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1、專(zhuān)題1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),通過(guò)_,賦予生物以_,創(chuàng)造出_?;蚬こ淌窃赺上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,又叫做_。(一)基因工程的基本工具1.“分子手術(shù)刀”_(1)來(lái)源:主要從_中分離純化出來(lái)的,常見(jiàn)的有_ 和_。(2)功能:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的_ _ ,并且使每一條鏈中_ 部位的兩個(gè)核苷酸之間的_ _斷開(kāi),因此具有_ 性。(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式: _ 和 _ _2.“分子縫合針”_ (1)DNA連接酶的種類(lèi)( 和 )的比較:相同點(diǎn):都縫合_ _鍵。區(qū)別:EcoliDNA連接酶來(lái)源于_ _,只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的_
2、 之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái);而T4DNA連接酶來(lái)源于_ _能縫合_ ,但連接平末端的之間的效率較_ 。(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將_ _ _加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_ _的末端,形成磷酸二酯鍵。3.“分子運(yùn)輸車(chē)”_ _(1)載體具備的條件: _ _ _ (2)最常用的載體是_ _,其本質(zhì)是_ (它并非只存在于原核細(xì)胞,某些真核細(xì)胞中也存在) (3)其它載體:_ _(二)基因工程的基本操作程序第一步:_ _1.目的基因是指: 。2.獲取目的基因的方法有_ _、_ _ 、_ 。3.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)原理:_ _。(2)條件:_
3、、_ _ 、_ 、_ _ 。(3)過(guò)程:第一步:加熱至9095使_ _; 第二步:冷卻到5560,_ _;第三步:加熱至7075,_ 酶從引物起開(kāi)始互補(bǔ)鏈的合成(4)結(jié)果:目的基因以_ 形式擴(kuò)增,即_ _。第二步:_ _(基因工程的核心)1.目的:使目的基因在受體細(xì)胞中_ _,2.組成:_ _ _ _ _(1)啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的 ,位于基因的_ _,是_ 酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因 ,最終獲得所需的 。(2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的 ,位于基因的 。(3)標(biāo)記基因的作用: ,常用的標(biāo)記基因是_ 。 第三步:_ _1.轉(zhuǎn)化的概念: 進(jìn)入 內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)_ 和_ _的過(guò)程。2
4、.常用的轉(zhuǎn)化方法:將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:常用的方法是 _ ,其次還有_ _和 _ _等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是 。此方法的受體細(xì)胞是 _ _。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:最常用的原核細(xì)胞是 _,其轉(zhuǎn)化方法是先用 _ _處理細(xì)胞,使其成為 _ ,再將 _ _溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。第四步:_ _1.首先要檢測(cè) 上是否插入了 ,方法是采用_ _2.其次還要檢測(cè) _,方法是采用 作探針與 雜交。3.最后檢測(cè) ,方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取 ,用相應(yīng)的 _ _進(jìn)行_。4.有時(shí)還需進(jìn)行 水平的鑒定。如 。(三)基因工程的應(yīng)用1、基因治療的概念:_ 。(四)蛋白質(zhì)工程1、概念:蛋白質(zhì)工程是指以 作為基礎(chǔ),通過(guò)_ _,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行 ,或制造一種
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