濕地生態(tài)動態(tài)監(jiān)測技術(shù)規(guī)程

1、濕地生態(tài)動態(tài)監(jiān)測技術(shù)規(guī)程目 錄1.范圍32.規(guī)范性引用文件33.術(shù)語和定義33.1 湖泊濕地33.2 沼澤濕地43.3 濕地生態(tài)43.4 濕地生態(tài)動態(tài)監(jiān)測44.通則44.1 濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測基本條件44.2 質(zhì)量控制44.3 儀器設(shè)備檢定45.監(jiān)測方案的結(jié)構(gòu)內(nèi)容55.1 采樣點布設(shè)55.2 監(jiān)測時間和頻率55.2.1 背景調(diào)查55.2.2 自然指標65.2.3 生物指標65.3 監(jiān)測指標65.3.1 宏觀指標65.3.2 水環(huán)境指標65.3.3 土壤指標75.3.4 生物多樣性指標75.4 監(jiān)測方法75.4.1 宏觀指標監(jiān)測方法75.4.2 水環(huán)境指標監(jiān)測方法85.4.3 土壤指標監(jiān)測方法

2、95.4.4 生物多樣性指標監(jiān)測方法106.評價技術(shù)與方法186.1 水質(zhì)質(zhì)量評價186.2 土壤質(zhì)量評價186.3 生物多樣性評價196.4 濕地面積退化評價196.5 植被現(xiàn)狀與趨勢評價196.6 濕地生態(tài)綜合評價197.監(jiān)測報告與數(shù)據(jù)資料207.1文本格式207.1.1 文本規(guī)格217.1.2 封面格式217.1.3 封里-內(nèi)容217.2 濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測報告編寫內(nèi)容217.3 監(jiān)測數(shù)據(jù)資料22附錄231. 范圍 本規(guī)程給出了濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測的技術(shù)規(guī)定，適用于我國湖、沼濕地的生態(tài)動態(tài)監(jiān)測。2. 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本規(guī)程的引用而成為本規(guī)程的條款。凡是注日期的引用文件

3、，其隨后所有的修改單或修訂版均不適用于本規(guī)程，然而，鼓勵根據(jù)本規(guī)程達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本規(guī)程。hj495-2009 水質(zhì)采樣方案設(shè)計技術(shù)規(guī)定hj493-2009 水質(zhì)采樣樣品的保存和管理技術(shù)規(guī)定hj/t166-2004 土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范gb 3838-2002 地表水環(huán)境質(zhì)量標準gb15618-1995 土壤環(huán)境質(zhì)量標準gb 17378.7-2007 海洋監(jiān)測規(guī)范 第7部分：近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測3. 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標準。3.1 湖泊濕地湖泊岸邊或淺湖發(fā)生沼澤化過程而形成的濕地。按拉姆薩爾國際公約，湖

4、泊濕地還包括湖泊水體本身。3.2 沼澤濕地地表有薄層積水或經(jīng)常過濕并生長濕生植物或沼澤植物，土層有泥炭的濕地，包括沼澤和沼澤化草甸（簡稱沼澤濕地），是最主要的濕地類型。3.3 濕地生態(tài)介于水、陸生態(tài)系統(tǒng)之間的一類生態(tài)單元。濕地生物群落與其相互作用的地理環(huán)境所構(gòu)成的自然系統(tǒng)。其生物群落由水生和陸生種類組成，物質(zhì)循環(huán)、能量流動和物種遷移與演變活躍，具有較高的生態(tài)多樣性、物種多樣性和生物生產(chǎn)力。3.4 濕地生態(tài)動態(tài)監(jiān)測應(yīng)用多平臺、多時相、多波段和多源數(shù)據(jù)對濕地生態(tài)資源與環(huán)境各要素時空變化進行動態(tài)的監(jiān)視與探測，是濕地生態(tài)系統(tǒng)對自然變化及人類活動所作出反應(yīng)的觀測以及評價，是濕地生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的時空格

5、局變化的度量。4. 通則4.1 濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測基本條件 為保證濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測的科學(xué)性、有效性，濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測應(yīng)具備必要的采樣、實驗條件和儀器設(shè)備，具有樣品采集、分析、鑒定和數(shù)據(jù)分析處理的基本能力。暫無條件和能力完成的監(jiān)測實驗項目，須委托已通過國家計量質(zhì)量認證并具備監(jiān)測能力的監(jiān)測機構(gòu)承擔(dān)相應(yīng)的監(jiān)測工作。 4.2 質(zhì)量控制 從事濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測的機構(gòu)須具備全程質(zhì)量保證和質(zhì)量控制的運行機制，執(zhí)行監(jiān)測質(zhì)量控制與保證的規(guī)定和要求，對監(jiān)測的全過程進行質(zhì)量控制。 4.3 儀器設(shè)備檢定 所有在監(jiān)測過程中使用的計量檢測器、設(shè)備和計量器具必須在有效檢定期內(nèi)使用，并在規(guī)定的檢定周期內(nèi)進行檢定。

6、可自檢的計量檢測器、設(shè)備和計量器具應(yīng)按期進行自檢。5. 監(jiān)測方案的結(jié)構(gòu)內(nèi)容5.1 采樣點布設(shè)1）采樣點應(yīng)能覆蓋所需的生態(tài)環(huán)境監(jiān)測和評價范圍，除特殊需要（因地形、水深和監(jiān)測目標所限制）外，所有采樣點應(yīng)在監(jiān)測范圍內(nèi)均勻布設(shè)，可采用網(wǎng)格式、斷面或梅花式等布設(shè)方式，以便確定監(jiān)測要素的分布趨勢；2）水樣采用斷面式的布設(shè)方法，土壤樣布設(shè)點與水樣保持一致，分別根據(jù)水質(zhì)采樣方案設(shè)計技術(shù)規(guī)定（hj4952009）和土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范hj/t166-2004采集水樣和土壤樣；3）水生浮游植物和水生浮游動物監(jiān)測點一般盡量與水化學(xué)監(jiān)測采樣點一致；4）挺水植物、浮葉植物、沉水植物的樣方面積應(yīng)不小于群落最小面積，可根據(jù)

7、種-面積曲線來確定。挺水和浮葉植物樣方面積一般采用1m1m或0.5m0.5m，沉水植物樣方面積為0.5m0.5m或0.2m0.2m；采樣點的布設(shè)可采用斷面法，根據(jù)湖泊的形狀、水文情況、植物的分布等設(shè)置斷面，斷面最好是平行排列，或為“之”字形。斷面與斷面的距離一般為50米-100m，（可根據(jù)實際情況而定）。斷面上定點數(shù)目最好為奇數(shù)，即斷面中間應(yīng)設(shè)一個點，沒有大型水生植物的地區(qū)可不必設(shè)定。5）鳥類監(jiān)測樣點布設(shè)見鳥類監(jiān)測方法；6）采樣一經(jīng)確定，不應(yīng)輕易更改，不同時期的采樣點應(yīng)保持不變。5.2 監(jiān)測時間和頻率5.2.1 背景調(diào)查針對濕地生態(tài)環(huán)境監(jiān)測的具體范圍，在正式開展生態(tài)環(huán)境監(jiān)測以前，應(yīng)進行濕地生態(tài)

8、環(huán)境的背景調(diào)查監(jiān)測，以便確定常規(guī)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測指標體系及生態(tài)環(huán)境評價的背景值。背景值主要包括濕地地理位置，濕地面積，水域面積，植被面積，水體總量，地表徑流量，年排入量，降雨量，蒸發(fā)量，湖、沼濕地與地下水的交換量，供給水量等。背景調(diào)查監(jiān)測應(yīng)在一個年度內(nèi)完成，調(diào)查頻率應(yīng)不少于4次，分別在春、夏、秋、冬四季各開展一次調(diào)查監(jiān)測。5.2.2 自然指標為保證采樣的連續(xù)性和周期性，通常水環(huán)境和土壤環(huán)境中的自然指標中可在線連續(xù)監(jiān)測的指標如水量、水溫、電導(dǎo)率、ph、do等可通過在線自動監(jiān)測系統(tǒng)進行實時連續(xù)監(jiān)測，其它指標的監(jiān)測時間設(shè)置為豐水期，平水期，枯水期各采樣一到兩次。5.2.3 生物指標1)植物監(jiān)測時要選擇植

9、物開花或結(jié)實的時期，分不同季節(jié)進行調(diào)查，以獲得全面而準確的資料和典型的標本。由于全國各地氣候差異懸殊，各監(jiān)測區(qū)應(yīng)根據(jù)本地氣候和植物生長發(fā)育特點具體確定最佳監(jiān)測時期。2)鳥類鳥類數(shù)量監(jiān)測分為繁殖季和越冬季兩次進行，繁殖季一般為每年的5月-7月，越冬季為12月-次年2月。各地應(yīng)根據(jù)本地的午后特點確定最佳檢測時間，其原則是：監(jiān)測時間應(yīng)選擇監(jiān)測區(qū)域內(nèi)的水鳥種類和數(shù)量均保持相對穩(wěn)定的時期；監(jiān)測應(yīng)在較短時間內(nèi)完成，以減少重復(fù)記錄。遷徙情況監(jiān)測主要在春、秋鳥類遷徙季節(jié)進行。3）魚類捕撈法通常應(yīng)在每個季度調(diào)查監(jiān)測一次，一般以5月、8月、11月和2月代表春季、夏季、秋季和冬季。也可以通過與水產(chǎn)部門、漁民及相關(guān)管

10、理人員溝通，獲得相應(yīng)資料 4）兩棲動物、爬行動物等其它獸類獸類監(jiān)測主要在冬季，與冬季鳥類監(jiān)測同時進行，在繁殖季節(jié)對鳥類進行數(shù)量監(jiān)測時，也應(yīng)兼顧對獸類的監(jiān)測。5.3 監(jiān)測指標5.3.1 宏觀指標濕地地理位置，濕地面積，水域面積，植被面積。5.3.2 水環(huán)境指標水體總量，地表徑流量，年排入量，降雨量，蒸發(fā)量，湖、沼濕地與地下水的交換量，供給水量，水溫，電導(dǎo)率，懸浮物，鹽度，堿度， ph，do，cod，tn，tp，nh4+-n，no3-n，co32-，cl-，so42，na+，k+， ca2+，mg2+及重金屬cu2+，zn2+，pb4+，cd2+等。5.3.3 土壤指標土壤含水量，ph，電導(dǎo)率，堿

11、度，有機質(zhì)含量，tds，n，p，k含量，co32-，hco3-，cl-，so42-，na+，k+，ca2+，mg2+。5.3.4 生物多樣性指標1）動物指標：鳥類、魚類、浮游動物和底棲動物的種類組成和生物數(shù)量，瀕危野生動物數(shù)量、動態(tài)及遷徙規(guī)律。2）植物指標：浮游植物、沉水植物、挺水植物和浮游植物的數(shù)量、生物量及群落面積，珍稀植物及其分布特征。3）微生物指標：細菌、真菌、藻類、原生動物和糞大腸菌群。5.4 監(jiān)測方法5.4.1 宏觀指標監(jiān)測方法濕地地理位置，濕地面積，水域面積，植被面積等指標利用遙感衛(wèi)星圖片進行解析，結(jié)合地形圖、野外調(diào)查以及現(xiàn)有資料查詢獲得。1）衛(wèi)星遙感資料的獲取根據(jù)不同實際需求及

12、各種數(shù)據(jù)源的優(yōu)缺點選擇適合的衛(wèi)星遙感數(shù)據(jù)。2）遙感圖像的校正（以spot為例）spot圖像在地形圖上選擇地面控制點（dcp），采用一般齊次多項式方法進行幾何校正，再用gps實地采集dcp作為補充進行二次校正，經(jīng)幾何校正后的spot圖像采用最鄰近內(nèi)插法進行重采樣。3）圖像增強與圖像復(fù)合方法在圖像中選擇感興區(qū)，分析濕地的圖像特征，然后用直線拉伸法對圖像進行三線性變換分段拉伸，使?jié)竦刂脖?、水域與和周圍地域的光譜間差異增大。采用銳化his變換的方法，分別將各spot圖像與相應(yīng)的etm+圖像進行融合，得到包含了spot和etm+兩種數(shù)據(jù)信息的復(fù)合圖像。然后采用經(jīng)過融合的圖像數(shù)據(jù)進行rgb真彩色合成，并加

13、入公里格網(wǎng)，以tiff格式保存。4）濕地信息提取進行濕地信息提取，首先進行分類系統(tǒng)的確定。一個分類系統(tǒng)具有兩個關(guān)鍵組成部分：即一套解譯標志和一套分類規(guī)則。在各種不同濕地區(qū)及其它土地利用類型選取觀察點，確定各點坐標，然后利用gps儀在野外對各選擇點進行定位考察，確定其類型、地物景觀狀況，并作好記錄，結(jié)合影像上對應(yīng)點進行判讀，分析各濕地類型的圖譜特征，建立相應(yīng)的解譯標志。然后采用常用的監(jiān)督分類、非監(jiān)督分類和ndvi植被指數(shù)法進行信息提取。5）結(jié)果計算采用gis對修正后的圖像進行空間分析，計算濕地面積、水域面積和不同植被面積。5.4.2 水環(huán)境指標監(jiān)測方法1）樣品采集和保存根據(jù)水質(zhì)采樣方案設(shè)計技術(shù)規(guī)

14、定（hj4952009）采集水樣，并參照水質(zhì)采樣樣品的保存和管理技術(shù)規(guī)定（hj4932009）進行水樣的保存。 2）水文、水質(zhì)指標監(jiān)測方法(1) 背景值水體總量，地表徑流量，年排入量，降雨量，蒸發(fā)量，湖、沼濕地與地下水的交換量，供給水量通過資料調(diào)查獲得。(2) 溫度、電導(dǎo)率、ph、do(3) 通過布置在現(xiàn)場的在線自動監(jiān)測系統(tǒng)進行實時連續(xù)監(jiān)測。其它監(jiān)測指標測定方法如表1：表1. 水環(huán)境指標的監(jiān)測方法監(jiān)測指標監(jiān)測方法引用標準cod快速消解分光光度法hj/t 399-2007bod稀釋與接種法hj 505-2009nh4+-n水楊酸分光光度法hj 536-2009no3-n離子色譜法no2-n離子色

15、譜法tn堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法gb/t 11894-89tp鉬酸銨分光光度法gb/t 11893-89濁度濁度儀gb/t 13200-91懸浮物重量法gb/t 11901-89co32-和hco3-滴定法dz/t 0064.49-93cl-、so42-、no3-、no2-離子色譜法na+、k+、ca2+、mg2+cu2+、zn2+、pb4+、cd2+原子吸收分光光度法gb 11907-89監(jiān)測結(jié)果按附錄表一填寫數(shù)據(jù)報表。5.4.3 土壤指標監(jiān)測方法1）樣品采集和保存土壤樣品根據(jù)土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范hj/t166-2004采集樣品并保存。2）土壤指標監(jiān)測方法（1）預(yù)處理方法 土壤樣的處理

16、土壤樣制備過程需要經(jīng)過風(fēng)干、磨細、過篩、混勻、裝瓶，以備各項測定之用。風(fēng)干：將采回的土壤樣，放在木盤或塑料布上，攤成薄薄的一層，置于室內(nèi)通風(fēng)陰干，土壤樣半干時，須將大泥塊捏碎，風(fēng)干場所力求干燥通風(fēng)，樣品風(fēng)干后應(yīng)揀去動植物殘體和泥塊。過篩：將風(fēng)干后的土壤樣用木棍研細，使之全部通過2 mm孔徑的篩子?；靹蚝?，四分法分成兩份，一份作為物理分析用，一份作為化學(xué)分析用，化學(xué)分析用的土壤樣還必須進一步研細，使之全部通過1 mm孔徑篩子。保存：一般樣品用塑料瓶保存半年或一年，以備必要時查核之用，樣品瓶上標簽須注明樣號、采樣地點、泥類名稱、試驗區(qū)號、深度、采樣日期、篩孔。 浸提液的制備將風(fēng)干土壤樣過2 mm篩

17、后，按照1:5的水(無二氧化碳水)泥比置于500毫升三角瓶中，加入干凈的玻璃珠加塞震蕩，每隔30分鐘震蕩一次，每次持續(xù)一分鐘，共震蕩5次，經(jīng)抽濾獲得土壤樣的浸出液。（2）土壤樣品電導(dǎo)率的測定可稱取4 g風(fēng)干泥放在25 mm200 mm的大試管中，加水20 ml，蓋緊皮塞，振蕩3 min，靜置澄清后，不必過濾，直接測定。（3）土壤其它指標的測定使用土壤浸提液測定，測定方法同水樣測定，如下：表2. 土壤指標的監(jiān)測方法監(jiān)測指標監(jiān)測方法方法來源tds稱量法或八大離子總和相加法（鹽堿性湖泊）tn堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法gb/t 11894-89tp鉬酸銨分光光度法 gb/t 11894-89co3

18、2-, hco3-滴定法 gb/t 11893-89cl-, so42-, no3-, no2-離子色譜法dz/t 0064.49-93na+, k+, ca2+, m g2+, cu2+, zn2+, pb4+, cd2+原子吸收分光光度法 gb 11907-89監(jiān)測結(jié)果按附錄表二填寫數(shù)據(jù)報表。5.4.4 生物多樣性指標監(jiān)測方法1）樣品采集和保存（1）采樣設(shè)備： 采水器a）顛倒采水器b）卡蓋式采水器 拖網(wǎng)：規(guī)格如表3表3. 網(wǎng)具名稱及規(guī)格網(wǎng)具名稱網(wǎng)長(cm)網(wǎng)口內(nèi)徑（cm）網(wǎng)口面積（m2）孔寬近似值（ mm）適用對象淺水i型浮游生物網(wǎng)145500.20.5050.507大型浮游動物淺水型浮游

19、生物網(wǎng)14531.60.080.1600.169中、小型浮游動物淺水型浮游生物網(wǎng)140370.10.077浮游植物 水草夾：規(guī)格如表4表4. 水草夾規(guī)格型號網(wǎng)口面積（m2）外形尺寸（cm）（合攏時）外形尺寸（cm）（展開時）適用對象適用范圍（m）ccyq-20.27045659045 50挺水、浮葉、沉水植物0.520 采泥器a)抓斗式呆泥器：由兩個可活動的瓢瓣構(gòu)成，兩瓣的張口面積為0. l m2。兩顎瓣頂部由一條鐵鏈連接，當鐵鏈被掛到鋼絲繩末端的掛鉤上時，兩顎瓣成開放狀態(tài)。采泥器一經(jīng)觸及底泥，掛鉤錘即下垂與鐵鏈脫鉤。當采泥器上提時，通過掛鉤對橫梁的拉力，連接麗顎瓣的鋼絲繩拉緊，使兩顎瓣閉合，

20、將沉積物取入。 b) 彈簧采泥器：該采泥器主要靠彈簧作用使左右顎插入沉積物內(nèi)取樣。兩瓣的張口面積為0.1m2。操作時，把采泥器放在木制框架上，將負載板插入導(dǎo)管中，在負載板的下孔中插入鐵銷，上孔中插入一長鐵桿，另外鐵桿下方基架臺放一塊三角鐵。然后，用鐵桿將負載板撬起，左右掛分別鉤住兩顎瓣限動臂上的眼環(huán)，使彈簧被壓縮受力。這時再把左右顎瓣臂向上推，使之與釋放桿上的制動栓卡在一起，兩顎瓣即成開放狀態(tài)。當采泥器平穩(wěn)地降至底泥時，由兩個啟動板的觸底帶動釋放將導(dǎo)管周圍的環(huán)托起，掛鉤即脫落，在彈簧的作用下顎瓣捕入底質(zhì)內(nèi)。此時，制動栓互相脫離。當鋼絲繩上提時，兩瓣閉臺將沉積物取入。c)“大洋-50”型采泥器：

21、結(jié)構(gòu)基本與抓斗式采泥器相同，取樣面積為0.05 m2。適于無動力設(shè)備的小船取樣。（2）樣品采集及保存浮游植物一般只調(diào)查水樣，水樣采集應(yīng)按以下要求進行：a) 用顛倒采水器或卡蓋式采水器或淺水型浮游生物網(wǎng)，其使用方法及操作步驟與水質(zhì)項目采樣相同；b) 采樣層次視調(diào)查需要、計劃規(guī)定和濕地水域?qū)嶋H水深而定；c) 水樣采集務(wù)必與水質(zhì)項目的采水同步進行；d) 所需水樣量一般為500 ml；e) 采樣后，應(yīng)及時按每升水樣加6 ml8 ml碘液固定。浮游動物使用拖網(wǎng)采樣，樣品采集應(yīng)按以下要求進行：a) 分別用淺水i、型浮游生物網(wǎng)自底至表垂直拖曳采集浮游動物；b) 每次下網(wǎng)前應(yīng)檢查網(wǎng)具有否破損，發(fā)現(xiàn)破損應(yīng)及時修

22、補或更換網(wǎng)衣；檢查網(wǎng)底管和流量計是否處于正常狀態(tài)，并把流量計指針撥至指零；放網(wǎng)入水，當網(wǎng)口貼近水面時，需調(diào)整計數(shù)器指針于零的位置；網(wǎng)具到達水底后可立即起網(wǎng)；c) 把網(wǎng)升至適當高度，用沖水設(shè)備自上而下反復(fù)沖洗網(wǎng)衣外表面（切勿使沖洗水進入網(wǎng)口），使粘附于網(wǎng)上的標本集中于網(wǎng)底管內(nèi)；將網(wǎng)收于船上，開啟網(wǎng)底管活門，把標本裝入標本瓶，再關(guān)閉網(wǎng)底管活門，用洗耳球吸水沖洗篩絹套，如此反復(fù)多次，直至殘留標本全部收入標本瓶中；d) 按樣品體積的5%，加入甲醛溶液進行固定。挺水植物、浮葉植物以及沉水植物適用水草夾采樣，樣品采集按以下要求進行：a）將水草夾的鐵夾完全打開，投入水中，到達水底后可關(guān)閉鐵夾，勻速上拉；b）

23、將水草夾收入船板之上，打開鐵夾，去除枯死的枝葉及雜質(zhì)，放入編號袋中；c）當浮葉植物中有個體較小的植物（如紫萍、滿江紅等）時，應(yīng)用帶柄手抄網(wǎng)進行采集，采集時，慢慢地將帶柄手抄網(wǎng)斜插入漂浮植物群叢的下方，等待水面恢復(fù)平靜之后，慢慢提起，待水濾完，去除枯死的枝、葉及雜質(zhì)，將樣品裝入采集袋，編號。網(wǎng)具每次使用后要清理，可將網(wǎng)翻過來，用沒有水生植物的湖水進行清洗。底棲動物使用采泥器采樣，樣品采集按以下要求進行：a) 投放：將采泥器掛在掛鉤上，拉緊鋼絲繩，兩顎瓣自動張開。然后將采泥器慢速放至水面，緩慢下降，入水后再快速下降。b) 提升：開始用慢速，離底后改用快中速，接近水面時，再用慢速，將采泥器放在預(yù)先準

24、備好的白鐵盤中。先打開采泥器兩顎瓣上方的活門，然后將活門打開，使土壤樣落入盤中。c) 淘洗及分離樣本：將采到的沉積物樣品移入漩渦分離器中，打開分流器的閥門進水，里用激光水流通過漩渦發(fā)生器攪動樣品，浮選出比重輕的生物，比重大的生物連同余渣沉底。從出水口溢出的水體和生物留到篩子上，將截留在篩網(wǎng)內(nèi)的動物按形態(tài)大小及軟硬程度分別揀入盛水的器皿中，然后按照類別或軟硬分別裝瓶，并注意勿使小動物遺漏。d) 采泥標本一律用5%的甲醛溶液固定保存。微生物樣品采集及保存按以下要求進行：a) 采樣容器：通常采用以耐用玻璃制成的，帶螺旋帽或磨口玻塞的500 ml廣口瓶，也可用適當大小、廣口的聚乙烯塑料瓶或聚丙烯耐熱塑

25、料瓶。要求在滅菌和樣品存放期間，該材料不應(yīng)產(chǎn)生和釋放出抑制細菌生存能力或促進繁殖的化學(xué)物質(zhì)。螺旋帽必須配以氯丁橡膠襯墊。b) 采樣瓶的洗滌：一般可用加入洗滌劑的熱水洗刷采樣瓶，用清水沖洗干凈，最后用蒸餾水沖洗l2次。新的采樣瓶必須徹底清洗，先用水和洗滌劑清潔塵埃和包裝物質(zhì)，再用鉻酸和硫酸洗滌液洗滌，然后用稀硝酸溶液沖洗，以除去重金屬或鉻酸鹽的殘留物，最后用自來水沖洗干凈，再用蒸餾水淋洗。對于聚乙烯容器，可先用約1 mol/l鹽酸溶液清洗，再依次用稀硝酸溶液浸泡，蒸餾水沖洗干凈。c) 采樣瓶的滅菌：將洗滌干凈的采樣瓶蓋好瓶塞（蓋），用牛皮紙等防潮紙將瓶塞、瓶頂和瓶頸處包裹好，置干燥箱160170

26、干熱滅菌2h，或用高壓蒸汽滅菌器，121經(jīng)15 min滅菌。不能使用加熱滅茵的塑料瓶則應(yīng)浸泡在0.5%的過氧乙酸溶液中l(wèi)0 min或用環(huán)氧乙烷氣體進行低溫滅菌。聚丙烯耐熱塑料瓶，可用121高壓蒸汽滅菌15 min。d) 去氯：采集加氯處理的水樣時，余氯的存在會影響待測水樣在采集時所指示的真正細菌含量，因此須經(jīng)去氯處理?？稍谙礈旄蓛舻臉悠菲績?nèi)，于滅菌前按500 ml采樣瓶加入0.3 ml 10%na2s2o3溶液。然后蓋好瓶蓋（塞），如上所述的滅菌方法進行滅菌。當被測水樣含有高濃度重金屬時，則須在采樣瓶內(nèi)，于滅菌前加入螯合劑以減少金屬毒性，采樣點位置較遠，須長距離運輸?shù)倪@類水樣更為重要?？砂?0

27、0 ml采樣瓶加入1 ml15%的乙二胺四乙酸二鈉鹽（edta-na2）溶液。e) 采好的水樣，應(yīng)迅速運往實驗室，進行細菌學(xué)檢驗。一般從取樣到檢驗不宜超過2h，否則應(yīng)使用10以下的冷藏設(shè)備保存樣品，但不得超過6h。實驗室接到送檢樣后，應(yīng)將樣品立即放入冰箱，并在2h內(nèi)著手檢驗。如果因路途遙遠，送檢時間超過6h者，則應(yīng)考慮現(xiàn)場檢驗或采用延遲培養(yǎng)法。2）生物多樣性指標監(jiān)測方法 浮游生物a) 浮游生物（包括浮游動物和浮游植物）計數(shù)時，須將標本置入計數(shù)框內(nèi)，在顯微鏡下進行計數(shù)。常用計數(shù)框容量有0.1和1 ml兩種。計數(shù)前要將樣品充分搖勻，然后用滴管在水樣中部吸液移入計數(shù)框內(nèi)。移入之前要將蓋玻片斜蓋在計數(shù)

28、框上，樣品按準確定量注入，在計數(shù)框中一邊進樣，另一邊出氣，這樣可避免氣泡產(chǎn)生。注滿后把蓋玻片移正。計數(shù)片子制成后，稍候幾分鐘，讓浮游生物沉至框底，然后計數(shù)。不易下沉到框底的生物，則要另行計數(shù)，并加到總數(shù)之內(nèi)。b) 藻類和原生動物的計數(shù)：吸取0.1 ml樣品注入0.1 ml計數(shù)框。在1040或840倍顯微鏡下計數(shù)，藻類計數(shù)100個視野，原生動物全片計數(shù)。輪蟲則取1 ml注入1 ml計數(shù)框內(nèi)，在108倍顯微鏡下全片計數(shù)。以上各類均計數(shù)兩片取其平均值。如兩片計數(shù)結(jié)果個數(shù)相差15%以上，則進行第三片計數(shù)，取其中個數(shù)相近的兩片平均值。c) 計算（a) 把計數(shù)所得結(jié)果按下式換算成每升水中浮游植物的數(shù)量：式

29、中：n每升水中浮游植物的數(shù)量（個/l）； a計數(shù)框面積（ mm2）； ac計數(shù)面積（ mm2），即視野面積視野數(shù)或長條計數(shù)時長條長度參與計數(shù)的長條寬度鏡檢的長條數(shù)：vw1l水樣經(jīng)沉淀濃縮后的樣品體積（ ml）；v計數(shù)框體積（ ml）；n計數(shù)所得的浮游植物的個體數(shù)或細胞數(shù)。按上述方法進行采樣、濃縮、計數(shù)。a為400 mm2，vw為30 ml，v為0.1 ml，故vw/v=300。（b) 每升內(nèi)某計數(shù)類群浮游動物個體數(shù)n可按下式計算：n=nv1v2v3式中：n計數(shù)所得個體數(shù)；v1濃縮樣體積（ ml）；v2計數(shù)體積（ ml）；v3采樣量（l）。原水樣中每升內(nèi)浮游動物總數(shù)等于各類群個體數(shù)之和。 底棲動

30、物一般鑒定到科即可，技術(shù)系在鑒定的基礎(chǔ)上進行數(shù)量統(tǒng)計。用采泥器取樣采的底棲動物，應(yīng)該算出每平方米的數(shù)量，生物重量通常以濕重法，用天平，稱出屬、種的重量，每個個體的重量和平均重量。 挺水、浮葉及沉水植物a) 將每個樣方內(nèi)的全部植物鑒定到種，測量植物株高和株重，并記錄。b) 某植物單位面積數(shù)量為所有樣方內(nèi)的植株數(shù)量除以樣方數(shù)目，再乘以植被面積即為該植物的植株總數(shù)量；c) 某植物單位面積數(shù)量乘以株重即為該植物單位面積生物量。 魚類采用專門的捕撈工具進行捕撈，全部魚類要鑒定到種，并統(tǒng)計數(shù)量。測定每尾魚的體重和全長。 鳥類a) 直接計數(shù)法，監(jiān)測以步行為主，在比較開闊、生境均勻的大范圍區(qū)域可借助汽車、船只

31、進行調(diào)查，有條件的地方還可以開展航調(diào)；計數(shù)可以借助單筒或雙筒望遠鏡進行，如果群體數(shù)量極大，或群體處于飛行、取食、行走等運動狀態(tài)時，可以5、10、20、50、100等為計數(shù)單元來估計群體的數(shù)量；春秋候鳥遷徙情況的監(jiān)測以種類調(diào)查為主，記錄鳥類遷來的時間、高峰期、居留期、停歇時間、遷離時間以及主要停歇地。b) 在群體密度很高或是難于進行直接技術(shù)的地區(qū)可以采用樣方法，即通過隨機取樣來估計水鳥種群的數(shù)量。樣方大小一般不小于20 m20 m；同一監(jiān)測區(qū)域的樣方數(shù)量應(yīng)不低于8個，記錄方法同直接計數(shù)法。 兩棲動物、爬行動物等其它獸類動物a) 可采用野外調(diào)查、走訪和利用近期的野生動物調(diào)查資料相結(jié)合的方法，記錄到

32、種和亞種；b) 數(shù)量狀況可用常見、可見、罕見三個等級進行估測；c) 野外調(diào)查也可采用樣方法，通過計數(shù)在設(shè)定的樣方中所見到的動物實體，然后通過頻度分析來推算動物種群數(shù)量的調(diào)查方法，其中樣方盡可能設(shè)置為方形、圓形等規(guī)則幾何圖形，樣方面積不小于100 m100 m 微生物a) 培養(yǎng)（a) 細菌總數(shù)：培養(yǎng)異養(yǎng)細菌采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，稀釋度為104108，37培養(yǎng)24h，重復(fù)數(shù)為3，平板法計數(shù)；（b) 真菌：酵母菌采用馬鈴薯培養(yǎng)基，霉菌采用查氏培養(yǎng)基，稀釋度分別為103106、102105，25培養(yǎng)57天，重復(fù)數(shù)均為3，平板法計數(shù)；（c) 放線菌：采用高氏淀粉培養(yǎng)基，稀釋度為101104，25培養(yǎng)7

33、天，重復(fù)數(shù)均為3，平板法計數(shù)；（d) 聚磷菌：采用培養(yǎng)基為：無水乙酸鈉5.0g，kh2po4 0.25g，mgso47h2o培0.5g，cacl2 0.2g，(nh4)2so4 2.0g，微量元素1ml，水1000ml，在28，培養(yǎng)天數(shù)為23天，重復(fù)數(shù)3，平板法計數(shù)（e) 亞硝化菌：采用改良斯蒂芬遜（stephenson）培養(yǎng)基，多管發(fā)酵法培養(yǎng)基，稀釋度為102107，每個稀釋度接種3管，培養(yǎng)溫度為28，培養(yǎng)1014天觀察，mpn法計數(shù)；（f) 反硝化菌：采用檸檬酸鈉硝酸鉀培養(yǎng)基，多管發(fā)酵法培養(yǎng)基，稀釋度為103109，重復(fù)數(shù)3，28培養(yǎng)14天后觀察，mpn法計數(shù)；（g) 硝化菌采用如下的培養(yǎng)

34、基：nano2 1.0g，na2co3 1.0g， nah2po4 0.25g，caco3 1.0g，k2hpo4 0.75g，mnso44h2o 0.01g，mgso47h2o 0.03g，蒸餾水1000ml，ph7.2，在121滅菌30min。稀釋度為102109，每個稀釋度接種3管，培養(yǎng)溫度為28，培養(yǎng)1014天觀察，mpn法計數(shù)；（h) 氨化菌采用的培養(yǎng)基：蛋白胨10g，mgso4 0.5g，k2hpo4 1g，nacl 0.5g， feso4 0.001g，微量元素液 1.0ml（微量元素液：硼酸0.5g，鉬酸鈉0.5g溶于100ml蒸餾水中），蒸餾水1000ml，用10%碳酸鈉調(diào)p

35、h7.27.4，121滅菌20min。稀釋度為102109，每個稀釋度接種3管，培養(yǎng)溫度為28，培養(yǎng)715天觀察，mpn法計數(shù)。操作方法：1）平板法：以無菌操作方法用1 ml滅菌吸管吸取充分混勻的水樣或適宜濃度的稀釋水樣1 ml，注入滅菌平皿中，傾注約15 ml已融化并冷卻到45左右的培養(yǎng)基，并立即旋搖平皿，使水樣與培養(yǎng)基充分混勻。待瓊脂冷卻凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，使底面向上，置于恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)；2）mpn法：以無菌操作方法用1 ml滅菌吸管吸取充分混勻的水樣或適宜濃度的稀釋水樣1 ml注入標有不同濃度梯度的試管中，使水樣與培養(yǎng)基充分混勻，放入恒溫箱培養(yǎng)。b) 計數(shù)（a) 平板法培養(yǎng)之后，立即進行平皿

36、菌落計數(shù)。如果計數(shù)必須暫緩進行，平皿需存放于510冰箱內(nèi)。作平皿菌落計數(shù)時，可用菌落計數(shù)器或放大鏡檢查，以防遺漏，在記下各平皿的菌落數(shù)后，應(yīng)求出同稀釋度的平均菌落數(shù)。在求同稀釋度的平均數(shù)時，如果其中一個平皿有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平皿作為該稀釋度的菌落數(shù)。若片狀菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，則可將此半皿計數(shù)后乘以2代表全皿菌落數(shù)，然后再求該稀釋度的平均菌落數(shù)。對那些看來相似，距離相近但卻不相觸的菌落，只要它們之間的距離不小于最小菌落的直徑，便應(yīng)一一予以計數(shù)。那些緊密接觸而外觀（例如形態(tài)或顏色）相異的菌落，也應(yīng)該一一予以計數(shù)。微生物總數(shù)以每個平

37、皿菌落的總數(shù)或平均數(shù)乘以稀釋倍數(shù)而得出。（b) mpn法根據(jù)各種菌種的檢查方法依次鑒定是否為陽性，以出現(xiàn)陽性結(jié)果的數(shù)目從mpn表中查得相應(yīng)的mpn指數(shù)，從而計算各菌種的mpn值。監(jiān)測結(jié)果按附錄表三、表四、表五及表六填寫數(shù)據(jù)報表。6. 評價技術(shù)與方法6.1 水質(zhì)質(zhì)量評價1）評價方法：單因子評價指數(shù)法2）單因子評價指數(shù)計算公式：pi= cicio式中：pi某污染因子的污染指數(shù)即單因子污染指數(shù)；ci某污染因子的實測濃度；cio某污染因子的評價標準。3）水質(zhì)指標評價標準依據(jù)為地表水環(huán)境質(zhì)量標準（ gb 3838-2002）。6.2 土壤質(zhì)量評價1）評價方法：單因子評價指數(shù)法2）單因子評價指數(shù)計算公式：

38、pi= cicio式中：pi某污染因子的污染指數(shù)即單因子污染指數(shù)；ci某污染因子的實測濃度；cio某污染因子的評價標準。3）土壤指標評價標準依據(jù)為土壤環(huán)境質(zhì)量標準（ gb15618-1995）6.3 生物多樣性評價1）評價方法：生物多樣性指數(shù)法2）生物多樣性指數(shù)計算公式：h = -i=1spilo g2pi式中：h植物的種類多樣性指標；s植物種類數(shù)；pi種的個體數(shù)與總個體數(shù)的比值。6.4 濕地面積退化評價濕地面積退化以退化率來表示，即減少的面積占原始面積的百分比，計算公式：e=s-ss100%式中：e濕地退化率；s濕地現(xiàn)有面積；s濕地原始面積。6.5 植被現(xiàn)狀與趨勢評價1）植被面積變化趨勢；2

39、）植被利用和破壞情況；3）植物種類數(shù)量變化趨勢，有無外來物種分布。6.6 濕地生態(tài)綜合評價濕地生態(tài)綜合評價采用綜合指數(shù)法，選取多樣性、代表性、稀有性、自然性、適宜性和生存威脅六項標準作為一級標準，并各自分解成多層次的下一級指標，構(gòu)成濕地生態(tài)綜合評價的指標體系。邀請多位相關(guān)學(xué)科領(lǐng)域的專家直接對指標的權(quán)重進行評分，然后統(tǒng)計平均值和均方差綜合各位專家的意見，再將統(tǒng)計結(jié)果反饋給各位專家進行咨詢，最后確定各指標的權(quán)重。表5 濕地生態(tài)綜合評價指標一級指標二級指標三級指標多樣性物種多樣性-生境多樣性-代表性-稀有性物種瀕危程度-物種地區(qū)分布情況-生境稀有性-自然性-適宜性面積適應(yīng)性-植被覆蓋度-水質(zhì)條件-水體鹽度-生存威脅穩(wěn)定性物種生活力種群穩(wěn)定性生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性人類威脅直接威脅間接威脅濕地生態(tài)綜合評價以100分為滿分，對每個子體系中最低一級的評價