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1、消毒試驗(yàn)用試劑和培養(yǎng)基配方B . 1磷酸鹽緩沖液(PBS。0.03mol/L , pH7.2)無(wú)水磷酸氫二鈉2.83g磷酸二氫鉀1.36g蒸餾水加至1000mL將各成分加入到1000mL蒸餾水中,待完全溶解后,調(diào)pH至7.27.4, 于 121T壓力蒸氣滅菌20min備用。B. 2無(wú)菌檢驗(yàn)用洗脫液吐溫一801g蛋白胨10g氯化鈉8.5g蒸餾水1000mL將各成分加入到1000mL0.03mol/L PBS液中,加熱溶解后調(diào) pH至7.27.4,與121C壓力蒸汽滅菌20min備用。B 3營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基蛋白胨10g牛肉膏5g氯化鈉5g瓊脂15g蒸餾水1000mL除瓊脂外其他成分溶解于蒸餾水中,調(diào)
2、pH至7.27.4,加入瓊脂,加熱溶解,分裝,于121 C壓力蒸氣滅菌 20min備用4 溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液蛋白胨10g葡萄糖5g可溶性淀粉1g溴甲酚紫乙醇溶液10mL蒸餾水1000mL將蛋白胨、葡萄糖溶解于蒸餾水中,調(diào)pH至7.07.2,加入1%溴甲酚紫酒精溶液,搖勻后,分裝,每管5mL ,于115C壓力蒸汽滅菌 30min。置4C冰箱備用B.5營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯化鈉蒸餾水10g5g5g1000ml將各成分溶解于蒸餾水中,調(diào) pH至7.27.4,分裝,于121 C壓力蒸汽滅菌 20min備用。B.6嗜熱脂肪桿菌恢復(fù)瓊脂培養(yǎng)基蛋白胨10g牛肉膏3g可溶性淀粉1g葡萄糖1g瓊脂20g
3、蒸餾水1000ml以上各成分蒸餾水溶解,調(diào) pH至7.07.2,裝瓶,經(jīng)115C壓力蒸汽滅菌 30min后使用B.70.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基10g5g5g 1000ml蛋白胨氯化鈉 葡萄糖 肉浸液取蛋白胨與氯化鈉加入肉浸液內(nèi),微溫溶解后,調(diào)pH至弱堿性,煮沸、加入葡萄糖溶解后,搖勻,濾清,調(diào)pH至7.07.4,分裝,于 115 C 壓力蒸汽滅菌 30min。B.8 稀釋液:胰蛋白胨生理鹽水溶液(TPS)。胰蛋白胨1.0g氯化鈉8.5g先用900ml以上蒸餾水溶解,并調(diào)節(jié) pH值在7.0 .2(20C),最終用蒸餾水加至 1000ml,分裝后,經(jīng) 121 C壓 力蒸汽滅菌后使用。B.9需氧-厭氧
4、菌瓊脂培養(yǎng)基酪胨(胰酶水解)15g3g牛肉膏葡萄糖5g氯化鈉2.5gL-胱氨酸0.5g硫乙醇酸鈉0.5g酵母浸出粉5g新鮮配制的0.1%刃天青溶液1.0ml(或新配制的0.2%亞甲藍(lán)溶液0.5ml瓊月旨0.5g0.7g蒸餾水1000ml除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成份加入蒸餾水中, 微溫溶解后,調(diào) pH至弱堿性,煮沸、濾清,加入葡萄糖和 刃天青溶液,搖勻,調(diào)pH至6.97.3,分裝于115C壓力蒸汽滅菌30min。B.10 無(wú)菌試驗(yàn)用真菌培養(yǎng)基磷酸二氫鉀(KH2PO4)1g硫酸鎂(MgSO4 7H2O)0.5g蛋白胨5g葡萄糖10g蒸餾水1000ml除葡萄糖外,上述各成分加入蒸餾水內(nèi),微溫溶解后,調(diào)節(jié)pH約6.8,煮沸,加葡萄糖溶解后,搖勻?yàn)V清,調(diào)pH使滅菌后為 6.4 0.2,分裝,115C壓力蒸汽滅菌 20min備B.11血瓊脂培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂100 ml脫纖維羊血(或兔血)10 ml將營(yíng)養(yǎng)瓊脂加熱熔化待冷至50C左右,以無(wú)菌操作將10ml脫纖維血加入后搖勻,倒平皿置冰箱備用。B.12 注意事項(xiàng)配制培養(yǎng)基注意事項(xiàng)如下:a)配制培養(yǎng)基的容器不宜用銅鍋或鐵鍋,以免
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