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1、畢 業(yè) 論 文(設(shè)計)題 目 番茄紅素提取工藝的研究 指導(dǎo)老師 專業(yè)班級 生物技術(shù)及應(yīng)用 071 姓 名 學(xué) 號 2010年5月30日摘要本文對超聲波提取番茄紅素的條件做了研究,確定了提取的最佳工藝條件。通過單因素試驗來研究影響番茄紅素的提取效果的主要因素:提取劑的選擇、提取溫度、提取時間、超聲功率、添加劑。根據(jù)這些因素選出較優(yōu)水平進行正交試驗。結(jié)果分析表明:以乙酸乙酯作為提取溶劑,提取溫度45,提取時間6min,超聲功率120w,0.5%nacl溶液為添加劑時提取條件最佳;提取時間是最主要的影響因素。關(guān)鍵詞:番茄紅素;提??;影響因素;添加劑目 錄引言. 11材料與儀器.11.1實驗材料.11
2、.2實驗試劑.11.3實驗儀器.22試驗方法.22.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制.22.2樣液的制備.22.3單因素試驗方案.22.3.1不同提取劑對提取效果的影響.22.3.2時間對提取效果的影響.32.3.3溫度對提取效果的影響.32.3.4超聲功率對提取效果的影響.32.3.5添加劑對提取效果的影響.32.4正交試驗方案表.33結(jié)果與分析43.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作.43.2單因素試驗分析.53.2.1不同提取劑對提取效果的影響.53.2.2時間對提取效果的影響.53.2.3溫度對提取效果的影響.63.2.4超聲功率對提取效果的影響.63.2.5添加劑對提取效果的影響.73.3正交試驗分析.74.結(jié)論 .
3、8參考文獻 .10引言番茄紅素是一種天然類胡蘿卜素,由于最早從番茄中分離制得,故稱番茄紅素1。與其他類胡蘿卜素一樣,番茄紅素由細菌、藻類及植物生物合成,動物自身無法合成,只能從食物中攝取。番茄紅素為開鏈?zhǔn)讲伙柡皖惡}卜素,其抗氧化性很強,是ve的100倍,是-胡蘿卜素的2倍多。番茄紅素還是許多類胡蘿卜素生物合成的中間體,經(jīng)過環(huán)化可形成其他類胡蘿卜素。番茄紅素具有抗氧化、清除自由基、促進細胞間連接與傳導(dǎo)、防癌抗癌等多種生理功能2。番茄紅素是一種很有發(fā)展前途的新型功能性天然色素,是目前國際上功能性食品成分研究中的一個熱點。番茄紅素的提取方法主要有有機溶劑提取法、皂化法、超臨界co2萃取法、色譜法和
4、超聲波提取法3 4。超聲波提取法能大大的縮短提取時間,提高提取效率。通過單因素試驗和正交試驗研究番茄紅素的最佳提取條件,為進一步開發(fā)利用這種功能性天然色素提供了一定的參考56。1 材料與儀器1.1實驗材料 新鮮大番茄,購于都尚超市1.2實驗試劑乙酸乙酯溶液:分析純,浙江杭州雙林化工試劑廠甲苯溶液:分析純,上海三鷹化學(xué)試劑有限公司石油醚溶液:分析純,杭州煉油廠丙酮溶液:分析純,上海三鷹化學(xué)試劑有限公司氯仿溶液:分析純,浙江迪耳藥液有限公司naoh:中國上海試劑總廠蘇丹i精制品:上海三鷹化學(xué)試劑有限公司無水乙醇:安徽安特生物化學(xué)有限公司蔗糖:杭州大方化學(xué)試劑廠nacl:中國上海試劑總廠ph試紙:上
5、海三愛思試劑有限公司番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取蘇丹i精制品0.0250g,加無水乙醇溶解并定溶至500ml:即濃度為50ug/ml1.3實驗儀器超聲提取器,昆山市超聲儀器有限公司,型號kq-200vde型雙頻數(shù)控電子天平,梅特勒-托利多稱重設(shè)備有限公司,型號sps202f,組織破碎機,金壇富化儀器有限公司,型號多功能878b721分光光度計,上海精密科學(xué)儀器有限公司,型號16c142實驗方法2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制準(zhǔn)確稱取蘇丹紅i色素0.0250g,溶于無水乙醇中,用無水乙醇定容至500ml,再準(zhǔn)確吸取溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml,分別注入50ml容量瓶中。用無水乙醇定容至刻
6、度,混勻后相當(dāng)于0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ug/ml番茄紅素的標(biāo)準(zhǔn)溶液,以無水乙醇作空白,由于番茄紅素在484nm波長下吸光度最大,試驗用721紫外分光光度計在484nm處測其吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,作線性回歸方程78。2.2樣液的制備將市售新鮮番茄去皮和籽,用組織破碎機均勻破碎,在破碎后的番茄糊中適當(dāng)加入10%naoh溶液,加熱攪拌,反應(yīng)完畢時水洗,得到中性的番茄糊。2.3 單因素試驗方案2.3.1不同提取劑對提取效果的影響稱取5g番茄糊,將其置于三角瓶中,以料液比為1:3的量加入不同有機溶劑,依次分別為:甲苯、乙酸乙酯、石油醚、丙酮、氯仿。然后在提取溫度45,超聲功率10
7、0w的超聲波提取器中避光提取6min。將提取物過濾后取濾液,測其吸光度值,計算番茄紅素含量,選出最佳提取溶劑。2.3.2時間對提取效率的影響稱取5g番茄糊5份,按照1:3(w/v)的料液比加入乙酸乙酯溶液,提取時間依次為2min、4min、6min、8min、10min。然后在提取溫度45,超聲功率100w的超聲提取器中避光提取。將提取取物過濾后取濾液,測其吸光度值,計算番茄紅素含量,選出最佳提取時間。2.3.3溫度對提取效果的影響稱取5g番茄糊5份,按照1:3(w/v)的料液比加入乙酸乙酯溶液,提取溫度依次為25、35、45、55、65。然后在超聲功率為100w的超聲提取器中避光提取6min
8、。將提取物過濾后取濾液,測其吸光度值,計算番茄紅素含量,選出最佳提取溫度。2.3.4超聲功率對提取效果的影響稱取5g番茄糊5份,按照1:3(w/v)的料液比加入乙酸乙酯溶液,超聲功率依次為60w、80w、100w、120w、140w910。然后在提取溫度45的超聲提取器中避光提取6min。將提取物過濾后取濾液,測其吸光度值,計算番茄紅素含量,選出最佳提取超聲功率。2.3.5添加劑對提取效果的影響稱取5g番茄糊3份,一份加5ml濃度為0.5%的nacl溶液,另一份加5ml濃度為0.5%的蔗糖,第三份作為空白11。按照1:3(w/v)的料液比加入乙酸乙酯溶液,提取溫度45,在超聲功率為100w的超
9、聲提取器中避光超聲提取6min。將提取物過濾后取濾液,測其吸光度值,計算番茄紅素含量,選出較好的添加劑。2.4 正交試驗方案表根據(jù)單因素試驗,選出對影響番茄紅素的提取效果的主要因素進行正交試驗,并建立正交試驗方案表。表2.1 正交試驗因素水平表水平abcd提取溫度()提取時間(min)超聲功率(w)添加劑125(1)2(1)100(1)0.5%的nacl溶液(1)235(2)4(2)120(2)0.5%的蔗糖溶液(2)345(3)6(3)140(3)不加任何添加劑(3)表2.2 正交試驗表水平abcd提取溫度()提取時間(min)超聲功率(w)添加劑1111121222313334212352
10、231623127313283213933213結(jié)果與分析3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作圖3.1 番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)曲線3.2單因素試驗分析3.2.1不同提取劑對提取效果的影響圖3.2 不同有機溶劑對提取效果的影響從圖3.2可以看出氯仿提取效果最好,其次分別為乙酸乙酯、甲苯、石油醚,丙酮最差。但乙酸乙酯比氯仿毒性較小,成本也較低的有機溶劑,而且提取效果尚好。所以,將乙酸乙酯作為最佳提取溶劑。3.2.2提取時間對提取效果的影響圖3.3 提取時間對提取效果的影響試驗結(jié)果表明,提取時間對提取效果的影響很大。從圖3.3可以看出在提取時間為6min時,番茄紅素的含量達到最大值。在提取6min后,繼續(xù)反應(yīng)會導(dǎo)致番茄紅素結(jié)
11、構(gòu)受到破壞,使番茄紅素含量下降。所以,選擇6min做為最佳提取時間。3.2.3溫度對提取效果的影響圖3.4 提取溫度對提取效果的影響試驗結(jié)果表明,提取溫度對提取率的影響很大。在提取溫度為45時,吸光度達到最大值,其后吸光度呈明顯下降趨勢。在高于45時,番茄紅素被破壞,導(dǎo)致提取率下降,因此可選擇45作為提取溫度。3.2.4超聲功率對提取效率的影響圖3.5 超聲功率對提取效果的影響當(dāng)功率增大到一定程度時,可能會使番茄紅素結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,提取率下降。且由圖3.5可知,輸出功率增大到140w后,提取率增加不明顯,因此選擇超聲輸出功率140w作為適宜提取功率。3.2.5添加劑對提取效果的影響表3.1 添加
12、劑對提取效果的影響添加劑吸光度番茄紅素含量(mg/g)0.5%的nacl溶液0.7083.320.5%的蔗糖溶液0.8323.90不加任何添加劑0.5512.67從表格可以看出加入添加劑以后,番茄紅素含量明顯增大,而且加入0.5%蔗糖溶液比加0.5%的nacl溶液增加得更明顯。3.3正交試驗分析表3.2 正交試驗直觀分析表試驗號提取溫度()a提取時間(min)b超聲功率(w)c添加劑d番茄紅素含量(mg/g)12521000.5%的nacl1.4222541200.5%的蔗糖3.273256140不加1.564352120不加1.0953541400.5%的nacl2.7163561000.5
13、%的蔗糖3.6874521400.5%的蔗糖1.038454100不加2.6894561200.5%的nacl3.70t12.0831.1802.5932.610t22.4932.8872.6872.660t32.4702.9801.7671.777極差0.4101.8000.9200.883在單因素試驗基礎(chǔ)上,對影響番茄紅素的提取效果的四個主要因素提取溫度、提取時間、超聲功率、添加劑所對應(yīng)的較優(yōu)水平進行正交試驗,由表3.2直觀分析可知,因各因素的主要因素:bcda,即最主要的影響因素是提取時間。a3b3c2d1提取效果是最好的,即提取溫度45,提取時間6min,超聲功率120w, 0.5%的
14、nacl溶液為添加劑。4.結(jié)論通過單因素試驗來研究影響番茄紅素的提取效果的主要因素:提取劑的選擇、提取溫度、提取時間、超聲功率、添加劑。根據(jù)這些因素選出較優(yōu)水平進行正交試驗。結(jié)果分析表明:以乙酸乙酯作為提取溶劑,提取溫度45,提取時間6min,超聲功率120w,0.5%nacl溶液為添加劑時提取條件最佳;提取時間是最主要的影響因素。超聲波提取法提取番茄紅素使提取的時間短,提取率較高,且經(jīng)濟簡便,應(yīng)用也逐漸的普遍。參考文獻1 許文玲, 李雁, 王雪霞. 番茄紅素的提取及生理功能研究j. 農(nóng)產(chǎn)品加工, 2006, 4 (7): 3-102 王燕燕, 邸進申, 鄭宇. 皂化對番茄紅素提取影響的研究j
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