水質(zhì)微生物檢測基礎(chǔ)ppt課件

1、微生物基礎(chǔ)知識培訓(xùn),1,微生物的定義,微生物（microorganism, microbe）:存在于自然界中的一群體型細(xì)小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼看不見，必須借助于特殊儀器放大后才能觀察到的微小生物 按其結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生活習(xí)性可分為: 原核類:僅有原始核質(zhì)，無核仁或核膜，細(xì)胞器很不完善。如細(xì)菌、放線菌、支原體、立克次氏體、衣原體、螺旋體 真核類:細(xì)胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體，細(xì)胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌）、 原生動(dòng)物、藻類 非細(xì)胞類:體積微小，能通過除菌過濾器。如病毒和朊病毒等 按其致病性可分為: 病原性微生物 非病原性微生物,2,微生物的特點(diǎn),個(gè)體小,面積大：小于0.1mm。肉眼

2、不可見。 分布廣,種類多（10萬多種） ：自然界中到處都有，如水、空氣、土壤等, 土壤中的數(shù)量最多。 代謝強(qiáng)，轉(zhuǎn)化快：發(fā)酵乳糖的細(xì)菌在1小時(shí)內(nèi)可分解其自重100010000倍的乳糖；產(chǎn)朊假絲酵母合成蛋白質(zhì)的能力比食用公牛強(qiáng)10萬倍 生長旺，繁殖快：微生物有驚人的繁殖速度，大多數(shù)微生物幾十分鐘內(nèi)就可以繁殖一代 適應(yīng)性強(qiáng)，易變異（耐藥性產(chǎn)生的原因）,3,葡萄球菌,酵母菌（芽痕）,棒狀桿菌,大腸桿菌,弧狀菌,鏈球菌,4,菌落單位,菌落單位-CFU 由單個(gè)菌細(xì)胞或幾個(gè)同種菌細(xì)胞在培養(yǎng)基上長成肉眼可見的菌落，每個(gè)菌落就是1CFU,5,微生物的分布,土壤：是微生物生活的最適環(huán)境 水：僅次于土壤的微生物分布

3、、定居的第二場所 空氣：空氣中的微生物主要來源于帶有微生物菌體及孢子的灰塵，這類微生物大多數(shù)是腐生性的，還來源于人和動(dòng)物，它們大多數(shù)是通過呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，懸浮在大氣中。,6,微生物的類群和形態(tài)結(jié)構(gòu),一、細(xì)菌 細(xì)菌是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物，分布廣泛。 細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu) （1） 球菌 多數(shù)球菌直徑在1微米左右，外觀呈球形或近似球形。由于繁殖時(shí)分裂平面不同可形成不同的排列方式，分為雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等。 （2） 桿菌 形態(tài)多數(shù)呈直桿狀，也有的菌體稍彎，多數(shù)呈分散存在，也有的呈鏈狀排列，分為棒狀桿菌、鏈狀桿菌、球桿菌等。 （3

4、） 螺形菌 菌體彎曲，呈弧形或螺旋形。如幽門螺桿菌。 細(xì)菌雖小，仍具有一定的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)等各種細(xì)菌都有，是細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)。,7,球菌(coccus),腦膜炎奈瑟菌,8,桿菌(bacillus),不同桿菌的大小、長短、粗細(xì)很不一致。,9,細(xì)菌的繁殖,細(xì)菌生長速度很快，一般約20min分裂一次。若按此速度計(jì)算，細(xì)菌群體將龐大到難以想象的程度。但事實(shí)上由于細(xì)菌繁殖中營養(yǎng)物質(zhì)的逐漸消耗，有害代謝產(chǎn)物的逐漸積累，細(xì)菌不可能始終保持高速度的無限繁殖。經(jīng)過一段時(shí)間后，細(xì)菌繁殖速度逐漸減慢，死亡菌數(shù)增多，活菌增長率隨之下降并趨于停滯。,10,熱原與內(nèi)毒素,許多細(xì)菌、病毒和真菌（

5、如酵母菌）都能產(chǎn)生熱原。熱原是微量即可引起恒溫動(dòng)物體溫異常升高的物質(zhì)的總稱。主要物質(zhì)為細(xì)菌內(nèi)毒素、胞壁酰二肽及其他抗原抗體復(fù)合物、半抗體原物質(zhì)和某些藥物（類固醇）等。 1、細(xì)菌內(nèi)毒素一般指革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)成分，主要是脂多糖。 2、細(xì)菌內(nèi)毒素生物學(xué)活性可分為兩類：一是致病作用，一是保護(hù)性反應(yīng)。 3、其他理化特性耐熱性：120加熱4h，可破壞98%。180加熱2h或250加熱30min，才可徹底破壞。濾過性：其體積小，約在15nm之間，故能通過濾器進(jìn)入濾液中。具有水溶性及不揮發(fā)性。能被強(qiáng)酸、強(qiáng)堿和氧化劑破壞,11,消毒與滅菌,下列術(shù)語常用于表示物理或化學(xué)方法對微生物的殺滅程度 消毒：殺死物

6、體上病源微生物的方法,并不一定能殺死細(xì)菌的芽胞。消毒所用的試劑稱為消毒劑。 滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細(xì)菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。 抑菌：抑制體內(nèi)或體外細(xì)菌的生長繁殖。常用的抑菌劑為各種抗生素，可抑制細(xì)菌的繁殖。 防腐：防止或抑制體外細(xì)菌生長繁殖的方法，細(xì)菌一般不死亡。同一種化學(xué)藥品在高濃度時(shí)為消毒劑，低濃度時(shí)常為防腐劑。 無菌：不存在活的細(xì)菌。防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)，為無菌操作。,12,消毒與滅菌,輻射滅菌法 1、紫外線：波長200-300nm的紫外線具有殺 菌作用。穿透物質(zhì)的能力很差，一般要求紫外燈距離照射物不超過1.0米為宜

7、 2、電離輻射 高速電子、X射線、射線 3、微波 波長1mm1m,熱力滅菌法：使蛋白質(zhì)、酶及核酸永久性破環(huán)，細(xì)胞膜溶解，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的死亡。 1、干熱滅菌法采用灼燒或干熱空氣滅菌 ，使用方便，適用于玻璃器皿和瓷器等耐高溫的固體物的滅菌 。 2、濕熱滅菌法利用熱蒸汽殺死微生物。 高壓蒸汽滅菌：利用高溫高壓蒸汽進(jìn)行滅菌的方法 ，蒸汽的穿透力較熱空氣強(qiáng)可以殺死一切微生物，包括細(xì)菌的芽孢，真菌的孢子或休眠體等耐高溫的個(gè)體 。最可靠最適用最廣泛的滅菌方法。,13,水質(zhì)微生物 采樣,自來水：現(xiàn)將自來水龍頭用火焰燒灼3min，滅菌；再打開水龍頭防水5min（常用的水龍頭可以 防水23min）；采樣水

8、置于無菌錐形瓶中，采樣總量占錐形瓶的80%左右，以便搖勻。 水源水：選取可疑及有代表性的水域，一般距離水面1015cm采樣；河道水采樣時(shí)，將瓶口朝向、 水流方向，在指定位置打開瓶蓋。 采樣結(jié)束后，樣品冷藏運(yùn)輸，盡快檢測。,14,樣品處理、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備、實(shí)驗(yàn)步驟及報(bào)告詳見作業(yè)指導(dǎo)書,15,染色,16,革蘭氏染色法,革蘭染色法是丹麥內(nèi)科醫(yī)生 Christain Gram于1884年創(chuàng)立的一種細(xì)菌復(fù)染色方法，已有130多年的歷史，仍在廣泛使用。,17,通透性學(xué)說、等電學(xué)說、化學(xué)學(xué)說,18,鑒別細(xì)菌：把細(xì)菌分成G+和G-兩大類。 選擇抗菌藥物：例如G+球菌對青霉素敏感,G-桿菌耐藥。 了解細(xì)菌的致病機(jī)理：G+菌大多產(chǎn)生外毒素,G-菌產(chǎn)生內(nèi)毒素。 革蘭染色的步驟 涂片 干燥 固定 染色 紫碘酒紅，分分半半,意義,19,滅菌接種環(huán), 細(xì)菌合適, 細(xì)菌較多,接種環(huán)取鹽水3ul2滴,水滴間距小于2cm。,取菌苔少許（1mm小菌落半個(gè)）與鹽水混勻，涂成大于1cm2均勻涂膜。,涂畢環(huán)移至涂膜中