五味子有效成分研究論文_優(yōu)秀論文

1、 五味子有效成分研究論文【摘要】五味子為我國(guó)傳統(tǒng)的中藥之一, 具有多種藥用功效, 該文對(duì)近些年來(lái)五味子多種有效成分的提取分離方法做一綜述, 以利進(jìn)一步的研究與開(kāi)發(fā)利用?！娟P(guān)鍵詞】五味子有效成分提取與分離AdvancesontheExtractionandSeparationTechnologiesofEfficientComponentsinSchisandrachinensis(Turcz.)BaillAbstract:Schisandrachinensis(Turcz.)BaillisoneoftraditionalChinesemedicines.Ithasbeenfoundtoposs

2、esssomebeneficialpharmacologicaleffects.Forfurtherresearchandapplication,thispaperreviewedthedevelopmentoftheextractionandseparationtechnologiesofefficientcomponentsinSchisandrachinensis(Turcz.)Baill.Keywords:Schisandrachinensis(Turcz.)Baill;Efficientcomponents;Extractionandseparation五味子Schisandrach

3、inensis(Turcz.)Baill為木蘭科多年生落葉植物, 因果實(shí)具有甘、酸、辛、苦、咸五味而得名, 具有斂肺生津、益胃養(yǎng)心、收斂固澀、滋補(bǔ)、強(qiáng)壯等功效, 是常用中藥之一1。五味子中含有木脂素、多糖和三萜酸等多種有效成分, 其中木脂素類(lèi)具有保肝、降酶、抗艾滋病等多種活性。本文對(duì)近些年來(lái)五味子及其莖葉中有效成分的提取和分離方法的研究進(jìn)展做一綜述, 以利進(jìn)一步的研究與開(kāi)發(fā)利用。1五味子中木脂素成分的提取分離方法五味子中總木脂素的含量約為2%8%, 其成分大多具有聯(lián)苯環(huán)辛二烯母核, 是一類(lèi)低極性小分子化合物, 如五味子甲素、五味子乙素, 五味子醇甲等。近年來(lái)常用的提取方法有回流提取法、超臨界C

4、O2萃取法, 超高壓提取法等。1.1溶劑提取法是根據(jù)中藥中各種成分在溶劑中的溶解性質(zhì), 選用對(duì)有效成分溶解度大, 對(duì)不需要溶出成分溶解度小的溶劑, 而將有效成分從藥材組織內(nèi)溶解出來(lái)的方法。常用浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流法及連續(xù)回流提取法等。袁海龍等2以五味子甲素的含量作為考察指標(biāo),采用均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)選出五味子的最佳提取工藝：乙醇濃度為90%, 回流時(shí)間為1h, 固液比為15。王茹等3采用正交設(shè)計(jì)安排實(shí)驗(yàn), 以五味子乙素、五味子醇甲的含量和出膏率為指標(biāo), 優(yōu)選出合理的提取工藝為：以生藥重量10倍的乙醇回流提取兩次, 每次提取4h。李奉勤等4考察了溶劑濃度、溶劑用量、回流時(shí)間和pH值對(duì)五味子中五味

5、子乙素提取效果的影響, 采用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選出五味子乙素的最佳提取條件：提取溶劑為85%乙醇、液固比為51, pH值為5.5, 回流時(shí)間為2h, 五味子乙素含量為291.04mg/100g。1.2超高壓提取法超高壓提取法(ultra-highpressureextractiontechnique,UHPE)是在常溫或較低溫度(通常低于100)的條件下, 對(duì)原料液迅速施加1001000MPa的流體靜壓力, 保壓一定時(shí)間, 溶劑在超高壓作用下迅速滲透到固體原料內(nèi)部, 有效成分溶解在溶劑中, 并在短時(shí)間內(nèi)達(dá)到溶解平衡, 然后迅速卸壓, 在超高滲透壓差下, 有效成分迅速擴(kuò)散到組織周?chē)奶崛∪軇┲?；同時(shí)在

6、超高壓作用下, 細(xì)胞的細(xì)胞壁、細(xì)胞膜以及細(xì)胞內(nèi)液泡等結(jié)構(gòu)發(fā)生變化, 細(xì)胞內(nèi)溶物和提取溶劑充分接觸, 從而達(dá)到快速、高效地提取目的5。劉長(zhǎng)姣等6應(yīng)用超高壓提取法提取五味子總木脂素, 利用均勻設(shè)計(jì)方法確定最優(yōu)提取工藝：提取壓力為350MPa, 溶劑為70%乙醇水溶液, 固液比為190, 總木脂素得率為3.54%, 常規(guī)回流提取方法的總木脂素得率為2.593%, 可見(jiàn)超高壓提取方法更有利于總木脂素的提取。1.3超臨界CO2萃取法超臨界流體萃?。╯upercriticalFluidextractiontechnique,SCFE）技術(shù)是以超臨界流體（SCF）為溶劑, 可應(yīng)用于多種液態(tài)或固態(tài)混合物中待分

7、離組分的萃取。因?yàn)镃O2具有無(wú)毒、不易燃易爆、價(jià)廉、臨界壓力和溫度較低、易于安全地從混合物中分離出來(lái)等優(yōu)點(diǎn), 所以CO2是中藥有效成分提取與分離過(guò)程中最常用的一種超臨界流體。程康華等7應(yīng)用超臨界CO2萃取五味子中五味子醇甲, 在溫度為45, 壓力為15.0MPa、時(shí)間為180min的條件下, 五味子醇甲的超臨界提取率為12.00%, 原藥材中五味子醇甲的得率為0.4813%, 而乙醇萃取物（加75%乙醇浸泡至恒溫水浴上回流3h）原料藥材中五味子醇甲的得率為0.1955%, 前者得率比后者高出1倍多。聶江力等8通過(guò)正交設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方法, 探討了超臨界CO2法萃取五味子果實(shí)中木脂素的工藝條件,確定了

8、最佳工藝條件：萃取壓力為30Mpa、萃取溫度為50、萃取時(shí)間為120min, 總木脂素得率為1.015%。劉本等9考察了不同溫度和壓力對(duì)超臨界CO2提取五味子甲素的提取效率的影響。結(jié)果表明,在溫度為60, 壓力為25.3MPa的條件下,有最快的提取速度,最大提取量達(dá)90%以上, 并且提取率和夾帶10%甲醇的超臨界CO2有相近(約0.5%,w/w)。田明等10對(duì)五味子傳統(tǒng)水提取、80%乙醇提取和超臨界CO2萃取進(jìn)行了對(duì)比研究, 不同提取工藝提取物出率分別為28.5%, 23.5%, 15.6%, 五味子總木脂素提出率分別為68%, 55.8%, 86.8%, 五味子乙素提出率分別為0%, 65.

9、1%, 94.6%, 證明,SFE-CO2提取法適用于五味子有效成分的提取。1.4微波提取法微波提取技術(shù)(microwaveextractiontechnique, MWE)應(yīng)用于提取天然植物中的有效成分始于20世紀(jì)90年代, 是微波和傳統(tǒng)溶劑提取法相結(jié)合, 利用微波能來(lái)提高萃取率的一項(xiàng)新技術(shù)。黃惠華等11采用乙醇和水作為萃取劑,研究了用微波輔助萃取的方法從五味子果實(shí)中萃取五味子醇甲。以不同的萃取時(shí)間、萃取功率、萃取溶劑/基質(zhì)比作為參數(shù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),利用高效液相色譜(HPLC)作為五味子醇甲的檢測(cè)手段, 確定了以乙醇和水作為溶劑的最優(yōu)微波輔助萃取條件：溫度為接近溶劑的沸點(diǎn)(乙醇設(shè)為72,水設(shè)為95

10、)、微波功率為350W, 萃取時(shí)間為58min, 萃取液固比為121, 在萃取產(chǎn)率上,乙醇的萃取效果優(yōu)于水(乙醇的萃取產(chǎn)率0.72%,水的萃取產(chǎn)率0.47%), 但是在萃取選擇性方面, 水作為萃取劑優(yōu)于乙醇；同時(shí)發(fā)現(xiàn)萃取時(shí)間的延長(zhǎng)和微波功率的增加都會(huì)導(dǎo)致五味子醇甲的萃取產(chǎn)率下降。1.5法多索溶劑提取法法多索溶劑是一類(lèi)新的溶劑系統(tǒng),主要有1,1,1,2-四氯乙烷組成, 具有不破壞臭氧層,無(wú)環(huán)境污染,耗能低且能在常溫等優(yōu)點(diǎn),可作為五味子甲素這類(lèi)化合物的提取溶劑。劉本等12以法多索洛劑(phytosolA,B和D)提取五味子甲素, 結(jié)果表明法多索溶劑能有效地提取五味子甲素, 提取率為0.45%(W/

11、W), 與10%甲醇調(diào)節(jié)的超臨界CO2的提取率(0.48%)接近。1.6高速逆流色譜技術(shù)高速逆流色譜技術(shù)(high-speedcounter-currentchromatographytechnique,HSCCC), 是一種不用任何固態(tài)載體或支撐體的液-液分配色譜技術(shù), 目前已成功地開(kāi)發(fā)出分析型、生產(chǎn)型兩大類(lèi)高速逆流色譜儀, 可分別用于中藥有效成分的分離制備和定量分析。JinyongPeng等13應(yīng)用高速逆流色譜技術(shù)分離純化五味子中五味子醇甲和五味子醇乙。在應(yīng)用D101大孔樹(shù)脂進(jìn)行初步純化后, 應(yīng)用高速逆流色譜技術(shù), 以正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水(10.90.91,v/v)為兩相溶劑系統(tǒng),

12、從400mg初純物中分離得到107mg五味子醇甲和36mg五味子醇乙, 純度分別為99.5%和99.1%, 且用時(shí)少于3h。TianhuiHuang等14應(yīng)用高速逆流色譜分離純化五味子甲素和五味子乙素, 以正己烷-甲醇-水(35303,v/v)為溶劑系統(tǒng), 從100mg五味子石油醚提取物中分離得到五味子甲素8mg, 五味子乙素12mg, 純度分別在98%和96%以上。2五味子多糖的提取分離方法多糖具有調(diào)節(jié)免疫功能、抗腫瘤、抗病毒病菌、降血糖等作用, 在抗腫瘤、抗病毒等藥物的研究中占有一定的地位, 所以多糖成分的提取分離也是比較活躍的研究領(lǐng)域。目前五味子多糖的提取分離研究主要集中在初步的提取分離

13、, 對(duì)其具體成分的結(jié)構(gòu)組成仍需進(jìn)一步的深入研究。張?zhí)m杰等15對(duì)北五味子果實(shí)的多糖進(jìn)行了研究, 經(jīng)提取、醇析、Savage法脫蛋白、脫脂、活性碳脫色、DEAE纖維素柱色譜等步驟, 確定北五味子中粗多糖含量為6.1%, 3次提取率分別為：55.6%, 38.5%, 4.6%,Savage法脫蛋白粗多糖損失率為7.2%, 得到兩種純多糖的含量分別為0.387%和0.061%。李巧云等16對(duì)五味子中可溶性粗多糖的提取工藝進(jìn)行了研究, 通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)確定了最佳工藝：料液比為125, 溫度為100、時(shí)間為4h, 此時(shí)五味子多糖提取率為5.38%。并應(yīng)用Sevag法結(jié)合酶法除蛋白對(duì)多糖進(jìn)行純化,

14、大大縮短了除蛋白時(shí)間。韓學(xué)忠等17研究了五味子多糖的乙醇分級(jí)純化, 結(jié)果證明, 對(duì)五味子多糖水溶液可直接用40%的乙醇溶液分成兩部分,藥理實(shí)驗(yàn)證明有藥效作用的多糖多集中在乙醇40%(V/V)沒(méi)有沉淀下來(lái)的多糖中。3五味子中揮發(fā)油的提取分離方法五味子莖葉、果實(shí)以及種子均含有豐富的揮發(fā)性成分, 種子中揮發(fā)性成分約占種子的1.6%18, 有明顯的辛辣、芳香氣味。譚曉梅等19對(duì)超臨界CO2萃取法和水蒸氣蒸餾法提取的北五味子揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行比較研究。應(yīng)用GC-MS法進(jìn)行成分分析, 供鑒定了80個(gè)成分, 超臨界CO2萃取法提取物被鑒定了55個(gè)成分, 水蒸氣蒸餾法提取物被鑒定了70個(gè)成分, 兩者共有成分達(dá)

15、45個(gè)。兩種提取方法的提取物得率分別為0.84%和11.6%, 后者提取物中除了揮發(fā)油, 還含有木脂素等脂溶性成分, 但兩種提取方法的揮發(fā)油主要成分基本一致。王炎等20運(yùn)用GC-MS技術(shù),結(jié)合計(jì)算機(jī)檢索對(duì)五味子揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行分離和鑒定,并對(duì)五味子種子和果實(shí)中的揮發(fā)油成分進(jìn)行對(duì)比。證明五味子種子中揮發(fā)油成分主要為各種萜類(lèi)化合物, 單萜類(lèi)如蒎烯、月桂烯、松油烯等相對(duì)分子質(zhì)量為136的物質(zhì)；倍半萜類(lèi)如金合歡烯、欖香烯、異石竹烯、依蘭烯等分子量為204的物質(zhì)。此外,揮發(fā)油中還有少量的醇、酯、醛、酮以及苯和萘的衍生物等；同時(shí)發(fā)現(xiàn), 五味子種子中的成分與以往報(bào)道過(guò)的果實(shí)揮發(fā)性成分差別較大,其中某些成分

16、未見(jiàn)報(bào)道,如-芹子烯和較為少見(jiàn)的吉馬烯B, 吉馬烯D等,說(shuō)明種子本身與果肉揮發(fā)油的組成成分不同, 應(yīng)分別加以研究利用。4五味子中其他成分的提取分離方法五味子中有效成分的研究除上述木脂素、多糖、揮發(fā)油成分外, 其它一些具有生物活性的成分也取得了一定的研究進(jìn)展。徐林峰等21從中藥五味子中提取分離-葡萄糖苷酶抑制劑, 利用浸提、超濾、柱層析、醋酸鉛沉淀等方法進(jìn)行純化, 初步分離得到-葡萄糖苷酶抑制劑。并確定該抑制劑成分為大分子糖苷類(lèi)物質(zhì),相對(duì)分子量在5萬(wàn)以上, 抑制類(lèi)型為非競(jìng)爭(zhēng)性抑制。盧山等22考察了浸提用溶劑、溫度、時(shí)間、添加劑及固液比對(duì)五味子紅色素提取率的影響, 應(yīng)用正交實(shí)驗(yàn)確定五味子紅色素的浸

17、提條件：浸提溫度為40, 溶劑為60%乙醇、固液比為1:6。RadekSladkovsky等23應(yīng)用反相液相色譜, 研究了不同年份（1997-1999）五味子莖葉提取物中槲皮素、山奈酚和(E)-苯乙烯酸的含量。并通過(guò)優(yōu)化方法確定了可以同時(shí)測(cè)定此3種成分的流動(dòng)相為acetonitrile-aqueous0.05%ortho-phosphoricacid(4060vv), 測(cè)得的不同年份五味子葉中槲皮素的含量分別為1.535%, 1.140%, 1.294；山奈酚的含量分別為0.359%, 0.268%, 0.298%；(E)-苯乙烯酸的含量的分別為3.824%, 3.131%, 2.515；五味

18、子莖提取物中槲皮素的含量分別為0.341%, 0.303%, 0.389%；(E)-苯乙烯酸的含量的分別為0.116%, 0.099%, 0.260%；莖提取物中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)山奈酚?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1侯團(tuán)章.中草藥提取物(第1卷)M.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2004：218.2袁海龍, 譚銳, 李仙逸, 等.均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)選五味子的提取工藝J.中國(guó)中藥雜志, 2002, 27（5）：355.3王茹, 張琰, 程建峰, 等.五味子活性成分提取工藝的優(yōu)選J.華南國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志, 2005, 19（6）：4.4李奉勤, 史冬霞, 張瑞紅, 等.五味子中五味子乙素提取工藝研究J.中國(guó)醫(yī)藥.2006, 15（7）

19、：46.5ZhangShouqin,ZhuJunjie,WangChangzhen.NovelhighpressureextractiontechnologyJ.InternationalJournalofPharmaceutics, 2004,27（8）：471.6劉長(zhǎng)姣, 張守勤, 吳華, 等.超高壓技術(shù)在五味子飲料加工中的應(yīng)用J.農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào), 2006, 22（6）：227.7程康華,劉幸平,朱凱.CO2超臨界液體萃取五味子中五味子醇甲的研究J.南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版).2001, 17, （6）：36.8聶江力,裴毅,祖元?jiǎng)?北五味子果實(shí)超臨界CO2萃取工藝的研究J.植物研究

20、.2005,25(2)：213.9劉本,JohnRDean.超臨界CO2流體提取五味子中的五味子甲素J.中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志.2000, 31（3）：101.10田明,黃玉芬,楊曉明等.五味子不同提取工藝活性成分的研究J.制劑研究, 2003, 20（4）：50.11黃惠華,梁漢華.利用微波輔助萃取技術(shù)提取五味子果實(shí)中五味子醇甲的研究J.天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā).2006,18：112.12劉本,DeanJR,PriceR.法多索溶劑提取五味子中的五味子甲素J.中成藥, 2000, 22（7）：507.13JinyongPeng,GuorongFan,LipingQu,XinZhou,YutianWu.

21、Applicationofpreparativehigh-speedcounter-currentchromatographyforisolationandseparationofschizandrinandgomisinAfromSchisandrachinensisJ.JournalofChromatographyA,2005, 1082：203.14TianhuiHuang,PingniangShen,YongjiaShen.Preparativeseparationandpurificationofdeoxyschisandrinand-schisandrinfromSchisandrachinensis(Turcz.)Baillbyhigh-speedcounter