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文檔簡(jiǎn)介
1、2 簡(jiǎn)述血沉測(cè)定的方法學(xué)評(píng)價(jià)。手工法包括魏氏法、潘氏法等:魏氏法簡(jiǎn)便實(shí)用,ICSH推薦為血沉測(cè)定的參比方法;潘氏法與魏氏法測(cè)定相關(guān)性較好,采用手指采血,用血量少,尤其適用于兒童,但易混入組織液,目前已很少使 用。手工法只能測(cè)定血沉某個(gè)時(shí)刻的最終結(jié)果,特異性差,其應(yīng)用有很大的局限性。血沉儀可動(dòng)態(tài)記錄整個(gè)血沉過 程的變化,描繪出紅細(xì)胞沉降的曲線,反映了不同疾病或疾病不同階段,血沉3個(gè)沉降階段所存在的差異,為臨床分析血沉測(cè)定結(jié)果提供了新的手段。3白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)質(zhì)量控制中應(yīng)注意哪些影響因素?影響白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性的因素:主要是細(xì)胞在涂片中的分布不均和觀察者對(duì)細(xì)胞辨認(rèn)的差異。影響白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)精確性的
2、因素。影響涂片染色效果的因素。白細(xì)胞分 類計(jì)數(shù)的參考方法:EDTA K2抗凝靜脈血,人工制成血涂片,以Roma no wsky液進(jìn)行染色,使用城墻式”移動(dòng)法,油鏡下分類計(jì)數(shù) 200個(gè)白細(xì)胞。當(dāng)其他分類法與此法作為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較時(shí),需要4個(gè)熟練檢驗(yàn)人員對(duì)同一張涂片各計(jì)數(shù)200個(gè)白細(xì)胞(即總數(shù)為800個(gè)細(xì)胞)后,求出平均值來作為各類白細(xì)胞的靶值。4.嗜酸性粒細(xì)胞升高的臨床意義是什么?嗜酸性粒細(xì)胞增多指成人外周血嗜酸性粒細(xì)胞0 5X 109/ L。引起嗜酸性粒細(xì)胞增多的原因包括:寄生蟲病是最常見的病因。變態(tài)反應(yīng)性疾病是僅次于寄生蟲病的另一主要病因,見于支氣 管哮喘、壞死性血管炎、藥物過敏反應(yīng)等。皮膚病
3、,如濕疹等。血液病,如慢性粒細(xì)胞白血病、真性紅細(xì)胞增多 癥、多發(fā)性骨髓瘤、脾切除術(shù)后、嗜酸性粒細(xì)胞白血病、霍奇金病。某些惡性腫瘤,如肺癌。某些傳染病,如猩 紅熱急性期。其他,如風(fēng)濕性疾病、腦垂體前葉功能減低癥等。高嗜酸性粒細(xì)胞綜合征。5 電阻抗法血液分析儀進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)的檢測(cè)原理是什么?根據(jù)血細(xì)胞相對(duì)非導(dǎo)電的性質(zhì),懸浮在電解質(zhì)溶液中的血細(xì)胞顆粒在通過計(jì)數(shù)小孔時(shí)可引起電阻的變化,于是瞬間引起了電壓變化而出現(xiàn)一個(gè)脈沖信號(hào)。脈沖信號(hào)變化的程度 取決于非導(dǎo)電性細(xì)胞體積的大小,細(xì)胞體積越大產(chǎn)生的脈沖振幅越高,記錄脈沖的數(shù)量就可測(cè)定細(xì)胞的數(shù)量。這些脈 沖信號(hào)經(jīng)過放大、閾值調(diào)節(jié)、甄別、整形、計(jì)數(shù)及自動(dòng)控制保
4、護(hù)系統(tǒng),最終可打印出數(shù)據(jù)報(bào)告6試述血紅蛋白測(cè)定的主要方法及其方法學(xué)評(píng)價(jià)。氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法 (HiCN)為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)參考方法。 操作簡(jiǎn)單、顯色快且結(jié)果穩(wěn)定可靠,可檢測(cè)除SHb外的各種血紅蛋白。KCN有劇毒,且存在高白細(xì)胞和高球蛋白血癥可致試劑混 濁,以及HbCO轉(zhuǎn)化較慢等問題。十二烷基硫酸鈉(SDS)血紅蛋白測(cè)定法可替代HiCN法。SDS與Hb作用(除SHb外),生成SDSHb棕紅色化合物,其吸收峰在 538nm,SDS可用HiCN法定的抗凝血或溶血液,制備標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。 本法操作簡(jiǎn)單,呈色穩(wěn)定,準(zhǔn)確性和精確性符合要求,且無公害,為次選方法。SDS本身質(zhì)量差異較大,且破壞白細(xì)胞,不適用于同時(shí)
5、有白細(xì)胞計(jì)數(shù)和Hb測(cè)定的血細(xì)胞分析儀上使用。疊氮高鐵血紅蛋白(HiN3)測(cè)定法具有與 HiCN測(cè)定法相似的優(yōu)點(diǎn),顯色快而穩(wěn)定,試劑毒性僅為HiCN的1 /7,但仍存在公害問題。 堿羥血紅蛋白(AHD575)測(cè)定法, 試劑簡(jiǎn)單,不含有毒劑,呈色穩(wěn)定,可用氯化血紅素作標(biāo)準(zhǔn)品。但此法在血液分析儀中的應(yīng)用受限。多參數(shù)血液分 析儀測(cè)Hb已逐步取代手工法,操作簡(jiǎn)單、快速,同時(shí)可以獲得多項(xiàng)紅細(xì)胞的參數(shù)。其測(cè)定原理多采用HiCN法,但由于各型號(hào)儀器使用的溶血?jiǎng)┎煌纬蒆b的衍生物不同。儀器要經(jīng)過HiCN標(biāo)準(zhǔn)液校正后,才能進(jìn)行Hb測(cè)定。7網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)的臨床意義是什么?網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(Ret)是反映骨髓造血功
6、能的重要指標(biāo)。判斷骨髓增生能力,判斷貧血類型:網(wǎng)織紅細(xì)胞增多,表示骨髓造血功能旺盛。常見于溶血性貧血(尤其急性溶血)、急性失血;造血恢復(fù)期可見Ret短暫和迅速增高,是骨髓功能恢復(fù)較敏感的指標(biāo);網(wǎng)織紅細(xì)胞減少,表示骨髓造血功能低下,見于再生 障礙性貧血、溶血性貧血、自身免疫性溶血性貧血危象。典型再生障礙性貧血,網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)常低于0. 005,網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值低于 15X 109/L,為其診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。(2)評(píng)價(jià)療效,判斷病情變化:Ret是貧血患者隨訪檢查的項(xiàng)目之一。(3)骨髓移植后監(jiān)測(cè)骨髓造血恢復(fù)8血沉變化的臨床意義是什么 ?(1)生理性增快:女性高于男性。婦女月經(jīng)期、妊娠3個(gè)月以上,以及老年
7、人血沉常增快。(2)病理性增快可見于:各種炎癥:感染是血沉加快最常見的原因,如急性細(xì)菌性感染;結(jié)核病、結(jié)締組織炎癥、 風(fēng)濕熱等慢性炎癥于活動(dòng)期血沉增快,病情好轉(zhuǎn)時(shí)血沉減慢,故血沉(ESR)可動(dòng)態(tài)觀察病情變化。組織損傷及壞死:見于較大范圍組織損傷或手術(shù)創(chuàng)傷。心肌梗死時(shí)血沉增快,而心絞痛時(shí)血沉多正常,可作為兩者鑒別指標(biāo)。惡性腫 瘤血沉增快,而良性腫瘤血沉多正常。高球蛋白血癥。貧血。高膽固醇血癥。(3)血沉減慢:臨床意義較小,主要見于紅細(xì)胞明顯增多、纖維蛋白原含量嚴(yán)重減低時(shí)。血沉是較為常用而缺乏特異性的指標(biāo),血沉常作為疾病是否活 動(dòng)的監(jiān)測(cè)指標(biāo)9 .試述中性粒細(xì)胞病理變化的臨床意義。中性粒細(xì)胞增多指分
8、葉核粒細(xì)胞超過70%,絕對(duì)值7 X 109/ L。急性感染或炎癥是最常見的原因,以中性粒細(xì)胞為主。尤其是化膿性球菌感染。其增高程度與病原體種類、感染部位和程度 以及機(jī)體的反應(yīng)性等有關(guān)。廣泛組織損傷或壞死和急性溶血,如嚴(yán)重?zé)齻⑿募」K赖染梢姲准?xì)胞增多,以中性 粒細(xì)胞為主。急性失血,白細(xì)胞迅速增多,以中性粒細(xì)胞為主。急性中毒。惡性腫瘤、白血病,急性白血病以 幼稚白血病細(xì)胞增多為主。慢性白血病以成熟的白血病細(xì)胞增高為主10. 為什么血細(xì)胞分析儀對(duì)白細(xì)胞的分類結(jié)果只能作為篩檢試驗(yàn)? (1)三分群血液分析儀用阻抗法的原理,依據(jù)白細(xì)胞的體積的大小,人為地將白細(xì)胞分成三群,這種分類不夠準(zhǔn)確。(2)五分類
9、的血細(xì)胞分析儀聯(lián)合應(yīng)用光學(xué)和電學(xué)等技術(shù)的儀器,檢測(cè)同一血細(xì)胞的體積、細(xì)胞核形狀及胞質(zhì)中顆粒,在綜合分析后作出白細(xì)胞分類,這種檢測(cè)分類法雖然較 電阻抗法高,但仍不能滿足臨床檢出異常細(xì)胞的需要。(3)各類型的血液分析儀尚不具有識(shí)別紅細(xì)胞、白細(xì)胞核、血小板的能力,仍不能檢出白細(xì)胞形態(tài)的病理性變化,特別是對(duì)幼稚細(xì)胞的檢測(cè)。而顯微鏡能根據(jù)血細(xì)胞與染色液特異性 的結(jié)合,根據(jù)血涂片上細(xì)胞的體積、細(xì)胞核形狀及胞質(zhì)中顆粒等著色情況,進(jìn)行綜合分析并能識(shí)別異常和幼稚細(xì)胞,因此,血細(xì)胞分析儀只能作為健康人血液一般檢驗(yàn)的篩檢之用11. 試述尿液常規(guī)分析的臨床價(jià)值。泌尿系統(tǒng)疾病的診斷與療效觀察。泌尿系統(tǒng)的炎癥、結(jié)石、腫瘤
10、、血管病變及 腎移植術(shù)后發(fā)生排異反應(yīng)時(shí),各種病變產(chǎn)物直接進(jìn)入尿中,引起尿液成分變化,因此尿液分析是泌尿系統(tǒng)疾病診斷與療效觀察的首選項(xiàng)目。(2)其他系統(tǒng)疾病的診斷。尿液來自血液,其成分又與機(jī)體代謝有密切關(guān)系,故任何系統(tǒng)疾病的 病變影響血液成分改變時(shí),均能引起尿液成分的變化,因此可通過尿液分析協(xié)助臨床診斷。(3)安全用藥的監(jiān)護(hù)。某些藥物如慶大霉素、卡那霉素、多黏菌素B與磺胺類藥等??梢鹉I損害,故用藥前及用藥過程中需觀察尿液的變化,以確保用藥安全。(4)職業(yè)病的輔助診斷。鉛、鎘、鉍、汞等均可引起腎損害,尿中此類重金屬排出量增多,對(duì)職業(yè)病 的診斷及預(yù)防有一定意義(5)對(duì)人體健康狀態(tài)的評(píng)估。對(duì)人群進(jìn)行
11、尿液分析,可篩查有無腎、肝、膽疾病和糖尿病,以 達(dá)早期診斷及預(yù)防疾病的目的12 試述糞便隱血試驗(yàn)的臨床意義。糞便隱血檢杳對(duì)消化道出血的診斷有重要價(jià)值。消化性潰瘍、藥物致胃黏膜損傷(如服用阿司匹林、吲哚美辛、糖皮質(zhì)激素等)、腸結(jié)核、Crohn病、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸息肉、鉤蟲病及胃癌、結(jié)腸癌等消化道腫瘤時(shí),糞便隱血試驗(yàn)均常為陽性。故須結(jié)合臨床其他資料進(jìn)行鑒別診斷。在消化性潰瘍時(shí),陽性率為40%70%,呈間斷性陽性。消化性潰瘍治療后當(dāng)糞便外觀正常時(shí),隱血試驗(yàn)陽性仍可持續(xù)57天,此后如出血完全停止,隱血試驗(yàn)即可轉(zhuǎn)陰。消化道癌癥時(shí),陽性率可達(dá)95%,呈持續(xù)陽性,故糞便隱血試驗(yàn)常作為消化道惡性腫瘤診斷的一
12、個(gè)篩選指標(biāo)。尤其對(duì)中老年人早期發(fā)現(xiàn)消化道惡性腫瘤有重要價(jià)值。此外在流行性出血熱患者的糞便中隱血試驗(yàn)也有 84%的陽性率,可作為該病的重要佐證。13. 試述尿HCG金標(biāo)法測(cè)試原理。 在纖維素膜的特定位置,分別包被單抗鼠 IgG抗體(對(duì)照線),單抗人HCG抗體(測(cè) 定線),呈上下排列,另外,試帶上還含有均勻分布的膠體金標(biāo)記人B-HCG單抗、膠體金標(biāo)記的鼠IgG抗原。檢測(cè)時(shí)因?qū)游饔媚蛞褐械?HCG與膠體金標(biāo)記的人B -HCG單抗結(jié)合,移至測(cè)定線,形成金標(biāo)記B -HCG單抗一 -HCG抗原 單抗人HCG抗體的雙抗體夾心式復(fù)合物, 測(cè)試線呈現(xiàn)紫紅色。同時(shí),金標(biāo)記鼠IgG抗原隨尿上行至單抗鼠IgG抗體,
13、 形成金標(biāo)記鼠IgG抗原與單抗鼠IgG抗體復(fù)合物,對(duì)照線呈紫紅色。1 簡(jiǎn)述血細(xì)胞發(fā)育過程中的形態(tài)演變規(guī)律。胞體由大到小,但原始細(xì)胞比早幼粒細(xì)胞小,巨核細(xì)胞由小到大,核漿比例由大到?。话擞纱蟮叫?,成熟紅細(xì)胞胞核消失;核形由圓到凹陷到分葉,有的細(xì)胞可不分葉;核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)由細(xì) 致疏松到粗糙緊密,核染色質(zhì)顏色由淡紫色到深紫色;核膜由不明顯到明顯;核仁由顯著可見到無,胞質(zhì)量由少到多, 胞質(zhì)顏色由藍(lán)到紅或由深藍(lán)到淺藍(lán);胞質(zhì)顆粒由無到有;紅細(xì)胞在成熟過程中,胞質(zhì)不會(huì)出現(xiàn)顆粒。2簡(jiǎn)述再障的骨髓病理學(xué)特點(diǎn)。骨髓增生減退,造血組織與脂肪組織的容積百分比降低,脂肪細(xì)胞與基質(zhì)增多。粒細(xì)胞、紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞均減少,淋
14、巴細(xì)胞增多。間質(zhì)內(nèi)漿細(xì)胞、肥大細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞等非造血細(xì)胞增多,并可有間質(zhì) 水腫、出血甚至液性脂肪壞死3再障的診斷標(biāo)準(zhǔn)是什么 孑全血細(xì)胞減少,網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值減少:一般無肝脾腫大:骨髓至少1個(gè)部位增生減低或重度減低,骨髓小粒非造血細(xì)胞增多;除外引起全血細(xì)胞減少的其他疾病,如PNH、MDS-RA急性造血功能停滯等;一般抗貧血藥物治療無效。4. 簡(jiǎn)述溶血性貧血的共性改變。一般貧血實(shí)驗(yàn)室表現(xiàn),正常細(xì)胞性貧血,網(wǎng)織紅細(xì)胞一般增高,血片中有特殊形態(tài)的紅細(xì)胞,類白血病反應(yīng)。骨髓有核細(xì)胞顯著增多,粒紅比例倒置。血紅蛋白的釋放。膽紅素代謝異常。紅細(xì) 胞壽命縮短。6簡(jiǎn)述凝血過程的三個(gè)階段。第一階段為血液凝血活酶的
15、形成,第二階段為凝血酶的形成,第三階段為纖維蛋白的形成。第一階段有內(nèi)源性和外源性凝血系統(tǒng)兩個(gè)途徑。外源性凝血系統(tǒng)是由于血管壁或組織損傷后釋放因子川,因子四、鈣離子形成復(fù)合物,促使因子X活化,然后形成凝血活酶。內(nèi)源性凝血系統(tǒng)是通過固相和液相激活因子劉,然后是區(qū)-忸-Ca-PF3復(fù)合物形成,從而促使因子X活化,形成凝血活酶7如何早期診斷 DIC。存在可引起 DIC的病因,如感染、創(chuàng)傷、腫瘤等。有兩種以上的下列臨床表現(xiàn):反復(fù)、 嚴(yán)重或廣泛的出血;不明原因或難以糾正的休克;出現(xiàn)反映肺、腦、肝、腎等器官栓塞的癥狀和體征;原來疾病不可 解釋的溶血現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)室檢查符合以下表現(xiàn):血小板減少或進(jìn)行性下降,F(xiàn)g含
16、量減少,3P實(shí)驗(yàn)陽性或D-二聚體升高。PT縮短或較正常對(duì)照延長(zhǎng) 3 s以上&簡(jiǎn)述骨髓檢查的適應(yīng)證:外周血細(xì)胞數(shù)量、成分及形態(tài)異常。不明原因的發(fā)熱、肝腫大、脾腫大、淋巴結(jié)腫大。不明原因的骨痛、骨質(zhì)破壞、腎功能異常、黃疸、紫癜、血沉明顯加快。惡性血液病化療后的療效觀察。其他: 骨髓活檢、骨髓細(xì)胞培養(yǎng)、微生物學(xué)及寄生蟲學(xué)檢查等10血小板在止血過程中的作用是什么?血小板能維持正常血管壁的完整性,使其通透性減低。通過黏附、聚集和釋放反應(yīng)在創(chuàng)口處形成血小板栓子。釋放各種血小板因子參與血液凝固,其中PF3最重要。釋放止血物質(zhì)TXA 2,使血小板進(jìn)一步收縮。釋放血小板收縮蛋白,使血塊收縮,有利于止血11.何為
17、急性白血病 M4型?其亞型如何劃分?M4為粒-單核細(xì)胞白血病,按粒細(xì)胞、單核細(xì)胞的比例,形態(tài)不同分為四 個(gè)亞型:M4a:以原始及早幼粒細(xì)胞白血病增生為主。單核細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞總數(shù)20% (NEC)。M4b:以原、幼單核細(xì)胞增生為主,原粒細(xì)胞+早幼粒細(xì)胞20% (NEC)。M4C;具有粒系又具有單核系特征的原始細(xì)胞30% (NEC)。M4E0;除上述特征外,還有顆粒粗大且圓、著色較深的嗜酸性粒細(xì)胞,占5%30%12何為造血干細(xì)胞 ?它具備哪些特征?造血干細(xì)胞是一種具有自身復(fù)制能力的細(xì)胞,必須具備:有分裂能力:一個(gè) 干細(xì)胞在經(jīng)過一個(gè)細(xì)胞周期活動(dòng)后可生成兩個(gè)與分裂前性質(zhì)相同的干細(xì)胞,這就是干細(xì)胞自身復(fù)制
18、的特性。由于它有 自身復(fù)制能力,所以能保持本細(xì)胞庫數(shù)的恒定。有分化為更成熟細(xì)胞的能力:即具有向骨髓多系細(xì)胞分化的能力。 造血干細(xì)胞既能自身復(fù)制,經(jīng)常維持一定的數(shù)量,又能分化為使多系細(xì)胞相對(duì)穩(wěn)定。概括為:血細(xì)胞來源于骨髓的造 血多能干細(xì)胞,多能干細(xì)胞能分化為多系統(tǒng)的定向干細(xì)胞,然后經(jīng)過原始、幼稚各階段,而后成熟為多種血細(xì)胞13 .試舉例說明急性白血病的MICM 分型。M(形態(tài)學(xué))1(免疫學(xué))C(細(xì)胞化學(xué))M(分子生物學(xué)),以急性早幼粒細(xì)胞白血病(M3)為例,Hb和RBC輕中度減少,白細(xì)胞不定,分類以異常早幼粒為主,Auer小體易見。骨髓象以顆粒增多的異常早幼粒增生為主,30%(NEC),早幼與原
19、粒之比3: 1,異常早幼粒胞核大小不一,胞質(zhì)中有大小不等顆粒,可見束狀 Auer 小體;POX( + ),CD 13/CD 33( +),CD 34 /HLA-DR( );t(15: 17)(q22 : q12)形成 PML / RARA 融合 基因14. 試述血栓形成機(jī)制。血管壁損傷:局部?jī)?nèi)皮細(xì)胞抗血栓形成活性減弱或喪失,使血栓形成的內(nèi)皮下成分暴露,促使血小板黏附、聚集和釋放,激活內(nèi)源性、外源性凝血途徑,局部形成纖維蛋白的凝塊或血栓,同時(shí)激肽的生成和 血小板釋放的血管壁通透性因子使血管壁通透性增加,利于血栓形成。血液成分改變:血小板數(shù)量過多與功能亢進(jìn), 血液凝固性增高。纖溶活性減低及白細(xì)胞等
20、均利于血栓形成。血流淤滯:血流緩慢、停滯與渦流均可導(dǎo)致血栓形成、 血黏度增高,利于血小板黏附、聚集,利于血栓形成16 .試舉例說明為什么分析骨髓象必須常規(guī)分析血常規(guī)。骨髓象相似而血常規(guī)有區(qū)別,如類白血病反應(yīng),其骨髓象與慢粒相似,但血中的白細(xì)胞增多不及慢粒顯著。骨髓象有區(qū)別而血常規(guī)相似,如傳染性淋巴細(xì)胞增多癥和慢粒時(shí) 血常規(guī)都有小淋巴細(xì)胞增多,但骨髓象顯示前者淋巴細(xì)胞稍增多而后者顯著增多。骨髓象變化不顯著而血常規(guī)有顯著異常,如傳染性淋巴細(xì)胞增多癥,其骨髓象中的異形淋巴細(xì)胞遠(yuǎn)不及血常規(guī)中明顯。骨髓象有顯著異常而血常規(guī) 變化不顯著,如多發(fā)性骨髓瘤,骨髓中可見特異性骨髓瘤細(xì)胞,而血常規(guī)甚少見到。骨髓象
21、細(xì)胞難辨認(rèn),如白血病, 血常規(guī)中白血病細(xì)胞的分化程度較骨髓象為好,也較骨髓象容易辨認(rèn)18.列舉5例引起外周血全血細(xì)胞減少的血液病及主要的鑒別指征孑血紅蛋白再生障礙性貧血:骨髓有核細(xì)胞增生低下,淋巴細(xì)胞比例相對(duì)增高,粒、紅、巨核三系細(xì)胞增生減低?;顧z示造血組織減少,脂肪組織增加。PNH : Ham實(shí)驗(yàn)和蔗糖溶血實(shí)驗(yàn)呈陽性反應(yīng)。MDS :骨髓象中可見至少一系的病態(tài)造血。非白血性白血病:骨髓象中可見大量原始細(xì)胞和幼稚細(xì)胞。惡性組織細(xì)胞病:骨髓象中可見惡性組織細(xì)胞。1. 輸注全血有哪些缺點(diǎn) ?全血中含有白細(xì)胞、血小板和血漿蛋白,可以使受血者產(chǎn)生抗體,再輸血時(shí),可發(fā)生輸血 反應(yīng)。由于血漿存在,全血容量較
22、大,對(duì)老年人和兒童可引起循環(huán)超負(fù)荷,發(fā)生心力衰竭。全血的血漿中可能含有較高濃度的枸櫞酸鈉、鉀和氨等,易發(fā)生代謝性堿中毒。2. ABO定型試驗(yàn)中常要注意哪些問題 孑ABO亞型:紅細(xì)胞上的 A或B抗原很弱,只作正定型時(shí)可導(dǎo)致血型誤定??笰抗B定型血清質(zhì)量差,對(duì)弱的 A或B抗原漏檢(假陰性)。受檢血清中存在不規(guī)則抗體。紅細(xì)胞有多凝集現(xiàn) 象。某些疾病,如低丙種球蛋白血癥等,導(dǎo)致反定型時(shí)血清中抗體漏檢(假陰性)3抗球蛋白配血法中,陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和鹽水對(duì)照的操作步驟是什么?結(jié)果如何判定? (1)取試管2支,分別標(biāo)明主側(cè)和次側(cè),主側(cè)管加受血者血清2滴和供血者5%紅細(xì)胞鹽水懸液 1滴;次側(cè)管加供血者血清
23、2滴和受血者5%紅細(xì)胞懸液1滴。(2)混和,置37C水浴致敏1h,取出后用鹽水離心洗滌紅細(xì)胞3次,傾去上清液。(3)加最適稀釋度抗球蛋白血清1滴,混勻,1000rpm離心1min,觀察結(jié)果。(4)陽性對(duì)照:5%不完全抗D致敏的Rh陽性紅細(xì)胞懸液1滴, 加抗球蛋白血清1滴。陰性對(duì)照:5% O型紅細(xì)胞懸液1滴,加抗球蛋白血清 1滴。鹽水對(duì)照:供血者 5 %紅細(xì)胞鹽 水懸液1滴加生理鹽水1滴;受血者 5%紅細(xì)胞鹽水懸液 1滴加生理鹽水1滴。(5)結(jié)果判定:如陽性對(duì)照管凝集, 陰性對(duì)照管、鹽水對(duì)照管不凝集,主側(cè)、次側(cè)配血管都不凝集,表示無輸血禁忌1簡(jiǎn)述血糖的來源與去路。肝糖原分解:食物經(jīng)消化吸收的葡萄
24、糖:糖異生。血糖的去路:氧化供能:合成糖原;轉(zhuǎn)變?yōu)橹炯澳承┓潜匦璋被?;轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌穷愇镔|(zhì)2. 根據(jù)米一曼氏方程計(jì)算,當(dāng)S是Km的5倍時(shí),反應(yīng)速度v相當(dāng)于最大速度Vmax的多少?根據(jù)公式v = VmaxS/(Km+S1),當(dāng)S = 5 Km 時(shí)= 83% Vmax。3說明高氨血癥導(dǎo)致肝昏迷的生化基礎(chǔ)。高氨血癥時(shí),腦中發(fā)生的反應(yīng)為:氨+ a酮戊二酸t(yī)谷氨酸氨+谷氨酸t(yī)谷氨酰胺腦內(nèi)a酮戊二酸減少導(dǎo)致了三羧酸循環(huán)減弱,從而使ATP生成減少,腦組織供能缺乏表現(xiàn)昏迷4體內(nèi)膽紅素可來源于何種代謝途徑?體內(nèi)膽紅素大部分由衰老紅細(xì)胞破壞降解而來。血紅蛋白破壞后亞鐵血紅素經(jīng)代謝轉(zhuǎn)變成膽紅素,約占75%。體內(nèi)膽
25、紅素小部分來自組織 (特別是肝細(xì)胞)中非血紅蛋白的血紅素蛋白質(zhì) (如細(xì)胞色素P450、細(xì)胞色素b5,過氧化氫酶等)的血紅素輔基的分解。極小部分由造血過程中血紅素的少量分解,即無效 造血所產(chǎn)生5簡(jiǎn)述肝功能檢杳及其意義 ?膽紅素代謝檢查了解其有無黃疸、黃疸的程度并鑒定其類型。蛋白質(zhì)代謝檢查了解 肝細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的能力。酶類測(cè)定了解肝細(xì)胞受損的程度。反映肝內(nèi)外膽汁淤滯的檢查。反映肝纖維化程度 的檢查。反映肝占位性病變的檢查。免疫功能檢查以確定肝炎類型。輸血后肝炎檢查6.試述ApoAl、ApoB測(cè)定的臨床意義?Apo作為脂類載體直接與脂類代謝ApoAI測(cè)定可直接反映 HDL和LDL水平,ApoAI含量
26、與HDL含量正相關(guān),與冠心病和動(dòng)脈硬化的發(fā)生呈負(fù)相關(guān),ApoAI越高對(duì)人體越有益,而 ApoB則相反,其水平越高意味著 LDL越高患冠心病危險(xiǎn)越大,ApoAI下降和ApoB增高見于冠心病,還見于未控制的糖尿病、腎病綜合征、活動(dòng)肝炎、營(yíng)養(yǎng)不良等,冠心病的優(yōu)選指標(biāo)是ApoB,其增高比HDL CH降低和TCH升高更有意義,腦血管病以HDL CH , ApoAI下降更明顯7肌鈣蛋白是反映哪個(gè)器官損傷的標(biāo)志物?有何臨床意義?肌鈣蛋白(Tn)是心肌組織的一種特有的調(diào)節(jié)蛋白,嚴(yán)重心肌缺損時(shí)釋放人血,是反映心肌損傷的血清標(biāo)志物。肌鈣蛋白以三種球型亞基組成,即TnT、Tnl和TnC ,相對(duì)分子質(zhì)量依次減小。其含
27、量與年齡、性別、梗死部位及溶栓藥物種類等無關(guān)&尿中微量蛋白的檢測(cè)對(duì)診斷早期腎損傷有什么意義?蛋白尿是腎臟疾病的一個(gè)重要指標(biāo)。在某些腎臟病早期,尿常規(guī)測(cè)定常為陰性,尿中蛋白質(zhì)含量實(shí)際已有微量的增加(20200 mg/L)。若早期發(fā)現(xiàn)腎臟損害疾病如糖尿病腎損害等,必須做一些尿中微量蛋白的檢測(cè),以監(jiān)測(cè)腎臟以及其他器官的功能狀態(tài),提供可靠的生化指標(biāo)。9簡(jiǎn)述電泳的工作原理。溶液中帶電粒子在直流電場(chǎng)中向電性相反的方向移動(dòng)的現(xiàn)象稱為電泳。蛋白質(zhì)、核酸與生物大分子具有兩性電離及各自等電點(diǎn)(pl)。在pH相同條件下這些生物分子將會(huì)有帶不同量的電荷。如果要分離一組等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì),只要選擇一個(gè)合適pH,使多種蛋
28、白質(zhì)在該 pH的凈電荷差異最大,即可用此電泳方法檢查得到滿意的分離效果10. 簡(jiǎn)述光譜吸收法的原理和朗伯一比爾定律。光譜吸收法是指利用各種化學(xué)物質(zhì)所具有的吸收光譜的特性,來確定其性質(zhì)、結(jié)構(gòu)和含量的方法。朗伯一比爾定律:A = kbc,其中k是吸光系數(shù),b是比色杯光徑,c為溶液濃 度。c為1mol/L, b為1 cm時(shí),則系數(shù)k為摩爾吸光系數(shù),以&表示,單位為L(zhǎng)/ (mol cm)11. 何為連續(xù)監(jiān)測(cè)法?其特點(diǎn)是什么?連續(xù)測(cè)定酶促反應(yīng)過程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的濃度隨時(shí)間變化的多點(diǎn)數(shù)據(jù),求 出酶反應(yīng)初速度,間接計(jì)算酶活性濃度的方法稱連續(xù)監(jiān)測(cè)法12. 何為電極法?表示電極法的基本公式是什么?利用電極
29、、電位和物質(zhì)濃度之間的關(guān)系來確定物質(zhì)含量的分析方法稱13.自動(dòng)生化分析儀性能評(píng)價(jià)指標(biāo)主要有哪些為電極法。表示電極法的基本公式是能斯特方程式?精密度、波長(zhǎng)準(zhǔn)確性、相關(guān)性、取樣量和最小反應(yīng)體積及攜帶污染情況14.簡(jiǎn)述干化學(xué)法原理。 干化學(xué)法是以被測(cè)樣本中存在的液體為反應(yīng)介質(zhì)(液體中的水溶解了試紙條上的試劑 ),被測(cè)成分直接與固化于載體上的干試劑反應(yīng)的一種方式1細(xì)菌有那些特殊的結(jié)構(gòu) ?它們?cè)卺t(yī)學(xué)上有何實(shí)際意義 ?莢膜:許多細(xì)菌胞壁外圍繞一層較厚的黏性、膠凍樣物質(zhì), 稱為莢膜。鞭毛:某些細(xì)菌體表面附著有細(xì)長(zhǎng)呈波狀彎曲的絲狀物,稱為鞭毛,是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官。菌毛:一些 細(xì)菌菌體表面遍布著短而細(xì)直的蛋白質(zhì)絲
30、狀物,稱為菌毛,與細(xì)菌的致病性有關(guān)。芽孢:某些細(xì)菌在一定環(huán)境條件 下,細(xì)胞質(zhì)脫水濃縮,在菌體內(nèi)形成一個(gè)折光性強(qiáng)的圓形或卵圓形小體,稱為芽孢。芽孢對(duì)外界的抵抗力增強(qiáng),不易 被殺滅。2. 常見的細(xì)菌變異現(xiàn)象有哪些 ?有何實(shí)際意義?常見的細(xì)菌變異現(xiàn)象有非潰傳性(表型性)改變和遺傳性(基因型)變異。 其意義為:表型性改變,是指當(dāng)外界環(huán)境條件發(fā)生改變時(shí)所引起的細(xì)菌某一性狀的改變。當(dāng)條件回復(fù),可恢復(fù)原來的性狀,不遺傳給后代。常見的有:形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變,細(xì)菌形態(tài)的改變,毒力的改變。基因型變異,是細(xì)菌自身遺傳物 質(zhì)(細(xì)菌染色體、質(zhì)粒)發(fā)生改變而引起的變異。新獲得的性狀可以穩(wěn)定地傳給后代3. 外毒素和內(nèi)毒素有哪些
31、主要的區(qū)別?外毒素是某些細(xì)菌在代謝過程中產(chǎn)生并分泌到菌體外的毒性物質(zhì)。主要由革蘭 陽性菌產(chǎn)生,少數(shù)革蘭陰性菌也能產(chǎn)生。外毒素的化學(xué)成分是蛋白質(zhì),性質(zhì)不穩(wěn)定,易被熱、酸及酶破壞;外毒素的 毒性作用強(qiáng);不同細(xì)菌產(chǎn)生的外毒素對(duì)人體組織有選擇性的毒性作用,引起特殊病變。外毒素有較強(qiáng)的抗原性,經(jīng)甲 醛處理可脫去毒性,但仍保留抗原性,成為類毒素,類毒素可刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗毒素,用于人工自動(dòng)免疫;內(nèi)毒 素是革蘭陰性桿菌細(xì)胞壁中的脂多糖成分,只有當(dāng)菌體死亡裂解或用人工方法裂解細(xì)菌后才釋放出來。內(nèi)毒素對(duì)機(jī)體 組織的毒性作用選擇性不強(qiáng),引起的病理變化和臨床癥狀基本相同?當(dāng)病人免疫功能下降,體內(nèi)微生態(tài)環(huán)境失衡或發(fā)
32、生4. 正常菌群一般不引起人體感染;請(qǐng)問在什么情況下可發(fā)生感染 細(xì)菌易位時(shí),即可發(fā)生感染。5. 頭孢菌素類抗生素,是否第四代頭孢就一定比第一代頭孢抗菌效果好,為什么?不一定,要看對(duì)什么纟田菌而言。女口第一代頭孢菌素對(duì)革蘭陽性菌抗菌效果要好于第四代頭孢菌素,而第四代頭孢菌素對(duì)革蘭陰性菌抗菌能力則強(qiáng)于第一 代頭孢菌素。6藥敏試驗(yàn)時(shí)常報(bào)告“中介”結(jié)果,你知道其臨床意義嗎?中介是介于敏感和耐藥之間的一個(gè)實(shí)驗(yàn)緩沖區(qū)域,有兩層意義:一是反映在操作中可能因控制不好出現(xiàn)的結(jié)果有誤,應(yīng)重復(fù)試驗(yàn)或改做MIC ;二是提示高于正常給藥或在某些生理藥物濃集的部位(如尿液中喹諾酮類)時(shí)細(xì)菌可被抑制7簡(jiǎn)述用細(xì)菌制片和進(jìn)行革
33、蘭染色的基本步驟。制片:取生理鹽水一滴,置玻片上,用接種環(huán)挑取菌落,將細(xì)菌放在生理鹽水內(nèi)研勻成薄的菌膜后,自然干燥,并經(jīng)火焰固定。染色:初染加結(jié)晶紫染于涂片上,染1min后,用水洗去染液。媒染加碘液染 1min,水洗。脫色加 95%乙醇,不時(shí)搖動(dòng)約 30s,至無紫色脫落為止,水洗。復(fù)染加稀釋 石炭酸復(fù)紅染30s,水洗,干后鏡檢。&簡(jiǎn)述甲基紅試驗(yàn)的原理。某些細(xì)菌能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,并進(jìn)一步分解丙酮酸產(chǎn)生甲酸、乙酸、乳酸等使pH下降至4. 5以下,加入甲基紅試劑后呈紅色,為陽性。若分解葡萄糖產(chǎn)酸量少,或產(chǎn)生的酸進(jìn)一步分解為其他非酸性 物質(zhì),則pH在6. 2以上,加入甲基紅試劑后呈黃色,為陰性9
34、簡(jiǎn)述金黃色葡萄球菌的最低鑒定特征。革蘭陽性球菌,呈葡萄串狀排列;血平板上產(chǎn)生透明溶血環(huán);觸酶試驗(yàn)陽性;血漿凝固酶試驗(yàn)陽性10簡(jiǎn)述細(xì)菌鑒定的基本思路。是首先進(jìn)行革蘭染色以區(qū)分細(xì)菌的基本形態(tài)和革蘭染色性。根據(jù)形態(tài)和染色性的不同做一些大的分類試驗(yàn),如革蘭陰性桿菌做氧化酶試驗(yàn),革蘭陽性球菌做觸酶試驗(yàn),其后再進(jìn)行不同的生化試驗(yàn),必要 時(shí)進(jìn)一步進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn)11.請(qǐng)敘述血液感染的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)程序無菌米集血液標(biāo)本t增菌培養(yǎng) (需氧或厭氧培養(yǎng)有菌生長(zhǎng)取其菌落。具體步驟:涂片、染色、鏡檢。直接藥敏試驗(yàn)t初級(jí)報(bào)告。分離培養(yǎng)t觀察菌落,取菌落涂片、染色、鏡檢。純培養(yǎng)t血 清學(xué)鑒定、生化鑒定、藥敏試驗(yàn)t出示報(bào)告2補(bǔ)體的
35、生物學(xué)活性是什么?補(bǔ)體的生物學(xué)活性是指補(bǔ)體活化過程的產(chǎn)物表現(xiàn)出的具有擴(kuò)大免疫效應(yīng)的多項(xiàng)生物學(xué)活性,根據(jù)這些產(chǎn)物的活性特點(diǎn)可分為五類。(1)細(xì)胞溶解作用即膜攻擊作用新生的C5b可插入就近的細(xì)胞膜上,進(jìn)而有C6、C7和C9與膜上有C5b組成膜攻擊單位 C5b 67 8 9n,構(gòu)成可讓細(xì)胞膜內(nèi)外物質(zhì)自由出入的通道壁,造成細(xì) 胞或細(xì)菌的破裂死亡。(2)調(diào)理作用與病原體或免疫復(fù)合物共價(jià)鍵結(jié)合的C3b,還可與吞噬細(xì)胞表面的C3b受體(CR1)結(jié)合,以促進(jìn)其吞噬過程,成為補(bǔ)體的調(diào)理作用。(3)引起炎癥反應(yīng)引起炎癥反應(yīng)(的物質(zhì)),C3a、C4a、C5a有過敏毒素作用,C5a有對(duì)粒細(xì)胞的趨化作用,其綜合作用效果
36、是導(dǎo)致組織充血、水腫及滲出等炎癥表現(xiàn)。(4)清除免疫復(fù)合物即補(bǔ)體(C3b)的免疫粘連作用在替代活化途徑和經(jīng)典活化途徑新產(chǎn)生的C3b,都可以借其不穩(wěn)定的硫酯鍵斷裂,直接與病原體(或其成分)或免疫復(fù)合物中的抗原成分共價(jià)性結(jié)合。和病原體或免疫復(fù)合物共價(jià)結(jié)合的C3b,可再與血小板或人紅細(xì)胞表面的C3b受體(CR1)結(jié)合,使這些病原體或免疫復(fù)合物黏附于血小板或人的紅細(xì)胞上,成為免疫黏連作用。 免疫黏連作用不僅可減少血液中游離的免疫復(fù)合物及病原體,而且被黏附于血小板或紅細(xì)胞表面的免疫復(fù)合物或病原體易被吞噬細(xì)胞捕捉吞噬,消除它們對(duì)機(jī)體的危害。(5)免疫調(diào)節(jié)作用補(bǔ)體可對(duì)免疫應(yīng)答的各個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)揮調(diào)節(jié)作用:C3可參
37、與捕捉、固定抗原,使抗原被APC處理與提呈;補(bǔ)體成分可與多種免疫細(xì)胞相互作用,調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖分化例如C3b與B細(xì)胞表面 CR1結(jié)合,可使 B細(xì)胞增殖分化為漿細(xì)胞。CR2能結(jié)合C3d、iC3b及C3Dg,助B細(xì)胞活化;補(bǔ)體參與調(diào)節(jié)多種免疫細(xì)胞效應(yīng)功能,如殺傷細(xì)胞結(jié)合C3b后可增強(qiáng)對(duì)靶細(xì)胞的 ADCC作用。3細(xì)胞因子的牛物學(xué)作用特點(diǎn)是什么?(1)細(xì)胞因子的作用高效性:極微量 (pg水平)即可發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。細(xì)胞因子的旁泌和自泌作用自產(chǎn)生分泌出來后作用于附近的細(xì)胞或自身產(chǎn)生細(xì)胞。(2)細(xì)胞因子作用的一時(shí)性:只在局部短時(shí)間發(fā)揮作用,臨床上細(xì)胞因子作為藥物治療時(shí),在藥理劑量下也可隨血流分部全身發(fā)揮作用。
38、(3)細(xì)胞因子作用的多效性:一種細(xì)胞因子可作用于多種靶細(xì)胞,發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)如促進(jìn)靶細(xì)胞增殖分化,增強(qiáng)抗感染和殺傷效應(yīng),促進(jìn)或抑 制其他細(xì)胞因子的產(chǎn)生和細(xì)胞膜表面分子的表達(dá)。(4)細(xì)胞因子作用的網(wǎng)絡(luò)性:不同的細(xì)胞因子之間有相互協(xié)同或相互制約的作用,由此構(gòu)成了復(fù)雜的細(xì)胞因子免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),女口IL-1又到產(chǎn)生IL-2 , IL-10抑制丫干擾素產(chǎn)生。4.試論MHC在醫(yī)學(xué)上的意義。(1)器官移植:移植排斥反應(yīng)的實(shí)質(zhì)是免疫應(yīng)答,故移植成敗的關(guān)鍵是供受者間MHC的相容程度。(2)免疫調(diào)節(jié):抗原提呈:無論外源性抗原還是內(nèi)源性抗原大多需經(jīng)細(xì)胞加工處理后形成抗原肽段,再 與HLA- I、n類分子結(jié)合,HLA
39、-抗原肽復(fù)合物共同表達(dá)于細(xì)胞膜表面,才能被 CD8 + T細(xì)胞或CD4 +T細(xì)胞所識(shí)別; MHC限制性:在免疫應(yīng)答過程中各種免疫細(xì)胞如Th、M $、B及TC細(xì)胞間的相互作用均受到不同的 MHC分子的調(diào)控或嚴(yán)格的約束。例如,TC細(xì)胞識(shí)別病毒抗原或腫瘤抗原時(shí)必須識(shí)別自身MHC- I類分子;而 Th細(xì)胞識(shí)別的抗原肽必須是與自身 MHC- H類分子結(jié)合者。這種特定T細(xì)胞識(shí)別特定類別自身 MHC分子而發(fā)揮效應(yīng)的現(xiàn)象稱MHC限制性;決定免疫應(yīng)答能力:在HLA- H類基因區(qū)有一免疫應(yīng)答基因Ir可對(duì)免疫應(yīng)答進(jìn)行調(diào)節(jié),包括增進(jìn)免疫應(yīng)答或抑制免疫應(yīng)答。(3)HLA與疾病的關(guān)系:人類 MHC即HLA復(fù)合體是目前已知
40、的最復(fù)雜多態(tài)性的人類基因系統(tǒng),在人類 證實(shí)強(qiáng)直性脊柱炎與 B27有強(qiáng)相關(guān)性后,通過群體的流行病學(xué)調(diào)查和家系調(diào)查發(fā)現(xiàn)許多內(nèi)分泌疾病、類風(fēng)濕性疾病、 自身免疫性疾病、腫瘤和感染性疾病等與HLA有關(guān)。HLA與疾病易感染相關(guān)的主要位點(diǎn)是DR3DR4和B27等。5參與體液免疫應(yīng)答的細(xì)胞有哪些?如何發(fā)揮作用?胸腺依賴抗原(TD-Ag)次級(jí)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體有下述細(xì)胞參加反應(yīng)。(1)抗原呈遞細(xì)胞(APC):主要是單核-巨噬細(xì)胞類將處理的抗原提呈給Th細(xì)胞并分泌IL-1 , IL-6活化T細(xì)胞。(2)Th細(xì)胞:經(jīng)抗原刺激活化后分泌細(xì)胞因子,特別是Th2細(xì)胞分泌IL-4、IL-5、IL-1O等,除輔助B細(xì)胞活化分化
41、變成漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體,還有調(diào)節(jié)抗體產(chǎn)生的作用。(3)B細(xì)胞:經(jīng)抗原次級(jí)后變成漿細(xì)胞合成并分泌抗體,在對(duì)應(yīng)抗原再次應(yīng)答時(shí)B細(xì)胞是主要的抗原提呈細(xì)胞 (APC),可處理并提呈抗原給 Th細(xì)胞,使之活化。(4)非胸腺依賴抗原(Tl-Ag)直接刺激B 細(xì)胞產(chǎn)生IgM類抗體,如脂多糖或肺炎球菌莢膜多糖抗原可直接與B細(xì)胞表面的lg結(jié)合,刺激其分化為漿細(xì)胞。6. 什么是自身抗原 ?它是怎樣產(chǎn)生的?有何臨床意義?一般來說,自身物質(zhì)對(duì)自身沒有抗原性。在一定條件下,自身物 質(zhì)對(duì)自身發(fā)揮抗原作用,引起免疫應(yīng)答,稱之為自身抗原。自身抗原產(chǎn)生的原因:(1)隱蔽的自身抗原:某些自身物質(zhì)在正常條件下與血流和免疫系統(tǒng)相對(duì)隔絕,
42、稱為隱蔽的自身抗原。外傷、感染或手術(shù)不甚等原因,使這些物質(zhì)進(jìn)入血 流,引起自身免疫應(yīng)答。例如眼外傷后,眼葡萄膜色素和眼晶體蛋白釋放可引起交感性眼炎和過敏性眼炎;精子抗原 釋放引起男性不育癥;甲狀腺球蛋白釋放引起變態(tài)反應(yīng)性甲狀腺炎;腦脊液和周圍神經(jīng)的髓鞘蛋白的釋放引起脫髓鞘 腦脊髓炎和外周神經(jīng)炎。(2)修飾的自身抗原:在病原微生物感染、電離輻射或藥物等影響下,自身組織分子改變,形 成新的抗原決定簇或暴露出內(nèi)部的隱蔽的決定簇,成為自身抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答,引起自身免疫疾病。例如, 服用氨基比林或甲基多巴,可改變粒細(xì)胞或紅細(xì)胞表面的化學(xué)結(jié)構(gòu),出現(xiàn)新的抗原決定簇,從而引起粒細(xì)胞減少癥或 自身免疫性
43、溶血性貧血。7 .試述抗原抗體反應(yīng)的基本原理??贵w能夠特異性結(jié)合是基于兩種分子間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性,這兩種特性是由抗原與抗體分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)決定的。抗原抗體反應(yīng)分為兩個(gè)階段:第一階段為抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合階段,此階段 反應(yīng)快,僅需幾秒鐘至幾分鐘,但不出現(xiàn)可見反應(yīng)。 第二階段為可見反應(yīng)階段,抗原抗體復(fù)合物在環(huán)境因素 (如電解質(zhì)、pH、溫度、補(bǔ)體)的影響下,進(jìn)一步交聯(lián)和聚集,表現(xiàn)為凝集、沉淀、溶解、補(bǔ)體結(jié)合介導(dǎo)的生物現(xiàn)象等肉眼可見的反 應(yīng)。此階段反應(yīng)慢,往往需要數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)。8. 簡(jiǎn)述HVGR和GVHR的主要區(qū)別。HVGR是由宿主體內(nèi)致敏的免疫效應(yīng)細(xì)胞和抗體對(duì)移植物進(jìn)行攻擊,導(dǎo)致移植 物排斥
44、;而GVHR是由移植物中的抗原特異性淋巴細(xì)胞,即“過路”淋巴細(xì)胞識(shí)別宿主抗原而發(fā)生的一種排斥反應(yīng)。這種反應(yīng)不僅導(dǎo)致移植失敗,而且還能給受者造成嚴(yán)重后果。9. T細(xì)胞亞群檢測(cè)有何臨床意義 ?T細(xì)胞亞群檢測(cè)已作為臨床輔助診斷與研究的一種重要手段,對(duì)各種疾病如自身免 疫病、免疫缺陷病、病毒感染、惡性腫瘤等的發(fā)生、發(fā)展、臨床療效考核和預(yù)后估計(jì)都具有極其重要的意義;對(duì)了解 機(jī)體的免疫狀態(tài)也有十分重要的意義。10 簡(jiǎn)述ELISA的基本原理。使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種 酶連接成酶標(biāo)抗原或酶標(biāo)抗體,這種酶標(biāo)抗原或酶標(biāo)抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),
45、令受檢標(biāo) 本(測(cè)定其中的抗原或抗體)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化形成有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的 深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可極大地放大反應(yīng)效果,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。11. 試述直接 Coomb s試驗(yàn)與間接 Coomb s試驗(yàn)的共同點(diǎn)與不同點(diǎn)。直接 Coomb s試驗(yàn)主要用于檢查已吸附在紅細(xì)胞上的不完全抗體。 此試驗(yàn)常用于新生兒溶血癥、自
46、身免疫性溶血癥及特發(fā)性自身免疫性貧血等檢查。間接Coombs試驗(yàn)主要用于檢查血清中游離的不完全抗體。此試驗(yàn)多用于檢測(cè)母體Rh(D)抗體,可及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥的發(fā)生。亦可對(duì)紅細(xì)胞抗原不相容性輸血所產(chǎn)生的血型抗體進(jìn)行檢測(cè)。12. 簡(jiǎn)述ELISA雙抗體夾心法的操作步驟。(1)特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。(2)加受檢標(biāo)本:使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)間,讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合,形成固相抗原 抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。(3)加酶抗體:使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受
47、檢物質(zhì)的量呈正相關(guān)。(4)加底物:夾心復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。13. ELISA操作的注意事項(xiàng)有哪些 ?(1)加樣:在ELISA中除了包被外,一般需進(jìn)行45次加樣。在定性測(cè)定中有時(shí)不 強(qiáng)調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性,例如規(guī)定為加樣1滴。此時(shí)應(yīng)該使用相同口徑的滴管,保持準(zhǔn)確的加樣姿勢(shì),使每滴液體的體 積基本相同。在定量測(cè)定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時(shí)應(yīng)將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現(xiàn)氣泡。(2)孵育:在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加結(jié)合物后,此時(shí)反應(yīng)的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定的要求,保溫容器最好是水浴箱,可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)⑵桨宸旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應(yīng)該是金屬的,傳熱容易。如用保溫箱,空濕 盒應(yīng)預(yù)先放在其中,以平衡溫度,這一步驟在室溫較低時(shí)更為重要。加入底物后,反應(yīng)時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。(3)洗滌:洗
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