統(tǒng)考版2021高考生物二輪復(fù)習(xí)整合訓(xùn)練十五基因工程和細(xì)胞工程含解析

1、整合訓(xùn)練(十五)基因工程和細(xì)胞工程全員必做題12020贛粵湘三省六校高三聯(lián)考科學(xué)工作者欲培育能產(chǎn)生含鐵量較高的轉(zhuǎn)基因花生新品種，ti質(zhì)粒中含有潮霉素抗性基因，具體步驟如圖：(1)完整的ti質(zhì)粒除了圖示結(jié)構(gòu)外，還應(yīng)該包括啟動(dòng)子、終止子等，其中啟動(dòng)子位于基因的首段，它的作用是_。(2)若鐵結(jié)合蛋白基因來(lái)自菜豆，獲取該目的基因需要用到的工具酶的特點(diǎn)是_。(3)圖中將目的基因(鐵結(jié)合蛋白基因)導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法為_(kāi)；為確定轉(zhuǎn)基因花生是否培育成功，首先應(yīng)檢測(cè)_，這是目的基因能否在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵；其次，利用_檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mrna；最后，利用抗原抗體雜交法檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白

2、質(zhì)。(4)圖中用到的植物細(xì)胞工程技術(shù)是_，培養(yǎng)基1中經(jīng)過(guò)脫分化得到愈傷組織，培養(yǎng)基2中篩選的方法是在培養(yǎng)基中加入一定量的_，培養(yǎng)基3的作用是_。22020東北三省四市教研聯(lián)合體高三模擬微衛(wèi)星dna是廣泛分布于真核生物基因組中的簡(jiǎn)單重復(fù)序列。由于重復(fù)單位和重復(fù)次數(shù)在個(gè)體間表現(xiàn)出一定的遺傳性和差異性，因此微衛(wèi)星dna可以作為分子標(biāo)記，并有著廣泛應(yīng)用。(1)可以用標(biāo)記的_為探針，與基因組文庫(kù)進(jìn)行雜交篩選，然后再經(jīng)多個(gè)步驟獲取微衛(wèi)星dna。(2)擴(kuò)增微衛(wèi)星dna序列a710的pcr反應(yīng)體系中含緩沖液、模板dna、dntp(包含datp、dctp、dgtp、dttp)、引物及耐熱的dna聚合酶。其中dn

3、tp的作用是_； pcr技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是_，以便根據(jù)這一序列合成引物，所以引物應(yīng)選用下圖中的_(填圖中標(biāo)號(hào))。pcr的基本反應(yīng)步驟為_(kāi)，其產(chǎn)物以_形式擴(kuò)增。(3)根據(jù)“微衛(wèi)星dna”的特點(diǎn)判斷，應(yīng)用這種標(biāo)記可進(jìn)行的研究有_(填字母)。人類親子鑒定調(diào)查某地大熊貓種群數(shù)量誘導(dǎo)基因突變冠狀病毒遺傳物質(zhì)測(cè)序a bc d32020安徽省皖江名校聯(lián)盟高三聯(lián)考珠蛋白是哺乳動(dòng)物血紅蛋白的重要組成成分，當(dāng)它成分異常時(shí)，動(dòng)物可能會(huì)患貧血癥。現(xiàn)利用基因工程改造大腸桿菌，生產(chǎn)出珠蛋白下圖表示所用的質(zhì)粒以及酶切位點(diǎn)，已知質(zhì)粒的總長(zhǎng)為3.8 kb(1 kb1 000堿基對(duì))，其中的lacz基因表達(dá)能使白色的大腸桿

4、菌菌落呈現(xiàn)藍(lán)色?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)質(zhì)粒通過(guò)bamh切割后，含有 ecor切割位點(diǎn)的dna長(zhǎng)度為_(kāi)kb。利用 bam h和bgl分別切割目的基因的兩端，再將其與bamh切割后的質(zhì)粒結(jié)合時(shí)，需要加入_酶，以構(gòu)成重組質(zhì)粒。在目的基因與質(zhì)粒結(jié)合時(shí)，質(zhì)粒上bamh切割位點(diǎn)與目的基因某一端的bgl切割位點(diǎn)能結(jié)合的原因是_。(2)若上述的重組質(zhì)粒長(zhǎng)度為4.65 kb，則酶切后的目的基因長(zhǎng)度為_(kāi)kb。根據(jù)重組質(zhì)粒經(jīng)bamh和ecor共同切割后的產(chǎn)物不同，可將重組質(zhì)粒分為兩種類型。若其中的一種可以獲得2個(gè)長(zhǎng)度分別為1.5kb和3.15kb的dna片段，則另一種重組質(zhì)粒通過(guò)bamh和ecor共同切割后，獲得的2

5、個(gè)dna片段長(zhǎng)度分別為_(kāi)kb。(3)將原始質(zhì)粒和重組質(zhì)粒分別導(dǎo)入大腸桿菌，則菌落顏色為_(kāi)色的受體菌可能會(huì)產(chǎn)生珠蛋白。42020湖南省高三二模干擾素是動(dòng)物或人體細(xì)胞受到病毒侵染后產(chǎn)生的一種糖蛋白，它是一種抗病毒的特效藥。中國(guó)“干擾素之父”侯云德院士利用基因工程的方法獲得了人干擾素alb，用于臨床疾病的治療?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題。(1)獲得基因工程用的干擾素基因，需從_細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中獲得mrna，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得cdna，該基因中不包括正常干擾素基因的_片段，再利用pcr技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因，擴(kuò)增干擾素基因的前提是_，以便合成引物。(2)大腸桿菌和酵母菌均可作為基因工程的受體菌，生產(chǎn)干擾素alb時(shí)宜選用后者

6、，原因是_。(3)有人嘗試讓植物細(xì)胞產(chǎn)生干擾素，探索發(fā)現(xiàn)水稻胚乳細(xì)胞作為反應(yīng)器的效果比較好。若用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法進(jìn)行目的基因的導(dǎo)入，添加一定量的酚類物質(zhì)效果更好，原因是_。在用農(nóng)桿菌ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)將干擾素基因插入tdna片段_(填“內(nèi)”或“外”)，ti質(zhì)粒上的tdna的作用是_。鑒定水稻胚乳細(xì)胞中干擾素基因是否表達(dá)可采用的方法是_。重點(diǎn)選做題12020廣東省高三二模在植物基因工程中，通常借助標(biāo)記基因來(lái)達(dá)到選擇的目的，但某些標(biāo)記基因的存在可能引起其他問(wèn)題。研究表明，在一定條件下用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化植物時(shí)，一個(gè)ti質(zhì)粒中的兩段tdna可分別整合到染色體不同位點(diǎn)上?？茖W(xué)家利用此研究成果培育

7、出了不帶hpt(抗潮霉素基因)的抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因秈稻。回答下列問(wèn)題。(1)在成功構(gòu)建的重組ti質(zhì)粒中，hpt與抗蟲(chóng)基因在ti質(zhì)粒中應(yīng)排列在_(填“同一段”或“兩段”)tdna上。(2)取秈稻的幼胚進(jìn)行_處理后，接種到培養(yǎng)基上培養(yǎng)，幼胚細(xì)胞通過(guò)_形成愈傷組織，隨后用含重組ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染該愈傷組織，然后轉(zhuǎn)接到含有_的培養(yǎng)基進(jìn)行初次篩選，獲得轉(zhuǎn)基因的愈傷組織后，再轉(zhuǎn)接到含有_(植物激素)的分化培養(yǎng)基培養(yǎng)出幼苗，移栽后繼續(xù)培養(yǎng)成植株。(3)對(duì)所得植株進(jìn)行連續(xù)自交，通過(guò)_和_對(duì)后代進(jìn)行篩選，最終可獲得不帶hpt的抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因秈稻。(4)與種植攜帶hpt的抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因秈稻相比，種植上述不帶hpt的抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因秈

8、稻的優(yōu)點(diǎn)是_(寫出1點(diǎn)即可)。22020江西省高三二模新冠肺炎(covid19)是由新冠病毒感染引起的呼吸道傳染病，研究表明新冠病毒侵染的關(guān)鍵是病毒表面的s蛋白與人體細(xì)胞表面ace2特異結(jié)合。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)為及時(shí)確診，科學(xué)家研制了基因檢測(cè)試劑盒，其機(jī)理為：分離待測(cè)個(gè)體細(xì)胞的總rna，在_酶的作用下得到相應(yīng)的dna，再利用_技術(shù)擴(kuò)增將樣本中微量的病毒信息放大，最后以熒光的方式讀取信號(hào)。(2)預(yù)防新冠肺炎(covid19)的有效措施是接種疫苗，核酸疫苗已成為疫苗研發(fā)的新領(lǐng)域。與dna疫苗(通過(guò)抗原蛋白基因在動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)引起機(jī)體免疫應(yīng)答)相比，mrna疫苗的安全性更有優(yōu)勢(shì)。這是因?yàn)閙rna

9、不需要進(jìn)入細(xì)胞核，無(wú)_的風(fēng)險(xiǎn)，且易被_水解，不會(huì)遺傳給子細(xì)胞。(3)研制s蛋白的單克隆抗體可能成為治療新冠肺炎的途徑，請(qǐng)利用小鼠作實(shí)驗(yàn)材料，簡(jiǎn)要寫出制備s蛋白的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)過(guò)程：_。(4)構(gòu)建乳腺生物反應(yīng)器可生產(chǎn)相應(yīng)的藥物蛋白，用來(lái)治療新冠肺炎。構(gòu)建的方法有多種，一是通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)將重組基因?qū)氲绞芫阎?，使其生長(zhǎng)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；二是通過(guò)轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞核移植技術(shù)生產(chǎn)克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器。兩種方法獲得的胚胎都要借助_技術(shù)和_技術(shù)才能獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物個(gè)體。32020吉林省高三模擬科學(xué)家研發(fā)出抗hpv的單克隆抗體可高效準(zhǔn)確檢測(cè)出hpv，從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)單克隆抗體具有

10、的主要優(yōu)點(diǎn)是_，單克隆抗體制備過(guò)程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有_(答出兩點(diǎn))。(2)將b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合時(shí)，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外(只考慮兩兩融合)，可能還有_，出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是_，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)，常用的誘導(dǎo)因素有_(答出三點(diǎn))等。(3)據(jù)報(bào)道，科學(xué)家從某些無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出了無(wú)限增殖調(diào)控基因(prg)，該基因能激發(fā)動(dòng)物細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。請(qǐng)據(jù)此設(shè)計(jì)兩種制備單克隆抗體的新思路：_；_。42020河北省石家莊高三下學(xué)期模擬人血清白蛋白(hsa)是血漿中含量最豐富的蛋白質(zhì)，在維持血漿滲透壓、抗凝血等方面起著重要作用，具有重

11、要的醫(yī)用價(jià)值。如圖是用基因工程技術(shù)獲取重組hsa(rhsa)的兩條途徑。(1)為獲取hsa基因，首先要提取人血細(xì)胞中的mrna，利用_法合成cdna，再利用pcr技術(shù)進(jìn)行快速擴(kuò)增，在這一過(guò)程中，需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成_，pcr過(guò)程中，溫度降低到55 的目的是_。(2)構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rhsa的載體時(shí)，需要選擇水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子，而不能選擇其他物種和組織細(xì)胞的啟動(dòng)子，原因可能是_。(3)在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過(guò)程中，為了吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，需添加_物質(zhì)。(4)選用大腸桿菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)有_(答出兩點(diǎn)即可)。但相比于水稻胚乳細(xì)胞，利

12、用大腸桿菌獲得的rhsa也有一些缺點(diǎn)，請(qǐng)從生物膜系統(tǒng)的角度進(jìn)行分析_。(5)利用上述方法獲得的rhsa不能直接用于臨床醫(yī)療，你推測(cè)的原因是_。52020江蘇揚(yáng)州高三階段性檢測(cè)基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來(lái)的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請(qǐng)結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問(wèn)題：注：neor 是新霉素抗性基因；tk 基因的表達(dá)可以使無(wú)毒的丙氧鳥(niǎo)苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。(1)將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的 dna 片段都重組到_上，構(gòu)建打靶載體(基因表達(dá)載體)。(2)打靶載體測(cè)序驗(yàn)證正確后，利用_酶，將之線性化，以提高重組率。通過(guò)_技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶

13、載體和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機(jī)會(huì)發(fā)生同源重組。(3)為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入_。最后還需要通過(guò)_技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞(去除靶基因)，將這樣的細(xì)胞通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中， 暫時(shí)不用的細(xì)胞進(jìn)行_保存。(4)將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、_的母鼠體內(nèi)，一段時(shí)間后對(duì)受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長(zhǎng)大后，體內(nèi)同時(shí)存在被“修飾”過(guò)的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的_(填“體細(xì)胞”或“生殖細(xì)胞”)恰巧被“修飾”過(guò)了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過(guò)的小鼠。62020山東青島3校高三聯(lián)考核

14、基因p53是細(xì)胞的“基因組衛(wèi)士”。當(dāng)人體細(xì)胞dna受損時(shí)，p53基因被激活，通過(guò)下圖所示相關(guān)途徑最終修復(fù)或清除受損dna，從而保持細(xì)胞基因組的完整性。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)若dna損傷為dna雙鏈斷裂，則被破壞的化學(xué)鍵是_，修復(fù)該斷裂dna需要的酶是_。(2)圖中過(guò)程發(fā)生的場(chǎng)所是_，完成過(guò)程需要的原料是_。(3)p53基因控制合成的p53蛋白通過(guò)過(guò)程合成lncrna，進(jìn)而影響過(guò)程，這一調(diào)節(jié)機(jī)制屬于_，其意義是_。(4)當(dāng)dna分子受損時(shí)，p53蛋白既可啟動(dòng)修復(fù)酶基因的表達(dá)，也能啟動(dòng)p21基因的表達(dá)。啟動(dòng)p21基因表達(dá)的意義是_。整合訓(xùn)練(十五)全員必做題1解析：(1)啟動(dòng)子位于基因的首段，它是

15、rna聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。(2)若鐵結(jié)合蛋白基因來(lái)自菜豆，獲取該目的基因需要用到的工具酶是限制酶，限制酶能識(shí)別雙鏈dna分子的某種特定的脫氧核苷酸序列并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。(3)圖中將目的基因(鐵結(jié)合蛋白基因)導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；為確定轉(zhuǎn)基因花生是否培育成功，首先應(yīng)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因花生的dna上是否插入目的基因；其次，利用分子雜交法檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mrna；最后，利用抗原抗體雜交法檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。(4)圖中用到的植物細(xì)胞工程技術(shù)是植物組織培養(yǎng)；培養(yǎng)基1中經(jīng)過(guò)脫分化得到愈傷組織，培養(yǎng)基2中篩選的方法是在培養(yǎng)

16、基中加入一定量的潮霉素，培養(yǎng)基3的作用是誘導(dǎo)愈傷組織再分化。答案：(1)rna聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄(2)能識(shí)別雙鏈dna分子的某種特定的脫氧核苷酸序列并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)基因花生的dna上是否插入目的基因分子雜交法(4)植物組織培養(yǎng)潮霉素誘導(dǎo)愈傷組織再分化2解析：(1)由于微衛(wèi)星dna是真核生物基因組中的簡(jiǎn)單重復(fù)序列，而且在個(gè)體間表現(xiàn)出一定的遺傳性和差異性，因此可以用標(biāo)記的微衛(wèi)星dna(重復(fù)序列)為探針，與基因組文庫(kù)進(jìn)行雜交篩選，然后再經(jīng)多個(gè)步驟獲取微衛(wèi)星dna。(2)pcr反應(yīng)體系中含緩沖液、模板dna、dntp(包含

17、datp、dctp、dgtp、dttp)、引物及耐熱的dna聚合酶。其中緩沖液模擬的是細(xì)胞中dna復(fù)制的環(huán)境，dntp是合成dna的原料、并能提供能量，引物為子鏈的合成提供起始點(diǎn)，dna聚合酶催化dna的復(fù)制過(guò)程； pcr技術(shù)擴(kuò)增目的基因的首要條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物，引物能夠與模板dna鏈進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，而后在dna聚合酶的作用下，單個(gè)的脫氧核苷酸連接到引物的3端，所以引物應(yīng)選用下圖中的和(填圖中標(biāo)號(hào))。pcr的步驟包括dna解鏈(高溫變性)引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈(低溫復(fù)性)互補(bǔ)鏈的合成(中溫延伸)，其產(chǎn)物大約以2n(指數(shù))形式擴(kuò)增。(3)由于“微衛(wèi)星dn

18、a在個(gè)體間表現(xiàn)出一定的遺傳性和差異性”因此應(yīng)用這種標(biāo)記可進(jìn)行的研究有：由于微衛(wèi)星dna在個(gè)體間表現(xiàn)出一定的遺傳性和差異性，因此可以用于人類親子鑒定 ， 正確；可利用微衛(wèi)星dna的特性進(jìn)行某地大熊貓種群數(shù)量的調(diào)查，正確；誘導(dǎo)基因突變的因素有物理因素、化學(xué)因素和生物因素，與微衛(wèi)星dna的特性聯(lián)系不起來(lái)，錯(cuò)誤；冠狀病毒遺傳物質(zhì)是rna，其測(cè)序過(guò)程與微衛(wèi)星dna無(wú)關(guān)，錯(cuò)誤；即正確。故選a。答案：(1)微衛(wèi)星dna(重復(fù)序列)(2)合成dna的原料、提供能量有一段已知目的基因的核苷酸序列和dna解鏈引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈互補(bǔ)鏈的合成(變性、復(fù)性/退火、延伸)約為2n(指數(shù))(3)a3解析：(1)質(zhì)粒通過(guò)bam

19、h切割后，0.5kb的片段被切割下來(lái)，由于原質(zhì)粒長(zhǎng)度為3.8 kb，所以剩下的長(zhǎng)度為3.3 kb，而此片段含ecor切割位點(diǎn)；質(zhì)粒與目的基因通過(guò)限制酶切割后，需要加入dna連接酶，以構(gòu)成重組質(zhì)粒；質(zhì)粒上bamh切割位點(diǎn)與目的基因某一端的bgl切割位點(diǎn)都能形成gatc的末端，因而能夠結(jié)合在一起。(2)切割后的質(zhì)粒為3.3 kb，重組質(zhì)粒長(zhǎng)度為4.65 kb，則目的基因長(zhǎng)度為4.653.31.35 kb；用bamh 和 ecor聯(lián)合酶切其中一種，只能獲得1.5 kb和3.15 kb兩種dna片段，說(shuō)明質(zhì)粒右側(cè)的bamh和 ecor 之間的長(zhǎng)度為1.5，用bamh和ecor聯(lián)合酶切同等長(zhǎng)度的另一種重

20、組質(zhì)粒，則切割的是bamh左側(cè)的位點(diǎn)，可獲得1.51.352.85 kb和4.652.851.8 kb兩種dna片段。(3)原始質(zhì)粒的lacz基因完整，表達(dá)后使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，而重組質(zhì)粒的lacz基因中插入了目的基因，無(wú)法正常表達(dá)，所以菌落為白色，所以白色的大腸桿菌才有可能會(huì)產(chǎn)生珠蛋白。答案：(1)3.3dna連接bamh和bgl 切割能夠產(chǎn)生相同的黏性末端(2)1.351.8和2.85(3)白4解析：(1)干擾素的基因在t淋巴細(xì)胞中選擇性表達(dá)，因此需從t淋巴細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中獲得mrna，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得的cdna不包括正常干擾素基因的啟動(dòng)子、終止子和內(nèi)含子，擴(kuò)增干擾素基因的前提是要有一段已知目的基因

21、的核苷酸序列，以便合成引物。(2)干擾素為糖蛋白，酵母菌為真核生物，能對(duì)產(chǎn)生的干擾素進(jìn)行加工，產(chǎn)生有活性的產(chǎn)物，大腸桿菌為原核生物，細(xì)胞中沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器，不能產(chǎn)生有活性的干擾素，因此基因工程中通常選用酵母菌作為受體細(xì)胞。(3)酚類化合物能吸引農(nóng)桿菌移向水稻細(xì)胞，利于農(nóng)桿菌的侵染，因此添加酚類化合物后的轉(zhuǎn)化效果更好。應(yīng)將干擾素基因插入tdna片段內(nèi)，ti質(zhì)粒上tdna的作用是可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的dna上。鑒定干擾素基因表達(dá)需采用抗原抗體雜交的方法。答案：(1)t淋巴啟動(dòng)子、終止子和內(nèi)含子要有一段已知目的基因的核苷酸序列(2)干擾素為糖蛋白，酵母菌為真核生物，能對(duì)產(chǎn)生的干

22、擾素進(jìn)行加工，產(chǎn)生有活性的產(chǎn)物，大腸桿菌為原核生物，細(xì)胞中沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器，不能產(chǎn)生有活性的干擾素(3)酚類化合物能吸引農(nóng)桿菌移向水稻細(xì)胞，利于農(nóng)桿菌的侵染內(nèi)可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的dna上抗原抗體雜交重點(diǎn)選做題1解析：(1)在構(gòu)建重組ti質(zhì)粒時(shí)，將hpt與抗蟲(chóng)基因排列在ti質(zhì)粒的同一段tdna上，以便同時(shí)導(dǎo)入受體細(xì)胞并進(jìn)行篩選。(2)將秈稻的幼胚接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程，培養(yǎng)出愈傷組織，然后用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將hpt與抗蟲(chóng)基因整合到愈傷組織細(xì)胞的染色體dna上，再將該愈傷組織轉(zhuǎn)接到含有潮霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，獲得的轉(zhuǎn)基因愈傷組織再轉(zhuǎn)接到含有赤霉素的分化培養(yǎng)基培養(yǎng)

23、出幼苗，移栽后繼續(xù)培養(yǎng)成植株。(3)以上過(guò)程獲得的導(dǎo)入hpt與抗蟲(chóng)基因的植株，相當(dāng)于兩對(duì)基因的雜合子，對(duì)其進(jìn)行連續(xù)自交，后代會(huì)出現(xiàn)不帶hpt的抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因秈稻，再通過(guò)dna分子雜交技術(shù)和抗蟲(chóng)接種實(shí)驗(yàn)將其篩選出來(lái)。(4)與種植攜帶hpt的抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因秈稻相比，種植上述不帶hpt的抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因秈稻可以避免基因污染。答案：(1)同一段 (2) 脫分化誘導(dǎo)潮霉素赤霉素 (3) dna分子雜交抗蟲(chóng)接種實(shí)驗(yàn)(4)不產(chǎn)生基因污染2解析：(1)利用rna得到相應(yīng)dna的方法為逆轉(zhuǎn)錄，起作用的酶為逆轉(zhuǎn)錄酶，在體外將dna擴(kuò)增的技術(shù)是pcr(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))。(2)病毒dna一般進(jìn)入細(xì)胞核，整合到宿主細(xì)胞dna上，與宿

24、主細(xì)胞的基因共同轉(zhuǎn)錄、翻譯，若是應(yīng)用mrna，則不會(huì)有遺傳信息整合到宿主細(xì)胞dna上的風(fēng)險(xiǎn)。在進(jìn)行翻譯后，mrna被細(xì)胞中的rna酶催化水解，較dna疫苗更加安全。(3)制備單克隆抗體的簡(jiǎn)單步驟：取已免疫小鼠的b細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞，誘導(dǎo)融合后轉(zhuǎn)入選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選。對(duì)所得的細(xì)胞再利用s蛋白進(jìn)行抗體檢測(cè)，選擇陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，分離提純相應(yīng)抗體。(4)無(wú)論是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將重組基因?qū)氲绞芫阎羞€是通過(guò)轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞核移植技術(shù)生產(chǎn)克隆動(dòng)物，都需要在動(dòng)物體外獲得轉(zhuǎn)基因胚胎，然后移植進(jìn)入雌性動(dòng)物子宮發(fā)育。所以二者都要借助的技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng)(動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng))和胚胎移植。答案：(1)逆轉(zhuǎn)錄pcr(2)

25、整合到宿主細(xì)胞染色體基因組中rna酶(3)取已免疫小鼠的b細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞，誘導(dǎo)融合后轉(zhuǎn)入選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選。對(duì)所得的細(xì)胞再利用s蛋白進(jìn)行抗體檢測(cè)，選擇陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，分離提純相應(yīng)抗體(4)早期胚胎培養(yǎng)(動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng))胚胎移植3解析：(1)單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。單克隆抗體制備過(guò)程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合 。(2)將b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合時(shí)，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外(只考慮兩兩融合)，可能還有融合的具有同種核的細(xì)胞(b淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞)，出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是細(xì)胞融合是隨機(jī)的，

26、且融合率達(dá)不到100%，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)，常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激 等。(3)兩種制備單克隆抗體的新思路： 通過(guò)基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prg并讓其表達(dá)；將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無(wú)限增殖細(xì)胞中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。答案：(1)特異性強(qiáng)、靈敏度高動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合(2)骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%聚乙二醇、滅活病毒、電刺激(3)通過(guò)基因工程向漿細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入prg，并讓其表達(dá)將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無(wú)限增殖細(xì)胞中進(jìn)行培養(yǎng)4解析：(1)獲取hsa基因，提取人血細(xì)胞中的mrna，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下利用反轉(zhuǎn)錄法合成cdna

27、，再利用 pcr技術(shù)進(jìn)行快速擴(kuò)增，pcr過(guò)程中，需要一段已知目的基因的核苷酸序列合成引物，溫度降低到55的目的是兩種引物通過(guò)互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈dna結(jié)合。(2)由于啟動(dòng)子具有物種或組織特異性，構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rhsa的載體時(shí)，需要選擇水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子。(3)酚類物質(zhì)會(huì)吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過(guò)程中，故需添加酚類物質(zhì)。(4)大腸桿菌受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)有繁殖快；單細(xì)胞。但相比于水稻胚乳細(xì)胞，大腸桿菌沒(méi)有生物膜系統(tǒng)(或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體)，不能對(duì)rhsa進(jìn)行深加工。(5)利用上述方法獲得的rhsa可能沒(méi)有活性，不能直接用于臨床醫(yī)療。答案：(1)反轉(zhuǎn)錄引物兩種引物通過(guò)互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈dna結(jié)合(2)啟動(dòng)子具有(物種及組織)特異性(3)酚類(4)繁殖快；單細(xì)胞；遺傳物質(zhì)少大腸桿菌沒(méi)有生物膜系統(tǒng)(或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體)，不能對(duì)rhsa進(jìn)行深加工(5)rhsa可能沒(méi)有生物活性或功能性較差或rhsa可能有安全隱患5解析：(1)分析題圖可知，將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的dna片段都重組到載體(或質(zhì)粒)上，構(gòu)建打靶載體(