苯磺酸氨氯地平片檢驗(yàn)方法確認(rèn)方案.

1、檢驗(yàn)方法驗(yàn)證報(bào)告名 稱(chēng)：苯磺酸氨氯地平片檢驗(yàn)方法確認(rèn)驗(yàn)證編碼：JL-JYFFYZ-026-01使用部門(mén)：質(zhì)量監(jiān)控部驗(yàn)證部門(mén)：質(zhì)量監(jiān)控部上海天賜福生物工程有限公司2014年目錄驗(yàn)證提議書(shū)4驗(yàn)證任務(wù)書(shū)5苯磺酸氨氯地平片檢驗(yàn)方法確認(rèn)方案11、 概述12、確認(rèn)方法的依據(jù)23、 確認(rèn)實(shí)施條件33.1實(shí)驗(yàn)樣品和對(duì)照品：33.2儀器和試劑：33.3執(zhí)行文件：43.4確認(rèn)檢驗(yàn)人員：43.5確認(rèn)實(shí)施環(huán)境：54、 確認(rèn)可接受標(biāo)準(zhǔn)55、確認(rèn)實(shí)施65.1鑒別方法學(xué)確認(rèn)：65.1.1薄層鑒別確認(rèn)：65.1.2液相鑒別確認(rèn)：65.1.3紫外鑒別確認(rèn)：75.1.4鑒別方法學(xué)確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)：85.2含量測(cè)定方法學(xué)確認(rèn)：85.2

2、.1含量測(cè)定方法：85.2.2樣品溶液提取考察：95.2.3回收率試驗(yàn)：95.2.4精密度試驗(yàn)：105.2.5不同色譜柱考察：115.2.6樣品含量測(cè)定：125.2.7含量測(cè)定方法學(xué)確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)：125.3有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)確認(rèn)：125.3.1有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法：125.3.2檢測(cè)限定量限試驗(yàn)：135.3.3樣品有關(guān)物質(zhì)測(cè)定：145.3.4有關(guān)物質(zhì)確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)：145.4含量均勻度方法學(xué)確認(rèn)：145.4.1含量均勻度檢查方法：145.4.2樣品含量均勻度測(cè)定：145.4.3含量均勻度確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)：155.5溶出度方法學(xué)確認(rèn)：155.5.1溶出度測(cè)定方法：155.5.2溶液穩(wěn)定性考察：165.5.3測(cè)

3、定精密度考察：165.5.4樣品溶出度測(cè)定：165.5.5溶出度確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)：176、確認(rèn)評(píng)價(jià)176.1評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：176.2新舊標(biāo)準(zhǔn)比較：176.3本次確認(rèn)評(píng)價(jià)：177、確認(rèn)評(píng)價(jià)評(píng)價(jià)報(bào)告178、記錄文件18驗(yàn)證提議書(shū)項(xiàng)目名稱(chēng)：苯磺酸氨氯地平片檢驗(yàn)方法確認(rèn)提議部門(mén)部門(mén)主管提議日期對(duì)象概述： 本公司于2007年12月28日獲得苯磺酸氨氯地平片藥品注冊(cè)件，批準(zhǔn)文號(hào)為國(guó)藥準(zhǔn)字H20074123，執(zhí)行藥品標(biāo)準(zhǔn)為YBH05302007。根據(jù)國(guó)家藥典委員會(huì)網(wǎng)站發(fā)布的“關(guān)于苯磺酸氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的公示”（公示日期：2014年3月24日 上午9:29），對(duì)征求意見(jiàn)稿與公司現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的檢驗(yàn)項(xiàng)目和方法進(jìn)行了詳細(xì)比較

4、。為此組織對(duì)苯磺酸氨氯地平片征求意見(jiàn)稿中的修訂部分（如鑒別、溶出度、有關(guān)物質(zhì)和含量測(cè)定等項(xiàng)目）檢驗(yàn)方法進(jìn)行（適用性）確認(rèn)。確認(rèn)目的：通過(guò)對(duì)苯磺酸氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（征求意見(jiàn)稿）的檢驗(yàn)方法確認(rèn)，以證實(shí)該檢驗(yàn)方法在本實(shí)驗(yàn)室的適用，確保所公示的苯磺酸氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)在本公司的有效執(zhí)行。確認(rèn)條件：1、參加實(shí)驗(yàn)操作人員均已通過(guò)培訓(xùn)，熟知確認(rèn)方案、熟悉所用儀器操作；2、實(shí)驗(yàn)所用的設(shè)備和儀器以及定量容器均檢定合格并在有效期內(nèi)；3、實(shí)驗(yàn)所用樣品的交接、貯存及使用均符合規(guī)定要求。實(shí)驗(yàn)所用試劑、對(duì)照品等均符合管理規(guī)定；4、實(shí)驗(yàn)所采用的方法、標(biāo)準(zhǔn)均經(jīng)過(guò)批準(zhǔn)或確認(rèn)；5、實(shí)驗(yàn)環(huán)境符合檢驗(yàn)方法的要求；初審意見(jiàn)： 年 月

5、 日附件：苯磺酸氨氯地平片成品檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)記錄。驗(yàn)證任務(wù)書(shū)驗(yàn)證題目： 苯磺酸氨氯地平片檢驗(yàn)方法確認(rèn) 驗(yàn)證對(duì)象驗(yàn)證類(lèi)別驗(yàn)證編號(hào)苯磺酸氨氯地平片檢驗(yàn)方法方法確認(rèn)JL-JYFFYZ-026-01驗(yàn)證小組成員部 門(mén)姓 名責(zé) 任質(zhì)量監(jiān)控部楊瑞群組長(zhǎng)，負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案起草、驗(yàn)證工作的實(shí)施安排及報(bào)告復(fù)核。 質(zhì)量監(jiān)控部王志蓮組員，參與驗(yàn)證方案制定、驗(yàn)證工作的實(shí)施質(zhì)量監(jiān)控部孔憲琴組員，參與驗(yàn)證方案制定、驗(yàn)證工作的實(shí)施質(zhì)量保證部黃星付組長(zhǎng)，負(fù)責(zé)驗(yàn)證協(xié)調(diào)，實(shí)施的監(jiān)督，方案及報(bào)告的審核、工作要求：總工程師：年 月 日苯磺酸氨氯地平片檢驗(yàn)方法確認(rèn)方案 JL-JYFFYZ-026-01苯磺酸氨氯地平片檢驗(yàn)方法確認(rèn)方案確認(rèn)人員部

6、門(mén)質(zhì)監(jiān)部質(zhì)監(jiān)部質(zhì)監(jiān)部質(zhì)保部人員時(shí)間審批：1、 概述本研究針對(duì)本公司苯磺酸氨氯地平片產(chǎn)品（國(guó)藥準(zhǔn)字H20074123）的產(chǎn)品檢驗(yàn)方法，依據(jù)國(guó)家藥典委員會(huì)網(wǎng)站發(fā)布的“關(guān)于苯磺酸氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的公示”中的征求意見(jiàn)稿內(nèi)容，選擇與本公司現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)（YBH05302007）中的修訂項(xiàng)目（如：鑒別、有關(guān)物質(zhì)、溶出度和含量測(cè)定等項(xiàng)目，詳見(jiàn)表1）進(jìn)行的方法確認(rèn)。根據(jù)GMP的驗(yàn)證管理要求，通過(guò)檢驗(yàn)方法確認(rèn)，證明該藥品標(biāo)準(zhǔn)的檢驗(yàn)方法在本公司實(shí)驗(yàn)室的適用性，以確保檢驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、可靠和所公示苯磺酸氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)在本公司的有效執(zhí)行。表1：公示標(biāo)準(zhǔn)與現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)不同之處比較檢驗(yàn)項(xiàng)目藥典委公示國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)YBH05302007

7、 【鑒別】薄層鑒別（1）取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于氨氯地平20mg），加甲醇4ml，超聲20 分鐘，濾過(guò)，取濾液作為供試品溶液；另取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品，加甲醇溶解并稀釋制成每1ml 中含氨氯地平為5mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（中國(guó)藥典2010 年版二部附錄 B）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各 10l，分別點(diǎn)于同一硅膠 G 薄層板上，以甲基異丁基酮-冰醋酸-水（2：1：1）的上層液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的位置和顏色應(yīng)與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)相同。取本品的細(xì)粉適量（約相當(dāng)于氨氯地平20mg），加甲醇4ml振搖使氨氯地平溶解，濾過(guò)，取濾液作為供試品溶液；

8、另取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品70mg，加甲醇10ml振搖使溶解，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（中國(guó)藥典2005年版二部附錄 B）試驗(yàn)，取上述兩種溶液各10l，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以氯仿甲醇濃氨溶液（80203）為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視，供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的顏色和位置應(yīng)與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)相同。液相鑒別在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的圖譜中，供試品主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品主峰的保留時(shí)間一致。紫外鑒別取本品細(xì)粉適量，加鹽酸溶液（0.91000）溶解并稀釋制成每1ml 中含氨氯地平

9、10g的溶液，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液照紫外-可見(jiàn)分光光度法（中國(guó)藥典 2010年版二部附錄A）在200400nm 范圍內(nèi)掃描，在239nm 與365nm 的波長(zhǎng)處有最大吸收，在225nm 的波長(zhǎng)處有最小吸收。【檢查】有關(guān)物質(zhì)取本品細(xì)粉（約相當(dāng)于氨氯地平50mg），置50ml 的量瓶中，加流動(dòng)相約40ml，超聲處理30 分鐘，取出，放冷至室溫，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液；精密量取供試品溶液1ml，置100ml 量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。照含量測(cè)定項(xiàng)下的色譜條件，取對(duì)照溶液20l 注入高效液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿(mǎn)量程的2

10、0%。再精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液各20l，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的3 倍。供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，氨氯地平雜質(zhì)峰（相對(duì)保留時(shí)間約0.5）的峰面積乘以2 不得大于對(duì)照溶液的主峰面積 (1.0%)，其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的0.5 倍(0.5%)，氨氯地平雜質(zhì)峰的峰面積乘以2 與其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的1.5 倍(1.5%)。取本品的細(xì)粉適量（約相當(dāng)于氨氯地平20mg），置100ml量瓶中，加流動(dòng)相適量，振搖使氨氯地平溶解，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。精密量取供試品溶液1ml置100ml量瓶中

11、，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。照含量測(cè)定項(xiàng)下的色譜條件，取對(duì)照溶液20l注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成份峰的峰高約為滿(mǎn)量程的20%，再精密量取上述兩種溶液各20l，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的3倍。供試品溶液的色譜圖中如顯示雜質(zhì)峰，量取各雜質(zhì)峰峰面積的和，不得大于對(duì)照溶液主成份峰峰面積的1.5倍（1.5%）。含量均勻度以含量測(cè)定項(xiàng)下測(cè)得的每片含量計(jì)算，應(yīng)符合規(guī)定（中國(guó)藥典2010 年版二部附錄 E）。取本品1片，置100ml量瓶中，加水10ml振搖使崩解，加流動(dòng)相適量，超聲使氨氯地平溶解，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液，照

12、含量測(cè)定項(xiàng)下的方法測(cè)定，應(yīng)符合規(guī)定（中國(guó)藥典2005年版二部附錄 E）。溶出度取本品，照溶出度測(cè)定法（中國(guó)藥典 2010 年版二部附錄 C 第二法），以鹽酸溶液（0.91000）500ml 為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為每分鐘75 轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)30 分鐘時(shí)，取溶液適量，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液適量，用流動(dòng)相定量稀釋制成每1ml 中含氨氯地平5g的溶液作為供試品溶液；另取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇適量溶解后用溶出介質(zhì)稀釋制成每1ml 中約含氨氯地平5g 的溶液，作為對(duì)照品溶液。照含量測(cè)定項(xiàng)下的方法測(cè)定，計(jì)算每片的溶出量。限度為標(biāo)示量的80%，應(yīng)符合規(guī)定。取本品，照溶出度測(cè)定法（中國(guó)藥典200

13、5年版二部附錄X C第二法），以鹽酸溶液（0.91000）500ml為溶劑，轉(zhuǎn)速為每分鐘75轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)30分鐘時(shí)，取溶液適量濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液；另取經(jīng)105干燥至恒重的苯磺酸氨氯地平對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加鹽酸溶液（0.91000）溶解并稀釋制成每1ml中含氨氯地平10g的溶液，作為對(duì)照品溶液。照紫外-可見(jiàn)分光光度法（中國(guó)藥典2005年版二部附錄 A），在237nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸收度，計(jì)算出每片的溶出量，限度為標(biāo)示量的80%，應(yīng)符合規(guī)定?！竞繙y(cè)定】照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2010 年版二部附錄VD）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（推薦Ph

14、enomenexLuna C18 柱，4.6mm250mm5m，或效能相當(dāng)?shù)纳V柱）；以甲醇-乙腈-0.7%三乙胺溶液（取三乙胺 7.0ml，加水至 l000ml，用磷酸調(diào)節(jié) pH值至 3.00.1）（351550）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為237nm。取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品5mg，加濃過(guò)氧化氫溶液5ml，置70加熱45 分鐘，作為系統(tǒng)適用性溶液，取系統(tǒng)適用性溶液20l 注入液相色譜儀，記錄色譜圖，氨氯地平峰保留時(shí)間約為18 分鐘，氨氯地平峰與氨氯地平雜質(zhì)峰（相對(duì)保留時(shí)間約0.5）的分離度應(yīng)大于4.5，理論板數(shù)按氨氯地平峰計(jì)算不低于3000。測(cè)定法 取本品10 片，分別置50ml 量瓶中，加流動(dòng)相約

15、30ml，超聲處理30 分鐘，放冷至室溫，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液，用流動(dòng)相稀釋制成每1ml中含氨氯地平50g 的溶液，精密量取20l 注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋成每1ml 中約含氨氯地平50g 的溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算每片的含量，并求得10 片的平均含量，即得。照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2005年版二部附錄 D）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(70:30)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)237nm。理論板數(shù)按苯磺酸氨氯地平峰計(jì)算應(yīng)不低

16、于2000。測(cè)定法 取本品20片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于氨氯地平10mg），置100ml量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲使氨氯地平溶解，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，置20ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20l注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取經(jīng)105干燥至恒重的苯磺酸氨氯地平對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含氨氯地平50g的溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。2、確認(rèn)方法的依據(jù)2.1國(guó)家藥典委員會(huì)網(wǎng)站發(fā)布的“關(guān)于苯磺酸氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的公示”中所附“苯磺酸氨氯地平片標(biāo)準(zhǔn)”（詳見(jiàn)附件1）；2.2中國(guó)藥典

17、2010年版二部藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)和化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗(yàn)證技術(shù)指導(dǎo)原則；3、 確認(rèn)實(shí)施條件3.1實(shí)驗(yàn)樣品和對(duì)照品：樣品：三批車(chē)間連續(xù)生產(chǎn)樣品（批號(hào)： ）、一批市售原研參比樣品（批號(hào)： ）。對(duì)照品：中國(guó)食品藥品檢定研究院提供，批號(hào)：3.2儀器和試劑：試驗(yàn)所用實(shí)驗(yàn)室儀器和試劑見(jiàn)表3-1、表3-2。表3-1 確認(rèn)試驗(yàn)所用儀器名稱(chēng)型號(hào)/規(guī)格生產(chǎn)廠家校驗(yàn)（或確認(rèn)）編號(hào)校驗(yàn)(或確認(rèn))有效期限高效液相色譜儀色譜系統(tǒng)色譜柱色譜柱藥物溶出儀RCZ-B天津大學(xué)精密儀器廠紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)電子天平超聲儀實(shí)驗(yàn)所用試劑：名稱(chēng)規(guī)格生產(chǎn)廠家編號(hào)/批號(hào)鹽酸AR醋酸銨AR冰醋酸AR氫氧化鈉AR磷酸二氫鉀AR3

18、.3執(zhí)行文件：檢驗(yàn)操作執(zhí)行文件：國(guó)家藥典委員會(huì)“關(guān)于苯磺酸氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的公示”中所附“苯磺酸氨氯地平片標(biāo)準(zhǔn)”。（詳見(jiàn)附件1）確認(rèn)試驗(yàn)所涉實(shí)驗(yàn)室管理執(zhí)行文件見(jiàn)表3-3。表3-3 實(shí)驗(yàn)室管理執(zhí)行文件目錄文件名稱(chēng)編號(hào)存放處1檢驗(yàn)方法確認(rèn)操作規(guī)程2分析儀器（設(shè)備）確認(rèn)、檢定管理規(guī)定3分析儀器設(shè)備管理規(guī)定4小容量玻璃器具校正管理規(guī)程5化學(xué)試劑、試液管理制度6對(duì)照品管理規(guī)定7滴定液管理制度8檢驗(yàn)樣品管理規(guī)定9色譜柱管理規(guī)定10質(zhì)量監(jiān)控部液相色譜圖管理規(guī)定11質(zhì)量監(jiān)控部人員培訓(xùn)管理規(guī)定12檢驗(yàn)記錄與檢驗(yàn)報(bào)告管理規(guī)定13檢驗(yàn)偏差處理規(guī)定14實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果超標(biāo)管理規(guī)程3.4確認(rèn)檢驗(yàn)人員：確認(rèn)試驗(yàn)人員情況見(jiàn)

19、表3-4。表3-4 試驗(yàn)參與人員情況表操作崗位姓名職務(wù)上崗證驗(yàn)證培訓(xùn)情況3.5確認(rèn)實(shí)施環(huán)境：本次苯磺酸氨氯地平片檢驗(yàn)方法確認(rèn)工作位于質(zhì)量監(jiān)控部的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)實(shí)施。4、 確認(rèn)可接受標(biāo)準(zhǔn)本次苯磺酸氨氯地平片檢驗(yàn)方法確認(rèn)選擇國(guó)家藥典委會(huì)公示的苯磺酸氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)與本公司現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)具有變化的項(xiàng)目?jī)?nèi)容，依據(jù)公示的苯磺酸氨氯地平片標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)內(nèi)容設(shè)定確認(rèn)可接受標(biāo)準(zhǔn)范圍。詳下表：苯磺酸氨氯地平片檢驗(yàn)方法可接受標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)項(xiàng)目方法質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】薄層鑒別TLC法供試品所顯主斑點(diǎn)顏色和位置應(yīng)與對(duì)照品主斑點(diǎn)的顏色和位置一致。樣品檢測(cè)均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定；空白輔料無(wú)干擾。液相鑒別HPLC法供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照

20、品溶液主峰的保留時(shí)間一致。樣品檢測(cè)均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定；空白輔料無(wú)干擾。紫外鑒別UV法在239nm與365的波長(zhǎng)處有最大吸收，在225nm的波長(zhǎng)處有最小吸收。樣品檢測(cè)均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定；空白輔料無(wú)干擾?！緳z查】有關(guān)物質(zhì)HPLC法氨氯地平雜質(zhì)峰21.0%樣品檢測(cè)均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定；檢測(cè)限和定量限測(cè)試：滿(mǎn)足檢測(cè)要求； 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)：滿(mǎn)足測(cè)定要求，RSD2.0%。其它單個(gè)雜質(zhì)0.5%氨氯地平雜質(zhì)峰2與其它雜質(zhì)和1.5%含量均勻度HPLC法由含量測(cè)定項(xiàng)下測(cè)得，應(yīng)符合規(guī)定樣品檢測(cè)均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。溶出度HPLC法限度為標(biāo)示量的80% 樣品檢測(cè)均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定；溶液精密度和穩(wěn)定性試驗(yàn)：滿(mǎn)足測(cè)定要求，RSD2.0%?！竞?/p>

21、測(cè)定】HPLC法含氨氯地平（C20H25N2O5Cl）應(yīng)為標(biāo)示量的95.0%105.0%樣品含量測(cè)定均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定；溶液提取考察：符合檢測(cè)要求； 回收率試驗(yàn)：回收率均在98.0%102.0%范圍，RSD2.0%重復(fù)性和中間精密試驗(yàn)：符合檢測(cè)要求；同型號(hào)色譜柱影響因素符合規(guī)定。 5、確認(rèn)實(shí)施5.1鑒別方法學(xué)確認(rèn)：參照國(guó)家藥典委公示苯磺酸氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中的鑒別方法，分別進(jìn)行薄層色譜法鑒別試驗(yàn)、液相色譜法鑒別試驗(yàn)和紫外分光法鑒別試驗(yàn)，并對(duì)方法做專(zhuān)屬性研究和確認(rèn)。5.1.1薄層鑒別確認(rèn)：方法：取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于氨氯地平20mg），加甲醇4ml，超聲20 分鐘，濾過(guò)，取濾液作為供試品溶液；另取

22、苯磺酸氨氯地平對(duì)照品，加甲醇溶解并稀釋制成每1ml 中含氨氯地平為5mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液；同時(shí)按處方比例稱(chēng)取空白輔料適量，配成空白輔料溶液。照薄層色譜法（中國(guó)藥典2010 年版二部附錄 B）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各 10l，分別點(diǎn)于同一硅膠 G 薄層板上，以甲基異丁基酮-冰醋酸-水（2：1：1）的上層液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，置紫外燈光（254nm）下檢視。結(jié)果：三批生產(chǎn)樣品、參比樣品及空白輔料的薄層鑒別試驗(yàn)圖片見(jiàn)附圖5-15，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5-1。表5-1 薄層鑒別試驗(yàn)結(jié)果樣品結(jié)果生產(chǎn)樣品1生產(chǎn)樣品2生產(chǎn)樣品3參比樣品空白輔料結(jié)論：5.1.2液相鑒別確認(rèn)： 方法：取含

23、量測(cè)定項(xiàng)下的供試品溶液和對(duì)照品溶液，照含量測(cè)定項(xiàng)下的高效液相色譜條件進(jìn)行試驗(yàn)。另取空白輔料適量，照含量測(cè)定方法配制溶液（相當(dāng)于每1ml含苯磺酸氨氯地平50g所用輔料量），同法測(cè)定。結(jié)果：三批生產(chǎn)樣品、參比樣品及空白輔料和對(duì)照品的液相鑒別試驗(yàn)圖譜見(jiàn)附圖5-612，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5-2。表5-2 液相鑒別試驗(yàn)結(jié)果樣品保留時(shí)間（分）生產(chǎn)樣品1生產(chǎn)樣品2生產(chǎn)樣品3參比樣品苯磺酸氨氯地平對(duì)照品空白輔料結(jié)論：5.1.3紫外鑒別確認(rèn)： 方法：精密取本品細(xì)粉適量（相當(dāng)于氨氯地平10.0mg），置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（0.91000）適量，超聲使溶解，加鹽酸溶液（0.91000）稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精

24、密量取續(xù)濾液1ml置10ml量瓶中，加鹽酸溶液（0.91000）至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另精密取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品適量，加鹽酸溶液（0.91000）溶液溶解并定量稀釋成每1ml中含氨氯地平10g的溶液，作為對(duì)照品溶液。另取空白輔料388mg置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（0.91000）稀釋至刻度，充分振搖使溶解，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液1ml置10ml量瓶中，加鹽酸溶液（0.91000）至刻度，搖勻，作為空白溶液。分別按照紫外-可見(jiàn)分光光度法（中國(guó)藥典 2010年版二部附錄A）在200400nm 波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描。結(jié)果：三批生產(chǎn)樣品、參比樣品及空白輔料和對(duì)照品的紫外鑒別試驗(yàn)掃描結(jié)果見(jiàn)附圖5

25、-1318及表5-3。表5-3 液相鑒別試驗(yàn)結(jié)果樣品最大吸收波長(zhǎng)（nm）生產(chǎn)樣品1生產(chǎn)樣品2生產(chǎn)樣品3參比樣品苯磺酸氨氯地平對(duì)照品空白輔料結(jié)論：5.1.4鑒別方法學(xué)確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)： 5.2含量測(cè)定方法學(xué)確認(rèn)：參照國(guó)家藥典委公示苯磺酸氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中的含量測(cè)定檢驗(yàn)方法進(jìn)行本品含量測(cè)定試驗(yàn)，并對(duì)含量測(cè)定方法的樣品溶液提取、檢測(cè)精密度以及不同型號(hào)色譜柱影響等進(jìn)行相應(yīng)考察和確認(rèn)。5.2.1含量測(cè)定方法：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（推薦PhenomenexLuna C18 柱，4.6mm250mm5m，或效能相當(dāng)?shù)纳V柱）；以甲醇-乙腈-0.7%三乙胺溶液（取三乙胺 7.

26、0ml，加水至 l000ml，用磷酸調(diào)節(jié) pH值至 3.00.1）（351550）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為237nm。取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品5mg，加濃過(guò)氧化氫溶液5ml，置70加熱45 分鐘，作為系統(tǒng)適用性溶液，取系統(tǒng)適用性溶液20l 注入液相色譜儀，記錄色譜圖，氨氯地平峰保留時(shí)間約為18 分鐘，氨氯地平峰與氨氯地平雜質(zhì)峰（相對(duì)保留時(shí)間約0.5）的分離度應(yīng)大于4.5，理論板數(shù)按氨氯地平峰計(jì)算不低于3000。測(cè)定法 取本品10 片，分別置50ml 量瓶中，加流動(dòng)相約30ml，超聲處理30 分鐘，放冷至室溫，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液，用流動(dòng)相稀釋制成每1ml中含氨氯地平50g

27、的溶液，精密量取20l 注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋成每1ml 中約含氨氯地平50g 的溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算每片的含量，并求得10 片的平均含量，即得。5.2.2樣品溶液提取考察：取樣品10片，研細(xì)，取約200mg，精密稱(chēng)定，置50ml量瓶中，加入流動(dòng)相30ml，共取5份，分別超聲處理10分鐘、20分鐘、30分鐘、40分鐘、50分鐘，放冷至室溫，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋

28、成每1ml中約含氨氯地平50g 的溶液。按照本品含量測(cè)定色譜條件，量取供試品溶液和對(duì)照品溶液各20l，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算5份樣品的含量，考察不同超聲時(shí)間的主藥成份提取情況。結(jié)果見(jiàn)表5-4，附圖見(jiàn)5-1924。表5-4 溶液提取方法考察結(jié)果超聲時(shí)間10分鐘20分鐘30分鐘40分鐘50分鐘樣品含量（%）結(jié)論：5.2.3回收率試驗(yàn)：精密稱(chēng)取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品13.8 mg（100%），置200ml量瓶中，加入處方比例的空白輔料387mg，加流動(dòng)相約160ml稀釋?zhuān)曁幚?0分鐘，放冷至室溫，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液照含量測(cè)定方法進(jìn)行試驗(yàn)，平行三份；另

29、精密稱(chēng)取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品11.2 mg、16.6mg（80%、120%），同法測(cè)定，考察回收率。結(jié)果見(jiàn)表5-5，附圖見(jiàn)5-2535。表5-5 含量測(cè)定回收率試驗(yàn)結(jié)果濃度編號(hào)加入量(mg)測(cè)得量(mg)回收率(%)平均回收率1(%)平均回收率2(%)RSD%80%199.040.6223100%456120%789結(jié)論：各濃度下的平均回收率均在98.0%102.0%之間，平均回收率為 %，RSD% 5.2.4精密度試驗(yàn)：重復(fù)性試驗(yàn)：供試品溶液的制備：取苯磺酸氨氯地平片10片，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于氨氯地平5.0mg），平行稱(chēng)定6份樣品，分別置50ml量瓶中，加流動(dòng)相30ml，超聲30分

30、鐘，放冷至室溫，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。對(duì)照品溶液的制備：取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品7mg，精密稱(chēng)定，置50ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。精密量取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20l，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算6份樣品的含量精密度。結(jié)果見(jiàn)表5-6，附圖見(jiàn)5-3641。表5-6 重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果樣品編號(hào)123456樣品含量（%）平均值= RSD=結(jié)論：中間精密度：取同一樣品，連續(xù)三天每天配制一份，每份重復(fù)三次。在不

31、同的檢查日期，采用不同的分析儀器，不同的試驗(yàn)人員，按照“重復(fù)性試驗(yàn)”檢驗(yàn)方法，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算各份樣品的氨氯地平含量，并計(jì)算含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(RSD%)。結(jié)果見(jiàn)表5-7，附圖見(jiàn)5-4253。表5-7 中間精密度試驗(yàn)結(jié)果第1天（人員A；儀品a）第2天（人員A；儀品b）第3天（人員B；儀品a）含量1（%）含量2（%）含量3（%）平均含量（%）平均值= RSD=結(jié)論：5.2.5不同色譜柱考察：取不同廠商相同規(guī)格的色譜柱，按含量測(cè)定項(xiàng)下檢測(cè)方法進(jìn)行考察，觀察不同色譜柱是否仍可實(shí)現(xiàn)樣品中的各雜峰之間以及雜峰與主峰很好的分離，考察不同廠商色譜柱對(duì)含量測(cè)定的影響。結(jié)果見(jiàn)表5-8，附圖見(jiàn)5-5459。表5

32、-8 含量測(cè)定不同色譜柱考察結(jié)果色譜柱氨氯地平峰與氨氯地平雜質(zhì)峰分離度雜質(zhì)總個(gè)數(shù)含量測(cè)定（%）Phenomenex Luna C18柱：（4.6mm250cm5m；批號(hào)： ）123平均值/RSD(%)/Agilent（4.6mm250cm5m；批號(hào)： ）123平均值/RSD(%)/結(jié)論：5.2.6樣品含量測(cè)定：取本品三批生產(chǎn)樣品和參比樣品，照上述含量測(cè)定方法，分別測(cè)定樣品含量，結(jié)果見(jiàn)表5-9，附圖見(jiàn)5-2630。表5-9 苯磺酸氨氯地平片樣品含量測(cè)定結(jié)果樣品批號(hào)生產(chǎn)樣品1生產(chǎn)樣品2生產(chǎn)樣品3參比樣品結(jié)論：5.2.7含量測(cè)定方法學(xué)確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)： 5.3有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)確認(rèn)：參照國(guó)家藥典委公示苯磺酸

33、氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中的有關(guān)物質(zhì)檢查方法進(jìn)行本品有關(guān)物質(zhì)測(cè)定試驗(yàn)，并對(duì)有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法的檢測(cè)限和定量限、供試品溶液穩(wěn)定性進(jìn)行相應(yīng)考察和確認(rèn)。5.3.1有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法：取本品細(xì)粉（約相當(dāng)于氨氯地平50mg），置50ml 的量瓶中，加流動(dòng)相約40ml，超聲處理30 分鐘，取出，放冷至室溫，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液；精密量取供試品溶液1ml，置100ml 量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。照含量測(cè)定項(xiàng)下的色譜條件，取對(duì)照溶液20l 注入高效液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿(mǎn)量程的20%。再精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液各20l，分別注入液

34、相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的3 倍。供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，氨氯地平雜質(zhì)峰（相對(duì)保留時(shí)間約0.5）的峰面積乘以2 不得大于對(duì)照溶液的主峰面積 (1.0%)，其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的0.5 倍(0.5%)，氨氯地平雜質(zhì)峰的峰面積乘以2 與其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的1.5 倍(1.5%)。5.3.2溶液穩(wěn)定性考察：取本品適量，照有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)下方法制備供試品溶液和對(duì)照品溶液，室溫放置10小時(shí)，分別在0、2、4、6、8、10小時(shí)測(cè)定有關(guān)物質(zhì)，結(jié)果見(jiàn)表5-10。附圖見(jiàn)5-1925。表5-10 苯磺酸氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)測(cè)定溶液穩(wěn)定性考察結(jié)果時(shí)間(小

35、時(shí))0246810均值RSD（%）主峰面積氨氯地平雜質(zhì)峰面積（%）其它單個(gè)雜質(zhì)峰面積（%）雜質(zhì)個(gè)數(shù)總雜（%）結(jié)論：5.3.2檢測(cè)限定量限試驗(yàn)：精密稱(chēng)取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品10.0mg，置10ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，取10l注入液相色譜儀，觀察主成分峰。逐步稀釋并分別取10l注入液相色譜儀，觀察主成分峰高度，約3倍和10倍于基線噪聲，信噪比約為3:1以及約10倍于基線噪聲、信噪比約為10：1，分別計(jì)算此時(shí)苯磺酸氨氯地平濃度。結(jié)論：5.3.3樣品有關(guān)物質(zhì)測(cè)定：取本品三批生產(chǎn)樣品和參比樣品，照上述有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法，分別測(cè)定有關(guān)物質(zhì)，結(jié)果見(jiàn)表5-11，附圖見(jiàn)5-7683。表5-11

36、 苯磺酸氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)測(cè)定結(jié)果樣品批號(hào)氨氯地平雜質(zhì)（%）最大單個(gè)雜質(zhì)（%）總雜質(zhì)（%）生產(chǎn)樣品生產(chǎn)樣品生產(chǎn)樣品參比樣品結(jié)論：5.3.4有關(guān)物質(zhì)確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)：5.4含量均勻度方法學(xué)確認(rèn)：參照國(guó)家藥典委公示苯磺酸氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中的含量均勻度檢查方法進(jìn)行本品含量均勻度測(cè)定試驗(yàn)和確認(rèn)。5.4.1含量均勻度檢查方法：以含量測(cè)定項(xiàng)下測(cè)得的每片含量計(jì)算，應(yīng)符合規(guī)定（中國(guó)藥典2010 年版二部附錄 E）。5.4.2樣品含量均勻度測(cè)定：取含量測(cè)定方法學(xué)確認(rèn)試驗(yàn)的本品三批生產(chǎn)樣品和參比樣品的含量測(cè)定數(shù)據(jù)，計(jì)算樣品的A+1.80S值，結(jié)果見(jiàn)表5-5。表5-5 苯磺酸氨氯地平片含量均勻度測(cè)定結(jié)果樣品批號(hào)生產(chǎn)樣品1生產(chǎn)樣品2生產(chǎn)樣品3參比樣品試驗(yàn)樣品編號(hào)12345678910SAA+1.80S結(jié)論：5.4.3含量均勻度確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)：5.5溶出度方法學(xué)確認(rèn)：參照國(guó)家藥典委公示苯磺酸氨氯地平片國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中的溶出度檢查方法進(jìn)行本品溶出度測(cè)定試驗(yàn)，并對(duì)溶出度測(cè)定方法的測(cè)定精密度、供試品溶液穩(wěn)定性進(jìn)行相應(yīng)考察和確認(rèn)。5.5.1溶出度測(cè)定方法：取本品，照溶出度測(cè)定法（中國(guó)藥典 2010 年版二部附錄 C 第二法），以鹽酸溶液（0.91000）500ml 為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為每分鐘75 轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)30