（完整版）剖析大蒜素可以抑制胃癌細胞的生長論文

1、關注我 實時更新 最新資料剖析大蒜素可以抑制胃癌細胞 的生長論文【摘要】目 的研究大蒜素對胃癌BGC823細胞增殖 的影響。方法通過細胞培養(yǎng)技術、瑞氏染色、MTT實驗方法，觀察大蒜素對胃癌細胞生長 的影響。結果BGC823細胞在大蒜素 的作用48h后，出現(xiàn)體積變小、核固縮等形態(tài)學改變。大蒜素對胃癌細胞 的生長曲線有明顯 的抑制作用，其抑制作用與大蒜素 的濃度和時間呈正相關。結論大蒜素對體外培養(yǎng) 的BGC823細胞具有明顯 的增殖抑制作用。【關鍵詞】大蒜素;胃癌;BGC823細胞大蒜在我國民間藥用已有三千多年 的歷史，在本草綱目和驗方新編中就有關于大蒜藥用價值 的記載1。大蒜素(又名大蒜注射液)

2、是對大蒜進行重整獲得 的揮發(fā)油，有效成分為大蒜辣素。大蒜辣素不僅具有抗菌消炎 的作用，而且可以抑制多種癌細胞 的生長并誘導其凋亡。胃癌 的發(fā)生和發(fā)展與細胞凋亡關系密切，誘導細胞凋亡已成為治療胃癌 的新手段。大蒜素作為一種可誘導細胞凋亡 的天然藥物，有望為胃癌治療開辟一條新途徑2。本研究將對大蒜素抑制胃癌細胞 的生長作用加以探討論文代寫。1材料與方法1.1材料大蒜素注射液(三硫二丙烯)購自安徽華源醫(yī) 藥有限公司，BGC823細胞為吉林醫(yī) 藥學院檢驗系細胞培養(yǎng)室凍存細胞株。1.2細胞生長狀態(tài)觀察常規(guī)培養(yǎng)胃癌細胞至對數(shù)生長期3，將對數(shù)生長期細胞均勻 的分成7組(每組設有1個對照孔和5個實驗復孔)，以

3、每孔106個細胞接種于96孔細胞培養(yǎng)板中，分別向7組中加入大蒜素使終濃度分別為5g/mL、10g/mL、15g/mL、20g/mL、25g/mL、30g/mL、40g/mL，其中對照孔中只加入相同體積含10%小牛血清 的1640完全培養(yǎng)液，分別于培養(yǎng)24h、48h、72h和96h時在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)并照相。1.3瑞氏染色觀察取對數(shù)生長期細胞,同樣將細胞均勻分成7組，分別接種于滅菌處理后放有蓋玻片 的細胞培養(yǎng)皿中,加入大蒜素使終濃度分別為5g/mL、10g/mL、15g/mL、20g/mL、25g/mL、30g/mL、40g/mL，培養(yǎng)24h、48h、72h和96h。終止培養(yǎng)后取出蓋玻片

4、，自然干燥，滴加瑞氏染液染色1min，再滴加等量 的PBS(磷酸鹽緩沖液)，輕輕晃動玻片，混勻，靜置5min;水洗、吸干、鏡檢觀察并照相。1.4MTT法檢測取對數(shù)生長期細胞，以106個/mL細胞接種到96孔板，每孔體積200L。按照藥物作用濃度設置7個實驗組，使大蒜素終濃度為5g/mL、10g/mL、15g/mL、20g/mL、25g/mL、30g/mL、40g/mL。每個濃度組分別設置5個實驗復孔，并設置1個調零孔。分別于培養(yǎng)24h、48h、72h加20LMTT溶液,繼續(xù)培養(yǎng)4h后加二甲基亞砜，微量振蕩器振蕩10min，在490nm酶聯(lián)免疫檢測儀檢測,記錄OD值，并求出生長抑制率(IR),I

5、R(%)=(1-用藥組平均OD值/對照組平均OD值)100%,以時間為橫軸，IR為縱軸繪制細胞生長 的抑制曲線,并計算出藥物 的半數(shù)抑制濃度(IC50)4。2結果2.1大蒜素對BGC823細胞生長狀態(tài) 的影響倒置顯微鏡觀察經不同濃度大蒜素作用后48h細胞 的形態(tài)，與對照組對比，細胞間隙變大，細胞漿中出現(xiàn)顆粒樣變化，細胞形態(tài)改變，體積變小、變圓，有 的呈懸浮狀態(tài)，見圖1。對照組15mg/L大蒜素組圖1BGC823細胞生長狀態(tài)(40)2.2瑞氏染色瑞氏染色法染色后，經大蒜素作用48h 的細胞出現(xiàn)退行性變，細胞體積變小、變圓，胞質濃染、結構模糊、邊緣不清晰、核固縮、深染等特征,見圖2。對照組15mg

6、/L大蒜素組圖2BGC823細胞生長狀態(tài)(40)2.3MTT檢測MTT檢測結果顯示：大蒜素對胃癌細胞具有明顯 的抑制增殖作用，并且隨著藥物濃度 的增加和作用時間 的延長，抑制作用越強、抑制率越大，并求得藥物半數(shù)抑制濃度(IC50)為15mg/L。見圖3。圖3不同濃度大蒜素對BGC823細胞 的抑制作用3討論胃癌是常見 的消化道腫瘤，在我國發(fā)病率較高，臨床上主要采用外科切除、藥物化療和放射治療等方法治療胃癌，手術切除如不徹底,易復發(fā)，而藥物化療和放射治療手段除了殺傷腫瘤細胞以外，對宿主 的免疫系統(tǒng)也造成了傷害，且治療效果不甚理想。而大蒜作為日常生活中常見 的食物，不僅僅價格低廉，而且其主要成分大

7、蒜素，含有一些特殊 的具有生物活性 的物質，如含硫化合物(蒜氨酸、蒜油、蒜素、阿霍烯等)、微量元素(高含量 的鍺、硒、磷、鎂等)、超氧化物歧化酶(SOD)等，使大蒜具有廣泛 的藥效，尤其具有良好 的抗菌消炎和抗腫瘤 的作用5，先前已有資料證明大蒜素對肝、胃、結腸、宮頸、乳房等多種腫瘤均有抗癌活性,作用廣泛6。本實驗觀察到胃癌細胞經不同濃度 的大蒜素作用后，細胞形態(tài)發(fā)生明顯 的改變，與對照組 的細胞相比可見細胞體積明顯變小、變圓，胞漿中出現(xiàn)明顯顆粒樣和空泡樣改變，有 的甚至懸浮，說明不同濃度 的大蒜素對胃癌細胞都具有殺傷作用7。另外，通過細胞生長曲線 的繪制、MTT檢測，進一步證明了大蒜素對胃癌

8、細胞 的生長具有明顯 的抑制作用，并且隨著大蒜素濃度 的梯度增加和作用時間 的延長，其抑制作用也隨之增大。生長曲線是觀測細胞在一代生存期內增生過程 的重要指標，MTT比色實驗是一種檢測細胞存活和生長 的方法,通過這些實驗方法都能進一步證明不同濃度大蒜素對胃癌細胞增殖具有抑制作用，為進一步研究大蒜素抑制胃癌細胞生長機制奠定基礎。本實驗證明了大蒜素對胃癌細胞BGC823增殖具有抑制作用，隨著免疫組化技術、分子生物學等技術 的發(fā)展，對各種藥物 的藥理作用機制研究已經廣泛而深入，所以應進一步明確大蒜素中各種成分 的藥理作用，并且進一步探討大蒜素抑制胃癌細胞生長機制，從而開發(fā)出新 的抗癌藥物，對腫瘤 的

9、治療產生深刻 的影響?！緟⒖嘉墨I】1黃泰康.常用中藥成分與藥理手冊M.北京:中國醫(yī) 藥科技出版社,1994:905.2梁衛(wèi)江,張萬岱,馬業(yè)俊,等.大蒜油對胃癌細胞增殖 的抑制作用J.中國中西醫(yī) 結合消化雜志,2006,14(4)：252.3司徒鎮(zhèn)強,吳軍正.細胞培養(yǎng)M.北京:世界圖書出版公司,1996:175177,186187,298305.4晏莉，黃起壬.大蒜素藥理作用和作用機理 的探討J.實用臨床醫(yī) 學,2008,9(1):134135.5鄭國華,李會慶.大蒜油和白藜蘆醇聯(lián)合應用對胃癌細胞抑制作用及其機制J.福建中醫(yī) 學院學報,2006,16(6):3436.6SiuCW,LauCP,TseHF.Preventionofatrialfibrillationrecurrencebystatintherapyinpatientswithloneatrialfibrillationaftersuccessful