HPV分型檢測的介紹（經(jīng)典實用）

1、HPV分型檢測的介紹 1 2 3 HPV分型檢測的介紹 HPV分型檢測的介紹 1.1 宮頸癌的概況宮頸癌的概況 v 宮頸癌是目前威脅女性健康的主要疾病，在全世界范圍內(nèi) 也是導(dǎo)致女性死亡的第二大癌癥。 v 世界上每世界上每2 2分鐘就有一位婦女死于宮頸癌。分鐘就有一位婦女死于宮頸癌。 v 我國宮頸癌兩率很高，屬于最嚴(yán)重的腫瘤之一。（每年有 15萬新發(fā)病例，每年約有10萬名婦女死于宮頸癌）。 v 發(fā)病年齡一般在4060歲。 v 與公共衛(wèi)生狀況直接相關(guān)。 HPV分型檢測的介紹 上世紀(jì)70年代末， Harald zur Hausen 首先提出人乳頭 瘤病毒(HPV)可能 是宮頸癌的致癌 病毒； 1.2

2、 宮頸癌與宮頸癌與HPV的研究歷程的研究歷程 1977年，Laverty 在電鏡中觀察到 宮頸癌活檢組織 中存在人乳頭瘤 病毒顆粒； 1989年左右， Keerti Shah等發(fā) 現(xiàn)99.7%99.7%的宮頸癌的宮頸癌 與與HPVHPV感染有關(guān)感染有關(guān)， 證實了宮頸癌與 HPV感染有直接關(guān) 系； HPV的感染使宮頸癌的相對危險性增加250倍 HPV分型檢測的介紹 v1995年 國際癌癥研究機構(gòu) (IARC) 專題討論會通過： HPV感染是宮頸癌的主要感染是宮頸癌的主要 原因原因； v2005年 IARC/WHO推薦HPV 檢測可以用于宮頸癌 篩查； HPV分型檢測的介紹 v2008年10月6日

3、公布Harald zur Hausen獲諾貝爾生 理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。 哈拉爾德楚爾豪森 HPV分型檢測的介紹 1.3 宮頸癌的致病因素宮頸癌的致病因素 HPV分型檢測的介紹 v 性接觸傳播：性接觸傳播： 丈夫陰莖HPV的存在可使妻子宮頸受染的危險增加9 倍；相同的HPV型別可以在性伴侶中檢出；與此相 反，處女通常是檢測不到HPV感染。 v 非性直接接觸感染：非性直接接觸感染：通過接觸病變部位及病人 分泌物感染； v 間接接觸：間接接觸：通過病人的衣物和用品感染； v 母嬰傳播：母嬰傳播：在分娩過程中通過產(chǎn)道直接接觸傳播， 還可以通過血液、羊水及胎盤傳播，或者可能通過 嬰兒出生后與攜帶HPV的母親密

4、切接觸傳染。 1.4 HPV的傳播途徑的傳播途徑 HPV分型檢測的介紹 HPV分型檢測的介紹 HPV感染潛伏期與發(fā)病期感染潛伏期與發(fā)病期 v 低危型HPV感染平均持續(xù)時間是4.8個月 v 高危型HPV感染平均持續(xù)時間是8個月 v HPV感染的最常見的結(jié)局是沒有明顯的臨床表現(xiàn)，絕大部 分會被機體免疫力自動清除 v 只有持續(xù)持續(xù)的高危型高危型的HPV感染才會發(fā)生癌前病變或?qū)m頸癌。 v 一般平均8-24月可發(fā)生輕度、中度和重度的宮頸癌前病 變（CIN1、CIN2和CIN3）；再平均5-10年才可發(fā)生浸 潤癌，只要早查早治，是完全可以避免死于宮頸癌的。 唯一病因明確唯一病因明確 唯一可以早期預(yù)防和治療

5、唯一可以早期預(yù)防和治療 唯一可以徹底根除的癌癥唯一可以徹底根除的癌癥 HPV分型檢測的介紹 1.5 HPV病毒學(xué)知識病毒學(xué)知識 v 小環(huán)狀雙鏈DNA病毒，約8Kb v 顆粒直徑為5055nm，無包膜 v 由72個病毒殼粒包被 v 在自然界中穩(wěn)定性好，廣泛分布 v 較高的種依賴性 v 嗜上皮性，在基底層細胞中潛伏 v 在鱗狀上皮細胞中復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯、 增殖 HPV(human papillomavirus)是一組病毒的總稱是一組病毒的總稱 HPV分型檢測的介紹 早期區(qū)早期區(qū)(early region, E) 含有E1、E2、E4、E5、E6、E7共6 個基因， 是維持病毒復(fù)制、編碼病毒蛋白、維

6、持細胞內(nèi)病毒的高拷貝數(shù)的基因 晚期區(qū)晚期區(qū)(late region, L) 長控制區(qū)長控制區(qū)(long control region, LCR) HPV分型檢測的介紹 HPV16 L1: 主要衣 殼蛋白，是 疫苗研發(fā)的 主要成分 L2: 次要衣殼蛋 白，是抗體的主 要識別位點 E4：結(jié)合并破壞中表層細胞角蛋 白網(wǎng)，形成中表層細胞的挖空外觀 HPV 的主要致癌基因 n E6 通過抑制p53而阻斷凋亡 n E7 通過抑制pRB使細胞周期失控 E2：負(fù)性調(diào)節(jié) E6和E7，維持 凋亡和細胞周期 的調(diào)控 病毒整合時會破 壞E2基因的結(jié) 構(gòu)，導(dǎo)致失活 X p53 是一種核蛋白，負(fù)向調(diào)節(jié)細胞的生長和分化。是

7、一種核蛋白，負(fù)向調(diào)節(jié)細胞的生長和分化。p53的的 降解失活阻礙了細胞對降解失活阻礙了細胞對DNA損傷的反應(yīng)，由此導(dǎo)致細胞遺損傷的反應(yīng)，由此導(dǎo)致細胞遺 傳學(xué)性狀改變的積累，進而產(chǎn)生惡變的基因型。傳學(xué)性狀改變的積累，進而產(chǎn)生惡變的基因型。 pRB是重要的抑癌基因，直接參與細胞周期的調(diào)控。是重要的抑癌基因，直接參與細胞周期的調(diào)控。 pRB功能失效，改變了細胞生長周期的調(diào)控機制，使細功能失效，改變了細胞生長周期的調(diào)控機制，使細 胞永生化，并對惡性病變的防御機制進一步影響。胞永生化，并對惡性病變的防御機制進一步影響。 HPV分型檢測的介紹 1.6 HPV的侵入、復(fù)制和釋放的侵入、復(fù)制和釋放 侵入：侵入：

8、病毒 微創(chuàng)口 微創(chuàng)口 皮膚黏膜表層 感染感染 （副）基底層細胞 附加體形式附加體形式 在宿主細胞核內(nèi)復(fù)制 復(fù)制：復(fù)制：依賴于上皮細胞的分化，在基底層上層細胞中開始復(fù)制 釋放：釋放：在表皮細胞中完成裝配并釋放完整病毒顆粒。當(dāng)表皮細胞脫落時，在皮膚表 面可發(fā)現(xiàn)病毒顆粒。 HPV分型檢測的介紹 1.7 宮頸組織與宮頸組織病變宮頸組織與宮頸組織病變 HPV分型檢測的介紹 輕度不典型增生(CIN)： 中度不典型增生(CIN )重度不典型增生(CIN ) :是一組病變的統(tǒng)稱，包括宮頸不典型增生和原位癌， 為宮頸浸潤癌的癌前期病變。 通常將CIN分為3級，以輕/中/重級不典型增生來區(qū)分 HPV分型檢測的介紹

9、 正常宮頸正常宮頸 感染感染 清除清除 HPV 感染感染 演進演進 消退消退 癌前病變癌前病變癌癌 浸潤浸潤 一過性一過性HPV感染感染持續(xù)性持續(xù)性HPV感染感染 E 7 E 6 E 2E6 E7 E 2 HPV分型檢測的介紹 一過性一過性HPV感染感染持續(xù)性持續(xù)性HPV感染感染 LSILHSIL CIN CIN CIN Very mild /mild dysplasiaModerate dysplasia S e v e r e dysplasia In situ carcinoma I n v a s i v e carcinoma HPV溫和輕微的激活宿主細胞的遺 傳學(xué)變化 HPV嚴(yán)重的

10、破壞宿主的遺傳學(xué)平衡 E6和E7低水平的表達，以維持病毒 基因組的復(fù)制和宿主細胞的生長 E6和E7高水平表達，宿主細胞凋亡被阻斷，細胞周期失控， 宿主細胞開始發(fā)生惡變 E2負(fù)責(zé)E6、E7的負(fù)調(diào)控。保持宿主 細胞的分化和成熟；確保能夠產(chǎn)生 完成的病毒顆粒 E2基因在病毒DNA整合入宿主基因組時被破壞，導(dǎo)致失去對 E6和E7的負(fù)調(diào)控的能力 在上皮分化的終末階段 L1和L2基因開始表達并組裝形成 病毒衣殼完整的病毒顆粒從宿主 細胞內(nèi)釋放出來 大量E4 聚集溶解宿主細胞骨架蛋 白呈現(xiàn)挖空細胞的外觀 在宿主細胞發(fā)生惡變時 細胞核的異形性：倍體的增多或非整倍體的出現(xiàn) 細胞分裂活性：持續(xù)增生 喪失分化能力：

11、不同程度的細胞不成熟性 HPV分型檢測的介紹 1.8 HPV感染引起的疾病感染引起的疾病 HPV分型檢測的介紹 疾病疾病感染感染HPV型別型別 扁平疣扁平疣 3、10、27、28、41 尋常疣尋常疣1、2、4、7、27、29、40、54 疣狀表皮發(fā)育不良疣狀表皮發(fā)育不良 5、8、12、14、15、17、19、25、38、46、 47、49、50 尖銳濕疣尖銳濕疣6、11、16、18、31、33、34、35、39、51 宮頸上皮內(nèi)瘤宮頸上皮內(nèi)瘤6、11、 16、18、31、33、35、43、44、51、 56、58、61 浸潤性宮頸癌浸潤性宮頸癌16、18、31、33、 35、39、45、51、

12、52、56、 58、59、68 陰莖癌陰莖癌16、18 女陰癌女陰癌16、18 HPV分型檢測的介紹 HPV分型檢測的介紹 HPV分型檢測的介紹 2.1 乳頭瘤病毒的分類依據(jù)乳頭瘤病毒的分類依據(jù) 主要以病毒基因組中L1區(qū)的DNA同源性作為分類依據(jù)： v 屬屬：病毒全基因組DNA同源性23%43%；同時病毒基因 組L1區(qū)DNA同源性在60%以下； v 種種：病毒基因組L1區(qū)DNA同源性介于60%70%； v 型型：病毒基因組L1區(qū)DNA同源性介于71%89%； v 亞型及變異株亞型及變異株：L1區(qū)DNA同源性在90%100%。 HPV分型檢測的介紹 HPV的型別的型別 v 目前已發(fā)現(xiàn)超過型別的人

13、乳頭瘤病毒（HPV）。 v 依據(jù)與生殖道腫瘤相關(guān)性，將HPV分為： HPV分型檢測的介紹 2.2 HPV分型檢測的意義分型檢測的意義 （1）預(yù)測受檢者發(fā)病的風(fēng)險度，確定篩查間隔）預(yù)測受檢者發(fā)病的風(fēng)險度，確定篩查間隔 女性感染HPV16或18型患宮頸癌及癌前病變的風(fēng)險 HPV分型檢測的介紹 對丹麥哥本哈根11088名登記在冊的婦女進行了為 期數(shù)年的跟蹤隨訪研究，對受檢人群進行了宮頸細胞涂 片檢查、HPV檢測和組織病理檢查。 該研究中假定連續(xù)兩次HPV檢測陰性的危險系數(shù)為 1.0，各種持續(xù)感染情況的危險系數(shù)是其與1.0的比值。 Susanne K Kjaer,et al. Type specifi

14、c persistence of high risk human papillomavirus (HPV) as indicator of high grade cervical squamous intraepithelial lesions in young women:population based prospective follow up study. BMJ VOLUME 325 14 SEPTEMBER 2002 （2）區(qū)分持續(xù)（重復(fù)）感染與一過性感染）區(qū)分持續(xù)（重復(fù)）感染與一過性感染 HPV分型檢測的介紹 HPV持續(xù)感染的危險性評定持續(xù)感染的危險性評定 持續(xù)感染情況 （相隔2

15、年） 致非典型鱗狀 上皮細胞的危 險系數(shù) 致宮頸低度病變 的危險系數(shù) 致宮頸高度病變 的危險系數(shù) 連續(xù)兩次檢測都為 陰性 1.01.01.0 第一次第二次都為 陽性，但感染型別 不同 16.873.2192.7 第一次第二次都為 陽性，感染型別至 少有一種相同 沒有病例117.9813.0 HPV分型檢測的介紹 v 對巴西1611名婦女在4個月間隔2次檢測HPV，HPV16、 18持續(xù)陽性致HSIL風(fēng)險性大于其他高危型HPV持續(xù)陽 性。（Nicolas F. Schlecht, et.al. JAMA. 2001; 286(24): 3106-3114. ） 宮頸癌的必要條件 高危型的HPV感

16、染 HPV持續(xù)感染 HPV分型檢測的介紹 （3）區(qū)分單一感染和多重感染）區(qū)分單一感染和多重感染 v 早期的文獻報道，HPV的多重感染與宮頸癌直接相關(guān)。 v 現(xiàn)在越來越多的報道發(fā)現(xiàn)，HPV的多重感染與宮頸癌之 間，不存在顯著性的關(guān)系。 v 例如：一個病人的HPV檢測結(jié)果是18、51的多重感染， 但隨訪后18型被免疫清除了，只有51型，由于51型的風(fēng) 險低，那么繼續(xù)隨訪并給予相應(yīng)的干預(yù)即可。 v 如果采用定量的方法，兩次結(jié)果的載量都很高，沒有型 別的輔助，很容易就會判讀為高危亞型持續(xù)感染而給予 過度的治療。 HPV分型檢測的介紹 （4）針對不同型別的感染采取不同的處理方案）針對不同型別的感染采取不

17、同的處理方案 v 據(jù)統(tǒng)計約有70%以上的生育年齡的婦女都曾有HPV感染 v 90%以上婦女能自動清除HPV感染 v 宮頸癌是一種常見感染常見感染的罕見結(jié)局罕見結(jié)局 v 相同細胞及組織學(xué)類型HPV陽性與陰性要區(qū)別對待 v 不同HPV感染型別要區(qū)別對待 例如：建議HPV16,18型的患者直接進行陰道鏡檢查；而對于其 他型別的感染，要結(jié)合細胞學(xué)診斷，一般不需要采取任何治療 方法，但需要按時隨訪。 HPV分型檢測的介紹 2.3 HPV分型檢測的應(yīng)用分型檢測的應(yīng)用 篩查篩查 陰道鏡適應(yīng)癥陰道鏡適應(yīng)癥 ASCUS分流分流 宮頸病變隨訪宮頸病變隨訪 指導(dǎo)疫苗的使用指導(dǎo)疫苗的使用 HPV分型檢測的介紹 （1）

18、篩查）篩查 v 從癌前病變發(fā)展到宮頸癌需要多年的時間(58年以上)， 而且病情的發(fā)展具有可逆性具有可逆性。如果篩查和治療的及時、 徹底，病變就會消失，身體恢復(fù)健康。反之，就會朝癌癥 發(fā)展。 HPV分型檢測的介紹 HPV+細胞學(xué) 陰道鏡檢查 組織學(xué)診斷 宮頸病變的三階梯診斷技術(shù)是在國內(nèi)廣泛推行的針對 宮頸癌及宮頸癌前病變的規(guī)范化診治流程。 由HPV檢測、宮頸細胞學(xué)、陰道鏡與組織病理學(xué)組成: 宮頸病變的三階梯診斷宮頸病變的三階梯診斷 HPV分型檢測的介紹 篩查方法：篩查方法： 敏感性差、假陰性率高（2%50%）、 假陽性率高、漏診多。 可重復(fù)性差，受閱片人主觀影響。 敏感度、準(zhǔn)確性有所提高 用途廣

19、泛 沒有改變傳統(tǒng)的閱片方式，與人為主 觀因素直接相關(guān)。 靈敏度高、特異性強（均高于95%） 可預(yù)測宮頸癌的風(fēng)險陰性預(yù)測值高 （99.9%） HPV分型檢測的介紹 HPV和細胞學(xué)檢測在子宮頸癌篩查中的對比和細胞學(xué)檢測在子宮頸癌篩查中的對比 對比項目對比項目HPV DNA檢測檢測細胞學(xué)（巴氏細胞學(xué)（巴氏/液基）檢測液基）檢測 檢測方法檢測方法分子生物學(xué)形態(tài)學(xué) 檢測病變程度檢測病變程度 HPV潛伏期、感染期、亞臨床期、 臨床癥狀期、癌癥相關(guān)期 臨床癥狀期、癌癥相關(guān)期 敏感度敏感度 98以上，可以檢查出在PAP檢測 中表現(xiàn)為假陰性的婦女 專家水平為80-85 陰性預(yù)測值陰性預(yù)測值 99以上，一次檢測陰

20、性可3-5年 內(nèi)處于安全期 低 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度高低 客觀性客觀性 客觀的檢測方法，不受人為因素的 影響，結(jié)果可靠。 主觀檢測方法，無法避免主觀的 人為因素的干擾，結(jié)果有一定的 可疑性。 重復(fù)性重復(fù)性目前重復(fù)性最好的HPV檢測 因取材、制片、閱片等客觀因素 的影響，重復(fù)性差。 經(jīng)濟效益經(jīng)濟效益 陰性者不用多次重復(fù)檢查，因此是 最經(jīng)濟的檢測。 需多次重復(fù)檢查，經(jīng)濟與心理負(fù) 擔(dān)過重 檢測風(fēng)險檢測風(fēng)險 低，給醫(yī)生可靠的依據(jù)，給患者安 心的答復(fù) 高面臨醫(yī)療糾紛 HPV分型檢測的介紹 最佳篩查方案最佳篩查方案 HPV分型檢測的介紹 一般篩查方案一般篩查方案 HPV分型檢測的介紹 2006/11 第第18屆屆

21、FIGO會議正式提出：會議正式提出： v 現(xiàn)在的各種細胞學(xué)技術(shù)與巴氏涂片相比并沒有提高宮頸癌 的早期檢出率； v 在WHO的協(xié)調(diào)下，南非和美國的研究提示，有條件的地 區(qū)應(yīng)以為首選。 HPV分型檢測的介紹 HPV-DNA檢測檢測 陰性陰性陽性陽性 篩查篩查 1次次/35年年 液基細胞學(xué)檢查液基細胞學(xué)檢查 篩查，篩查，1次次/6月月1年年 正常正常異常異常 陰道鏡陰道鏡/組織學(xué)檢查組織學(xué)檢查 16+/18+ 2006 consensus guidelines for management of women with abnormal cervical cancer screening tests

22、推薦的子宮頸癌篩查方案推薦的子宮頸癌篩查方案 HPV分型檢測的介紹 適合篩查的人群適合篩查的人群 v 任何有三年以上性行為或三年以上性行為或21歲以上有性行為歲以上有性行為的婦女均為篩 查對象（因為21歲以下子宮頸癌患者極為罕見，而且從 HPV感染到CIN需要3-8年時間) v 高危人群：有多個性伴侶、性生活過早、HIV/HPV感染、 免疫功能低下、衛(wèi)生條件差/性保健知識缺乏的婦女 v 對決定妊娠的婦女，在妊娠前妊娠前應(yīng)進行HPV檢查 HPV分型檢測的介紹 （2）陰道鏡適應(yīng)癥）陰道鏡適應(yīng)癥 v 波特蘭的一項研究表明，30歲細胞學(xué)陰性的女性中， HPV16或或18陽性陽性的女性在10年隨訪中出現(xiàn)

23、CIN3的比率分 別為21%和和18%。與此相比，其他高危型HPV陽性的女性 中，CIN3的風(fēng)險性僅1.5%。 v 不同型別致CIN3的風(fēng)險不同。 2009年，美國陰道鏡和宮頸病理學(xué)會（簡稱年，美國陰道鏡和宮頸病理學(xué)會（簡稱ASCCP） 發(fā)布了發(fā)布了HPV 基因分型檢測指南，明確指出基因分型檢測指南，明確指出: 30婦女，婦女， 細胞學(xué)未見上皮內(nèi)病變和惡性細胞，細胞學(xué)未見上皮內(nèi)病變和惡性細胞，HPV16，18建議建議 陰道鏡；其他陰道鏡；其他HPV高危型，則在高危型，則在12個月后重復(fù)個月后重復(fù)HPV DNA檢測和細胞學(xué)檢查。（檢測和細胞學(xué)檢查。（American Society for Co

24、lposcopy and Cervical Pathology, 2009） HPV分型檢測的介紹 （3）ASCUS分流分流（atypical squamous cells of unknown significance 診斷意義不明的不典型鱗狀上皮細胞） v 直接陰道鏡檢查或多點病理活檢，引起創(chuàng)傷和過度診治（ 40-60%） v 重復(fù)細胞學(xué)檢查，有25%失訪率，此外復(fù)檢會增加病人經(jīng) 濟及精神負(fù)擔(dān) 457例細胞學(xué)診斷為ASCUS/LSIL，進行HPV檢測和活檢： LSIL且高危HPV陽性陽性者，22.7%為CIN II/III； LSIL但高危HPV陰性者，僅1%為CIN II/III。 Le

25、e Nak-Woo, et al., Is the Human Papillomavirus Test in Combination With the Papanicolaou Test Useful for Management of Patients With Diagnoses of Atypical Squamous Cells of Undetermined Significance/Low-Grade Squamous Intraepithelial Lesions? Arch Pathol Lab Med, 2001, 125:1453 HPV檢測為目前的檢測為目前的最優(yōu)方法最優(yōu)

26、方法。 HPV檢測陰性，可列入常規(guī)篩查人群；檢測陰性，可列入常規(guī)篩查人群； HPV檢測陽性，則考慮配合陰道鏡檢查。檢測陽性，則考慮配合陰道鏡檢查。 HPV分型檢測的介紹 （4）宮頸病變隨訪）宮頸病變隨訪 v 據(jù)瑞典的一項研究，針對完成宮頸錐切術(shù)后，術(shù)后隨訪結(jié) 果有26例CIN復(fù)發(fā)；22例未復(fù)發(fā)。術(shù)后3個月用PCR方法檢 測宮頸細胞涂片HPV，其中： 26例復(fù)發(fā)者：25例為HPV陽性 22例對照組：全部為HPV陰性 v 實驗說明：宮頸病變治療后檢測HPV-DNA，可預(yù)測殘余 病變、估計療效。 Chua, K.L., Hjerpe, A. Human papillomavirus analysis

27、 as a prognostic marker following conization of the cervix uteri. Gynecol Oncol, 1997, 66(1): 108-113 HPV分型檢測的介紹 術(shù)后術(shù)后HPV-DNA檢測檢測 陰性陰性陽性陽性 病灶切除干凈或病灶切除干凈或 沒有再次感染沒有再次感染 相同基因型相同基因型 新的新的HPV感染感染有殘留病灶或有殘留病灶或 重復(fù)感染重復(fù)感染 不同基因型不同基因型 宮頸病變治療后的隨訪宮頸病變治療后的隨訪 HPV分型檢測的介紹 （5）指導(dǎo)疫苗的使用）指導(dǎo)疫苗的使用 v HPV感染后可以激發(fā)機體產(chǎn)生特異性體液免疫和細胞免疫

28、 v 針對衣殼蛋白（L1）的IgG和IgA中和抗體在病毒感染的 早期較為重要-預(yù)防性疫苗 v 針對早期蛋白（E6E7）的細胞免疫反應(yīng)對最終清除病毒 可能更為重要-治療性疫苗 默沙東：Gardasil（6、11、16、18） 43.94% 葛蘭素史克： Cervarix（16、18） 26.47% 約約200種種HPV HPV分型檢測的介紹 中國中國HPV數(shù)據(jù)庫的目的和意義數(shù)據(jù)庫的目的和意義 v 收集積累HPV不同型別感染數(shù)據(jù)和中國HPV 基因研究資料，形成具有中國特色的開放 數(shù)據(jù)平臺。 v 應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)信息技術(shù)，對HPV流行趨勢開展 長期監(jiān)測。 v 積極探索HPV與宿主、基因多態(tài)性及與腫 瘤的發(fā)生

29、發(fā)展演變的關(guān)系。 v 解決宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)瘤等重大科學(xué)問題。 v 指導(dǎo)適合中國人群HPV治療性和預(yù)防性疫苗的研制。 v 為制定宮頸癌相關(guān)的公共衛(wèi)生政策提供理論基礎(chǔ)。 HPV分型檢測的介紹 HPV分型檢測的介紹 屬于分子醫(yī)學(xué)范疇，是 。 v具有高靈敏度、高特異性的特點。 3.1 實驗原理實驗原理 HPV分型檢測的介紹 v 將PCR和低密度基因芯片技術(shù)結(jié)合成綜合工作平臺，具 有高效、快速、靈敏、準(zhǔn)確的特點。 HPV分型檢測的介紹 3.2 宮頸細胞樣本的采集宮頸細胞樣本的采集 v 月經(jīng)期不可采集標(biāo)本。（減少給受檢者的損傷） v 月經(jīng)正常婦女，在月經(jīng)來潮后1018天為最佳檢查時間 v 不可在碘試

30、驗和醋酸試驗之后采集樣本。（可能會抑制 PCR反應(yīng)） v 檢查前48小時內(nèi)不要作陰道沖洗，不要用避孕藥膏等陰 道內(nèi)用藥物。（可能會抑制PCR反應(yīng)） v 檢查前48小時最好不要行性生活。（一過性假陽性） v 樣本采集后，注意避免交叉污染。 HPV分型檢測的介紹 u子宮頸的鱗狀上皮細胞與 柱狀上皮細胞的連接處（轉(zhuǎn) 化帶，Transformation Zone） 是HPV的易感部位。 uHPV-DNA檢測樣本是子宮子宮 頸轉(zhuǎn)化帶的脫落細胞頸轉(zhuǎn)化帶的脫落細胞。 HPV分型檢測的介紹 被檢者脫掉褲子，然后按醫(yī)生指示仰 臥于一張檢查床上。 由醫(yī)生以窺陰器或陰道張開器暴露宮 頸。 然后使用專用的 置于宮頸口采集標(biāo)本。（最好在取樣 前先用棉簽擦去宮頸分泌物） HPV分型檢測的介紹 將專用宮頸刷置于宮頸口，輕 輕搓動宮頸刷使其旋轉(zhuǎn)5圈。 慢慢取出宮頸刷，將其放入標(biāo)有病人編號的取樣管中，取樣管內(nèi)已加有專 用細胞保存液，折斷其刷頭入管中，擰緊瓶蓋。 HPV分型檢測的介紹 樣品收集中注意事項：樣品收集中注意事項： v 取樣管上標(biāo)簽的名稱須與患者一一對應(yīng)。 v 使用凱普專用取樣器及保存液，可抑制細菌