(完整word版)浙大醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)真題2005-2011

1、2011 年一、名詞解釋（每題 3 分）：1、Okazaki fragments2、Trans-acting factor3、Multiple -cloning site4、Micro RNA5、Chaperone二、簡(jiǎn)答題（每題 5 分）1、簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)；2、真核細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄的主要調(diào)控點(diǎn)有哪些？3、表觀遺傳學(xué)機(jī)制如何調(diào)控染色體4、簡(jiǎn)述真核細(xì)胞中 RNA 聚合酶的類型及功能；5、真核生物 RNA 的類型；6、什么是基因突變？真核細(xì)胞基因突變的主要類型？7、什么是 組學(xué) ？常有的組學(xué)技術(shù)有哪些？8、簡(jiǎn)述兔源多克隆抗體的制備過程；9、研究蛋白質(zhì) -蛋白質(zhì)相互作用的方法有哪些？三、問答題（每

2、題 10 分）：1、什么是蛋白質(zhì)修飾？細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)修飾主要類型有哪些？其主要功能是什么？2、大規(guī)模臨床證據(jù)顯示非受體酪氨酸磷酸酶在乳腺腫瘤轉(zhuǎn)移灶組織中高表達(dá)。請(qǐng)?jiān)O(shè) 計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)研究方案在細(xì)胞水平探討該蛋白在腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移過程中的可能作用。3、什么是模式生物？為什么醫(yī)學(xué)研究中需要模式生物？4、結(jié)合你的實(shí)際經(jīng)歷和知識(shí)背景，談?wù)劮肿由飳W(xué)在醫(yī)學(xué)中的作用。 2010 年一、名詞解釋（每題 3 分）：1、基因與基因組：2、基因診斷：3、半保留復(fù)制：4、疾病模型與模式：5、ncRNA：二、簡(jiǎn)答題：1、為什么個(gè)體基因型可以用于健康風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)？2、蛋白質(zhì)哪些理化性質(zhì)可以用于檢測(cè)和鑒定？3、蛋白質(zhì)非共價(jià)鍵作用包括？

3、蛋白質(zhì)相互作用機(jī)制？4、細(xì)胞死亡的方式？5、肝細(xì)胞對(duì)醫(yī)學(xué)的作用？6、基因轉(zhuǎn)錄、翻譯和基因表達(dá)的區(qū)別？7、DNA 損傷類型、檢測(cè)方式？8、蛋白質(zhì)為什么能夠細(xì)胞定位？怎樣檢測(cè)蛋白質(zhì)定位？9、為什么同一個(gè)體的細(xì)胞基因組相同，蛋白質(zhì)組不同？怎樣檢測(cè)蛋白質(zhì)組差異？三、問答題：1、談?wù)勣D(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的定義 ? 你對(duì)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究有何建議？2、表觀遺傳機(jī)制？如何研究？有何意義？3、設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)說明信號(hào)傳導(dǎo)的過程？（研究信號(hào)通路，信號(hào)從細(xì)胞外傳至細(xì)胞內(nèi)，往往 是形成一個(gè)復(fù)合物，從而引起效應(yīng)，請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)方法，了解整個(gè)信號(hào)通路的傳遞過程）4、端粒和端粒酶為何能獲諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)？2009 年一、名詞解釋1、種系分析法（系譜

4、分析） ：2、癌基因和抑癌基因：3、順式作用元件和反式作用因子：4、表觀遺傳學(xué)（遺傳表觀學(xué)性狀） ：5、基因表達(dá)：二、簡(jiǎn)答 試述基因、基因組，蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)組。 舉例說明蛋白質(zhì)之間相互作用的研究方法有哪些？ 什么是基因表達(dá)及其調(diào)控機(jī)制？（基因表達(dá)的主要過程及調(diào)控的主要位點(diǎn)？） 設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)以證明 DNA 是遺傳物質(zhì)?；虿僮髦械某Ｓ霉ぞ哂心男?？ 舉例說明蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。蛋白質(zhì)翻譯后加工的內(nèi)容？單核苷酸多態(tài)性？ 基因突變及生物學(xué)意義？10、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與疾病的關(guān)系？三、問答題：有一個(gè)蛋白X,發(fā)現(xiàn)其在血管內(nèi)皮細(xì)胞中與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路A有密切聯(lián)系，如何證明在此細(xì)胞中與蛋白 X 相互作用的蛋白。HG

5、P 已完成，談?wù)勀銓?duì)其后續(xù)計(jì)劃的認(rèn)識(shí)。 根據(jù)國(guó)內(nèi)外進(jìn)展，說明分子生物學(xué)與醫(yī)學(xué)的關(guān)系 . 結(jié)合環(huán)境污染，舉例說明環(huán)境污染與基因的關(guān)系說明疾病的發(fā)生機(jī)制？5、 某信號(hào)A與血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)蛋白 B可發(fā)生信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)說明細(xì)胞內(nèi)蛋白B發(fā) 生相互作用的蛋白？2008 年（ 1）一、名詞解釋1、核糖開關(guān)：2、反式作用因子：3、質(zhì)粒：4、鋅指結(jié)構(gòu)：5 、分子雜交基因組：6、hnRNA ：7、cDNA ：8、密碼的簡(jiǎn)并性：9、信號(hào)肽：二、簡(jiǎn)答題（ 30 分）：1、什么是乳糖操縱子，簡(jiǎn)述乳糖操縱子的正負(fù)調(diào)節(jié)機(jī)制？2、簡(jiǎn)述原核和真核細(xì)胞在核酸翻譯成蛋白質(zhì)的過程中的異同點(diǎn)？3、質(zhì)粒的不相容性和相容性指的是什么

6、？其分子基礎(chǔ)機(jī)制是什么？4、核酸凝膠電泳的基本原理和方法是什么？5 談?wù)勀愕拇T士論文的基本內(nèi)容，研究方法和結(jié)果，有什么收獲，打算你的博士生涯如何度 過？三、問答題（ 40 分）：1、簡(jiǎn)述3種由PCR技術(shù)衍生出來的技術(shù)及其應(yīng)用？2、試述一條反向遺傳克隆功能基因的途徑。 （同下）3、近年來有些什么分子生物學(xué)研究的成果應(yīng)用到實(shí)際應(yīng)用當(dāng)中？4、 闡述一種細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的途徑（從接受信號(hào)到調(diào)控基因表達(dá)）。5、給你一個(gè) cDNA 序列 ,你如何表達(dá) ,純化得到所需要的目的蛋白質(zhì)？ 2008 年（ 2）一、名詞解釋I 、蛋白質(zhì)的超二級(jí)結(jié)構(gòu)：2、核酸分子雜交：3 、基因組：4、操縱子：5、反式作用元件：6、小衛(wèi)

7、星 DNA：7 、基因表達(dá)：8、逆轉(zhuǎn)錄：9、管家基因：10 、信號(hào)肽：II 、基因打靶：12 、基因治療：二、論述題1 、 DNA 的復(fù)制過程的基本特點(diǎn)和要點(diǎn)。2、G-蛋白信號(hào)介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。3、DNA 損傷可以分為哪幾類？相應(yīng)的修復(fù)機(jī)制是什么？4、蛋白質(zhì)組的概念及其研究意義。2007 年一、名詞解釋1 、質(zhì)粒：2、密碼的簡(jiǎn)并性：3、信號(hào)肽：4、反式作用子：5、基因組：6、hnRNA：7、cDNA：8、結(jié)構(gòu)域：9、EMSA：10、轉(zhuǎn)座子：二、簡(jiǎn)答題：1、何謂乳糖操縱子，以乳酸操縱子為例說明基因表達(dá)與阻遏？2、核酸凝膠電泳的基本原理和方法是什么？ （同前）3、簡(jiǎn)述原核和真核細(xì)胞在核酸翻譯成蛋

8、白質(zhì)的過程中的異同點(diǎn)？（同前）4、DNA 克隆的篩選方法及原理。5、何謂質(zhì)粒的不相容性和相容性？其分子基礎(chǔ)機(jī)制是什么？（同前）三、問答題：1、試述一條反向遺傳克隆功能基因的途徑。 （同前）2、假定事先給你一個(gè) cDNA 序列，你如何表達(dá)、純化得到目的蛋白質(zhì)？3、闡述一種細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的途徑（從接受信號(hào)到調(diào)控基因表達(dá)） （同前）4、ELISA方法的基本原理，方法，及其種類？5、原核生物和真核生物基因結(jié)構(gòu)的差別有哪些？怎樣去用實(shí)驗(yàn)證明呢？2006 年一、名詞解釋： （25%）1、 RFLP限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性，是由DNA變異（產(chǎn)生新的酶切位點(diǎn)或消除原有的酶切位點(diǎn)）導(dǎo)致在限制性核酸內(nèi)切酶酶切時(shí)產(chǎn)生不同

9、的長(zhǎng)度片段?？山柚鶶outhern Blotting 或 PCR的方法進(jìn)行檢測(cè)。2、 SSR簡(jiǎn)章序列重復(fù)多態(tài)性，引物是根據(jù)微衛(wèi)星DNA重復(fù)序列兩翼的特定短序列設(shè)計(jì)， 用來擴(kuò)增重復(fù)序列本身。 由于重復(fù)的長(zhǎng)度變化極大， 所以是檢測(cè)多態(tài)性的一種有效方法。 其 特點(diǎn)包括： 一般檢測(cè)到的是一個(gè)單一的多等位基因位點(diǎn)， 共顯性遺傳， 故可鑒別雜合子與純 合子；得到的結(jié)果重復(fù)性很高。3、 EST表達(dá)序列標(biāo)簽，是指從不同的組織構(gòu)建的cDNA文庫中，隨機(jī)挑選不同的克隆，進(jìn)行克隆的部分測(cè)序所產(chǎn)生的cDNA序列。隨著高通量測(cè)序技術(shù)的進(jìn)步，使人們?cè)絹碓较嘈牛笠?guī)模地產(chǎn)生EST結(jié)合生物信息學(xué)的手段，將為人們提供一種快速有

10、效的發(fā)現(xiàn)新基因的方法。4、STS序列標(biāo)簽位點(diǎn)，是由特定引物序列所界定的一類標(biāo)記的統(tǒng)稱，短的在基因組上是可 以被唯一操作的序列，因而可以確定在物理圖譜上的特定位置。5、 CAP: CAP即分解代謝物基因活化蛋白，是一種激活蛋白，因?yàn)榧?xì)菌的許多啟動(dòng)子為弱啟 動(dòng)子，本身與RNA聚合酶的作用較弱，在有 CAP蛋白這類激活蛋白存在下，可使 RNA聚合 酶與啟動(dòng)子的親和力增強(qiáng)， CAP蛋白的活性強(qiáng)烈依賴 cAMP。6、 AFLP擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性，其特點(diǎn)是把RFLP和PCR結(jié)合了起來。其基本步驟是：把DNA進(jìn)行限制性內(nèi)切酶酶切，然后選擇特定的片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增（在所有的限制性片段兩端加上帶有特定序列的“接

11、頭” ，用與接頭互補(bǔ)的 3端有幾個(gè)隨機(jī)選擇的核苷酸的引物進(jìn) 行特異PCR擴(kuò)增，只有那些與 3端嚴(yán)格配對(duì)的片段才能得到擴(kuò)增），再在有高分辨力的測(cè)序膠上分開這些擴(kuò)增產(chǎn)物，用放射性法、熒光法或銀染染色法均可檢測(cè)之。7、SNP 單核苷酸多態(tài)性，是一種較為新型的分子標(biāo)記，其依據(jù)的是一位點(diǎn)的不同等位基 因之間常常只有一個(gè)或幾個(gè)核苷酸的差異， 因此在分子水平上對(duì)單個(gè)核苷酸的差異進(jìn)行檢測(cè) 是很有意義的。8、FISH 熒光原位雜交技術(shù)，是一種利用非放射性的熒光信號(hào)對(duì)原位雜交樣本進(jìn)行檢測(cè)的 技術(shù)。 它將熒光信號(hào)的高靈敏度、 安全性， 熒光信號(hào)的直觀性和原位雜交的高準(zhǔn)確性結(jié)合起 來，通過熒光標(biāo)記的 DNA探針與待測(cè)

12、樣本的 DNA進(jìn)行原位雜交，在熒光顯微鏡下對(duì)熒光信 號(hào)進(jìn)行辨別和計(jì)數(shù)， 從而對(duì)染色體或基因異常的細(xì)胞、 組織樣本進(jìn)行檢測(cè)和診斷， 為各種基 因相關(guān)疾病的分型、預(yù)前和預(yù)后提供準(zhǔn)確的依據(jù)。9、 Genome :基因組，有機(jī)體或細(xì)胞中的所有 DNA,包括核中的染色體和線粒體中的DNA。10、 RNA in situ hybridization : RNA原位雜交，是利用 cDNA為探針來檢測(cè)與其互補(bǔ)的mRNA 鏈在細(xì)菌或其他真核細(xì)胞中的位置，是檢測(cè)基因組織特性表達(dá)的常用方法。11、單克隆抗體:每個(gè) B 淋巴細(xì)胞有合成一種抗體的遺傳基因。動(dòng)物脾臟有上百萬種不同 的 B 淋巴細(xì)胞系，含遺傳基因不同的 B

13、 淋巴細(xì)胞合成不同的抗體。當(dāng)機(jī)體受抗原刺激時(shí)， 抗原分子上的許多決定簇分別激活各個(gè)具有不同基因的 B 細(xì)胞。被激活的 B 細(xì)胞分裂增殖 形成該細(xì)胞的子孫， 即克隆由許多個(gè)被激活 B 細(xì)胞的分裂增殖形成多克隆， 并合成多種抗體。 如果能選出一個(gè)制造一種專一抗體的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)， 就可得到由單細(xì)胞經(jīng)分裂增殖而形成細(xì) 胞群，即單克隆。單克隆細(xì)胞將合成一種決定簇的抗體，稱為單克隆抗體。12、基因芯片: 所謂基因芯片，是指將大量探針分子固定于支持物上，然后與標(biāo)記的樣品進(jìn)行雜交， 通過檢測(cè)雜交信號(hào)的強(qiáng)弱進(jìn)而判斷樣品中靶分子的數(shù)量。 由于用該技術(shù)可以將極其 大量的探針同時(shí)固定于支持物上，所以一次可以對(duì)大量的D

14、NA分子或RNA分子進(jìn)行檢測(cè)分析，從而解決了傳統(tǒng)核酸印跡雜交，技術(shù)復(fù)雜、自動(dòng)化程度低、檢測(cè)目的分子數(shù)量少、效率 低等不足，而且，通過設(shè)計(jì)不同的探針陣列，用一定的分析方法，還可以用于序列分析，稱 作雜交測(cè)序。二、 描述cDNA文庫構(gòu)建原理與方法（25%）：（ 1）cDNA獲得方法，（2）克隆方法，（3）文 庫質(zhì)量定義。答：cDNA：以mRNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄酶合成與 mRNA互補(bǔ)的DNA（complementary DNA， cDNA），再?gòu)?fù)制成雙鏈 cDNA片段，與適當(dāng)載體連接后轉(zhuǎn)入受菌體，擴(kuò)增為 cDNA文庫（cDNA library），然后再采用適當(dāng)方法從cDNA文庫中篩選出目的 cDN

15、A。與基因組 DNA文庫類似，由總 mRNA 制作的 cDNA 文庫包括了細(xì)胞全部 mRNA 信息，自然也含有我們感興趣的編碼 cDNA。當(dāng)前發(fā)現(xiàn)的大多數(shù)蛋白質(zhì)的編碼基因幾乎都是這樣分離的。（1） cDNA獲得方法：Total RNA的提取；mRNA的分離；cDNA雙鏈合成：Superscript II RT合成第一鏈，cDNA第二鏈的合成，雙鏈 cDNA末端補(bǔ)平，EcoR I adaptor加接，雙鏈 cDNA末端的磷酸化及 Xho I酶切，膠回收cDNA。（2） 克隆方法： 載體制備：p Blue Script II 的提取， p Blue Script II 的雙酶切消化，載體去磷酸化，

16、載體效率檢測(cè)； cDNA雙鏈和載體的連接：連接，檢測(cè)（PCR方法）；電轉(zhuǎn)化：電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的制備，連接產(chǎn)物純化，電轉(zhuǎn)化；快速鑒定、菌落PCRp Blue ScriptcDNA文庫擴(kuò)增。（3）文庫質(zhì)量定義：評(píng)價(jià)一個(gè)文庫是否有實(shí)用價(jià)值主要在于文庫的含量和插入片段的大小兩個(gè)方面。 所構(gòu)建的文庫中必須有足夠多的克隆數(shù)， 這樣才能確?；蚪M cDNA 中的每一個(gè) 序列至少有一個(gè)拷貝存在于重組文庫中，為達(dá)到這一要求，文庫的容量應(yīng)不小于1.7 X 105 ,同時(shí)為保證cDNA片段的完整性，插入片段的平均大小應(yīng)不小于1kb。三、闡述基因突變的概念及引起突變的可能途徑（25%）：（ 1）化學(xué)誘變，（2）物理誘

17、變，（3）T-DNA插入，（4）缺失、插入，（5）無義突變概念，（6）堿基修復(fù)概念基因突變的特點(diǎn)。答：基因突變屬分子水平上的變異， 是指染色體上個(gè)別基因所發(fā)生的分子結(jié)構(gòu)的變化， 基因 突變?cè)谧匀唤缙毡榇嬖凇?基因突變的方式很多，主要有： （1）化學(xué)誘變，基因突變可以由 某些化學(xué)物質(zhì)所引起， 這些化學(xué)物質(zhì)稱為化學(xué)誘變劑。 現(xiàn)已知很多的化學(xué)誘變劑， 它們誘變 的機(jī)制是不同的。在 DNA 復(fù)制過程由于堿基類似物的取代，堿基的化學(xué)修飾以及堿基的插 入和缺失都會(huì)引起突變。 （ 2）物理誘變，利用物理因素引起基因突變的稱物理誘變，如X射線、紫外線、電離輻射等。 （3） T-DNA插入，改變讀碼或變成假基因

18、。（4）移碼突變：基因中插入或者缺失一個(gè)或幾個(gè)堿基對(duì)，會(huì)使DNA的閱讀框架（讀碼框）發(fā)生改變，導(dǎo)致插入或缺失部位之后的所有密碼子都跟著發(fā)生變化， 結(jié)果產(chǎn)生一種異常的多肽鏈。 移碼突變誘 發(fā)的原因是一些像吖啶類染料分子能插入DNA分子，使DNA復(fù)制時(shí)發(fā)生差錯(cuò)，導(dǎo)致移碼突變。（ 5）無義突變， 由于一對(duì)或幾對(duì)堿基對(duì)的改變而使決定某一氨基酸的密碼子變成一個(gè)終止密碼子的基因突變。（6）堿基修復(fù)：DNA損傷的修復(fù)系統(tǒng)主要有以下幾個(gè)：損傷堿基 的直接修復(fù)；切除修復(fù)，包括堿基切除修復(fù)、核苷酸切除修復(fù)和DNA交鏈的切除修復(fù)；錯(cuò)配修復(fù)；重組修復(fù)，又稱復(fù)制后修復(fù)；跨損傷DNA合成，這是一種利用損傷核苷酸為模板，通

19、過 DNA聚合酶I使堿基摻入到復(fù)制終止處進(jìn)行DNA合成，從而延長(zhǎng)DNA鏈的修復(fù)?；蛲蛔兊奶攸c(diǎn)為： 第一，基因突變?cè)谏锝缰惺瞧毡榇嬖诘模?第二，基因突變是隨機(jī)發(fā)生的； 第三，在自然狀態(tài)下，對(duì)一種生物來說，基因突變的概率是很低的；由于任何一種生物都是長(zhǎng)期進(jìn)化過程的產(chǎn)物， 它（25%）經(jīng)典遺傳學(xué)是從生物的性狀、 表型到遺傳物質(zhì)第四， 大多數(shù)基因突變對(duì)生物體是有害的， 們與環(huán)境條件已經(jīng)取得了高度的協(xié)調(diào)； 第五，基因突變是不定向的。四、闡述一條反向遺傳克隆功能基因的途徑 答：反向遺傳學(xué)是相對(duì)于經(jīng)典遺傳學(xué)而言的。來研究生命的發(fā)生與發(fā)展規(guī)律。 反向遺傳學(xué)則是在獲得生物體基因組全部序列的基礎(chǔ)上，通過對(duì)靶基因進(jìn)行必要的加工和修飾，如定點(diǎn)突變、基因插入 /缺失、基因置換等，再按組成