機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷

1、精選ppt,1,家兔腸缺血/再灌注損傷 Ischemia-reperfusion Injury in Rabbit (I/R),精選ppt,2,掌握缺血再灌注損傷模型的復制，比較缺血損傷和缺血再灌注損傷的區(qū)別 觀察缺血再灌注損傷的表現，理解缺血再灌注損傷發(fā)生的機制,【目的要求】,精選ppt,3,【實驗動物】 家兔,精選ppt,4,【實驗器材】,兔手術臺、BL-420生物信息采集系統(tǒng)、Y型氣管插管、動脈夾、動脈插管、靜脈插管、注射器、紗布、棉線、實驗動物常用手術器械一套、橡皮管、三通管、1%肝素、25%烏拉坦、生理鹽水,精選ppt,5,【實驗設計原理】,通過腸系膜上動脈結扎，即SMAO(Supe

2、rior Mesentery Artery Occlusion)來阻斷部分腸的血液供應一段時間后再恢復血流灌注，以復制腸缺血/再灌注損傷的動物模型，探討缺血/再灌注損傷的發(fā)生機制,精選ppt,6,組：持續(xù)缺血組 夾閉腸系膜上動脈1h 組：再灌損傷組 夾閉腸系膜上動脈30min，再恢復血流30min,【實驗分組】,精選ppt,7,【實驗方法與步驟】,1. 稱重 2. 全麻（耳緣靜脈注射25%烏拉坦4ml/kg） 注意：從耳緣靜脈的遠心端開始注射， 排盡氣泡，速度不宜太快 麻醉效果：角膜反射 基本消失，鉗夾家兔 舌頭無回收，四肢松軟,精選ppt,8,3. 仰臥固定（背部交叉）、備皮 頸部正中（甲狀

3、軟骨下緣胸骨上切跡） 腹部正中（劍突下1.5cm起向下5cm） 注意：平貼皮膚剪毛，勿拎起皮膚！,精選ppt,9,4.頸部正中切口行動脈插管 切口范圍：頸部正中，甲狀軟骨下緣胸骨上切跡，長約5cm,分離左側頸總動脈：胸骨舌骨肌與胸鎖乳突肌之間深面的頸動脈鞘內，與 氣管平行，顏色鮮紅、 較細、觸之有搏動感， 長約2-3cm，穿線備用,精選ppt,10,注意：（1）鈍性分離 （2）辨清頸A鞘內的血管神經 血管插管,先結扎遠心端，后夾閉近心端，剪口部位盡量靠近遠心端，成45度角朝向近心端剪一小口，約為管徑的1/3-1/2，插管方向朝向近心端，插入1-1.5cm,精選ppt,11,【插管的注意事項】,

4、插管內事先應加入少量肝素以防凝血；排凈氣泡，記錄前應關閉三通管 插管易滑脫，應雙線固定，結扎牢靠 勿使插管尖端與血管壁形成角度，避免刺破血管,精選ppt,12,5.腹部正中切口： 腹正中線自劍突下1.5cm起向下做5cm切口 6.尋找腸系膜上動脈： 將家兔腹腔內臟左移，找到齊右腎門對側垂直向腹主動脈分出的腸系膜上動脈，穿雙線備用，注意避免損傷其他血管（缺血再灌注夾閉時注意墊橡皮管） 7.記錄一段正常血壓曲線 8.復制腸缺血-再灌注模型，輕輕提起腸系膜上動脈的穿線，用動脈夾夾閉，同時觀察各項生理指標變化。 9.分組進行實驗并記錄各項指標。（組：夾閉腸系膜上動脈1h 組：夾閉腸系膜上動脈30min

5、，再恢復血流30min）,精選ppt,13,腸系膜上動脈示意圖,精選ppt,14,精選ppt,15,精選ppt,16,1. 移動內臟時，動作要輕柔 2. 分離腸系膜上A時需小心細致，不要使用銳利器械，以免損傷血管造成大出血 3. 腸系膜上A夾閉要徹底，缺血再灌注組結扎時注意墊橡皮管，恢復血流灌流（復流）要完全,【注意事項】,精選ppt,17,【結果分析】, 峰表示：結扎腸系膜上A 血管床容量 有效循環(huán)血量相對BP 壓力感受器 (+) 減壓反射BP 峰表示：松開腸系膜上A 血管床容量有效循環(huán)血量相對 BP升壓反射（再灌注損傷還未來得及發(fā)生）有時峰不出現，BP直到死亡 血壓持續(xù)下降，有再灌注損傷,

6、精選ppt,18,組：結扎BP BP趨于平穩(wěn)（相似于結 扎前），腸壁粉紅暗紅（淤血）腫脹（水腫），無出血點 組：結扎 BPBP趨于平穩(wěn)（機體自身調節(jié)） 再灌BP，腸壁暗紅、水腫、出血點BP低于正常1/2時休克 、組比較說明：缺血損傷與 是不同的 損傷過程， 損傷過程，后者損傷更嚴重,精選ppt,19,【典型結果】,精選ppt,20,【結果不明顯可能存在的問題】,（1）實驗過程中是否發(fā)生了大血？ （2）缺血是否完全？ （3）再灌注是否通暢？ （4）記錄結果時基線是否改變？ （5）個體差異,精選ppt,21,【I/R的發(fā)生機制】,（1）活性氧的作用 ） （2）鈣超載 ） （3）白細胞的作用 ） （4）高能磷酸化合物生成障礙 ）,精選ppt,22,（1）盡早恢復血流灌流，縮短缺血時間 （2）再灌注時