第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌

1、第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第十二章第十二章 革蘭氏陽性無芽胞桿菌革蘭氏陽性無芽胞桿菌 有有3 3個屬：個屬： 李氏桿菌屬李氏桿菌屬 丹毒絲菌屬丹毒絲菌屬 1.1.腎桿菌屬腎桿菌屬 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第一節(jié)第一節(jié) 李氏桿菌屬李氏桿菌屬 本屬細菌為本屬細菌為G+G+桿菌桿菌 需氧或兼性厭氧需氧或兼性厭氧 無芽胞無芽胞 無莢膜無莢膜 20252025下能運動下能運動 3737不運動不運動 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 有有7 7個種：個種： 產(chǎn)單核細胞李氏桿菌產(chǎn)單核細胞李氏桿菌 伊氏李氏桿菌伊氏李氏桿菌 韋氏李氏桿菌韋氏李氏

2、桿菌 塞氏李氏桿菌塞氏李氏桿菌 格氏李氏桿菌：不致病格氏李氏桿菌：不致病 莫氏李氏桿菌：不致病莫氏李氏桿菌：不致病 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 產(chǎn)單核細胞李氏桿菌產(chǎn)單核細胞李氏桿菌 一、所致疾?。阂?、所致疾病： 細胞內(nèi)寄生菌，牛羊易感，小牛、羔細胞內(nèi)寄生菌，牛羊易感，小牛、羔 羊表現(xiàn)為敗血癥或肝臟壞死羊表現(xiàn)為敗血癥或肝臟壞死 ，成年，成年 牛間表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀的牛間表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀的“轉(zhuǎn)圈病轉(zhuǎn)圈病”， 母畜可致流產(chǎn)。母畜可致流產(chǎn)。 孕婦可致流產(chǎn)，兒童出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，孕婦可致流產(chǎn)，兒童出現(xiàn)神經(jīng)癥狀， 獸醫(yī)易患皮膚型李氏桿菌病。獸醫(yī)易患皮膚型李氏桿菌病。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 產(chǎn)單核細胞李氏桿

3、菌產(chǎn)單核細胞李氏桿菌 二、形態(tài)及染色特點：二、形態(tài)及染色特點： G+G+規(guī)則的短桿菌，呈規(guī)則的短桿菌，呈“發(fā)渣發(fā)渣”狀，狀， 兩端鈍圓，有時排列成兩端鈍圓，有時排列成V V型，型，20-20- 2525下培養(yǎng)產(chǎn)生下培養(yǎng)產(chǎn)生4 4根周身鞭毛，根周身鞭毛，3737 下一根鞭毛，無芽孢，無莢膜。下一根鞭毛，無芽孢，無莢膜。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 四、微生物學(xué)診斷四、微生物學(xué)診斷 1 1分離培養(yǎng)及鑒定分離培養(yǎng)及鑒定 取患畜血液，腦組織研磨液，取患畜血液，腦組織研磨液， 加 入加 入 5 0 m l5 0 m l 胰 蛋 白 胨 肉 湯

4、 中胰 蛋 白 胨 肉 湯 中 3724h3724h劃線含有劃線含有5%5%綿羊血綿羊血 的胰蛋白胨瓊脂的胰蛋白胨瓊脂是否有是否有溶血溶血 及淡藍色小菌落。及淡藍色小菌落。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 四、微生物學(xué)診斷四、微生物學(xué)診斷 1 1分離培養(yǎng)及鑒定分離培養(yǎng)及鑒定 挑取特征性菌落作純培養(yǎng)后，用純培養(yǎng)物作挑取特征性菌落作純培養(yǎng)后，用純培養(yǎng)物作 以下試驗：染色：以下試驗：染色：G+G+短桿菌。溶血性檢查：短桿菌。溶血性檢查： 溶血，溶血，20202525運動。運動。 生化試驗：略生化試驗：略 動物致病試驗：肉湯培養(yǎng)物鴿子胸肌注射動物致病試驗：肉湯培養(yǎng)物鴿子胸肌注射1ml1ml， 豚鼠皮下豚

5、鼠皮下1ml1ml，2-5d2-5d內(nèi)鴿子死亡，豚鼠死亡。內(nèi)鴿子死亡，豚鼠死亡。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 2 2血清學(xué)檢查：凝集反應(yīng)。血清學(xué)檢查：凝集反應(yīng)。 病羊，牛，豬血清凝集價達病羊，牛，豬血清凝集價達1250150012501500。 馬：馬：11000110001250012500 流產(chǎn)牛：流產(chǎn)牛：180018001160011600 五、免疫防治五、免疫防治 1 1滅活強毒菌株免疫小鼠產(chǎn)生數(shù)月堅強免疫力。滅活強毒菌株免疫小鼠產(chǎn)生數(shù)月堅強免疫力。 2 2免疫能通過淋巴細胞被動轉(zhuǎn)移，但不能通過血清免疫能通過淋巴細胞被動轉(zhuǎn)移，但不能通過血清 被動轉(zhuǎn)移。被動轉(zhuǎn)移。 第21章革蘭氏陽性無

6、芽胞桿菌 第二節(jié)第二節(jié) 丹毒絲菌屬丹毒絲菌屬 只有只有1 1個種，即：豬丹毒絲菌（豬丹毒個種，即：豬丹毒絲菌（豬丹毒 桿菌）桿菌） 一、所致疾病一、所致疾病 1 1引起引起3 31212月齡豬丹毒，月齡豬丹毒，3 34 4周歲周歲 羔羊慢性多發(fā)性關(guān)節(jié)炎，雞，火雞衰羔羊慢性多發(fā)性關(guān)節(jié)炎，雞，火雞衰 弱和下痢、鴨的敗血癥并侵害輸卵管。弱和下痢、鴨的敗血癥并侵害輸卵管。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第二節(jié)第二節(jié) 丹毒絲菌屬丹毒絲菌屬 一、所致疾病一、所致疾病 2 2實驗動物以小鼠和鴿子最易感，實驗動物以小鼠和鴿子最易感， 家兔和豚鼠抵抗力強。家兔和豚鼠抵抗力強。 3 3人感染后發(fā)生皮膚病變稱人感染

7、后發(fā)生皮膚病變稱“類類 丹毒丹毒”，病狀與人的丹毒病相似，病狀與人的丹毒病相似， 人的丹毒病由化膿性鏈球菌屬致。人的丹毒病由化膿性鏈球菌屬致。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 豬丹毒病理豬丹毒病理 一、發(fā)病機理一、發(fā)病機理 二、病理變化（二、病理變化（如圖如圖） （一）、急性敗血型（一）、急性敗血型 （二）、亞急性疹塊型（二）、亞急性疹塊型 （三）、慢性型（三）、慢性型 1、豬丹毒心內(nèi)膜炎、豬丹毒心內(nèi)膜炎 2、慢性豬丹毒關(guān)節(jié)炎、慢性豬丹毒關(guān)節(jié)炎 3、皮膚壞死、皮膚壞死 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 三、培養(yǎng)特性三、培養(yǎng)特性 微需微需O

8、O2 2或兼性厭氧，普通培養(yǎng)基上或兼性厭氧，普通培養(yǎng)基上 不生長。不生長。 1 1血平板：濕潤，光滑透明，灰血平板：濕潤，光滑透明，灰 白色露珠樣的圓形小菌落，白色露珠樣的圓形小菌落，溶血溶血 （李氏桿菌狹窄的（李氏桿菌狹窄的溶血）。溶血）。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 三、培養(yǎng)特性三、培養(yǎng)特性 2 2血清肉湯：輕度混濁，有少量血清肉湯：輕度混濁，有少量 白色粘稠沉淀，無菌環(huán)，無菌膜。白色粘稠沉淀，無菌環(huán)，無菌膜。 3 3明膠穿刺：沿穿刺線橫向四周明膠穿刺：沿穿刺線橫向四周 生長，如試管刷狀，不液化明膠。生長，如試管刷狀，不液化明膠。 4 4麥康凱平板：不生長。麥康凱平板：不生長。 第21章

9、革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 3 3動物致病性試驗動物致病性試驗 病料制成鹽水乳劑，小鼠皮下病料制成鹽水乳劑，小鼠皮下 0.2ml0.2ml，鴿子胸肌，鴿子胸肌1ml1ml，豚鼠皮，豚鼠皮 下下1ml1ml。結(jié)果：。結(jié)果： 小鼠，鴿子，小鼠，鴿子，2-5d2-5d，死亡，尸，死亡，尸 體剖檢可分離大量丹毒菌。豚體剖檢可分離大量丹毒菌。豚 鼠不反應(yīng)。鼠不反應(yīng)。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 4 4血清學(xué)診斷：凝集反應(yīng)。血清學(xué)診斷：凝集反應(yīng)。 （1 1）玻片法：取標(biāo)準(zhǔn)抗原）玻片法：取標(biāo)準(zhǔn)抗原2 2滴，滴，1 1個加病豬個加病豬 血清，另一個加生理鹽水，血清，另一個加生理鹽水，

10、2min2min內(nèi)凝集為內(nèi)凝集為+ +。 （2 2）試管法：將血清作）試管法：將血清作150150和和11001100釋釋 稀稀2 2管，每管管，每管1ml1ml，加標(biāo)準(zhǔn)抗原，加標(biāo)準(zhǔn)抗原1212滴。滴。3737 放放2-4 h2-4 h，如，如150150凝集，為陽性。凝集，為陽性。 免疫熒光試驗，環(huán)狀沉淀試驗。免疫熒光試驗，環(huán)狀沉淀試驗。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 五、免疫治療五、免疫治療 1 1本菌有良好免疫原性，應(yīng)用本菌有良好免疫原性，應(yīng)用 豬丹毒活菌苗豬丹毒活菌苗GCGC42 42。 。 2 2滅活疫苗：三聯(lián)苗（豬瘟，滅活疫苗：三聯(lián)苗（豬瘟， 豬丹毒，豬肺疫）。豬丹毒，豬肺疫）。

11、3 3抗豬丹毒血清預(yù)防及治療。抗豬丹毒血清預(yù)防及治療。 4 4青霉素治療。青霉素治療。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第三節(jié)第三節(jié) 腎桿菌屬腎桿菌屬 鮭腎桿菌：鮭腎桿菌： 致鮭魚、鱒魚的細菌性腎病，致鮭魚、鱒魚的細菌性腎病， 外觀無明顯變化，外觀無明顯變化， 剖檢可見腎臟的乳白色顆粒肉剖檢可見腎臟的乳白色顆粒肉 芽腫病灶。芽腫病灶。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第十三章第十三章 G+G+形成芽孢的細菌形成芽孢的細菌 產(chǎn)芽孢的細菌包括產(chǎn)芽孢的細菌包括6 6個屬：個屬： 芽孢桿菌屬：引起動物疾病芽孢桿菌屬：引起動物疾病 梭菌屬：引起動物疾病梭菌屬：引起動物疾病 芽孢

12、乳桿菌屬芽孢乳桿菌屬 脫硫腸狀菌屬脫硫腸狀菌屬 芽孢八疊球菌屬芽孢八疊球菌屬 顫螺菌屬顫螺菌屬 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第一節(jié)第一節(jié) 芽孢桿菌屬芽孢桿菌屬 本屬種類繁多有本屬種類繁多有3434個正式種和個正式種和2424個不個不 正式種，對人畜致病的主要是：正式種，對人畜致病的主要是： 炭疽芽孢桿菌：致炭疽炭疽芽孢桿菌：致炭疽 蠟狀芽孢桿菌：引起食物中毒蠟狀芽孢桿菌：引起食物中毒 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 炭疽病理炭疽病理 一、發(fā)病機理一、發(fā)病機理 二、病理變化二、病理變化 （一）、敗血型炭疽（一）、敗血型炭疽（如圖如圖） （二）、癰型炭疽（二）、癰型炭

13、疽 1、咽炭疽、咽炭疽 （1）、急性咽炭疽）、急性咽炭疽 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 （2）、慢性咽炭疽）、慢性咽炭疽 2、皮膚炭疽癰、皮膚炭疽癰 3、腸炭疽癰、腸炭疽癰 4、肺炭疽癰、肺炭疽癰 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 （二）形態(tài)及染色特征（二）形態(tài)及染色特征 G G+ +大桿菌，無鞭毛，不運動，芽胞位于菌體中央，大桿菌，無鞭毛，不運動，芽胞位于菌體中央， 直徑不大于菌體，可形成莢膜。直徑不大于菌體，可形成莢膜。 在動物組織或血液中，單在或在動物組織或血液中，單在或2 25 5個菌連接成短鏈，個菌

14、連接成短鏈， 菌體矢直，菌端平截而呈菌體矢直，菌端平截而呈“竹節(jié)狀竹節(jié)狀”，圍繞以豐厚的，圍繞以豐厚的 莢膜，莢膜抗腐敗能力強，菌體因腐敗而消失后，莢莢膜，莢膜抗腐敗能力強，菌體因腐敗而消失后，莢 膜仍可殘留稱為膜仍可殘留稱為“菌影菌影”。 組織中的菌體只有遇到游離氧時，才形成芽孢。組織中的菌體只有遇到游離氧時，才形成芽孢。 所以懷疑為炭疽病時，嚴(yán)禁剖檢，避免與所以懷疑為炭疽病時，嚴(yán)禁剖檢，避免與O O2 2接觸，耳接觸，耳 尖采血涂片。尖采血涂片。 在培養(yǎng)基中，形成長鏈，在普通培養(yǎng)基上不形成莢在培養(yǎng)基中，形成長鏈，在普通培養(yǎng)基上不形成莢 膜，并于培養(yǎng)膜，并于培養(yǎng)181824h24h開始形成芽

15、孢。開始形成芽孢。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 體外炭體外炭 疽桿菌疽桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 （三）培養(yǎng)特性（三）培養(yǎng)特性 需氧兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高。需氧兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高。 1 1普通培養(yǎng)基上：強毒株形成灰白色不透明，大普通培養(yǎng)基上：強毒株形成灰白色不透明，大 而扁平，表面干燥，邊緣呈卷發(fā)狀的粗糙菌落而扁平，表面干燥，邊緣呈卷發(fā)狀的粗糙菌落 （R R）；弱毒株形成小而隆起，光滑濕潤，邊緣整）；弱毒株形成小而隆起，光滑濕潤，邊緣整 齊的齊的S S型菌落。型菌落。 2 2血平板：不溶血（類炭疽呈血平板：不溶血（類炭疽呈溶血）溶血） 3 3普通肉湯

16、：上部清朗，底部有絮狀沉淀，無菌普通肉湯：上部清朗，底部有絮狀沉淀，無菌 環(huán)和菌膜，輕搖試管，沉淀物徐徐上升，纏繞成環(huán)和菌膜，輕搖試管，沉淀物徐徐上升，纏繞成 團而不散開。團而不散開。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 （三）培養(yǎng)特性（三）培養(yǎng)特性 4 4明膠穿刺：明膠穿刺： 沿穿刺線緩慢液化，形成倒立的松樹狀。沿穿刺線緩慢液化，形成倒立的松樹狀。 5 5青霉素串珠試驗：青霉素串珠試驗： 在含有在含有0.50.5單位單位/ml/ml的青霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng)的青霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng) 時，由

17、于細胞壁中粘肽合成受到抑制，因時，由于細胞壁中粘肽合成受到抑制，因 而形成原生質(zhì)體相互連接成串稱為而形成原生質(zhì)體相互連接成串稱為“串珠串珠 反應(yīng)反應(yīng)”，這是該菌特有的反應(yīng)。，這是該菌特有的反應(yīng)。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 （四）生化特性（四）生化特性 糖發(fā)酵：糖發(fā)酵：G+ G+ 蔗蔗+ + 麥麥+ + 菊菊+ + 蕈糖蕈糖+ + 果糖果糖+ + 甘油甘油+ + 伯膠糖伯膠糖 木甘露醇淀粉木甘露醇淀粉+ + 硝酸鹽還原硝酸鹽還原+ + 吲哚吲哚 H H2 2S S H H2 2O O2 2+ + （五）抵抗力（五）抵抗力 1 1繁殖體的抵抗力不強：繁殖體的抵抗力不強：60 3060 3060

18、min60min殺死殺死75 575 5 15min15min殺死。一般消毒劑短時間內(nèi)可將其殺死，未剖殺死。一般消毒劑短時間內(nèi)可將其殺死，未剖 檢的尸體，細菌隨腐敗而迅速死亡。檢的尸體，細菌隨腐敗而迅速死亡。 2 2芽胞抵抗力特強：干燥狀態(tài)下存活芽胞抵抗力特強：干燥狀態(tài)下存活1010年，土壤中年，土壤中2020 3030年年。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 （六）抗原性：（六）抗原性： 有有4 4種主要抗原成分種主要抗原成分 1 1莢膜多肽抗原：與毒力有關(guān)，是莢膜多肽抗原：與毒力有關(guān)，是 一種半抗原，此抗原的抗體無保護一種半抗原，此抗原的抗體無保護 作用，但有特異性較強，可用該抗作用，但有特異

19、性較強，可用該抗 體進行莢膜腫脹試驗及熒光抗體法體進行莢膜腫脹試驗及熒光抗體法 進行鑒定細菌。進行鑒定細菌。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 （六）抗原性：（六）抗原性： 有有4 4種主要抗原成分種主要抗原成分 2 2菌體多糖抗原：當(dāng)毒力無關(guān)，但性質(zhì)穩(wěn)定，耐菌體多糖抗原：當(dāng)毒力無關(guān)，但性質(zhì)穩(wěn)定，耐 高溫高壓，抗原性不被破壞。可用來制備炭疽熱沉高溫高壓，抗原性不被破壞?？捎脕碇苽涮烤覠岢?淀反應(yīng)用抗原，即淀反應(yīng)用抗原，即AscoliAscoli氏反應(yīng)。此法特異性不高，氏反應(yīng)。此法特異性不高， 與其它芽孢菌能發(fā)生交叉反應(yīng)。與其它芽孢菌能發(fā)生交叉反應(yīng)。 3 3保護性蛋白抗原（保護性蛋白抗原（PAPA）

20、：是毒素組成成分，具）：是毒素組成成分，具 有免疫原性，能使機體產(chǎn)生抗體保護被感染。有免疫原性，能使機體產(chǎn)生抗體保護被感染。 4.4.芽孢抗原芽孢抗原 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 （七）毒素和毒力（七）毒素和毒力 1 1莢膜：抗吞噬和消除抗體作用，利于細菌擴散。莢膜：抗吞噬和消除抗體作用，利于細菌擴散。 2 2炭疽毒素：包括水腫毒素和致死性毒素炭疽毒素：包括水腫毒素和致死性毒素2 2種，由種，由3 3 個亞單位組成：個亞單位組成： 水腫因子（水腫因子（EFEF）（脂蛋白）（脂蛋白） 致死因子（致死因子（LFLF）（蛋白質(zhì)）（蛋白質(zhì)） 保護性抗原（保護性抗原（PAPA）（蛋白質(zhì)）（蛋白質(zhì)） 三

21、者單獨均無毒性作用，只有三者單獨均無毒性作用，只有PA-EFPA-EF或或PA-LFPA-LF結(jié)合才有結(jié)合才有 致病作用。致病作用。 作用機理：毒素作用于微血管內(nèi)皮作用機理：毒素作用于微血管內(nèi)皮C C，使之通透性增，使之通透性增 強，損害腎臟，干擾糖代謝，引起彌散性血管內(nèi)凝血，強，損害腎臟，干擾糖代謝，引起彌散性血管內(nèi)凝血， 導(dǎo)致動物死亡。導(dǎo)致動物死亡。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 （八）微生物學(xué)診斷（八）微生物學(xué)診斷 嚴(yán)禁剖檢，自耳根部采血，必要時切開肋間取脾臟，嚴(yán)禁剖檢，自耳根部采血，必要時切開肋間取脾臟， 皮膚炭疽取滲出液。皮膚炭疽取滲出液。 1 1細菌學(xué)檢查細菌學(xué)檢查 取材、涂片、染

22、色、鏡檢：發(fā)現(xiàn)有莢膜的竹節(jié)狀取材、涂片、染色、鏡檢：發(fā)現(xiàn)有莢膜的竹節(jié)狀 大桿菌（初步診斷）。大桿菌（初步診斷）。 分離培養(yǎng)：分離培養(yǎng)：a. a. 普通平板。普通平板。 b. b. 血平板。血平板。 c. c. 選擇性培養(yǎng)基：如戊烷脒瓊脂、選擇性培養(yǎng)基：如戊烷脒瓊脂、 溶菌酶正鐵溶菌酶正鐵 血紅素瓊脂、血紅素瓊脂、KniselyKnisely培養(yǎng)基，培養(yǎng)基，37 1637 1620h20h挑挑 選可疑菌落與其它大桿菌作鑒別診斷。選可疑菌落與其它大桿菌作鑒別診斷。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 生化試驗生化試驗 致病性試驗：被檢病料制成致病性試驗：被檢病料制成1515懸液，小白懸液，小白 鼠鼠0.

23、1ml0.1ml皮下注射，兔、豚鼠皮下注射，兔、豚鼠0.2-0.3ml0.2-0.3ml，動物，動物 死于敗血癥，剖檢取臟器涂片鏡檢可見死于敗血癥，剖檢取臟器涂片鏡檢可見G+G+有莢有莢 膜大桿菌，確診。膜大桿菌，確診。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 （九）防治（九）防治 1 1號炭疽芽胞苗：巴斯德將強毒株號炭疽芽胞苗：巴斯德將強毒株 42.5 42.5 培培 養(yǎng)養(yǎng)10-1210-12天，使其喪失形成芽孢的能力，然后天，使其喪失形成芽孢的能力，然后35 35 培育培育4-74-7天，使其恢復(fù)形成芽孢的能力，用這種細天，使其恢復(fù)形成芽孢的能力，用這種細 菌制成疫苗叫

24、菌制成疫苗叫號炭疽芽胞苗。號炭疽芽胞苗。 2 2無毒炭疽芽孢苗：南非畜牧獸醫(yī)研究所選育的無毒炭疽芽孢苗：南非畜牧獸醫(yī)研究所選育的 一株弱毒變種，失去形成莢膜能力，比一株弱毒變種，失去形成莢膜能力，比號炭疽芽號炭疽芽 孢易余毒力強。此疫苗對山羊有強烈反應(yīng)孢易余毒力強。此疫苗對山羊有強烈反應(yīng), ,可引起可引起 嚴(yán)重反應(yīng)，甚至死亡。嚴(yán)重反應(yīng)，甚至死亡。 3 3抗炭疽血清抗炭疽血清 以下圖片為鼠疫相關(guān)以下圖片為鼠疫相關(guān) 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 鼠疫的壞死及出血鼠疫的壞死及出血 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 二、蠟樣芽孢桿菌二、蠟樣芽孢桿菌 廣泛存在在于自然界，如土壤、水、空氣、飼料、食品，一定條

25、廣泛存在在于自然界，如土壤、水、空氣、飼料、食品，一定條 件下，對人致?。阂鹑宋改c道感染（食物中毒）、眼球炎、新件下，對人致?。阂鹑宋改c道感染（食物中毒）、眼球炎、新 生兒上呼吸道感染和臍帶炎。自然情況下，引起牛的乳腺炎，驢生兒上呼吸道感染和臍帶炎。自然情況下，引起牛的乳腺炎，驢 的皮下水腫，犬，貓腹瀉。的皮下水腫，犬，貓腹瀉。 蠟樣芽孢桿菌蠟樣芽孢桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第二節(jié)第二節(jié) 梭菌屬梭菌屬 一、屬的特性一、屬的特性 厭氧芽孢桿菌，芽孢呈卵圓形或圓形，直徑大于菌厭氧芽孢桿菌，芽孢呈卵圓形或圓形，直徑大于菌 體，使菌體膨大呈梭形，故得名。大多數(shù)有鞭毛體，使菌體膨大呈梭形，

26、故得名。大多數(shù)有鞭毛 （魏氏梭菌除外），無莢膜（魏氏梭菌除外），（魏氏梭菌除外），無莢膜（魏氏梭菌除外），G+G+。 二、分類及所致疾病二、分類及所致疾病 本屬有本屬有8080個種，多為非致病菌，常見致病菌約為個種，多為非致病菌，常見致病菌約為1111 種。種。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 三、疾病類型及診斷原則三、疾病類型及診斷原則 疾病類型有疾病類型有5 5大類。大類。 1 1氣腫疽與惡性水腫：急性敗血癥且有氣性水腫氣腫疽與惡性水腫：急性敗血癥且有氣性水腫 癥狀。癥狀。 氣腫疽：氣腫疽梭菌引起，經(jīng)消化道感染。氣腫疽：氣腫疽梭菌引起，經(jīng)消化道感染。 惡性水腫：病原復(fù)雜，動物（腐敗梭菌）、人

27、惡性水腫：病原復(fù)雜，動物（腐敗梭菌）、人 （A A型產(chǎn)氣莢膜梭菌）。型產(chǎn)氣莢膜梭菌）。 診斷原則：病原菌的檢查。診斷原則：病原菌的檢查。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 3 3羔羊痢疾，犢牛痢疾，人禽的壞死性腸炎羔羊痢疾，犢牛痢疾，人禽的壞死性腸炎 由魏氏梭菌在腸道內(nèi)產(chǎn)生毒素所致，細菌不一定侵由魏氏梭菌在腸道內(nèi)產(chǎn)生毒素所致，細菌不一定侵 入體內(nèi)，主要查毒素。入體內(nèi)，主要查毒素。 4 4人畜的肉毒中毒、人魏氏梭菌食物中毒：均由人畜的肉毒中毒、人魏氏梭菌食物中毒：均由 病原菌在食物或飼料中生長繁殖，產(chǎn)生毒素被食入病原菌在食物或飼料中生長繁殖

28、，產(chǎn)生毒素被食入 而中毒。而中毒。 肉毒癥：主要檢查肉毒毒素，其次細菌學(xué)檢查。肉毒癥：主要檢查肉毒毒素，其次細菌學(xué)檢查。 魏氏梭菌食物中毒：可疑食物分離細菌，并測定其魏氏梭菌食物中毒：可疑食物分離細菌，并測定其 毒素產(chǎn)生能力。毒素產(chǎn)生能力。 5 5破傷風(fēng)：破傷風(fēng)梭菌經(jīng)傷口感染，產(chǎn)生破傷風(fēng)破傷風(fēng)：破傷風(fēng)梭菌經(jīng)傷口感染，產(chǎn)生破傷風(fēng) 毒素引起，癥狀極為特征毒素引起，癥狀極為特征“木馬狀木馬狀”，不需微生物，不需微生物 診斷。診斷。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 四、梭菌屬分離鑒定應(yīng)注意事項四、梭菌屬分離鑒定應(yīng)注意事項 1 1專性厭氧，必須采用厭氧培養(yǎng)物。焦性沒專性厭氧，必須采用厭氧培養(yǎng)物。焦性沒 食

29、子酸法、共棲法，肝塊肉湯、鐵釘牛乳。食子酸法、共棲法，肝塊肉湯、鐵釘牛乳。 2 2培養(yǎng)基必須是新鮮配制，厭氧條件下保存。培養(yǎng)基必須是新鮮配制，厭氧條件下保存。 3 3梭菌在培養(yǎng)基表面蔓延生長，不易得到單梭菌在培養(yǎng)基表面蔓延生長，不易得到單 個菌落，為了得到單個菌落，可將瓊脂量加到個菌落，為了得到單個菌落，可將瓊脂量加到 46%46%（一般（一般2%2%），或劃線接種后在表面再加注），或劃線接種后在表面再加注 一層瓊脂培養(yǎng)基，以限制其蔓延生長。一層瓊脂培養(yǎng)基，以限制其蔓延生長。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 四、梭菌屬分離鑒定應(yīng)注意事項四、梭菌屬分離鑒定應(yīng)注意事項 4 4污染嚴(yán)重時，污染嚴(yán)重時，

30、80 20min80 20min殺死雜菌，殺死雜菌， 2525下培養(yǎng)。下培養(yǎng)。 5 5腐敗梭菌，魏氏梭菌容易在死后侵入腐敗梭菌，魏氏梭菌容易在死后侵入 動物體，而諾維梭菌、溶血梭菌存在正動物體，而諾維梭菌、溶血梭菌存在正 常動物體內(nèi)，故從動物體分離出這些梭常動物體內(nèi)，故從動物體分離出這些梭 菌，并不能肯定它們就是病原，應(yīng)進行菌，并不能肯定它們就是病原，應(yīng)進行 毒力測定。毒力測定。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 五、產(chǎn)氣莢膜梭菌五、產(chǎn)氣莢膜梭菌 舊名：魏氏梭菌，自然界分布廣，可見舊名：魏氏梭菌，自然界分布廣，可見 于污水，土壤，飼料，食物及人畜腸道于污水，土壤，飼料，食物及人畜腸道 中，一定條件

31、下，引起多種嚴(yán)重疾病。中，一定條件下，引起多種嚴(yán)重疾病。 （一）形態(tài)染色特征（一）形態(tài)染色特征 G G+ +粗大正直桿菌，單在或成雙排列，無粗大正直桿菌，單在或成雙排列，無 鞭毛，一般條件下培養(yǎng)芽孢很少產(chǎn)生，鞭毛，一般條件下培養(yǎng)芽孢很少產(chǎn)生， 有莢膜。有莢膜。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 產(chǎn)氣莢膜梭菌產(chǎn)氣莢膜梭菌 （二）培養(yǎng)特性（二）培養(yǎng)特性 厭氧要求不高，普通培養(yǎng)基上易生長。厭氧要求不高，普通培養(yǎng)基上易生長。 1 1葡萄糖血平板：圓形，光滑，隆起，淡灰葡萄糖血平板：圓形，光滑，隆起，淡灰 白色中等大小菌落，有的可形成圓盤形邊緣呈白色中等大小菌落，有的可形成圓盤形邊緣呈 鋸齒狀，表面有輻射狀

32、條紋的鋸齒狀，表面有輻射狀條紋的“勛章勛章”樣大菌樣大菌 落，產(chǎn)生落，產(chǎn)生“雙重溶血環(huán)雙重溶血環(huán)”內(nèi)環(huán)內(nèi)環(huán)溶血，外環(huán)為溶血，外環(huán)為 溶血。溶血。 2 2肝塊肉湯：肝塊肉湯：5-6h5-6h，均勻渾濁，產(chǎn)生大量氣，均勻渾濁，產(chǎn)生大量氣 體。體。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 （三）生化特性（三）生化特性 1 1牛乳暴烈發(fā)酵：魏氏梭菌接種牛乳培養(yǎng)牛乳暴烈發(fā)酵：魏氏梭菌接種牛乳培養(yǎng) 基基8-10h8-10h后，發(fā)酵牛乳中的乳糖使牛乳酸凝，后，發(fā)酵牛乳中的乳糖使牛乳酸凝， 同時產(chǎn)生大量氣體使凝塊變多孔的海綿狀，同時產(chǎn)生大量氣體使凝塊變多孔的海綿狀， 嚴(yán)重時，被沖成數(shù)段，甚至噴出管外。嚴(yán)重時，被沖成數(shù)段

33、，甚至噴出管外。 2 2明膠液化，糖發(fā)酵明膠液化，糖發(fā)酵 H H2 2S+ S+ 吲哚吲哚 HNOHNO3 3 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 （五）微生物學(xué)診斷（五）微生物學(xué)診斷 細菌學(xué)診斷意義不大，因為魏氏梭菌是人畜腸道中常見菌，細菌學(xué)診斷意義不大，因為魏氏梭菌是人畜腸道中常見菌， 或者死后被侵入，從病料中檢出該菌并不能說明它就是病或者死后被侵入，從病料中檢出該菌并不能說明它就是病 原。必須進行腸內(nèi)容物毒素檢查。原。必須進行腸內(nèi)容物毒素檢查。 1 1方法：方法： 回腸內(nèi)容物回腸內(nèi)容物加適量滅菌生理鹽水作加適量滅菌生理鹽水作1-31-3倍稀釋倍稀釋離心取上離心取上

34、 清，濾過除菌清，濾過除菌濾液靜脈注射家兔（濾液靜脈注射家兔（1-3ml1-3ml），小鼠（），小鼠（0.1-0.1- 0.3ml0.3ml） 數(shù)分鐘至數(shù)分鐘至1010小時內(nèi)死亡，證明有毒素存在。小時內(nèi)死亡，證明有毒素存在。 2 2為了進一步證明是否為魏氏梭菌毒素及毒素型，必須進為了進一步證明是否為魏氏梭菌毒素及毒素型，必須進 行毒素中和試驗。行毒素中和試驗。 方法：上述濾液方法：上述濾液3 3份。份。 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 I+C型魏氏梭菌抗毒素血清型魏氏梭菌抗毒素血清 +D型魏氏梭菌抗毒素血清型魏氏梭菌抗毒素血清 37作用作用40min靜脈注射小鼠或兔子靜脈注射小鼠或兔子 +生理鹽

35、水生理鹽水 觀察觀察12h, 記錄結(jié)果如下：記錄結(jié)果如下： D型抗毒素血清可保護型抗毒素血清可保護 C型抗毒素血清也可保護型抗毒素血清也可保護A型毒素型毒素 C型抗毒素血清不能保護型抗毒素血清不能保護D型毒素型毒素 D型抗毒素血清不保護型抗毒素血清不保護 C型抗毒素血清可保護型抗毒素血清可保護B型或型或C型毒素型毒素 C型也不保護型也不保護可能是可能是E型或不是魏氏梭菌毒型或不是魏氏梭菌毒 素，再用素，再用E型血清試驗確定型血清試驗確定 第21章革蘭氏陽性無芽胞桿菌 E E型能保護型能保護E E型毒素型毒素。 E E型不能保護型不能保護不是魏氏梭菌毒不是魏氏梭菌毒 素素。 不能區(qū)分不能區(qū)分B B型或型或C C型毒素時，濾液中加入型毒素時，濾液中加入0.250.5%0.250.5%胰酶，胰酶， 3737 作用作用30-60min30-60min，離心沉淀取上清再與，離心沉淀取上清再與C C型抗血清進行中和保型抗血清進行中和保 護試驗。護試驗。 C C型抗毒素血清不能保護型抗毒素血清不能保護B B型毒素型毒素 C C型抗毒素血清能保護型抗毒素血清能保護C C型毒素型毒素 （原因（原因B B型毒素中的型毒素中的