牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方資料

1、精品文檔牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時又稱為普通培養(yǎng) 基。它含有牛肉膏、蛋白胨和 nacl。其中牛肉膏為微生物提供碳源和能源，磷酸鹽、蛋白 胨主要提供氮源，而 nacl 提供無機(jī)鹽。在配制固體培養(yǎng)基時還要加入一定量瓊脂作凝固劑。 瓊脂在常用濃度下 96時溶化，一般實際應(yīng)用時在沸水浴中或下面墊以石棉網(wǎng)煮沸溶化， 以免瓊脂燒焦。瓊脂在 40時凝固，通常不被微生物分解利用。固體培養(yǎng)基中瓊脂的含量 根據(jù)瓊脂的質(zhì)量和氣溫的不同而有所不同。由于這種培養(yǎng)基多用于培養(yǎng)細(xì)菌（葷食），因此，要用稀酸或稀堿將其 ph 調(diào)至中性或微 堿性，以利于細(xì)菌的生長繁殖

2、。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方如下：牛肉膏 3g、蛋白胨 10g、nacl 5g、瓊脂 1520g、水 1000ml、ph 7476（7.0 8.0）三、器材牛肉膏，蛋白胨， nacl，瓊脂；1mol/l naoh， 1mol/l hcl；試管，三角燒瓶，燒杯，量筒，玻棒，培養(yǎng)基分裝器，扭力天平，牛角匙，高壓蒸汽滅菌鍋， ph 試紙（ ph 5590），棉花，牛皮紙，記號筆，麻繩，紗布等。四、操作步驟1稱量按培養(yǎng)基配方比例依次準(zhǔn)確地稱取牛肉膏、蛋白胨、nacl 放入燒杯中。牛肉膏常用玻棒挑 取，放在小燒杯或表面皿中稱量，用熱水溶化后倒入燒杯。也可放在稱量紙上，稱量后直接 放入水中，這時如稍微加熱，

3、牛肉膏便會與稱量紙分離，然后立即取出紙片。蛋白胨很易吸 潮，在稱取時動作要迅速。另外，稱藥品時嚴(yán)防藥品混雜，一把牛角匙用于一種藥品，或稱 取一種藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一藥品，瓶蓋也不要蓋錯。2溶化在上述燒杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒攪勻，然后，在石棉網(wǎng)上加熱使其溶解。 待藥品完全溶解后，補(bǔ)充水分到所需的總體積。如果配制固體培養(yǎng)基，將稱好的瓊脂放入已 溶化的藥品中，再加熱溶化，在瓊脂溶化的過程中，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底使燒杯破裂。 最后補(bǔ)足所失的水分。3調(diào) ph在未調(diào) ph 前，先用精密 ph 試紙測量培養(yǎng)基的原始 ph 值，如果 ph 偏酸，用滴管向培養(yǎng) 基中逐滴加入 1mol

4、/l naoh，邊加邊攪拌，并隨時用 ph 試紙測其 ph 值，直至 ph 達(dá) 76。 反之，則用 1mol/l hcl 進(jìn)行調(diào)節(jié)。注意 ph 值不要調(diào)過頭，以避免回調(diào)，否則，將會影響 培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度。對于有些要求 ph 值較精確的微生物，其 ph 的調(diào)節(jié)可用酸度計進(jìn)行（使用方法，可參考有 關(guān)說明書）。4過濾趁熱用濾紙或多層紗布過濾，以利結(jié)果的觀察。一般無特殊要求的情況下，這一步可以省去 （本實驗無需過濾）。5分裝按實驗要求，可將配制的培養(yǎng)基分裝入試管內(nèi)或三角燒瓶內(nèi)。分裝裝置見圖-1。分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。(1)液體分裝分裝高度以試管高度的

5、1/4 左右為宜。精品文檔精品文檔(2) 固體分裝分裝試管，其裝量不超過管高的 1/5，滅菌后制成斜面，如圖-2。分裝三角燒 瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。(3) 半固體分裝試管一般以試管高度的 1/3 為宜，滅菌后垂直待凝。6加塞培養(yǎng)基分裝完畢后，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)而 造成污染，并保證有良好的通氣性能（棉塞制作方法附本實驗后面）。7包扎加塞后，將全部試管用麻繩捆扎好，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉 塞，其外再用一道麻繩扎好。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、日期 。三角燒瓶加塞后，外 包牛皮紙，用麻繩以活結(jié)形式扎好，使用時容易解

6、開，同樣用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、 日期。8滅菌將上述培養(yǎng)基以 105kg/cm2（15 磅/英寸 2），1213， 20 分鐘高壓蒸汽滅菌。如因 特殊情況不能及時滅菌，則應(yīng)放入冰箱內(nèi)暫存。9擱置斜面將滅菌的試管培養(yǎng)基冷至 50左右，將試管棉塞端擱在玻棒上，擱置的斜面長度以不超過 試管總長的一半為宜。10無菌檢查將滅菌的培養(yǎng)基放入 37的溫室中培養(yǎng) 2448 小時，以檢查滅菌是否徹底。pda 培養(yǎng)基配方：特點及用途pda 培養(yǎng)基是人們對馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的簡稱，即 potato dextrose agar （medium ），依次對應(yīng)馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂的英文。一種常用的培養(yǎng)基， 宜培

7、養(yǎng)酵母菌、 霉菌、蘑菇等真菌 （素食）。酵母菌 ph（3.86.0 ）， 霉菌（ 4.05.8 ）等。按物理性狀劃分：固體培養(yǎng)基 ，按培養(yǎng)基成分劃分：半合成培養(yǎng)基配方馬鈴薯 200 克 葡萄糖 20 克 瓊脂 1520 克 自來水 1000 毫升 自然 ph配制步驟其做法是稱取 200g 馬鈴薯，洗凈去皮切成小塊，加水煮爛（煮沸2030 分鐘，能被玻璃棒戳破即 可），用四層紗布過濾，再據(jù)實際實驗需要加葡萄糖和瓊脂，繼續(xù)加熱攪拌混勻，稍冷卻后再補(bǔ)足水分至1000 毫升，分裝試管，加塞、包扎， （ 121 ）滅菌 20 分鐘左右后取出試管擺斜面，冷卻后貯存?zhèn)溆?。精品文檔精品文檔其他事項1. 培養(yǎng)基

8、經(jīng)滅菌后，必須放在37c 溫箱培養(yǎng) 24h ，無菌生長者方可使用。2.pda 培養(yǎng)基一般不需要調(diào) ph 。對于要調(diào)節(jié) ph 的培養(yǎng)基，一般用 ph 試紙測定其 ph 。如果培養(yǎng)基偏酸或偏堿時，可用lmol lnaoh 或 lmol lhcl 溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。調(diào)節(jié)時應(yīng)逐滴加入 naoh 或 hcl 溶液，防止局部過酸或過堿破壞培養(yǎng)基成分。3. 培養(yǎng)基在使用時也可以做成不含瓊脂的液體培養(yǎng)基，用于菌類的震蕩培養(yǎng)。4. 培養(yǎng)基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量為 的生長，減少干擾性0.1g/l 培養(yǎng)基，主要是為了抑制細(xì)菌高氏 1 號培養(yǎng)及配方：培養(yǎng)放線菌用 ，改良的高氏可溶性淀粉 2g ，kno3 0.1

9、g ，k2hpo4 0.05g ，mgso4 7h2o 0.05g ， nacl 0.05g ， feso4 7h2o 0.001g （母液），瓊脂 2g ，自來水 100ml ，ph 7.2 7.4 ，滅菌 1.05kg/cm2 ，20min配制時， 先用少量冷水， 將淀粉調(diào)成糊狀， 倒入少于所需水量的沸水中， 在火上加熱， 邊攪拌邊依次逐一溶化其他成分， 溶化后，補(bǔ)足水分到 100ml ，調(diào) ph ，121滅菌 20min 。高溫滅菌后，倒平皿前加入 10% 酚 2 滴至 100ml 培養(yǎng)基中混勻，將培養(yǎng)基倒入平皿內(nèi) 約 15ml/ 皿。高氏 1 號：可溶性淀粉（20g ），kno3（1g ），k2hpo4（0.5g ），mgso4 7h2o（0.