體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn)

1、體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 體外診斷試劑生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)體外診斷試劑生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 主講人主講人: 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 體外診斷試劑產(chǎn)品介紹 一酶聯(lián)免疫診斷試劑產(chǎn)品 l乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 二快速診斷試劑產(chǎn)品 l人類免疫缺陷病毒抗體檢測(cè)試劑盒（膠體金法） 三PCR核酸診斷試劑產(chǎn)品 l乙型肝炎病毒核酸定量檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?四臨床化學(xué)診斷試劑產(chǎn)品 l葡萄糖試劑盒（液體單試劑）（氧化酶法） 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 一.酶聯(lián)免疫診斷試劑產(chǎn)品 【產(chǎn)品名稱產(chǎn)品名稱】 乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法）乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒（

2、酶聯(lián)免疫法） 【包裝規(guī)格包裝規(guī)格】 96人份人份/盒盒 【預(yù)期用途預(yù)期用途】 本試劑盒采用酶聯(lián)免疫法原理檢測(cè)本試劑盒采用酶聯(lián)免疫法原理檢測(cè)HBsAg，適用于血清或，適用于血清或 血漿類標(biāo)本血漿類標(biāo)本。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 酶聯(lián)免疫法反應(yīng)原理 l雙抗體夾心法l雙抗原夾心法 標(biāo)本 抗-HBs 抗-HBs-HRP HBsAg 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒（酶乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒（酶 聯(lián)免疫法）聯(lián)免疫法）的原理 采用抗-HBs包被反應(yīng)板，加入待測(cè)樣本，經(jīng)孵育后， 加入抗-HBs-HRP，當(dāng)樣本中存在HBsAg時(shí)，該HBsAg 與包被抗-HBs結(jié)合并與

3、抗-HBs-HRP結(jié)合形成抗-HBs- HBsAg-抗-HBs-HRP復(fù)合物，加入TMB底物產(chǎn)生顯色反 應(yīng)，反之則無(wú)顯色反應(yīng)。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 試劑盒組份試劑盒組份 1. 微孔反應(yīng)板微孔反應(yīng)板 2. 酶結(jié)合物酶結(jié)合物 3. 陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照 4. 陰性對(duì)照陰性對(duì)照 5. 洗滌液洗滌液 6. 顯色劑顯色劑A 7. 顯色劑顯色劑B 8. 終止液終止液 9. 封片封片 10. 說(shuō)明書(shū)說(shuō)明書(shū) 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 主要生產(chǎn)設(shè)備 微孔反應(yīng)板包被機(jī)微孔反應(yīng)板包被機(jī) 微孔反應(yīng)板全自動(dòng)封閉生產(chǎn)線微孔反應(yīng)板全自動(dòng)封閉生產(chǎn)線 灌封流水線灌封流水線 超聲波洗瓶機(jī)超聲波洗瓶機(jī) 全自動(dòng)進(jìn)口分裝機(jī)全

4、自動(dòng)進(jìn)口分裝機(jī) 生物安全柜生物安全柜 酶標(biāo)儀酶標(biāo)儀 橫枕式包裝機(jī)橫枕式包裝機(jī) 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工藝流程圖生產(chǎn)工藝流程圖 合并 分裝 純化 包被 結(jié)酶純化 配制配制配制 抗-HBs血清 酶標(biāo)用抗 -HBs 抗-HBs-HRP 酶結(jié)合物反應(yīng)板 包板用單 抗-HBs 單抗-HBs腹水 正常人血清、 陽(yáng)性血 陰、陽(yáng)性 對(duì)照 顯色劑、終止 液、洗滌液 TMB、硫酸、 吐溫20 成品 半成品 滴配 半成品檢 定 成品檢定 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 外購(gòu)原輔料控制外購(gòu)原輔料控制 l原輔料必須從合格供應(yīng)商目錄所載廠家購(gòu)入。 l采購(gòu)的生產(chǎn)用原輔料，均應(yīng)符合藥品的標(biāo)準(zhǔn)、 包裝材料標(biāo)準(zhǔn)、生物制

5、品規(guī)程或其它標(biāo)準(zhǔn)，不 得對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)量產(chǎn)生不良影響。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 自制主要原料生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)自制主要原料生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) l 工藝用水 l 抗原 l 抗體 l 酶標(biāo)記物 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 基因工程基因工程HBsAg生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序質(zhì)量控制要點(diǎn) 細(xì)胞培養(yǎng) 基因工程細(xì)胞株，經(jīng)接 種復(fù)蘇后，進(jìn)行細(xì)胞傳 代培養(yǎng)。 無(wú)菌操作，培養(yǎng)基的配 制，細(xì)胞培養(yǎng)溫度，細(xì) 胞的形態(tài)及傳代速度。 純化 收集的細(xì)胞培養(yǎng)上清液 經(jīng)抗-HBs 親和層析柱 等純化。 層析柱填料的使用次數(shù)， 所用緩沖液的pH值， 上 樣、平衡、洗脫速度。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要

6、點(diǎn) 基因工程基因工程HBsAg質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l效價(jià)：效價(jià)： ELISA l純度：采用純度：采用SDS-PAGE l功能性實(shí)驗(yàn)功能性實(shí)驗(yàn) ：陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、陰性參考：陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、陰性參考 品符合率、最低檢出量、精密性、穩(wěn)定性品符合率、最低檢出量、精密性、穩(wěn)定性 l蛋白濃度：用雙縮脲法測(cè)定蛋白濃度：用雙縮脲法測(cè)定 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 單抗單抗-HBs生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序質(zhì)量控制要點(diǎn) 細(xì)胞復(fù)蘇及 傳代培養(yǎng) 單克隆抗體細(xì)胞株，經(jīng)接種復(fù)蘇 后，進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。 無(wú)菌操作，培養(yǎng)基的配 制，細(xì)胞培養(yǎng)溫度。 腹水制備 福氏不完全佐劑免疫，7-10天后 單克

7、隆抗體細(xì)胞懸液注射于F1代 小鼠 ，10天后采集小鼠腹水， 離心，制得單抗-HBs腹水。 對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞接種。 腹水純化 用制備的單抗-HBs腹水，經(jīng)飽和 硫酸銨二步沉淀，經(jīng)離子交換層 析柱純化即為單抗-HBs。 層析填料的使用次數(shù)， 所用緩沖液的pH值， 上 樣、平衡、洗脫速度。 純化的得率。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 單抗單抗-HBs質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l純度純度 ：采用：采用SDS-PAGE法法 l蛋白含量蛋白含量 ：采用：采用Lowry法法 l效價(jià)效價(jià) ：ELISA效價(jià)效價(jià) l功能性檢測(cè)：免疫活性、穩(wěn)定性功能性檢測(cè)：免疫活性、穩(wěn)定性 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 多抗多抗-HBs生產(chǎn)

8、和質(zhì)量控制要點(diǎn)生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序質(zhì)量控制要點(diǎn) 抗血清制備 用福氏佐劑和純化 HBsAg抗原 制成乳化膠 乳劑注射實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 ，經(jīng) 多次免疫后，采集動(dòng)物 血清。 動(dòng)物的選擇，乳劑 配制的均一性。 純化 抗血清，經(jīng)親和層析柱 粗提后，正常人全血清 等多種親和層析柱等純 化制得。 親和柱的制備及使 用次數(shù)，所用緩沖 液的pH等的控制， 純化的收率。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 多抗多抗-HBs的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l純度純度 ：SDS-PAGE法檢定法檢定 l蛋白含量蛋白含量 ：Lowry法法 l效價(jià)效價(jià) ：對(duì)流電泳法測(cè)定效價(jià)：對(duì)流電泳法測(cè)定效價(jià) l功能性檢測(cè)：免疫活性、穩(wěn)定性功能性檢測(cè)：

9、免疫活性、穩(wěn)定性 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 多抗多抗-HBs-HRP生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序質(zhì)量控制要點(diǎn) 酶的活化 HRP與 NaIO4反應(yīng)，再加入 乙二醇制成活化的酶溶 液。 辣根過(guò)氧化物酶 RZ值3.0 及活化 時(shí)間的控制 酶的偶聯(lián) 酶溶液液加入抗-HBs抗體pH,溫度及時(shí)間的 控制 還原酶反應(yīng)液加入NaBH4溶液還 原。 還原時(shí)間的控制 純化 飽和硫酸銨純化純度控制 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 辣根過(guò)氧化物酶質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)辣根過(guò)氧化物酶質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l溶解性 ：應(yīng)符合要求 lPH值 ：應(yīng)符合要求 l活性測(cè)定 ：應(yīng)符合要求 lRZ值：應(yīng)3.0 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn)

10、 多抗-HBs-HRP質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l免疫活性 l穩(wěn)定性試驗(yàn) 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序生產(chǎn)工序生產(chǎn)要點(diǎn)生產(chǎn)要點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn) 反應(yīng)板制備反應(yīng)板制備 1包被液的配制包被液的配制pH值的控制值的控制 2*反應(yīng)板的包被反應(yīng)板的包被 包被液量的準(zhǔn)確性，反應(yīng)板包被放置包被液量的準(zhǔn)確性，反應(yīng)板包被放置 的溫度、濕度及時(shí)間的控制的溫度、濕度及時(shí)間的控制 3 反應(yīng)板的洗滌、反應(yīng)板的洗滌、 加封閉液加封閉液 液量的準(zhǔn)確性液量的準(zhǔn)確性 4*反應(yīng)板的封閉反應(yīng)板的封閉房間溫度的控制，封閉時(shí)間的控制房間溫度的控制，封閉時(shí)間的控制 5反應(yīng)板的抽干反應(yīng)板的抽干抽干機(jī)的真空度、溫度抽干機(jī)的真空度、溫度 6*鋁

11、箔袋的熱封鋁箔袋的熱封房間的濕度控制，鋁箔袋的密封性房間的濕度控制，鋁箔袋的密封性 7*反應(yīng)板的抽檢反應(yīng)板的抽檢應(yīng)符合相關(guān)質(zhì)量要求應(yīng)符合相關(guān)質(zhì)量要求 反應(yīng)板制備生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 反應(yīng)板制備反應(yīng)板制備 包被液配制包被液配制 l質(zhì)量控制點(diǎn)：包被緩沖液pH l測(cè)定方法：用pH計(jì)測(cè)定 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 反應(yīng)板制備反應(yīng)板制備 反應(yīng)板的包被反應(yīng)板的包被 l質(zhì)量控制點(diǎn)：包被液量的準(zhǔn)確性 要求：100l/孔 l操作： 將待包被的微孔反應(yīng)板放置傳送帶上，開(kāi)始包被，每塊包被 板應(yīng)用目測(cè)法檢查其96孔加液是否完整。前10塊包被板檢查加 液量是否準(zhǔn)確，檢后的包被板放入報(bào)廢專

12、用盤(pán)內(nèi)，作報(bào)廢處理。 連續(xù)100塊包被板檢查合格后，進(jìn)入正常包被過(guò)程。正常包 被過(guò)程中每100塊包被板應(yīng)抽1塊作過(guò)程檢查。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 反應(yīng)板制備反應(yīng)板制備 反應(yīng)板的包被反應(yīng)板的包被 l質(zhì)量控制點(diǎn)： 反應(yīng)板包被放置的溫度及時(shí)間的控制 要求： 2-8冷庫(kù)包被過(guò)夜。 l操作：包被板應(yīng)堆放整齊，并用一次性塑料布覆蓋。注 明產(chǎn)品名稱、批號(hào)和時(shí)間，放入2-8冷庫(kù)包被過(guò)夜。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 反應(yīng)板制備反應(yīng)板制備 反應(yīng)板的洗滌、加封閉液反應(yīng)板的洗滌、加封閉液 l質(zhì)量控制點(diǎn)：液量的準(zhǔn)確性 要求: 洗板液量：200l/孔 封閉液量：250l/孔 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 反應(yīng)

13、板制備反應(yīng)板制備 反應(yīng)板的封閉反應(yīng)板的封閉 l質(zhì)量控制點(diǎn)： 封閉溫度：370.5 封閉時(shí)間：2小時(shí) l操作：將加好封閉液的包被板整齊堆放在托盤(pán)內(nèi)，注明 批號(hào)、封閉開(kāi)始時(shí)間和結(jié)束時(shí)間，放入恒溫房。到達(dá)規(guī) 定時(shí)間后，迅速取出包被板，轉(zhuǎn)入下一道工序的生產(chǎn)。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 反應(yīng)板制備反應(yīng)板制備 反應(yīng)板的抽干反應(yīng)板的抽干 l質(zhì)量控制點(diǎn)：抽干機(jī)的真空度、溫度 要求： 真空度：低于100Pa，維持4小時(shí)以上 溫度：202 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 反應(yīng)板制備反應(yīng)板制備 鋁箔袋的熱封鋁箔袋的熱封 l質(zhì)量控制點(diǎn)： 房間的濕度：40% 鋁箔袋的密封性： 端面刀封溫度2105 中封刀封溫度210

14、5 l操作： 房間濕度控制：生產(chǎn)操作前提前2小時(shí)，打開(kāi)去濕機(jī)進(jìn)行 工作場(chǎng)地去濕，使車間濕度達(dá)到40%以下。 鋁箔袋的密封性：在線袋袋檢。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 反應(yīng)板制備反應(yīng)板制備 反應(yīng)板的抽檢反應(yīng)板的抽檢 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)： 陰性參考品符合率：用國(guó)家參考品或國(guó)家參考品標(biāo)化的參考品進(jìn)行檢 定，不得出現(xiàn)假陽(yáng)性。 陽(yáng)性參考品符合率：用國(guó)家參考品或國(guó)家參考品標(biāo)化的參考品進(jìn)行檢 定，不得出現(xiàn)假陰性。 最低檢出量：用國(guó)家參考品或國(guó)家參考品標(biāo)化的參考品進(jìn)行檢定， HBsAg adr、adw及ay亞型的最低檢出量應(yīng)符合要求。 精密性：用國(guó)家參考品或國(guó)家參考品標(biāo)化的參考品進(jìn)行檢定，CV（%） 應(yīng)不高于15%（

15、n=10）。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序生產(chǎn)工序生產(chǎn)要點(diǎn)生產(chǎn)要點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn) 陰、陽(yáng)性對(duì)照的配陰、陽(yáng)性對(duì)照的配 制制 1陰性血清的滅活陰性血清的滅活滅活的時(shí)間，溫度滅活的時(shí)間，溫度 2*陰性對(duì)照的配制陰性對(duì)照的配制檢測(cè)陰性檢測(cè)陰性O(shè)D值值 3陽(yáng)性血清的滅活陽(yáng)性血清的滅活滅活的時(shí)間，溫度滅活的時(shí)間，溫度 4*陽(yáng)性對(duì)照的配制陽(yáng)性對(duì)照的配制檢測(cè)陽(yáng)性檢測(cè)陽(yáng)性O(shè)D值值 陰、陽(yáng)性對(duì)照制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)陰、陽(yáng)性對(duì)照制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 陰、陽(yáng)性血清的滅活陰、陽(yáng)性血清的滅活 l要求：要求： 滅活時(shí)間：滅活時(shí)間：1小時(shí)小時(shí) 溫度：溫度：60 l操作：將

16、操作：將血清置水浴箱內(nèi)。隨時(shí)注意測(cè)量血清血清置水浴箱內(nèi)。隨時(shí)注意測(cè)量血清 溫度，當(dāng)血清溫度到達(dá)溫度，當(dāng)血清溫度到達(dá)60時(shí)，開(kāi)始計(jì)時(shí)至規(guī)時(shí)，開(kāi)始計(jì)時(shí)至規(guī) 定時(shí)間止。定時(shí)間止。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 陰、陽(yáng)性對(duì)照的配制控制陰、陽(yáng)性對(duì)照的配制控制 陰性對(duì)照的配制陰性對(duì)照的配制 l質(zhì)控點(diǎn)：陰性對(duì)照OD值 l要求：OD值0.050 陽(yáng)性對(duì)照的配制陽(yáng)性對(duì)照的配制 l質(zhì)控點(diǎn)：陽(yáng)性對(duì)照OD值 l要求：OD值1.000 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 通用試劑制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)通用試劑制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序生產(chǎn)工序生產(chǎn)關(guān)鍵點(diǎn)生產(chǎn)關(guān)鍵點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn) 顯色劑、終止液、顯色劑、終止液、

17、 洗滌液等通用試洗滌液等通用試 劑的制備劑的制備 1 顯色劑顯色劑B的配的配 制制 避光配制、分裝避光配制、分裝 溶液配制的溶液配制的pH、電導(dǎo)的控制、電導(dǎo)的控制 配制后配制后12小時(shí)內(nèi)進(jìn)行分裝小時(shí)內(nèi)進(jìn)行分裝 2 顯色劑顯色劑A的配的配 制制 72小時(shí)內(nèi)進(jìn)行分裝小時(shí)內(nèi)進(jìn)行分裝 溶液配制的溶液配制的pH、電導(dǎo)的控制、電導(dǎo)的控制 3終止液的配制終止液的配制比重控制比重控制 4洗滌液的配制洗滌液的配制pH、電導(dǎo)的控制、電導(dǎo)的控制 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 顯色劑顯色劑B的配制的配制 l質(zhì)量控制點(diǎn)：質(zhì)量控制點(diǎn)： 1 溶液配制的準(zhǔn)確性溶液配制的準(zhǔn)確性 用用pH計(jì)測(cè)定溶液計(jì)測(cè)定溶液pH值應(yīng)符合要求值應(yīng)

18、符合要求 用電導(dǎo)率儀測(cè)定溶液電導(dǎo)率應(yīng)符合要求用電導(dǎo)率儀測(cè)定溶液電導(dǎo)率應(yīng)符合要求 2 配制、分裝環(huán)境：避光配制、分裝環(huán)境：避光 3 配制后溶液分裝的即時(shí)性：配制后溶液分裝的即時(shí)性：12小時(shí)內(nèi)進(jìn)行分裝小時(shí)內(nèi)進(jìn)行分裝 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 顯色劑顯色劑A的配制的配制 l質(zhì)量控制點(diǎn)：質(zhì)量控制點(diǎn)： 1溶液配制的準(zhǔn)確性溶液配制的準(zhǔn)確性 用用pH計(jì)測(cè)定溶液計(jì)測(cè)定溶液pH值值 用電導(dǎo)率儀測(cè)定溶液電導(dǎo)率用電導(dǎo)率儀測(cè)定溶液電導(dǎo)率 2配制后溶液存放：配制后溶液存放：72小時(shí)內(nèi)進(jìn)行分裝小時(shí)內(nèi)進(jìn)行分裝 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 終止液的配制終止液的配制 l質(zhì)量控制點(diǎn)：質(zhì)量控制點(diǎn)： 溶液配制的準(zhǔn)確性：溶液配制

19、的準(zhǔn)確性： 用婆美計(jì)測(cè)定溶液的比重應(yīng)符合要求用婆美計(jì)測(cè)定溶液的比重應(yīng)符合要求 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 洗滌液的配制洗滌液的配制 l質(zhì)量控制點(diǎn)：質(zhì)量控制點(diǎn)： 溶液配制的準(zhǔn)確性溶液配制的準(zhǔn)確性 用用pH計(jì)測(cè)定溶液計(jì)測(cè)定溶液pH值值 用電導(dǎo)率儀測(cè)定溶液電導(dǎo)率用電導(dǎo)率儀測(cè)定溶液電導(dǎo)率 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 酶結(jié)合物制備生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)酶結(jié)合物制備生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序生產(chǎn)工序生產(chǎn)關(guān)鍵點(diǎn)生產(chǎn)關(guān)鍵點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn) 酶結(jié)合物的制酶結(jié)合物的制 備、滴配備、滴配 1 酶稀釋液的配酶稀釋液的配 制制 pH的控制的控制 2 *酶結(jié)合物的滴酶結(jié)合物的滴 配配 通過(guò)比較陽(yáng)性參考品、通過(guò)比較陽(yáng)

20、性參考品、 陰性參考品、精密性以陰性參考品、精密性以 及最低檢出率情況，用及最低檢出率情況，用 方陣滴定法進(jìn)行方陣滴定法進(jìn)行EIA法法 測(cè)定確定酶結(jié)合物的濃測(cè)定確定酶結(jié)合物的濃 度度 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 半成品檢定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)半成品檢定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l物理檢查 l試劑空白 l陰性對(duì)照 l陽(yáng)性對(duì)照 l陰性參考品符合率 l陽(yáng)性參考品符合率 l最低檢出量 l精密性 l穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) : 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 試劑的分裝、貼簽生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)試劑的分裝、貼簽生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 除菌過(guò)濾除菌過(guò)濾 l質(zhì)量控制點(diǎn)：過(guò)濾膜的起泡點(diǎn)實(shí)驗(yàn) l要求：濾器滅菌12130分鐘；0.22m濾 芯泡點(diǎn)3.5bar

21、體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 分裝分裝 l質(zhì)量控制點(diǎn)：液量的準(zhǔn)確性、試劑瓶的密封性 要求： 分裝液量應(yīng)大于等于標(biāo)示量 ； 分裝好的試劑瓶應(yīng)無(wú)漏液現(xiàn)象。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 貼簽貼簽 l質(zhì)量控制點(diǎn)：批號(hào)打印的準(zhǔn)確性 要求：批號(hào)等打印正確、清晰 l操作： 貼瓶開(kāi)始后，前30瓶應(yīng)仔細(xì)檢查瓶貼質(zhì)量，包括 瓶貼位置，批號(hào)等打印是否正確、清晰，粘貼是否牢固、 平整等。 合格后，每50瓶抽1瓶進(jìn)行檢查。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 合并包裝合并包裝生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序生產(chǎn)工序生產(chǎn)要點(diǎn)生產(chǎn)要點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn) 合并包裝合并包裝 1 包裝盒的包裝盒的 壓印壓印 生產(chǎn)日期

22、、批號(hào)打印的準(zhǔn)生產(chǎn)日期、批號(hào)打印的準(zhǔn) 確性、清晰度確性、清晰度 2合并合并 合并組分的齊全性合并組分的齊全性 印刷類包裝品的物料平衡印刷類包裝品的物料平衡 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 成品檢定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)成品檢定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l物理檢查 l試劑空白 l陰性對(duì)照 l陽(yáng)性對(duì)照 l陰性參考品符合率 l陽(yáng)性參考品符合率 l最低檢出量 l精密性 l穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 成品入庫(kù)成品入庫(kù) 入庫(kù)入庫(kù) l控制點(diǎn)：產(chǎn)品放行報(bào)告；入庫(kù)數(shù) l要求： 憑由質(zhì)量管理部經(jīng)理簽署的成品出廠合格報(bào)告，成 品檢定書(shū)辦理入庫(kù)手續(xù)，入庫(kù)數(shù)應(yīng)與成品出廠合格報(bào)告 中所報(bào)數(shù)量一致。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) P2生物安

23、全實(shí)驗(yàn)室管理生物安全實(shí)驗(yàn)室管理 l人員衛(wèi)生 進(jìn)入P2實(shí)驗(yàn)室必須加穿潔凈防護(hù)服，帶一次性乳膠手套和一次性 口罩。只允許工作人員進(jìn)入，禁止非工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。 l生物安全柜 實(shí)驗(yàn)室的操作嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行操作，對(duì)存在感染性或潛在感染 性的操作須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。做好相應(yīng)的消毒、使用記錄。 l消毒及滅菌 所有直接或間接接觸病原微生物的儀器、設(shè)備、器具，均需進(jìn)行消 毒處理，能高壓的選擇121高壓滅菌30分鐘處理，不能高壓的選擇 1%次氯酸鈉消毒。實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的具有感染性或潛在感染性的穿透性 利器廢物置入黃色塑料利器盒中，其他非利器廢物置入黃色醫(yī)療廢 物塑料袋中。 l 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)指定專人負(fù)責(zé)感染性或存在

24、潛在感染性材料的保藏，做好 標(biāo)識(shí)，建立臺(tái)帳。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 二.金標(biāo)產(chǎn)品 【產(chǎn)品名稱產(chǎn)品名稱】 l人類免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗體診斷試劑盒(膠體金法) 【包裝規(guī)格包裝規(guī)格】 l 50人份/盒 【預(yù)期用途預(yù)期用途】 l本試劑盒適用于對(duì)人血清/血漿或全血中的(HIV1/2)抗體 的快速檢測(cè)。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金標(biāo)產(chǎn)品檢驗(yàn)原理 本品采用膠體金免疫層析技術(shù)，在玻璃纖本品采用膠體金免疫層析技術(shù)，在玻璃纖 維膜上預(yù)包被金標(biāo)記維膜上預(yù)包被金標(biāo)記HIVgp160HIVgp160和和gp36gp36抗原等，在抗原等，在 硝酸纖維膜檢測(cè)線和質(zhì)控線上分別包被硝酸纖維膜檢測(cè)線和質(zhì)控

25、線上分別包被HIVgp41HIVgp41、 gp36gp36混合抗原和抗體等，當(dāng)檢測(cè)進(jìn)行時(shí)，樣品中混合抗原和抗體等，當(dāng)檢測(cè)進(jìn)行時(shí)，樣品中 HIVHIV抗體可與金標(biāo)記抗體可與金標(biāo)記HIVHIV抗原結(jié)合形成復(fù)合物，由抗原結(jié)合形成復(fù)合物，由 于層析作用復(fù)合物沿試紙條向前移動(dòng)。于層析作用復(fù)合物沿試紙條向前移動(dòng)。 若樣品中含有可被檢測(cè)的若樣品中含有可被檢測(cè)的HIVHIV抗體，則與檢抗體，則與檢 測(cè)線預(yù)包被的測(cè)線預(yù)包被的HIVHIV抗原結(jié)合形成抗原結(jié)合形成“金標(biāo)記金標(biāo)記HIVHIV抗抗 原原HIVHIV抗體抗體HIVHIV包被抗原包被抗原”復(fù)合物而凝聚顯色；復(fù)合物而凝聚顯色； 若樣品中沒(méi)有若樣品中沒(méi)有HI

26、VHIV抗體或抗體或HIVHIV抗體的含量低于檢測(cè)抗體的含量低于檢測(cè) 限時(shí)，則不形成復(fù)合物而不顯色。限時(shí)，則不形成復(fù)合物而不顯色。示 意 圖 陰性 加樣區(qū)加樣區(qū) 陽(yáng)性 無(wú)效 檢測(cè)線 質(zhì)控線 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 主要組成成份主要組成成份 lHIV(1/2)抗體膠體金試紙條抗體膠體金試紙條/板板 50 Tests l樣品稀釋液（磷酸鹽緩沖液）樣品稀釋液（磷酸鹽緩沖液） 1瓶瓶4.0ml/瓶瓶 l說(shuō)明書(shū)說(shuō)明書(shū)1份份 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金標(biāo)產(chǎn)品主要生產(chǎn)設(shè)備 點(diǎn)樣儀點(diǎn)樣儀 切割機(jī)切割機(jī) 核酸蛋白儀核酸蛋白儀 電子防潮箱電子防潮箱 全自動(dòng)噴點(diǎn)系統(tǒng)全自動(dòng)噴點(diǎn)系統(tǒng) 劃膜機(jī)劃膜機(jī) 多功能薄

27、膜封口機(jī)多功能薄膜封口機(jī) 干燥箱干燥箱 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金標(biāo)產(chǎn)品生產(chǎn)工藝流程圖金標(biāo)產(chǎn)品生產(chǎn)工藝流程圖 氯化金 膠體金 標(biāo)記抗原 HIVgp36 HIVgp160 金標(biāo)記抗原 金反應(yīng)墊 燒金 標(biāo)金 噴金 干燥 包被抗原 HIVgp36 A抗原 檢測(cè)線包被液 抗HIVgp160單抗 質(zhì)控線包被液 配制配制 反應(yīng)膜 劃膜 干燥 試紙大板 組裝 試紙條 切割 試紙板 封裝 氯化鈉等 配制 樣品稀釋液 待檢成品 合并 出廠成品 檢定 滴配 滴配 檢定 半成品檢定 半成品檢定 成品檢定 分裝、帖簽 物料 質(zhì)控點(diǎn) 工序關(guān)鍵工序 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) gp160抗原制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制抗

28、原制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制 生產(chǎn)工序質(zhì)量控制要點(diǎn) 細(xì)胞培 養(yǎng) 取工程細(xì)胞株，經(jīng)接種復(fù)蘇 后，進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞連續(xù)培 養(yǎng)，收集培養(yǎng)上清液。上清 液經(jīng)滅活、過(guò)濾、超濾，得 濃縮上清液，置-20保存。 無(wú)菌操作，培養(yǎng)溫 度，溶氧值，pH值， 細(xì)胞密度，細(xì)胞表 達(dá)水平。 純化 濃縮上清液經(jīng)親和層析柱純 化，用適宜的緩沖溶液淋洗、 洗脫，收集洗脫峰，經(jīng)濃縮 即得純化的gp 160抗原。 層析柱填料的使用 次數(shù)，所用緩沖液 的pH值，上樣、淋 洗、洗脫速度。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) gp160抗原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)抗原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l物理性狀：為澄清溶液 l純度：采用SDS-PAGE l分子量 ：免疫活性 l穩(wěn)定性 體

29、外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) gp36抗原制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制抗原制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制 生產(chǎn)工序質(zhì)量控制要點(diǎn) 發(fā)酵用gp36工程菌發(fā)酵，收集菌體。 工程菌誘導(dǎo)溫度， 工程菌誘導(dǎo)時(shí)間。 純化 菌體經(jīng)超聲破碎，制得粗制gp36 抗原。粗制gp36抗原經(jīng)親和層析 柱純化，用適宜的緩沖液進(jìn)行透 析，經(jīng)濃縮即得純化的gp 36抗 原。 超聲破碎時(shí)間，層 析柱填料的使用次 數(shù)，所用緩沖液的 pH值控制，上樣、 淋洗、洗脫速度。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) gp36抗原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)抗原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l純度 l分子量 l功能性試驗(yàn) l穩(wěn)定性 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) gp41抗原制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制抗原制備的生產(chǎn)

30、和質(zhì)量控制 生產(chǎn)工序質(zhì)量控制要點(diǎn) 發(fā)酵用工程菌發(fā)酵，收集菌體。工程菌誘導(dǎo)溫度， 工程菌誘導(dǎo)時(shí)間。 純化 超聲破碎，制得粗制gp41抗原。 粗制gp41抗原經(jīng)親和層析、分 子篩等純化，收集目的蛋白峰， 即得純化的gp 41抗原。 超聲破碎時(shí)間，層 析柱填料的使用次 數(shù)，所用緩沖液的 pH值，上樣、淋洗、 洗脫速度。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) gp41抗原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)抗原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l純度：采用SDS-PAGE法檢定應(yīng)符合要求 l分子量 l功能性試驗(yàn) l穩(wěn)定性 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 抗抗HIV單抗制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制單抗制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制 生產(chǎn)工序質(zhì)量控制要點(diǎn) 細(xì)胞復(fù)蘇 及傳代培 養(yǎng) 單克

31、隆抗體細(xì)胞株，經(jīng)接 種復(fù)蘇后，進(jìn)行細(xì)胞傳代 培養(yǎng)。 無(wú)菌操作，培養(yǎng)基的配制，細(xì)胞 培養(yǎng)溫度。 腹水制備 福氏不完全佐劑免疫，7- 10天后單克隆抗體細(xì)胞懸 液注射于F1代小鼠 ，10天 后采集小鼠腹水，離心， 制得單抗-HIV腹水。 對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞接種。 純化 用制備的抗HIV 單抗腹水， 經(jīng)親和層析柱純化等即得 抗HIV 單抗。 層析柱填料的使用次數(shù)，所用緩 沖液的pH值，上樣、平衡、洗 脫速度。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 單抗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)單抗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l純度純度 l分子量分子量 l功能性檢測(cè)功能性檢測(cè) l穩(wěn)定性試驗(yàn)：穩(wěn)定性試驗(yàn)：37放置放置1515天，檢測(cè)上述標(biāo)本，天，檢測(cè)上述標(biāo)本， 可達(dá)

32、到上述功能性檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)可達(dá)到上述功能性檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)墊制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)金反應(yīng)墊制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序生產(chǎn)工序生產(chǎn)關(guān)鍵點(diǎn)生產(chǎn)關(guān)鍵點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn) 金反應(yīng)墊的金反應(yīng)墊的 制備制備 1 1膠體金的制備膠體金的制備顏色、波長(zhǎng)的控制顏色、波長(zhǎng)的控制 2 2* *金標(biāo)抗原的制備金標(biāo)抗原的制備pHpH值、顏色、波長(zhǎng)的控制值、顏色、波長(zhǎng)的控制 3 3* *滴配滴配 適當(dāng)?shù)卣{(diào)整兩種金標(biāo)抗原的濃度適當(dāng)?shù)卣{(diào)整兩種金標(biāo)抗原的濃度 和比例，比較靈敏度和特異性結(jié)和比例，比較靈敏度和特異性結(jié) 果，確定最佳的工作濃度。果，確定最佳的工作濃度。 4 4* *噴金噴金包被

33、量的控制包被量的控制 5 5抽干抽干真空度、時(shí)間的控制真空度、時(shí)間的控制 6 6保存保存避光、干燥的控制避光、干燥的控制 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)墊的制備金反應(yīng)墊的制備 膠體金的制備膠體金的制備 l控制點(diǎn)：膠體金顏色、波長(zhǎng)的控制 l要求： 膠體金顏色：紅色； 波長(zhǎng)：5284nm 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)墊的制備金反應(yīng)墊的制備 金標(biāo)抗原的制備金標(biāo)抗原的制備 l質(zhì)量控制點(diǎn)：GP160和GP36抗原標(biāo)記時(shí) pH值、顏色、 波長(zhǎng)的控制 l要求：用PH計(jì)測(cè)定，pH值：6-7； 顏色：紅色 波長(zhǎng)：5334nm 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)墊的制備金反應(yīng)墊的制備 滴滴 配配

34、l質(zhì)量控制點(diǎn)：金標(biāo)抗原的靈敏度和特異性 l要求：通過(guò)HIV快速診斷試劑國(guó)家參考品 l測(cè)定方法：適當(dāng)?shù)卣{(diào)整兩種金標(biāo)抗原的濃度和 比例，比較靈敏度和特異性結(jié)果，確定最佳的 工作濃度。用HIV快速診斷試劑國(guó)家參考品檢驗(yàn)， 應(yīng)符合要求。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)墊的制備金反應(yīng)墊的制備 噴噴 金金 l質(zhì)量控制點(diǎn)：包被液量的準(zhǔn)確性 l要求：2l/mm l方法： 將待包被的玻璃纖維放置于面板，開(kāi)始包 被，每張玻璃纖維應(yīng)用目測(cè)法檢查加液是否完 整。連續(xù)5張玻璃纖維檢查合格后，進(jìn)入正常 包被過(guò)程。正常包被過(guò)程中每100張金反應(yīng)墊 應(yīng)抽1張作過(guò)程檢查。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)墊的制備金反

35、應(yīng)墊的制備 金反應(yīng)墊的抽干金反應(yīng)墊的抽干 l質(zhì)量控制點(diǎn)：真空度、時(shí)間的控制 l要求： 真空度：低于100Pa 時(shí)間：維持2小時(shí)以上 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)墊的保存金反應(yīng)墊的保存 l質(zhì)量控制點(diǎn)：金反應(yīng)墊的存放 l要求：避光、干燥（濕度30% ） l操作： 用目測(cè)法檢測(cè)保存金反應(yīng)墊的鋁箔袋的密封性。 存放金反應(yīng)墊的干燥柜 每天監(jiān)測(cè)濕度2次。 金反應(yīng)墊的制備金反應(yīng)墊的制備 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)膜制備生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序生產(chǎn)工序生產(chǎn)關(guān)鍵點(diǎn)生產(chǎn)關(guān)鍵點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn) 金反應(yīng)膜制備金反應(yīng)膜制備 1 1質(zhì)控線包被液的配制質(zhì)控線包被液的配制pHpH值及濃度的控制值及濃

36、度的控制 2 2檢測(cè)線包被液的配制檢測(cè)線包被液的配制pHpH值及濃度的控制值及濃度的控制 3 3* *包被抗原滴配包被抗原滴配 適當(dāng)?shù)卣{(diào)整抗原的濃度和比例，適當(dāng)?shù)卣{(diào)整抗原的濃度和比例， 比較靈敏度和特異性結(jié)果，確定比較靈敏度和特異性結(jié)果，確定 最佳的工作濃度。最佳的工作濃度。 4 4* *劃膜包被劃膜包被 點(diǎn)樣量的控制、質(zhì)控線及檢測(cè)線點(diǎn)樣量的控制、質(zhì)控線及檢測(cè)線 間距的控制間距的控制 5 5抽干抽干真空度、時(shí)間控制真空度、時(shí)間控制 6 6保存保存避光、濕度的控制避光、濕度的控制 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)膜制備金反應(yīng)膜制備 質(zhì)控線包被液的配制質(zhì)控線包被液的配制 l控制點(diǎn)： 包被緩沖液

37、pH值及包被濃度 l要求： 包被緩沖液pH值：用pH計(jì)測(cè)定 包被濃度：用核酸蛋白儀檢測(cè)其蛋白濃度應(yīng)符合要求 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)膜制備金反應(yīng)膜制備 檢測(cè)線包被液的配制檢測(cè)線包被液的配制 l質(zhì)量控制點(diǎn)： 包被緩沖液pH值及包被濃度 l要求： 包被緩沖液pH值：pH計(jì)測(cè)定 包被濃度：用核酸蛋白儀檢測(cè)其蛋白濃度應(yīng)符合要求 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)膜制備金反應(yīng)膜制備 包被抗原滴配包被抗原滴配 l控制點(diǎn)：包被抗原滴配的靈敏度和特異性 l要求：通過(guò)HIV快速診斷試劑國(guó)家參考品 l測(cè)定方法：適當(dāng)?shù)卣{(diào)整抗原的濃度和比例，比較靈敏度 和特異性結(jié)果，確定最佳的工作濃度。用國(guó)家參考品檢

38、驗(yàn)，應(yīng)符合要求。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)膜制備金反應(yīng)膜制備 劃膜包被劃膜包被 l控制點(diǎn)：點(diǎn)樣量、質(zhì)控線及檢測(cè)線間距 l要求：點(diǎn)樣量0.5-1.5l/mm ；兩線間距5-6.5mm l操作： 將待包被的硝酸纖維素膜放置于軌道，用卡尺檢 測(cè)質(zhì)控線和檢測(cè)線出樣管的間距，符合要求后開(kāi)始包 被。觀察包被液體出樣情況，連續(xù)5分鐘無(wú)異常，則 進(jìn)入正常包被過(guò)程。正常包被過(guò)程中每卷金反應(yīng)膜抽 1張進(jìn)行檢查。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)膜制備金反應(yīng)膜制備 金反應(yīng)膜的抽干金反應(yīng)膜的抽干 l質(zhì)量控制點(diǎn)：真空度、時(shí)間的控制 l要求： 真空度：低于100Pa 時(shí)間：維持2小時(shí)以上 體外診斷試劑生產(chǎn)

39、質(zhì)量控制要點(diǎn) 金反應(yīng)膜制備金反應(yīng)膜制備 金反應(yīng)膜的保存金反應(yīng)膜的保存 l控制點(diǎn)：金反應(yīng)膜存放 l要求：避光、干燥（濕度30% ） l操作： 用目測(cè)法檢測(cè)保存金反應(yīng)膜的鋁箔袋的密封性。 存放金反應(yīng)膜的干燥柜 每天監(jiān)測(cè)濕度2次。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 樣品稀釋液制備生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 樣品稀釋液的配制樣品稀釋液的配制 l質(zhì)量控制點(diǎn)： pH值 l要求：用pH計(jì)進(jìn)行測(cè)量 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 試紙大板的組裝及分裝生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)試紙大板的組裝及分裝生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序生產(chǎn)工序生產(chǎn)關(guān)鍵點(diǎn)生產(chǎn)關(guān)鍵點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn) 試紙大板的組試紙大板的組 裝及分裝裝及分裝 1 1 * *試

40、紙大板的裝試紙大板的裝 配配 加樣墊、金反應(yīng)墊、金反應(yīng)膜、加樣墊、金反應(yīng)墊、金反應(yīng)膜、 吸水紙等各組分銜接的控制吸水紙等各組分銜接的控制 2 2* *試紙條的切割試紙條的切割試紙條切割寬度的控制試紙條切割寬度的控制 3 3CTCT盒的組裝盒的組裝試紙條完整性的檢驗(yàn)試紙條完整性的檢驗(yàn) 4 4裝鋁箔袋裝鋁箔袋鋁箔袋的密封性鋁箔袋的密封性 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 試紙大板的組裝及分裝試紙大板的組裝及分裝 試紙大板的裝配試紙大板的裝配 l質(zhì)量控制點(diǎn)：質(zhì)量控制點(diǎn)： 加樣墊、金反應(yīng)墊、金反應(yīng)膜、吸水紙等加樣墊、金反應(yīng)墊、金反應(yīng)膜、吸水紙等 各組分應(yīng)銜接緊密各組分應(yīng)銜接緊密 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要

41、點(diǎn) 試紙大板的組裝及分裝試紙大板的組裝及分裝 試紙條的切割試紙條的切割 l質(zhì)量控制點(diǎn)：試紙條切割寬度 要求：3002mm*8mm 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 試紙大板的組裝及分裝試紙大板的組裝及分裝 CTCT盒的組裝盒的組裝 l質(zhì)量控制點(diǎn)：應(yīng)檢查試紙條的完整性 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 試紙大板的組裝及分裝控制試紙大板的組裝及分裝控制 裝鋁箔袋裝鋁箔袋 l質(zhì)量控制點(diǎn)： 鋁箔袋應(yīng)密封 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 樣品稀釋液的配制、分裝及貼簽樣品稀釋液的配制、分裝及貼簽 生產(chǎn)工序生產(chǎn)工序生產(chǎn)關(guān)鍵點(diǎn)生產(chǎn)關(guān)鍵點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn) 樣品稀釋液的制備樣品稀釋液的制備 1 1配制配制溶液配制溶液配

42、制pHpH的控制的控制 2 2分裝、燈檢分裝、燈檢 液量的準(zhǔn)確性，分裝液量應(yīng)不液量的準(zhǔn)確性，分裝液量應(yīng)不 低于標(biāo)示量低于標(biāo)示量 3 3標(biāo)簽打印標(biāo)簽打印批號(hào)打印的準(zhǔn)確性及清晰度批號(hào)打印的準(zhǔn)確性及清晰度 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 合并包裝的生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn)合并包裝的生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) l質(zhì)量控制點(diǎn)：質(zhì)量控制點(diǎn)： 1.1.包裝盒的批號(hào)打印準(zhǔn)確、清晰。包裝盒的批號(hào)打印準(zhǔn)確、清晰。 2.2.合并組分的齊全性，物料的損耗是合并組分的齊全性，物料的損耗是 否符合規(guī)定要求。否符合規(guī)定要求。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 成品檢驗(yàn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)成品檢驗(yàn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 外觀 ：試紙條外觀平整，材料附著牢固。每條寬不小于

43、 3mm。 物理檢查：膜面無(wú)破損、劃痕。 陰性參考品符合率 ：應(yīng)符合要求 陽(yáng)性參考品符合率 ：應(yīng)符合要求 最低檢出限參考品符合率：應(yīng)符合要求 精密性試驗(yàn)：應(yīng)符合要求 濾血功能：應(yīng)符合要求 穩(wěn)定性試驗(yàn)：試劑盒各組分置3715天 ，應(yīng)符合性能要求。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 三.PCR核酸診斷試劑產(chǎn)品 【產(chǎn)品名稱產(chǎn)品名稱】 乙型肝炎病毒核酸定量檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?【包裝規(guī)格包裝規(guī)格】 32人份/盒 【預(yù)期用途預(yù)期用途】 本試劑盒采用PCR技術(shù)、實(shí)時(shí)熒光探針技術(shù)、用于對(duì) 臨床血清或血漿標(biāo)本中的乙型肝炎病毒核酸DNA的定量檢 測(cè)。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) PCR診斷試劑的原理

44、本品系由乙型肝炎病毒特異性引物、熒光探針、以 及Taq酶等成分組成，采用PCR體外擴(kuò)增的方法，用過(guò) 熒光信號(hào)的變化，定量檢測(cè)人血清或血漿標(biāo)本中的HBV DNA。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 【試劑盒組份】 樣品處理液樣品處理液A 樣品處理液樣品處理液B HBV PCR反應(yīng)液反應(yīng)液A HBV PCR反應(yīng)液反應(yīng)液B HBV PCR反應(yīng)液反應(yīng)液C 工作標(biāo)準(zhǔn)品工作標(biāo)準(zhǔn)品 工作標(biāo)準(zhǔn)品工作標(biāo)準(zhǔn)品 工作標(biāo)準(zhǔn)品工作標(biāo)準(zhǔn)品 工作標(biāo)準(zhǔn)品工作標(biāo)準(zhǔn)品 陰性對(duì)照陰性對(duì)照 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工藝流程圖生產(chǎn)工藝流程圖 Tris、PEG 6000、 氯化鈉、辛酸鈉、 EDTA-Na2 樣品處理母液 引物、探

45、針、 Taq酶、dNTP、 UNG酶 樣品處理試劑 樣品處理液A 樣品處理液B PCR工作母液 PCR擴(kuò)增反應(yīng)試 劑 PCR反應(yīng)液A PCR反應(yīng)液B PCR反應(yīng)液C 基因工程菌株 工作標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì) 粒 配制 配制 配制 配制 培養(yǎng)、抽提 工作標(biāo)準(zhǔn)品 工作標(biāo)準(zhǔn)品 工作標(biāo)準(zhǔn)品 工作標(biāo)準(zhǔn)品 HBV DNA陰 性血 陰性對(duì)照 配制配制 分裝 待檢半成品 半成品檢定 半成品 待檢成品 貼簽、合并 出廠成品 成品檢定 物料工序關(guān)鍵工序 質(zhì)控點(diǎn) 功能性試驗(yàn) 工作參數(shù) 標(biāo)定 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) PCR產(chǎn)品生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點(diǎn) 生產(chǎn)工序生產(chǎn)工序質(zhì)量控制點(diǎn)質(zhì)量控制點(diǎn) 原輔料的檢驗(yàn)原輔料的檢驗(yàn) 主要原輔料按質(zhì)量

46、標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行檢驗(yàn)，合格才能用主要原輔料按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行檢驗(yàn)，合格才能用 于生產(chǎn)于生產(chǎn) 提取試劑的配制及分裝提取試劑的配制及分裝配制完成的試劑立即分裝配制完成的試劑立即分裝 ，分裝的裝量準(zhǔn)確性控制，分裝的裝量準(zhǔn)確性控制 擴(kuò)增試劑的配制及分裝擴(kuò)增試劑的配制及分裝配制完成的試劑應(yīng)立分裝配制完成的試劑應(yīng)立分裝 ，分裝的裝量準(zhǔn)確性控制，分裝的裝量準(zhǔn)確性控制 *工作標(biāo)準(zhǔn)品的制備工作標(biāo)準(zhǔn)品的制備工作標(biāo)準(zhǔn)品的定標(biāo)工作標(biāo)準(zhǔn)品的定標(biāo) 半成品檢定半成品檢定應(yīng)符合相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn) 成品檢定成品檢定 應(yīng)符合相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn) 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 工作標(biāo)準(zhǔn)品的定標(biāo)工作標(biāo)準(zhǔn)品的定標(biāo) 根據(jù)測(cè)定的HBV質(zhì)

47、粒含量，取適量HBV質(zhì)粒用模擬血清 稀釋后，以質(zhì)控參考品為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行標(biāo)定，使最終稀釋濃度為 約107Copies/ml，即為工作標(biāo)準(zhǔn)品。 然后將工作標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行10倍系列梯度稀釋，稀釋后為工 作標(biāo)準(zhǔn)品、工作標(biāo)準(zhǔn)品、工作標(biāo)準(zhǔn)品。 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量控制要點(diǎn) 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l陰性對(duì)照：陰性對(duì)照的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陰性， l工作標(biāo)準(zhǔn)品： 工作標(biāo)準(zhǔn)品Q1Q4的測(cè)定值符合下表的范圍，并且其線性相關(guān)系數(shù) |r|0.950。 工作標(biāo)準(zhǔn)品 已知拷貝數(shù)（IU/ml） 拷貝數(shù)允許范圍（IU/ml） Q1（工作標(biāo)準(zhǔn)品）K11073.54K11062.83K1107 Q2（工作標(biāo)準(zhǔn)品）K21063.54K21052.83K2106 Q3（工作標(biāo)準(zhǔn)品）K31053.54K31042.83K3105 Q4（工作標(biāo)準(zhǔn)品）K41043.54K41032.83K4104 l陰性參考品符合率： 檢測(cè)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)8份陰性參考品檢測(cè)結(jié)果不得出現(xiàn)假陽(yáng)性。 l陽(yáng)性參考品符合率： 檢測(cè)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)9份陽(yáng)性參考品檢測(cè)結(jié)果不得出現(xiàn)假陰性。 l最低檢出限： 檢測(cè)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品中，線性和靈敏度