高中生物 專題1 基因工程 1.2 多聚酶鏈式反應擴增DNA片段習題 新人教版選修3(2021年最新整理)_第1頁
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1、2016-2017學年高中生物 專題1 基因工程 1.2 多聚酶鏈式反應擴增dna片段習題 新人教版選修32016-2017學年高中生物 專題1 基因工程 1.2 多聚酶鏈式反應擴增dna片段習題 新人教版選修3 編輯整理:尊敬的讀者朋友們:這里是精品文檔編輯中心,本文檔內容是由我和我的同事精心編輯整理后發(fā)布的,發(fā)布之前我們對文中內容進行仔細校對,但是難免會有疏漏的地方,但是任然希望(2016-2017學年高中生物 專題1 基因工程 1.2 多聚酶鏈式反應擴增dna片段習題 新人教版選修3)的內容能夠給您的工作和學習帶來便利。同時也真誠的希望收到您的建議和反饋,這將是我們進步的源泉,前進的動力

2、。本文可編輯可修改,如果覺得對您有幫助請收藏以便隨時查閱,最后祝您生活愉快 業(yè)績進步,以下為2016-2017學年高中生物 專題1 基因工程 1.2 多聚酶鏈式反應擴增dna片段習題 新人教版選修3的全部內容。13專題1 基因工程1.2 多聚酶鏈式反應擴增dna片段一、 pcr原理1 細胞內dna復制條件條件組分作用模板dna的兩條單鏈原料合成dna子鏈的原料酶解旋酶dna聚合酶能量為解螺旋和合成子鏈供能引物為dna聚合酶提供合成的3端起點2細胞內dna復制過程dna的兩條鏈是反向平行的,通常將dna的羥基末端稱為_,而磷酸基團的末端稱為_.dna聚合酶不能_開始合成dna,而只能_,因此,d

3、na復制需要引物。dna的合成方向總是_。在dna的復制過程中,復制的前提是_。在體外可通過控制_來實現.在_的溫度范圍內,dna的雙螺旋結構將解體,雙鏈分開,這個過程稱為_。pcr利用了dna的_原理,通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結合.由于pcr過程的溫度高,導致dna聚合酶失活,后來_的dna聚合酶的發(fā)現和應用,大大增加了pcr的效率。pcr反應需要在一定的緩沖溶液中進行,需提供:_,_,_,_,同時通過控制溫度使dna復制在體外反復進行.二、 pcr的反應過程pcr一般要經歷_循環(huán),每次循環(huán)可以分為_、_和_三步。從第二輪循環(huán)開始,上一次循環(huán)的產物也作為模板參與反應,并且由 延伸而成的

4、dna單鏈會與_結合,進行dna的延伸,這樣,dna聚合酶只能_,使這段固定長度的序列成指數擴增。三、 實驗操作1pcr反應體系:緩沖液、 , 、 、兩種rna引物、水.2實驗操作步驟按照pcr反應體系配方配制反應液;將pcr反應體系50l用微量移液器轉移到微量離心管(0。5 ml)中;將微量離心管放到pcr儀中;設置pcr儀的工作參數;dna在pcr儀中大量擴增。一、1提供復制的模板 四種脫氧核苷酸 打開dna雙螺旋 催化合成dna子鏈 atp rna23端 5端 從頭 從3端延伸dna鏈 從子鏈的5端向3端延伸雙鏈解開 溫度 80100 變性 熱變性 耐高溫dna模板 分別與兩條模板鏈相結

5、合的兩種引物 四種脫氧核苷酸 耐熱的dna聚合酶二、三十多次 變性 復性 延伸 引物 引物 特異地復制處于兩個引物之間的dna序列三、dna模板 四種脫氧核苷酸原料 熱穩(wěn)定dna聚合酶1 pcr技術與dna的復制相同點原理dna復制(堿基互補配對)原料四種游離的脫氧核苷酸條件模板、atp、酶、原料、引物等不同點解旋方式dna在高溫下變性解旋解旋酶催化場所體外復制(pcr擴增儀)主要在細胞核內酶熱穩(wěn)定的dna合酶(taq酶)細胞內含有的dna聚合酶結果在短時間內形成大量的dna片段形成整個dna分子1pcr過程與細胞內的dna復制過程相比,主要有兩點不同,它們是pcr過程需要的引物是人工合成的單

6、鏈dna或rnapcr過程不需要dna聚合酶pcr過程中dna的解旋不依靠解旋酶,而是通過對反應溫度的控制來實現pcr過程中,dna不需要解旋,直接以雙鏈dna為模板進行復制a bc d【參考答案】c【試題解析】pcr過程需要的引物是人工合成的單鏈dna,正確;pcr過程需要耐高溫的dna聚合酶,錯誤;pcr過程中dna的解旋不依靠解旋酶,而是通過對反應溫度的控制來實現,正確;pcr過程中,dna不依靠解旋酶解旋,而是利用高溫解旋,然后以單鏈dna為模板進行復制,錯誤。2pcr的反應過程pcr一般要經歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)可以分為變性(當溫度上升到90 oc以上時,雙鏈dna解聚為單鏈)、復

7、性(溫度下降到50 oc左右,兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈dna結合)和延伸(溫度上升到72 oc左右,溶液中的四種脫氧核苷酸在dna聚合酶的作用下,根據堿基互補配對原則合成新的dna鏈)三步。從第二輪循環(huán)開始,上一次循環(huán)的產物也作為模板參與反應,并且由引物延伸而成的dna單鏈會與引物結合,進行dna的延伸,這樣,dna聚合酶只能特異地復制處于兩個引物之間的dna序列,使這段固定長度的序列成指數擴增。2pcr是一種體外迅速擴增dna片段的技術,下列有關pcr過程的敘述,不正確的是a變性過程中破壞的是dna分子內堿基對之間的氫鍵b復性過程中引物與dna模板鏈的結合依靠堿基互補配對原則完成c

8、延伸過程中需要rna聚合酶、atp、四種核糖核苷酸d與細胞內dna復制相比所需要酶的最適溫度較高【參考答案】c【試題解析】變性過程是打開dna雙鏈之間的氫鍵,a正確.復性過程是引物與dna模板根據堿基互補配對原則而形成氫鍵,b正確。延伸過程需要的是taq dna聚合酶、atp和四種脫氧核糖核苷酸,c錯誤。與細胞內dna復制相比,pcr需要的酶的溫度較高,d正確。1下列關于pcr的描述中,正確的是pcr是一種酶促反應 引物決定了擴增的特異性 擴增dna利用了熱變性的原理 擴增的對象是氨基酸序列a bc d2下列關于pcr反應體系中所加物質的作用的描述,錯誤的是adna聚合酶催化合成dna子鏈b引

9、物使dna聚合酶能從引物的5端開始連接脫氧核苷酸c四種游離的脫氧核苷酸是用于合成子鏈的原料ddna母鏈提供dna復制的模板3引物的作用是a打開dna雙鏈b催化合成dna子鏈c提供模板d使dna聚合酶能夠從引物的3端開始復制4在pcr反應中,只有一個dna的片段作為模板,經過三次循環(huán)后,含引物i的dna單鏈占dna總鏈數的a1/2 b1/4 c1 d7/165利用pcr技術可以快速擴增特定基因,下列有關pcr技術的敘述正確的是a需要加入解旋酶使模板dna序列解旋b需要不斷加入作為引物的核苷酸序列c反應需要的dna聚合酶必須不斷地加進反應體系中d反應必須在相對穩(wěn)定的溫度條件下進行6下列關于pcr技

10、術的敘述,錯誤的是a利用了細胞內dna復制的原理b引物是合成子鏈的條件之一ctaq酶在9095 時會變性d每一次循環(huán)后目的基因的量增加一倍7在pcr擴增前,需要將下列哪些物質加入微量離心管中模板dna模板rnadna解旋酶耐高溫的dna聚合酶引物pcr緩沖液脫氧核苷酸貯備液核苷酸貯備液abcd8有關dna聚合酶與rna聚合酶的說法,不正確的是a均以dna的兩條鏈作為模板b均可催化形成磷酸二酯鍵c均以氨基酸作為基本組成單位d催化生成的產物不相同9復性溫度是影響pcr特異性的較重要因素.變性后溫度冷卻至4060 ,可使引物和模板發(fā)生結合。pcr的結果可不考慮原來解旋開的兩個dna模板鏈的重新結合,

11、原因不包括a模板dna比引物復雜得多b引物和模板之間的碰撞結合機會遠遠高于模板互補鏈之間的碰撞c模板鏈加熱解旋后已經變性,不可能再次結合d加入引物的量足夠多而模板鏈數量少10下列關于操作過程的敘述,錯誤的是apcr反應中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進行滅菌bpcr緩沖液和酶應分裝成小份,在20 儲存cpcr所用緩沖液和酶從冰箱拿出之后,迅速融化d在微量離心管中添加反應成分時,每吸取一種試劑后,移液器上的吸液槍頭都必須更換11下列有關核酸的變性與復性的敘述,正確的是a不同長度的dna分子變性后,在合適溫度下復性所用的時間基本相同b熱變性后的dn a經緩慢冷卻后可復性c熱

12、變性的dna迅速降溫過程也稱作退火d復性的最佳溫度為7085 12下列對pcr過程中“溫度的控制”的敘述,不正確的是apcr反應需要高溫,是為了確保模板是單鏈b延伸的溫度必須大于復性溫度,而小于變性溫度c要用耐高溫的dna聚合酶d需要耐高溫的解旋酶13一個由15n標記的dna分子,放在沒有標記的環(huán)境中培養(yǎng),利用pcr循環(huán)5次后標記的dna分子占總數的a1/10 b1/5 c1/16 d1/2514近十年來,pcr技術(多聚酶鏈式反應)成為分子生物學實驗室里的一種常規(guī)手段,其原理是利用dna半保留復制,在試管中進行dna的人工復制(如圖),在很短的時間內,將dna擴增幾百萬倍甚至幾十億倍,使實驗

13、所需要的遺傳物質不再受限于活的生物體。(1)pcr技術能把某一dna片段進行擴增,依據的原理是: 。(2)加熱使dna雙鏈打開,這一步是打開 鍵,稱為 ,在細胞中是在 的作用下使此鍵斷裂。(3)當溫度降低時,引物與模板 端結合,在dna聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最終合成2個dna分子,此過程中加入四種脫氧核苷三磷酸的目的是 ,遵循的原則是 。(4)pcr技術的必要條件,除了模板、原料、atp、酶以外,至少還需要三個條件。即:液體環(huán)境、適宜的 和 。(5)pcr一般要經歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)可分為 、 、 三個步驟.15(江蘇卷)小鼠雜交瘤細胞表達的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應

14、,為了克服這個缺陷,可選擇性擴增抗體的可變區(qū)基因 (目的基因)后再重組表達。下列相關敘述正確的是(雙選)a設計擴增目的基因的引物時不必考慮表達載體的序列b用pcr 方法擴增目的基因時不必知道基因的全部序列cpcr 體系中一定要添加從受體細胞中提取的dna 聚合酶d一定要根據目的基因編碼產物的特性選擇合適的受體細胞1【答案】d【解析】pcr是一種體外迅速擴增dna片段的技術,在高溫條件下,把dna的雙鏈打開,緩慢冷卻后,又重新結合,需要耐高溫的dna聚合酶,同時,還需要引物,從引物的3端連接脫氧核苷酸。2【答案】b【解析】pcr反應體系中,dna聚合酶催化合成dna子鏈;引物使dna聚合酶能從引

15、物的3端開始連接脫氧核苷酸;四種游離的脫氧核苷酸是用于合成子鏈的原料;dna母鏈提供dna復制的模板.故選b.3【答案】d【解析】pcr技術的原理是dna復制,而dna的復制需要引物,其主要原因是dna聚合酶只能從3端延伸dna鏈。因此,引物的作用是使dna聚合酶能夠從引物的3端開始復制。4【答案】d【解析】聚合酶鏈式反應(pcr)技術是在人為條件下進行的dna分子復制技術,而dna復制為半保留方式,經過3次循環(huán)即復制3次,則合成23個dna分子,共16條單鏈,而含有引物的dna除親代dna片段外,其余每個dna片段都有一條單鏈含引物,所以,含引物i的dna單鏈占dna總鏈數的7/16,選d。

16、5【答案】b 【解析】pcr技術利用高溫將氫鍵打開,不需要解旋酶的催化,a錯誤;模板鏈只要加入一次,引物片段必須不斷加入,dna聚合酶、dna連接酶可以反復使用,b正確;反應需要的dna聚合酶可以反復使用,不需要不斷地加進到反應當中,c錯誤;pcr反應在整個過程中溫度不斷地發(fā)生改變,而且變化較大,d錯誤.6【答案】c【解析】pcr技術的原理是dna分子的復制,a正確;pcr技術需要兩個不同的引物,b正確;taq酶是耐高溫的dna聚合酶,在9095 時不會變性,c錯誤;pcr技術的原理是dna分子的復制,每一次循環(huán)后目的基因的量增加一倍,d正確。7【答案】a【解析】pcr擴增需要的條件是模板dn

17、a 、耐高溫的dna聚合酶、引物、pcr緩沖液、脫氧核苷酸貯備液,a正確。8【答案】a【解析】dna聚合酶催化合成dna時,以dna分子兩條鏈為模板;rna聚合酶催化轉錄合成mrna時,以dna分子一條鏈為模板,a錯誤。由于磷酸與五碳糖是通過磷酸二酯鍵相連,所以dna聚合酶與rna聚合酶都是通過形成磷酸二酯鍵逐個連接核苷酸的,b正確.dna聚合酶與rna聚合酶的成分為蛋白質,都以氨基酸作為基本組成單位,c正確。dna聚合酶催化合成dna,rna聚合酶催化轉錄合成mrna,d正確。9【答案】c【解析】復性的原理是堿基互補配對,解旋后dna分子變成單鏈,堿基序列未發(fā)生改變,冷卻后仍可以進行復性,c

18、項錯誤。10【答案】c【解析】為避免外源dna等因素污染,pcr反應中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進行滅菌,a正確。pcr緩沖液和酶應分裝成小份,在20 儲存,使用前,將所需試劑從冰箱取出,放在冰塊上緩慢融化,b正確,c錯.微量離心管中添加反應成分時,每吸取一種試劑后,移液器上的吸液槍頭都必須更換,以免其他成分污染,d正確。11【答案】b【解析】不同長度的dna分子變性后,在合適溫度下復性所用的時間不同,dna的片段越大,復性越慢,;熱變性的dna驟然冷卻時,dna不會復性,經緩慢冷卻后可以復性;當將雙鏈呈分散狀態(tài)的dna溶液緩慢冷卻時,它們可以發(fā)生不同程度的重新結合

19、而形成雙鏈螺旋結構,這現象稱為“退火”;dna復性溫度受g+c含量影響而各不相同。12【答案】d【解析】pcr是體外dna擴增技術,dna雙鏈的解開不需要解旋酶,而是靠高溫使其變性解鏈,a項正確,d項錯誤;復性前,在耐高溫的taq dna聚合酶的作用下根據堿基互補配對原則合成新的dna,因此延伸的溫度要大于復性溫度但小于變性溫度,b項正確;pcr過程中dna聚合酶要在7075條件下催化dna鏈的延伸,所以要用耐高溫的dna聚合酶,c項正確.13【答案】c【解析】一個dna分子利用pcr技術循環(huán)5次后產生的dna分子數目為2n。而dna的復制是半保留復制,其特點是:新形成的dna雙鏈,一條是來自親代dna分子的母鏈,另一條是新形成的子鏈。這樣最初由15n標記的dna分子復制后,其標記的兩條鏈就分別進入兩個子代dna分子中,這樣兩個子代dna分子帶標記。以后均是在沒有標記的環(huán)境中培養(yǎng),不論經過多少次復制,

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