生物化學(xué)：第六節(jié) 酶的活性

1、第六節(jié) 酶的活力,酶的活力測(cè)定,酶的定量并非對(duì)其蛋白質(zhì)進(jìn)行定量，而是對(duì)它的催化能力進(jìn)行定量。,也稱酶活性指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力，通常用最適條件下酶所催化的化學(xué)反應(yīng)的速度來衡量。,酶促反應(yīng)的速度越快，表示酶的活力越高；反之，則低。 所以，酶的定量就是測(cè)定酶的活力，也即測(cè)定酶促反應(yīng)的速度。,一. 酶活力 P171,酶的活力測(cè)定,不同的酶在不同的條件下反應(yīng)速度曲線都不一樣，但大致相似,二. 酶促反應(yīng)速度的測(cè)定,以產(chǎn)物濃度對(duì)反應(yīng)時(shí)間作圖，可得到酶促反應(yīng)速度曲線,酶的活力測(cè)定,二. 酶促反應(yīng)速度的測(cè)定,可見，反應(yīng)速度只在最初一段時(shí)間內(nèi)保持恒定，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，反應(yīng)速度逐漸下降,原 因 底物濃度的降低

2、、產(chǎn)物的增加造成的逆反應(yīng)的加快 產(chǎn)物的抑制作用 酶本身逐漸失活,酶的活力測(cè)定,二. 酶促反應(yīng)速度的測(cè)定,正確的酶促反應(yīng)速度應(yīng)該是在反應(yīng)初期短時(shí)間內(nèi)的反應(yīng)速度，即反應(yīng)初速度,酶的活力測(cè)定,二. 酶促反應(yīng)速度的測(cè)定,測(cè)定酶的活力，就是測(cè)定酶促反應(yīng)的初速度,所以,酶的活力測(cè)定,常用的酶活力單位有三種：,三. 酶活力的單位 P172,1. 國(guó)際單位 (IU),這種單位是由國(guó)際酶學(xué)委員會(huì)規(guī)定的。,在標(biāo)準(zhǔn)條件(25、最適pH、最適底物濃度)下，每分鐘催化 1mmol 底物轉(zhuǎn)化的酶量，這樣的速度所代表的酶的活力即酶的量定義為1個(gè)國(guó)際單位 (IU)。,酶的活力測(cè)定,常用的酶活力單位有三種：,三. 酶活力的單位

3、,2. Kat,是由國(guó)際酶學(xué)委員會(huì)于1972年規(guī)定的一種新單位。,在最適條件下，酶每秒鐘催化1mol 底物轉(zhuǎn)化，這樣的速度所代表的酶的活力即酶的量定義為 1個(gè)Kat 。,1 Kat = 60106 IU,酶的活力測(cè)定,常用的酶活力單位有三種：,三. 酶活力的單位,3. 自定義的活力單位（U）,這種單位簡(jiǎn)單方便，省去了許多計(jì)算；但只能進(jìn)行酶活力的相對(duì)比較。,酶習(xí)慣上或測(cè)定時(shí)使用的反應(yīng)速度的單位定義為酶的活力單位。 有的甚至直接用測(cè)得的物理量，如單位時(shí)間內(nèi)消光值的變化 (DA) 表示酶活力單位。,酶的活力測(cè)定,四. 比活力 P172,指每毫克蛋白所含的酶活力單位數(shù),比活力是酶制劑純度的常用指標(biāo) 比活力越大，表示酶越純,酶的活力測(cè)定,五. 純化倍數(shù),六 產(chǎn)率,產(chǎn)率 ,每次總活力,第一次總活力,七