人教版選修1土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)第1課時教案2

1、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)一、教學目標課題目標 （ 一）知識與技能 利用選擇培養(yǎng)基分離細菌 , 運用相關(guān) 技術(shù)解決生產(chǎn)生活中有關(guān)微生物的計數(shù) （ 二） 過程與方法 分析研究 思路的形成過程 , 找出共性和差異性 （ 三） 情感、態(tài)度與價值觀 形成 無菌不在的概念 , 養(yǎng)成講究衛(wèi)生的習慣二、學情分析 學生已經(jīng)學習了微生物實驗室培養(yǎng)的知識基礎(chǔ)上再來學習這節(jié) 課, 有一定的學習基礎(chǔ)。三、重點難點課題重點 對土樣的選取和選擇培養(yǎng)基的配制 課題難點 對 分解尿素的細菌的計數(shù)四、教學過程4.1 第一課時4.1.1 教學活動活動 1【講授】課題 2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)1. 基礎(chǔ)知識1.1

2、 尿素是一種重要的氮肥 ,農(nóng)作物不能 （能,不能）直接吸收利 用,而是首先通過土壤中的細菌將尿素分解為 氨和 CO2 ,這是因為細 菌能合成 脲酶 。1.2 科學家能從熱泉中把耐熱細菌篩選出來是因為 熱泉的高溫 條件淘汰了絕大多數(shù)微生物 , 這樣也適用于實驗室中微生物的篩選 ,原理是 人為提供有利于目的菌株生長的條件 （ 包括營養(yǎng)、溫度、 PH等）, 同時抑制或阻止其他微生物生長 。 點評: 生物適應(yīng)一定環(huán)境 , 環(huán)境對生物具有選擇作用。 所以通過配制選擇培養(yǎng)基、 控制培養(yǎng)條件 等選擇目的微生物。 思考 1在該培養(yǎng)基配方中 , 為微生物的生長 提供碳源的是 葡萄糖 , 提供氮源的的是 尿素 ,

3、 瓊脂的作用是 凝固 劑 。思考 2該培養(yǎng)基對微生物 具有 （ 具有, 不具有）選擇作用。 如果具有 , 其選擇機制是 只有能夠以尿素作為氮源的微生物才能在 該培養(yǎng)基上生長 。1.3 在統(tǒng)計菌落數(shù)目時 , 常用來統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)目的方法是 稀 釋涂布平板法 。除此之外 , 顯微鏡直接計數(shù) 也是測定微生物數(shù)量的 常用方法?！狙a充】顯微鏡直接計數(shù)是測定微生物的方法。公式：觀察到的紅細胞平均數(shù)：觀察到的細菌平均數(shù) 二紅細胞含 量：細菌含量1.4 采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時 , 培養(yǎng)基表面生長的一 個菌落, 來源于 樣品稀釋液中一個活菌 。通過統(tǒng)計 平板上的菌落 數(shù) , 就能推測出樣品中大約含有

4、多少活菌。為了保證結(jié)果準確 ,一般 選擇菌落數(shù)在 30300 的平板進行計數(shù)。 思考 3從平板上的菌 落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)的計算方法是（平均菌落數(shù)+涂布的稀釋液體積）X稀釋倍數(shù)。思考4利用稀釋涂布平板法成功 統(tǒng)計菌落數(shù)目的關(guān)鍵是 恰當?shù)南♂尪?。 思考 5第 二 位同學 的結(jié)果接近真實值。 你認為這兩位同學的實驗需要改進的操作是第一 位同學需設(shè)置重復(fù)實驗組 ; 第二位同學統(tǒng)計的三個菌落數(shù)相差太大 說明操作有誤 , 需重新實驗。1.5 統(tǒng)計的菌落數(shù)比活菌的實際數(shù)目 低 。這是因為當兩個或多 個細胞在一起時 ,平板上觀察到的只是 一個 菌落。因此, 統(tǒng)計結(jié)果一 般用 菌落數(shù) 來表示。1.6

5、 設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果 的影響, 提高實驗結(jié)果的可信度。1.7 對照實驗是指除了 被測試 的條件外, 其他條件都 相同 的 實驗。滿足該條件的稱為 對照組, 未滿足該條件的稱為 實驗 組。思考6請設(shè)計本實驗的對照實驗組：方案1:其他同學用A同學的 土樣進行實驗。 方案 2:A 同學以不接種的培養(yǎng)基作為空白對照。 2. 實驗設(shè)計2.1 實驗設(shè)計的內(nèi)容包括實驗方案、 材料用具、實施步驟和時間 安排等。2.2 根據(jù)圖示 2-7 填寫以下實驗流程 :2.3 土壤微生物主要分布在距地表 38cm的近中性土壤中，約 70%80%為細菌。2.4 分離不同的微生物采用不同的稀釋

6、度 , 其原因是不同微生物 在土壤中含量不同 ,其目的是保證獲得菌落數(shù)在 30300之間、適于計 數(shù)的平板。細菌稀釋度為 1 04、1 05、1 06 ,放線菌稀釋度為 103、104、 105, 真菌稀釋度為 102、 103、 104。2.5培養(yǎng)不同微生物往往需要不同培養(yǎng)溫度。細菌一般在3037C 培養(yǎng)12d,放線菌一般在2528C培養(yǎng)57d,霉菌一般在2528C的溫 度下培養(yǎng) 34d。2.6 在菌落計數(shù)時 , 每隔 24h 統(tǒng)計一次菌落數(shù)目。選取菌落數(shù)目 穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果 ,以防止因培養(yǎng)時間不足而導致遺漏菌落的數(shù) 目。 點評:菌種中有些菌體增殖快 ,有些菌體增值慢 , 所以培養(yǎng)時間要

7、 充足, 使得每個菌體都能形成肉眼可觀察到的菌落。2.7 菌落的特征包括 形狀、大小、隆起程度、顏色 等方面。 思 考 8土壤微生物種類最多、數(shù)量最大的原因是什么 ?土壤中營養(yǎng)物 質(zhì)含量豐富 , 環(huán)境條件適宜等。2.9 實驗過程 1) 取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用前 都要滅菌。 2) 應(yīng)在火焰旁稱取土壤 10 g 。將稱好的土樣倒入盛有 90mL無菌水的錐形瓶中，塞好棉塞。3)在稀釋土壤溶液的過程中，每 一步都要在火焰旁進行。 4) 實驗時要對培養(yǎng)皿作好標記。注明培養(yǎng) 基類型、培養(yǎng)時間、稀釋度、培養(yǎng)物等。 5) 為了提高效率 , 在操作時 更加有條不紊 , 應(yīng)當事先規(guī)劃時間。 思考 9在研究未知微生物時 務(wù)必規(guī)范操作 , 以防被致病微生物感染 , 實驗后一定要洗手。 3. 結(jié)果 分析與評價3.1 對分離的菌種作進一步的鑒定 , 還需要借助 生物化學 的方 法。3.2 在細菌分解尿素的化學反應(yīng)中 , 細菌合成的 脲酶 將尿素分 解成了 氨 。氨會使培養(yǎng)基的堿性 增強 ,PH 升高 。因此, 我們可以 通過檢測培養(yǎng)基 pH 變化來判斷該化學反應(yīng)是否發(fā)生。3.3 在以 尿素 為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入 酚紅 指示劑。培養(yǎng) 某種細菌后，如果PH升高,指示劑將變 紅，說明該細菌