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文檔簡介
1、 血清甘油三酯和總膽固醇的測定血清甘油三酯和總膽固醇的測定 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.掌握甘油磷酸氧化酶法測定血清甘油三酯 和膽固醇氧化酶法測定血清總膽固醇的基本 原理。 2.熟悉甘油磷酸氧化酶法測定血清甘油三酯 和膽固醇氧化酶法測定血清總膽固醇操作方 法 。 3.了解血清甘油三酯和總膽固醇 測定的臨床意義。 甘油三酯+H2O CEH 甘油+脂肪酸 甘油+ATP 甘油激酶 甘油-3-磷酸+ADP 甘油-3-磷酸+O2甘油磷酸氧化酶磷酸二羥酮+H2O2 H2O2+酚+4-氨基安替吡啉 POD紅色醌亞胺+H2O 實(shí)驗(yàn)原理 膽固醇酯+H2O CEH 游離膽固醇+脂肪酸 游離膽固醇+O2COD膽甾烯酮+H2O2
2、H2O2+酚+4-氨基安替吡啉 POD紅色醌亞胺 +H2O 實(shí)驗(yàn)原理 實(shí)驗(yàn)原理 紅色醌亞胺在500nm有特征吸收,且生成量 與樣本中的膽固醇含量成正比,可通過測 定標(biāo)準(zhǔn)品反應(yīng)生成的醌亞胺的吸光度值, 計(jì)算出樣本中甘油三酯和膽固醇的濃度。 實(shí)驗(yàn)用品 1.甘油三酯試劑盒(GPO-PAP法) 2.膽固醇試劑盒(膽固醇氧化酶法) 3. 標(biāo)準(zhǔn)血清 TG:1.24mmol/l TC: 5.17mmol/L 4.混合血清 5.蒸餾水 6.分光光度計(jì) 7.水浴箱 操作步驟 分別取3支試管,標(biāo)明測定管(U)、標(biāo)準(zhǔn)管(S)、空白管(B) 混勻,37水浴10min,在500nm波長處比色,以空白管調(diào)零, 測定各管的
3、吸光度。 加入物(ml) B S U 血 清 - 0.03 標(biāo)準(zhǔn)液 - 0.03 - 蒸餾水 0.03 - - 試 劑 3.0 3.0 3.0 計(jì) 算 AU 甘油三酯/膽固醇濃度(mmolL)= - 標(biāo)準(zhǔn)濃度 AS 參考范圍 甘油三酯:0.7-1.7mmol/l 膽固醇:5.17mmol/L 臨床意義 血清血清TGTG增高增高 常見于家族性脂類代謝 紊亂、腎病綜合征、糖尿病、 甲狀腺功能減退、急性胰腺炎、 糖原積累病、膽道梗塞、原發(fā) 性甘油三酯增高癥、動(dòng)脈粥樣 硬化等。 臨床意義 血清血清TGTG降低降低 比較少見,慢性阻塞 性肺疾患、腦梗死、甲狀腺功 能亢進(jìn)、營養(yǎng)不良和消化吸收 不良綜合征等
4、可引起血清TG的 降低。 臨床意義 TC TC 增高增高 常見于動(dòng)脈粥樣硬化、原發(fā)性高脂血癥 ( 如家族性高膽固醇血癥、家族性 ApoB 缺 陷癥、多源性高膽固醇血癥、混合性高脂蛋 白血癥等 ) 、糖尿病、腎病 綜合征、總膽管阻塞、甲狀腺 功能減退、肥大性骨關(guān)節(jié)炎、 老年性白內(nèi)障和牛皮癬。 臨床意義 TC TC 降低降低 常見于低脂蛋白血癥、貧血、敗血癥、 甲狀腺功能亢進(jìn)、肝臟疾病、嚴(yán)重感染、 營養(yǎng)不良、腸道吸收不良和藥物 治療過程中的溶血性黃疸及慢 性消耗性疾病,如癌癥晚期等。 人體中的脂類大部分從食物中 來,所以甘油三酯高的人飲食 應(yīng)有節(jié)制,主食之中應(yīng)搭配部 分粗糧,副食品以魚類、瘦肉、
5、豆及豆制品、各種新鮮蔬菜、 水果為主。 生活小知識 有助降甘油三酯的食物,如: 沙丁魚、大馬哈魚、甜杏仁、 馬齒莧,還有豆類,大蒜等。 還有一些利于降低血脂防治動(dòng) 脈硬化的食物:海帶、紫菜、 木耳、金針菇、香菇、洋蔥等 可常吃。 生活小知識 飲牛奶宜去奶油,不加糖。蛋 類原則上每日不超過1個(gè),烹 調(diào)食物用素油,少吃油煎食物。 少吃花生,因其中含油甚多, 但可以食用核桃肉、瓜子仁、 果仁等。 生活小知識 生活小知識 將每100克食物中膽固醇 含量低于100毫克的食物 稱為低膽固醇食物 如鰻魚、娼魚、鯉魚、 豬瘦肉、牛瘦肉、羊瘦肉、 鴨肉等; 生活小知識 將每100克食物中膽固醇含 量為100200毫克的食物稱為 中度膽固醇食物 如草魚、鯽魚、鰱魚、黃 鱔、河鰻、甲魚、蟹肉、豬排、 雞肉等; 生活小知識 將每100克食物中膽固醇含 量為200300毫克的食物稱高 膽固醇食物 如豬腎、豬肝、豬肚、蚌 肉、蛀肉、蛋黃、蟹黃等。 吃什么可以降低膽固醇? 1、 多吃魚 2、多吃富含纖維的食物 3、多吃大豆制品 4、攝入足量的維生素C 注意事項(xiàng) 1.試劑中酶的質(zhì)量影響測定結(jié)果 2.血清TG易受飲食的影響 3.注意準(zhǔn)確加樣 方法評價(jià) TG:線性范圍為0.2-11.4mmol/l 準(zhǔn)確度:誤差10% 精密
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