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1、哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法總結(jié)哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法總結(jié) 編輯整理:尊敬的讀者朋友們:這里是精品文檔編輯中心,本文檔內(nèi)容是由我和我的同事精心編輯整理后發(fā)布的,發(fā)布之前我們對(duì)文中內(nèi)容進(jìn)行仔細(xì)校對(duì),但是難免會(huì)有疏漏的地方,但是任然希望(哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法總結(jié))的內(nèi)容能夠給您的工作和學(xué)習(xí)帶來(lái)便利。同時(shí)也真誠(chéng)的希望收到您的建議和反饋,這將是我們進(jìn)步的源泉,前進(jìn)的動(dòng)力。本文可編輯可修改,如果覺得對(duì)您有幫助請(qǐng)收藏以便隨時(shí)查閱,最后祝您生活愉快 業(yè)績(jī)進(jìn)步,以下為哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法總結(jié)的全部?jī)?nèi)容。轉(zhuǎn)染原理特點(diǎn)陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法帶正電荷的脂質(zhì)體靠靜電作用和dna結(jié)合形成脂質(zhì)體dna復(fù)合物然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)
2、胞操作簡(jiǎn)便瞬時(shí)轉(zhuǎn)染穩(wěn)定轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞適用于各種裸露dna,rna片段適用于各種細(xì)胞對(duì)dna濃度有一定要求對(duì)細(xì)胞有一定毒性陽(yáng)離子聚合物(pei)帶正電的陽(yáng)離子聚合物和核酸的磷酸基團(tuán)結(jié)合形成帶正點(diǎn)復(fù)合物與帶負(fù)電的細(xì)胞膜接觸,內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞與陽(yáng)離子脂質(zhì)體類似,但是具有很低的毒性,操作簡(jiǎn)單實(shí)用性廣,為新一代轉(zhuǎn)染試劑瞬時(shí)轉(zhuǎn)染穩(wěn)定轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞磷酸鈣法磷酸鈣-dna沉淀附著在細(xì)胞膜,促進(jìn)細(xì)胞的內(nèi)吞作用操作簡(jiǎn)單瞬時(shí)轉(zhuǎn)染穩(wěn)定轉(zhuǎn)染大部分細(xì)胞磷酸鈣dna沉淀附著在細(xì)胞膜不適用于原代細(xì)胞電穿孔法高脈沖的電壓破壞細(xì)胞膜,在細(xì)胞膜表面形成孔道,dna由孔道進(jìn)入細(xì)胞適用性廣,適于質(zhì)粒和幾十kb的基因組片段瞬時(shí)轉(zhuǎn)染穩(wěn)定轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞針對(duì)不同的細(xì)胞要優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件細(xì)胞致死率高顯微注射法利用顯微操作系統(tǒng)和顯微注射技術(shù)將dna注射進(jìn)入細(xì)胞整合率高,適用于工程改造轉(zhuǎn)基因動(dòng)物瞬時(shí)轉(zhuǎn)染穩(wěn)定轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞設(shè)備昂貴外源基因的整合位點(diǎn)和拷貝數(shù)無(wú)法控制會(huì)導(dǎo)致片段突變?nèi)笔孓D(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染利用病毒的膜蛋白可以和細(xì)胞表面受體結(jié)合而進(jìn)入細(xì)胞,利用宿主細(xì)胞酶自行轉(zhuǎn)錄復(fù)制合成dna并隨機(jī)整合到細(xì)胞基因組中轉(zhuǎn)染效率高適合難轉(zhuǎn)染細(xì)胞轉(zhuǎn)染瞬時(shí)轉(zhuǎn)染穩(wěn)定轉(zhuǎn)染特定細(xì)胞利用病毒
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