人教版選修一課題1《微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)》word學(xué)案

1、專題2課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)學(xué)案【學(xué)習(xí)目標(biāo)】知識目標(biāo)：1.舉例說明有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識2.概述無菌操作技術(shù)包括的主要內(nèi)容能力目標(biāo)：掌握純化大腸桿菌的基本操作【學(xué)習(xí)過程】第一部分：自主預(yù)習(xí)一、基礎(chǔ)知識（一）培養(yǎng)基1.概念：人們按照微生物對的不冋需求，配制出供其的營養(yǎng)基質(zhì)叫培養(yǎng)X基-Qm培養(yǎng)基的種類包括培養(yǎng)基和培養(yǎng)基等Q2.培養(yǎng)基的化學(xué)成分一般都含有、四類營養(yǎng)成分。3. 在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對、一以及等的要求。例如：培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加；培養(yǎng)霉菌時需要將培養(yǎng)基的 PH調(diào)至;培養(yǎng)細(xì)菌時需要將培養(yǎng)基的PH調(diào)至;培養(yǎng)厭氧微生物時需要提供無氧的條件。

2、【補(bǔ)充】碳源：如 CO2、糖類、脂肪酸等有機(jī)物，構(gòu)成微生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和分泌物，并提供能量。氮源：如N2、氨鹽、硝酸鹽、牛肉膏、蛋白胨等，主要用來合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝物等。含有 C、H、0、N的化合物既可以作為碳源，又可以作為氮源，如氨基酸 等。蔗糖是提供碳源的，也就是提供能源的，瓊脂是凝固劑（二）無菌技術(shù)1. 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 。避免雜菌污染的方法主要包括以下四個內(nèi)容：對實(shí)驗(yàn)操作的 、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和 。 將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行 。 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 附近進(jìn)行。 實(shí)驗(yàn)操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與相接觸。2. 消

3、毒和滅菌（1） 消毒是指使用 僅殺死物體表面或 的部分微生物（不包括和）。常用的消毒方法有 、。此外，人們也常使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒， 如用、等。此外，實(shí)驗(yàn)室里還用 或進(jìn)行消毒。（2） 滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體 的微生物，包括芽孢和孢子。常用的滅菌方法有、，二、實(shí)驗(yàn)操作本實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基進(jìn)行大腸桿菌的純化培養(yǎng)，可分成和兩個階段進(jìn)行。1. 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基tttt倒平板2. 純化大腸桿菌微生物接種的方法中最常用的是 和。（1）平板劃線法是指接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面 的操作，將聚集的菌種至y培養(yǎng)基的表面。平板劃線的操作步驟如下:(2)稀釋涂布平板法是指將菌液進(jìn)行一系列的 ，然后將不

4、同 的菌液分別涂布在瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 ,進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度 的菌液時，聚集在一起的微生物將被分散成 ,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的 。三、結(jié)果分析與評價1. 如果接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致，說明接種符合要求。2. 若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中 未達(dá)到要求。3. 的作為對照的培養(yǎng)基，在培養(yǎng)過程中出現(xiàn)了菌落，則說明培養(yǎng)基不徹底，實(shí)驗(yàn)失敗。四、菌種的保存1. 對于頻繁使用的菌種，我們可以采用 法；2.對于需要長期保存的菌種，可以采用法。第二部分：課中探究探究一：消毒與滅菌的比較條件結(jié)果常用方法對象共冋點(diǎn)消毒滅閑探究二：有關(guān)“倒平板”操作1.培養(yǎng)基滅菌后

5、，需要冷卻到50C左右，才能用來倒平板。你用什么方法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？2. 為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？3. 平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4. 在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用 來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？探究三：有關(guān)“平板劃線法”操作1. 為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？2. 在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?3. 在作第二次以及其后的劃線操作是為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?探究四：有關(guān)“稀釋涂布平板法”操作1. 系列稀釋操作中應(yīng)注意的事項(xiàng)有哪些?2.

6、 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行，結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想 一想，涂布平板操作的第 2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作?第三部分：課后練習(xí)1.下列措施中不屬于消毒的是（）A. 酒精擦拭雙手B.向水中通入少量Cl2 C.皮膚受傷處涂紫藥水D. 灼燒接種環(huán)2. 有關(guān)平板劃線操作的敘述，正確的是（）A. 使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程中不再滅菌B. 打開含菌種的試管需通過火焰滅菌，取出菌種后需馬上塞上棉塞C. 把皿蓋打開，將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可D. 最后將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3. 下列有關(guān)平板劃線接種法的操作錯誤的是（）A.將接種環(huán)放在火焰上燃燒

7、B.將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液C.蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行D.接種環(huán)劃線要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連4. 關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述錯誤的是（）A.操作順序?yàn)橛?jì)算、 稱量、溶化、倒平板、滅菌B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C.等培養(yǎng)基冷卻至 50C左右時進(jìn)行倒平板D.將平板冷卻凝固5-10分鐘后將平板 倒過來放置5. 細(xì)菌培養(yǎng)過程分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌（）A.接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B.咼壓鍋、手、接種環(huán) C.培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D.接種環(huán)、手、 高壓鍋（ ）B.然后將不同稀釋度的菌液分別涂布

8、在瓊脂固體培6. 有關(guān)稀釋涂布平板法的敘述錯誤的是A.首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋 養(yǎng)基的表面C.適宜條件下培養(yǎng)D.形成單個的菌落7. 如右圖是微生物平板劃線示意圖。下列操作方法正確的是（）A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B .劃線操作須在火焰上進(jìn)行C.在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D .在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌8. 為了保持菌種的純凈需要進(jìn)行菌種的保藏，下列有關(guān)敘述不正確的是()A.對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法B.臨時保藏的菌種一般接種到試管的斜面培養(yǎng)基上C臨時保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異D.對于需要長期保存的菌種，可以采用低溫-40C保藏的方

9、法9. ( 2009 寧夏理綜，40)(1 )在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮 、和滲透壓等條件。(2) 在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行 處理(消毒、滅菌)，其中對培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌常用的方法是 ;操作者的雙手需要進(jìn)行清洗。(3) 若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的 。(4) 通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的。(5 )培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢 測方法是(6 )若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。10. (2010年重慶理綜)炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通 過實(shí)驗(yàn)確診。(1) 細(xì)菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。(2) 細(xì)菌鑒定：實(shí)驗(yàn)流程如下圖所示。35X? *Ml入 世箱 竝水審剖3歩9. &力時 對配制的液體培養(yǎng)基等需采取 方法滅菌；實(shí)驗(yàn)所用液體培養(yǎng)基的碳源為(填“無機(jī)碳”或“有機(jī)碳”)。 挑選可疑菌落制片后，用 觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。 接種可疑菌后，35 C培養(yǎng)