2016年秋備課參考人教版生物必修2 6.2-基因工程及其應(yīng)用 (共51張PPT).

1、基因工程基因工程 及其應(yīng)用及其應(yīng)用 第第2節(jié)節(jié) 轉(zhuǎn)基因的番轉(zhuǎn)基因的番 茄茄 轉(zhuǎn)基因鮭轉(zhuǎn)基因鮭 魚魚 高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和 具有優(yōu)良品質(zhì)具有優(yōu)良品質(zhì) 的農(nóng)作物和具的農(nóng)作物和具 有抗逆性的作有抗逆性的作 物新品種物新品種. 抗蟲害的玉米抗蟲害的玉米 1 1、什么是基因工程、什么是基因工程? ? 2 2、基因工程的原理是什么？、基因工程的原理是什么？ 3 3、基因工程的基本操作工具有哪些、基因工程的基本操作工具有哪些? ? 閱讀教材閱讀教材 P102103，思考以下問題：，思考以下問題： 基因工程：基因工程：又叫做又叫做基因拼接技術(shù)基因拼接技術(shù)或或DNA重組技術(shù)重組技術(shù)。 通俗的說，就是按照人們

2、的意愿，把一種生物的某通俗的說，就是按照人們的意愿，把一種生物的某 種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種 生物的細(xì)胞里，生物的細(xì)胞里，定向定向地改造生物的地改造生物的遺傳性狀遺傳性狀。 原原 理理： 操作水平操作水平： 結(jié)結(jié) 果果： 基因重組基因重組 DNA分子水平分子水平 定向地改造生物的遺傳性狀，定向地改造生物的遺傳性狀， 獲得人類所需要的品種。獲得人類所需要的品種。 基因的基因的“剪刀剪刀” 基因的基因的“針線針線”基因的運(yùn)載體基因的運(yùn)載體 二、基因操作的工具二、基因操作的工具 1.1.基因的基因的“剪刀剪刀”限制性內(nèi)切酶（限制酶）限制

3、性內(nèi)切酶（限制酶） 功能特點(diǎn)：一種限制酶只能識(shí)別一種功能特點(diǎn)：一種限制酶只能識(shí)別一種特定特定的的 核苷酸序列，并在核苷酸序列，并在特定特定的切點(diǎn)上切割的切點(diǎn)上切割DNADNA分子。分子。 專一性專一性 如如:EcoRI限制酶限制酶 限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶（EcoREcoR）作用過作用過 程程 模型構(gòu)建1 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 練習(xí)使用練習(xí)使用EcoRI 剪切目的基因剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG

4、 目的基因目的基因 黏性末端黏性末端 什么是黏性末端什么是黏性末端？ 被限制酶切開的被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口兩條單鏈的切口 帶有幾個(gè)伸出的核苷酸，帶有幾個(gè)伸出的核苷酸， 它們之間正好互補(bǔ)配對(duì)，它們之間正好互補(bǔ)配對(duì)， 這樣的切口叫黏性末端。這樣的切口叫黏性末端。 被同一種限制酶切斷的幾個(gè)被同一種限制酶切斷的幾個(gè)DNADNA是否是否 具有相同的黏性末端？具有相同的黏性末端？ 思考思考: 是是 基因的針線：DNA連接 酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A

5、 A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同種限制酶切割用同種限制酶切割 、基因的針線、基因的針線DNADNA連接酶連接酶 連接酶的作用是：將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末連接酶的作用是：將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末 端連接起來，使之成為一個(gè)完整的端連接起來，使之成為一個(gè)完整的DNADNA分子。分子。 DNA連接酶的作用過程連接酶的作用過程 基因的針線：基因的針線：DNA連接酶連接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C

6、 T T A A A A T T C G 用同種限制酶切割用同種限制酶切割 DNA連接酶連接連接酶連接 的是的是DNA骨架上骨架上 的缺口的缺口磷酸二酯磷酸二酯 鍵鍵，不是不是堿基間堿基間 的氫鍵的氫鍵 模型構(gòu)建2 使用使用DNA連接酶制作重組連接酶制作重組DNA分子分子 甲片段甲片段 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 乙片段乙片段 GGCATCTTAA AATTCCGTAG 重組重組DNA分子分子 GGCATCTTAA AATTCCGTAG 3 3、基因的運(yùn)輸工具、基因的運(yùn)輸工具運(yùn)載體運(yùn)載體 運(yùn)載體必須同時(shí)滿足三運(yùn)載體必須同時(shí)滿足三 個(gè)要求：個(gè)要求：

7、 具有一到多個(gè)限制酶的酶具有一到多個(gè)限制酶的酶 切位點(diǎn)切位點(diǎn), ,以便與外源基因連以便與外源基因連 接接; ; 能進(jìn)入受體細(xì)胞并在受體能進(jìn)入受體細(xì)胞并在受體 細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并能復(fù)制、細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并能復(fù)制、 表達(dá)；表達(dá)； 具有標(biāo)記基因具有標(biāo)記基因, ,便于目的便于目的 基因的篩選基因的篩選. . 3 3、基因的運(yùn)輸工具、基因的運(yùn)輸工具運(yùn)載體運(yùn)載體 常用的運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體： 質(zhì)粒、噬菌體和質(zhì)粒、噬菌體和 動(dòng)植物病毒等動(dòng)植物病毒等 標(biāo)記基標(biāo)記基 因，便因，便 于進(jìn)行于進(jìn)行 檢測(cè)。檢測(cè)。 質(zhì)粒存在于質(zhì)粒存在于 許多細(xì)菌和酵母許多細(xì)菌和酵母 菌等生物中菌等生物中, ,是細(xì)是細(xì) 胞染色體外能夠胞染色

8、體外能夠 自主復(fù)制的很小自主復(fù)制的很小 的環(huán)狀的環(huán)狀DNADNA分子分子. . 三、基因工程基本步驟三、基因工程基本步驟 1 1、獲取目的基因、獲取目的基因 提取目的基因的方法提取目的基因的方法 用限制酶切用限制酶切 斷成許多片段斷成許多片段 直接分離基因直接分離基因鳥槍法鳥槍法 將供體生物的將供體生物的DNADNA用限制酶用限制酶 切割為許多片段，再用運(yùn)載體將切割為許多片段，再用運(yùn)載體將 這些片段都運(yùn)載到受體生物的不這些片段都運(yùn)載到受體生物的不 同細(xì)胞中去。只要有一個(gè)細(xì)胞獲同細(xì)胞中去。只要有一個(gè)細(xì)胞獲 得了需要的目的基因并得以表達(dá)，得了需要的目的基因并得以表達(dá)， 基因工程就算成功了。基因工程

9、就算成功了。 該法最大的缺點(diǎn)是該法最大的缺點(diǎn)是帶有很大帶有很大 的盲目性，工作量大，成功率低。的盲目性，工作量大，成功率低。 且不能將真核生物的基因轉(zhuǎn)移到且不能將真核生物的基因轉(zhuǎn)移到 原核生物中去。原核生物中去。 人工合成基因法人工合成基因法 DNADNA合成儀合成儀 有兩種方法：有兩種方法： 逆轉(zhuǎn)錄法逆轉(zhuǎn)錄法：以信使：以信使 RNARNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶 的作用下利用脫氧核苷酸的作用下利用脫氧核苷酸 合成合成DNA(DNA(基因基因) )。 化學(xué)合成法化學(xué)合成法：根據(jù)：根據(jù) 蛋白質(zhì)的氨基酸順序推算蛋白質(zhì)的氨基酸順序推算 出信使出信使RNARNA核糖核苷酸順核糖核苷酸順 序

10、，再據(jù)此推算出基因序，再據(jù)此推算出基因 DNADNA的脫氧核苷酸順序。的脫氧核苷酸順序。 用游離脫氧核苷酸直接合用游離脫氧核苷酸直接合 成相應(yīng)的基因。成相應(yīng)的基因。 用與提取目的基因用與提取目的基因 相同的限制酶切割質(zhì)粒相同的限制酶切割質(zhì)粒 使之出現(xiàn)一個(gè)切口，將使之出現(xiàn)一個(gè)切口，將 目的基因插入切口處，目的基因插入切口處， 讓目的基因的黏性末端讓目的基因的黏性末端 與切口上的黏性末端互與切口上的黏性末端互 補(bǔ)配對(duì)后，在補(bǔ)配對(duì)后，在DNADNA連接連接 酶的作用下連接形成重酶的作用下連接形成重 組組DNADNA分子。分子。 2 2、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 3、將目的基因?qū)胧?/p>

11、體細(xì)胞、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 導(dǎo)入導(dǎo)入 擴(kuò)增擴(kuò)增 常用的受體細(xì)常用的受體細(xì) 胞：胞：菌類菌類和和動(dòng)動(dòng) 植物細(xì)胞植物細(xì)胞 4、目的基因的表達(dá)和檢測(cè)、目的基因的表達(dá)和檢測(cè) 大量的受體細(xì)胞接受不多的目的基因。處理的受大量的受體細(xì)胞接受不多的目的基因。處理的受 體細(xì)胞中真正攝入了目的基因的很少，必須將它從中體細(xì)胞中真正攝入了目的基因的很少，必須將它從中 檢測(cè)出來。檢測(cè)出來。 將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)形成菌落，檢測(cè)菌落中將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)形成菌落，檢測(cè)菌落中 是否有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。淘汰無表達(dá)產(chǎn)物的菌落，是否有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。淘汰無表達(dá)產(chǎn)物的菌落， 保留有表達(dá)產(chǎn)物的進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。保留有表達(dá)

12、產(chǎn)物的進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。 無表達(dá)產(chǎn)物無表達(dá)產(chǎn)物無表達(dá)產(chǎn)物無表達(dá)產(chǎn)物 有表達(dá)產(chǎn)物有表達(dá)產(chǎn)物無表達(dá)產(chǎn)物無表達(dá)產(chǎn)物 第一步：獲取目的基因第一步：獲取目的基因 基因工程基本步驟：基因工程基本步驟： 第二步：目的基因與運(yùn)載體結(jié)合第二步：目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 第四步第四步: 目的基因的表達(dá)和檢測(cè)目的基因的表達(dá)和檢測(cè) ？如何讓大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素？如何讓大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素？ 1 1、什么是基因工程、什么是基因工程? ? 2 2、基因工程的原理是什么、基因工程的原理是什么? ? 思維拓展: 細(xì)菌和人是差異非常細(xì)菌和人是差異非常 大的兩種生物大的兩

13、種生物, ,為什么通過為什么通過 基因重組后基因重組后, ,細(xì)菌能夠合成細(xì)菌能夠合成 人體的某些蛋白質(zhì)呢人體的某些蛋白質(zhì)呢? ? 因?yàn)樵诨蛩缴?，人和?xì)菌的遺傳機(jī)制是一樣的。因?yàn)樵诨蛩缴?，人和?xì)菌的遺傳機(jī)制是一樣的。 細(xì)菌和人的遺傳物質(zhì)都是細(xì)菌和人的遺傳物質(zhì)都是DNA，都使用一套遺傳密，都使用一套遺傳密 碼子，遵循中心法則。碼子，遵循中心法則。 水母 香香 蕉蕉 魚魚 （一）、基因工程與作物育種（一）、基因工程與作物育種 1、在農(nóng)作物生產(chǎn)方面、在農(nóng)作物生產(chǎn)方面 目的：培育出高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、抗逆性的優(yōu)目的：培育出高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、抗逆性的優(yōu) 良作物及新品種。良作物及新品種。 優(yōu)點(diǎn)：降低生產(chǎn)成本，減少

14、農(nóng)藥的使用優(yōu)點(diǎn)：降低生產(chǎn)成本，減少農(nóng)藥的使用 對(duì)環(huán)境的危害，提高農(nóng)作物對(duì)不良環(huán)境對(duì)環(huán)境的危害，提高農(nóng)作物對(duì)不良環(huán)境 的適應(yīng)能力。的適應(yīng)能力。 1993年，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院的科學(xué)家成功的培育出年，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院的科學(xué)家成功的培育出 了抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，了抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，抗蟲的基因來自蘇云金桿菌抗蟲的基因來自蘇云金桿菌， 科學(xué)家將抗性基因?qū)胱魑铮棺魑镒陨砭哂械钟x害的能力。科學(xué)家將抗性基因?qū)胱魑?，使作物自身具有抵御蟲害的能力。 （一）、基因工程與作物育種（一）、基因工程與作物育種 2、在畜牧養(yǎng)殖方面、在畜牧養(yǎng)殖方面 科學(xué)家利用基因工程的方法培育出了轉(zhuǎn)基科學(xué)家利用基因工程的方法培育

15、出了轉(zhuǎn)基 因奶牛、超級(jí)綿羊等多種轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。因奶牛、超級(jí)綿羊等多種轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。 生長快、肉質(zhì)好的轉(zhuǎn)基生長快、肉質(zhì)好的轉(zhuǎn)基 因魚因魚( (中國中國) ) 乳汁中含有人生長激素乳汁中含有人生長激素 的轉(zhuǎn)基因牛的轉(zhuǎn)基因牛( (阿根廷阿根廷) ) ( (二）、基因工程與藥物研制二）、基因工程與藥物研制 我國生產(chǎn)的部分基因我國生產(chǎn)的部分基因 工程疫苗和藥物工程疫苗和藥物 許多藥品的生產(chǎn)許多藥品的生產(chǎn) 是從是從生物組織生物組織中提取中提取 的。受材料來源限制的。受材料來源限制 產(chǎn)量有限，其價(jià)格往產(chǎn)量有限，其價(jià)格往 往十分昂貴。往十分昂貴。 微生物生長迅速，容易控制，適于大規(guī)模工微生物生長迅速，容易控制，適

16、于大規(guī)模工 業(yè)化生產(chǎn)。若業(yè)化生產(chǎn)。若將生物合成相應(yīng)藥物成分的基因?qū)⑸锖铣上鄳?yīng)藥物成分的基因?qū)?dǎo) 入微生物細(xì)胞內(nèi)，讓它們產(chǎn)生相應(yīng)的藥物，不但入微生物細(xì)胞內(nèi)，讓它們產(chǎn)生相應(yīng)的藥物，不但 能解決產(chǎn)量問題，還能大大降低生產(chǎn)成本。能解決產(chǎn)量問題，還能大大降低生產(chǎn)成本。 胰島素從豬、牛等動(dòng)物的胰胰島素從豬、牛等動(dòng)物的胰 腺中提取，腺中提取，100Kg100Kg胰腺只能提取胰腺只能提取 4-5g4-5g的胰島素，其產(chǎn)量之低和價(jià)的胰島素，其產(chǎn)量之低和價(jià) 格之高可想而知。格之高可想而知。 將合成的胰島將合成的胰島 素基因?qū)氪竽c桿素基因?qū)氪竽c桿 菌，每菌，每2000L2000L培養(yǎng)液培養(yǎng)液 就能產(chǎn)生就能產(chǎn)生

17、100g100g胰島胰島 素！使其價(jià)格降低素！使其價(jià)格降低 了了30%-50%!30%-50%! 優(yōu)點(diǎn)：能夠高效率地生產(chǎn)出各種高質(zhì)量，低成本優(yōu)點(diǎn)：能夠高效率地生產(chǎn)出各種高質(zhì)量，低成本 的藥品。的藥品。 （三）、環(huán)境保護(hù)（三）、環(huán)境保護(hù)基因工程做成的基因工程做成的“超超 級(jí)細(xì)菌級(jí)細(xì)菌”能吞食和分解多種污染環(huán)境的物質(zhì)。能吞食和分解多種污染環(huán)境的物質(zhì)。 通常一種細(xì)菌只能分解石油中的一種烴類，用基因通常一種細(xì)菌只能分解石油中的一種烴類，用基因 工程培育成功的工程培育成功的“超級(jí)細(xì)菌超級(jí)細(xì)菌”卻能分解石油中的多種烴卻能分解石油中的多種烴 類化合物。有的還能吞食轉(zhuǎn)化汞、鎘等重金屬，分解類化合物。有的還能吞

18、食轉(zhuǎn)化汞、鎘等重金屬，分解 DDTDDT等毒害物質(zhì)。等毒害物質(zhì)。 19981998年，英國一位生物學(xué)家在電視節(jié)目中宣布：老鼠食用了年，英國一位生物學(xué)家在電視節(jié)目中宣布：老鼠食用了 轉(zhuǎn)基因馬鈴薯后，腎、脾和消化道都出現(xiàn)了損傷，體重和器官重轉(zhuǎn)基因馬鈴薯后，腎、脾和消化道都出現(xiàn)了損傷，體重和器官重 量減輕，免疫系統(tǒng)遭到破壞。量減輕，免疫系統(tǒng)遭到破壞。 安全嗎? 轉(zhuǎn)基因植物的安全性爭論轉(zhuǎn)基因植物的安全性爭論 支持派認(rèn)為：如果轉(zhuǎn)基因農(nóng)業(yè)生物技術(shù)得支持派認(rèn)為：如果轉(zhuǎn)基因農(nóng)業(yè)生物技術(shù)得 不到社會(huì)支持，這一研究將被扼殺，并且不到社會(huì)支持，這一研究將被扼殺，并且 強(qiáng)調(diào)，迄今為止并沒有發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因食品危強(qiáng)調(diào)，迄今為

19、止并沒有發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因食品危 害人體健康和環(huán)境的確切證據(jù)。害人體健康和環(huán)境的確切證據(jù)。 反對(duì)派的觀點(diǎn)反對(duì)派的觀點(diǎn) 一英國科學(xué)家聲稱，轉(zhuǎn)基因馬鈴薯會(huì)減弱老鼠免疫一英國科學(xué)家聲稱，轉(zhuǎn)基因馬鈴薯會(huì)減弱老鼠免疫 系統(tǒng)功能；系統(tǒng)功能； 美國康乃爾大學(xué)也發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因玉米會(huì)危害蝴蝶幼美國康乃爾大學(xué)也發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因玉米會(huì)危害蝴蝶幼 蟲及其相關(guān)生態(tài)環(huán)境。蟲及其相關(guān)生態(tài)環(huán)境。 環(huán)保團(tuán)體認(rèn)為這種違反自然的轉(zhuǎn)基因作物及產(chǎn)品，環(huán)保團(tuán)體認(rèn)為這種違反自然的轉(zhuǎn)基因作物及產(chǎn)品， 未經(jīng)長期安全測(cè)試，長期食用可能對(duì)人類及生態(tài)環(huán)未經(jīng)長期安全測(cè)試，長期食用可能對(duì)人類及生態(tài)環(huán) 境造成負(fù)面影響。境造成負(fù)面影響。 我國態(tài)度我國態(tài)度 十分重視基因工

20、程的安全性問題，對(duì)十分重視基因工程的安全性問題，對(duì) 農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物的研究和試驗(yàn)、生產(chǎn)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物的研究和試驗(yàn)、生產(chǎn) 和加工、經(jīng)營和進(jìn)口作了具體規(guī)定。和加工、經(jīng)營和進(jìn)口作了具體規(guī)定。 1.基因工程的概念基因工程的概念 2.基因工程操作的基本工具基因工程操作的基本工具 3.基因操作的基本步驟基因操作的基本步驟 雜交雜交 育種育種 誘變誘變 育種育種 多倍體育多倍體育 種種 單倍體育單倍體育 種種 基因基因 工程工程 處理處理雜交雜交射線、輻射線、輻 射處理射處理 秋水秋水 仙素仙素 花藥離體花藥離體 培養(yǎng)培養(yǎng) 基因基因 轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移 原理原理基因基因 重組重組 基因突變基因突變 染色體變?nèi)旧w變 異

21、異 染色體變?nèi)旧w變 異異 基因基因 重組重組 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 集集“優(yōu)優(yōu)” 提高突變提高突變 頻率，產(chǎn)頻率，產(chǎn) 生新基因生新基因 果實(shí)大營果實(shí)大營 養(yǎng)豐富養(yǎng)豐富 縮短育種縮短育種 年限年限 定向改變定向改變 生物性狀生物性狀 缺點(diǎn)缺點(diǎn)育種時(shí)間育種時(shí)間 長長 需要處理需要處理 大量材料大量材料 發(fā)育遲結(jié)發(fā)育遲結(jié) 實(shí)率低實(shí)率低 技術(shù)復(fù)雜技術(shù)復(fù)雜 操作操作 復(fù)雜復(fù)雜 要使目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組，所需的工具酶是要使目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組，所需的工具酶是 限制酶連接酶解旋酶還原酶限制酶連接酶解旋酶還原酶 2.2.下列關(guān)于基因工程的敘述中下列關(guān)于基因工程的敘述中, ,正確的是正確的是: : A.A.限制酶

22、只用于提取目的基因限制酶只用于提取目的基因 B.B.細(xì)菌體內(nèi)的環(huán)狀細(xì)菌體內(nèi)的環(huán)狀DNADNA均可作運(yùn)載體均可作運(yùn)載體 C.DNAC.DNA連接酶可用于目的基因和運(yùn)載體的連接連接酶可用于目的基因和運(yùn)載體的連接 D.D.重組重組DNADNA分子一旦進(jìn)入受體細(xì)胞分子一旦進(jìn)入受體細(xì)胞, ,基因工程則完成基因工程則完成. . 3.3.以下說法正確的是以下說法正確的是: : A.A.目的基因是指重組目的基因是指重組DNA DNA B.B.一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列 C.DNAC.DNA重組所用的工具酶是限制酶、連接酶和運(yùn)載體重組所用的工具酶是限制酶、連接酶

23、和運(yùn)載體 D.D.只要受體細(xì)胞中含有目的基因，目的基因就一定只要受體細(xì)胞中含有目的基因，目的基因就一定 能夠成功表達(dá)能夠成功表達(dá) A C B DNADNA連接酶的作用是：連接酶的作用是： A.A.子鏈和母鏈之間形成氫鍵子鏈和母鏈之間形成氫鍵 B.B.黏性末端之間形成氫鍵黏性末端之間形成氫鍵 C.C.兩個(gè)兩個(gè)DNADNA末端間的縫隙連接（磷酸二酯鍵）末端間的縫隙連接（磷酸二酯鍵） D.AD.A、B B、C C都對(duì)都對(duì) C 下列是由限制酶切割形成的下列是由限制酶切割形成的DNADNA片段，能用片段，能用 相應(yīng)相應(yīng)DNADNA連接酶將它們恢復(fù)連接的組合是連接酶將它們恢復(fù)連接的組合是 CTGC A G

24、 G CTTAA G ACGTC AATTC G A. A. ； B. B. ； C. C. ； D.D.以上都不對(duì)以上都不對(duì) A b a ( (多選題多選題) )如圖如圖, ,下列有關(guān)酶功能的下列有關(guān)酶功能的 敘述中敘述中, ,正確的是正確的是 A.A.切斷切斷a a處的酶為限制性內(nèi)切酶處的酶為限制性內(nèi)切酶 B.B.連接連接a a處的酶為處的酶為DNADNA連接酶連接酶 C.C.切斷切斷b b處的酶為解旋酶處的酶為解旋酶 D.D.連接連接b b處的酶為處的酶為RNARNA聚合酶聚合酶 ABC 4.4.基因工程技術(shù)在培育抗旱植物用于發(fā)展沙漠農(nóng)基因工程技術(shù)在培育抗旱植物用于發(fā)展沙漠農(nóng) 業(yè)和改造沙

25、漠方面顯示了良好的前景業(yè)和改造沙漠方面顯示了良好的前景, ,荷蘭一家公荷蘭一家公 司將大腸桿菌中的海藻糖合成酶基因?qū)胫参锼緦⒋竽c桿菌中的海藻糖合成酶基因?qū)胫参? (如如 甜菜、馬鈴薯等甜菜、馬鈴薯等) )中并獲得有效表達(dá)，使中并獲得有效表達(dá)，使“工程植工程植 物物”增強(qiáng)了耐旱性、耐寒性的基本操作步驟是：增強(qiáng)了耐旱性、耐寒性的基本操作步驟是： （2）基因表達(dá)的含義是：）基因表達(dá)的含義是： （3）寫出酶基因工程在植物體內(nèi)的表達(dá)過程：）寫出酶基因工程在植物體內(nèi)的表達(dá)過程： （4）基因工程操作中的工具是：）基因工程操作中的工具是： 海藻糖合成酶基因的獲取海藻糖合成酶基因的獲取 目的基因與運(yùn)載體結(jié)合

26、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的表達(dá)和檢測(cè)目的基因的表達(dá)和檢測(cè) 基因基因通過通過轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄、翻譯翻譯合成蛋白質(zhì)，體合成蛋白質(zhì)，體 現(xiàn)出相應(yīng)的性狀現(xiàn)出相應(yīng)的性狀 酶基因酶基因 mRNA mRNA 海藻糖合成酶海藻糖合成酶 轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄 翻譯翻譯 要使目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組，所需的兩種酶是要使目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組，所需的兩種酶是( )( ) 限制酶限制酶DNADNA連接酶解旋酶還原酶連接酶解旋酶還原酶 2.2.基因工程的正確操作步驟是（）基因工程的正確操作步驟是（） 使目的基因與運(yùn)載體結(jié)合使目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)

27、胞 檢測(cè)目的基因的表達(dá)是否符合特定性狀要求檢測(cè)目的基因的表達(dá)是否符合特定性狀要求 提取目的基因提取目的基因 積極思維積極思維: : 3.3.實(shí)施基因工程的第一步的一種方法是把所需的基因?qū)嵤┗蚬こ痰牡谝徊降囊环N方法是把所需的基因 從供體細(xì)胞內(nèi)分離出來，這要利用限制性內(nèi)切酶。一從供體細(xì)胞內(nèi)分離出來，這要利用限制性內(nèi)切酶。一 種限制性內(nèi)切酶能識(shí)別分子的順種限制性內(nèi)切酶能識(shí)別分子的順 序，切點(diǎn)在和之間，這是利用了酶的（）序，切點(diǎn)在和之間，這是利用了酶的（） 高效性專一性高效性專一性 多樣性催化活性易受外界影響多樣性催化活性易受外界影響 采用基因工程的方法培育抗蟲棉，下列導(dǎo)入目的基采用基因工程的方法培育抗蟲棉，下列導(dǎo)入目的基 因的作法正確的是（）因的作法正確的是（） 將毒素蛋白注射到棉受精卵中將毒素蛋白注射到棉受精卵中 將編碼毒素蛋白的序列，注射到棉受精卵中將編碼毒素蛋白的序列，注射到棉受精卵中 將編碼毒素蛋白的序列，與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入將編碼毒素蛋白的序列，與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入 細(xì)菌，用該細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞，在進(jìn)行組織培養(yǎng)細(xì)菌，用該細(xì)菌感染