅(qū)邪復(fù)正”為治則治療急性白血病，率先在臨床中應(yīng)用純中藥補(bǔ)骨脂PSORALEAFRUITS提取物補(bǔ)骨脂素PSORALEN，PSO加長(zhǎng)波紫外線(xiàn)LONGWAVEULTRAVIOLETA，UVA，又稱(chēng)PUVA，體外凈化骨髓，采用自體骨髓移植AUTOLOGOUSBONEMARROWTRANSPLANTATION，ABMT治療急性粒細(xì)胞白血病ACUTEGRANULOCYTICLEUKEMIA，AGL。本研究的目的在于全面總結(jié)臨床療效、系統(tǒng)整理老師可貴的臨床經(jīng)驗(yàn)，并探討PUVA法抗白血病的部分作用機(jī)制。方法臨床研究分析1991年10月至2005年11月于我單位接受PUVA體外凈化ABMT的28例AGL病例的臨床資料。實(shí)驗(yàn)研究選擇人類(lèi)白血病HL60、NB4和K562細(xì)胞為研究對(duì)象，AFFYMETRIXHUMANU13320基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)PUVA對(duì)人白血病細(xì)胞基因表達(dá)的影響；流式細(xì)胞儀FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM測(cè)定PUVA后24小時(shí)細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平的變化、細(xì)胞FAS、FASL蛋白表達(dá)情況；熒光定量RTPCR技術(shù)檢測(cè)PUVA后4小時(shí)細(xì)胞FAS、FASLMRNA的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)法IMMUNOCYTOCHEMISTRY，ICC檢測(cè)CASPASE8、CASPASE3蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS115軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1、28例患者凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中位數(shù)分別為865109和993109個(gè)P0418005。其中25例凈化前后骨髓單個(gè)核細(xì)胞中CD34細(xì)胞中位百分?jǐn)?shù)分別為196和177P0543005。2、28例患者有27例獲得造血重建，中性粒細(xì)胞恢復(fù)至05109/L的中位時(shí)間為13天；血小板恢復(fù)至40109/L的中位時(shí)間為16天。3、在預(yù)處理過(guò)程中，28例患者均有不同程度的胃腸道反應(yīng)，其中11例患者出現(xiàn)嘔吐；在ABMT恢復(fù)過(guò)程中，3例患者合并感染而出現(xiàn)發(fā)熱，2例合并出血。4、28例患者中有8例在ABMT后中位時(shí)間7個(gè)月復(fù)發(fā)，總復(fù)發(fā)率為2857，1年復(fù)發(fā)概率為2222，2、3、5，7、10年復(fù)發(fā)概率均為2963。5、隨訪(fǎng)中位時(shí)間525月，28例患者平均生存期為143751563月，95可信區(qū)間為11311，17439；實(shí)際1年生存率為8214，2年生存率為75，3、5、7、10年生存率均為7143；1年生存概率為8174，2年生存概率為7322，3、5、7、10年生存概率均為7143。6、基因芯片結(jié)果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及與細(xì)胞凋亡有關(guān)的蛋白代謝、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的折疊與修飾以及細(xì)胞表面受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，細(xì)胞體現(xiàn)出凋亡及其相關(guān)功能基因的激活7、FCM結(jié)果示PUVA作用后24小時(shí)HL60、NB4和K562細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位水平、FASL蛋白表達(dá)明顯下降，F(xiàn)AS蛋白表達(dá)明顯升高。8、熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果示PUVA作用后4小時(shí)FASMRNA表達(dá)升高，F(xiàn)ASLMRNA表達(dá)下降。9、ICC檢測(cè)結(jié)果示PUVA可促進(jìn)細(xì)胞CASPASE8、CASPASE3蛋白表達(dá)。結(jié)論1、依據(jù)PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在國(guó)內(nèi)外率先將PSO應(yīng)用于ABMT臨床治療AGL，具有創(chuàng)新性。2、PUVA體外凈化ABMT治療AGL，對(duì)骨髓正常造血細(xì)胞損傷較小，可降低復(fù)發(fā)率，延長(zhǎng)無(wú)病生存期。3、PUVA可激活白血病細(xì)胞凋亡及與其相關(guān)功能基因。4、PUVA誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的途徑之一是作用于FAS/FASL系統(tǒng)，激活下游的CASPASE8、3，線(xiàn)粒體跨膜電位參與了凋亡的過(guò)程。目的導(dǎo)師黃世林教授從軍從醫(yī)60余年，他埋首岐黃，勤求故訓(xùn)，不斷地繼承發(fā)揚(yáng)，博采眾長(zhǎng)，至今中西合璧，學(xué)養(yǎng)精深，在中醫(yī)，中西醫(yī)藥結(jié)合治療血液系統(tǒng)疾病等方面造詣?lì)H深。他提出以“驅(qū)邪復(fù)正”為治則治療急性白血病，率先在臨床中應(yīng)用純中藥補(bǔ)骨脂PSORALEAFRUITS提取物補(bǔ)骨脂素PSORALEN，PSO加長(zhǎng)波紫外線(xiàn)LONGWAVEULTRAVIOLETA，UVA，又稱(chēng)PUVA，體外凈化骨髓，采用自體骨髓移植AUTOLOGOUSBONEMARROWTRANSPLANTATION，ABMT治療急性粒細(xì)胞白血病ACUTEG