微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序手冊(cè)

1、猇亭區(qū)古老背社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心婦幼保健與計(jì)劃生育服務(wù)中心微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序質(zhì)量手冊(cè)實(shí)驗(yàn)操作者：彭昱昊執(zhí)行日期：2015 年12月1日啟用日期：2016 年1月1日標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件01 試劑貯存和配制區(qū)工作制度02 標(biāo)本處理區(qū)工作制度03 細(xì)菌自動(dòng)分析區(qū)工作制度04 試劑貯存和配制區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序05 標(biāo)本處理區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序06 細(xì)菌自動(dòng)分析區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序07 紫外消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序08 消毒液配制使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序09 普通冰箱使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序10 超低溫冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程11 潔凈工作臺(tái)使用操作規(guī)程12 VITEK32 型自動(dòng)分析系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序13 移液器使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序14 高速離心機(jī)操作標(biāo)

2、準(zhǔn)操作程序15 冰箱維護(hù)和保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序16 電熱恒溫水浴箱操作程序17 潔凈工作臺(tái)維護(hù)和保養(yǎng)程序18 可移動(dòng)紫外消毒車使用操作程序19 加樣器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序20 離心機(jī)維護(hù)保養(yǎng)操作程序21 溫度計(jì)校準(zhǔn)程序22 試劑的質(zhì)檢操作程序23_微生物實(shí)驗(yàn)室崗位職責(zé)(暫行)24 臨床標(biāo)本的保存程序25 臨床檢驗(yàn)及收費(fèi)程序26 微生物檢驗(yàn)收收費(fèi)價(jià)格27 普通培養(yǎng)陰性操作程序28 真菌培養(yǎng)陰性操作程序29 苛養(yǎng)菌培養(yǎng)陰性操作程序30 抗酸桿菌培養(yǎng)陰性操作程序31 支原體培養(yǎng)檢驗(yàn)操作程序標(biāo)本處理區(qū)工作制度進(jìn)入本區(qū)需穿工作服、工作鞋。本區(qū)只能進(jìn)行：臨床標(biāo)本的保存，標(biāo)本接種、培養(yǎng)、及其菌株檢驗(yàn)前處理、菌懸液制

3、備、染色標(biāo)本檢查、非上機(jī)鑒定與藥敏試驗(yàn)操作等危險(xiǎn)操作，其它操作不得在此區(qū)進(jìn)行。在整個(gè)本區(qū)的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，操作者必須戴手套、口罩和帽子，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。工作結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔或消毒。非本實(shí)驗(yàn)室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入。試劑配制和無(wú)菌區(qū)工作制度進(jìn)入該區(qū)需穿專用工作服和工作鞋。本區(qū)只能進(jìn)行貯存試劑的制備、試劑的分裝和平板的制備。在整個(gè)本區(qū)的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。工作結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔和消毒。非本實(shí)驗(yàn)室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入。無(wú)菌室公能用于分裝培養(yǎng)管或倒制平板培養(yǎng)基操作。使用前以紫外燈消毒至少30 分鐘，定期用乳酸熏蒸，徹底消毒

4、。無(wú)菌室僅限操作者進(jìn)入，操作時(shí)嚴(yán)格關(guān)門。室內(nèi)備有空調(diào)設(shè)備，以保證不因溫度而影響工作。儀器自動(dòng)分析區(qū)工作制度進(jìn)入本區(qū)需穿專用工作服和工作鞋。本區(qū)只能進(jìn)行：微生物上機(jī)鑒定與藥敏分析、血培養(yǎng)儀增菌培養(yǎng)、培養(yǎng)基溶解與保溫、相關(guān)實(shí)驗(yàn)記錄與報(bào)告書寫、打??；其它操作不得在此區(qū)進(jìn)行。在整個(gè)本區(qū)的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。工作結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔。非本實(shí)驗(yàn)室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入。試劑貯存和配制區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的：規(guī)定在本區(qū)進(jìn)行的工作，確保試劑正確貯存和制備。適用范圍：試劑的貯存和制備。職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并遵守本室相關(guān)SOP。3.2 本SOP 的

5、改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。4 程序：4.1 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)專用工作服。實(shí)驗(yàn)中須戴手套、工作鞋。4.2 實(shí)驗(yàn)室所購(gòu)試劑經(jīng)驗(yàn)收登記后，按說(shuō)明書中的要求貯存。4.3 記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)。4.4 記錄冰箱的溫度計(jì)讀數(shù)。根據(jù)當(dāng)天的標(biāo)本驗(yàn)收登記表，取出當(dāng)天實(shí)驗(yàn)須配制和使用的試劑放置于即用冰箱，其余試劑要立即收好放回貯藏冰箱內(nèi)。4.5 不同廠家的試劑勿混用，同廠家的不同檢測(cè)項(xiàng)目試劑盒中的相同試劑也不宜混用，除非廠家有特別說(shuō)明。4.6 做好詳細(xì)實(shí)驗(yàn)記錄。4.7 實(shí)驗(yàn)完畢，清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。4.8 每周一清點(diǎn)庫(kù)存試劑，看有無(wú)過(guò)期或?qū)⒔狡诘脑噭?，?/p>

6、作報(bào)廢處理或排列優(yōu)先使用，避免浪費(fèi)，然后記錄試劑的詳細(xì)保存情況。5. 引用的文件及表格：5.1 項(xiàng)目SOP：sop -tb;sop_tc;sop_ng;sop_hbv;sop_hcv5.2 實(shí)驗(yàn)室清潔程序：proc_lab_75.3 冰箱溫度記錄表：Tab-temp_record5.4 溫濕度計(jì)記錄表：Tab-temp_record標(biāo)本處理區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的：規(guī)定在標(biāo)本制備區(qū)內(nèi)所進(jìn)行的工作及其操作。適用范圍：所有在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行的工作。職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP。3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。標(biāo)

7、準(zhǔn)操作：1.1 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本室專用工作服1.2 實(shí)驗(yàn)中須使用一次性鞋套1.3 戴手手套1.4 手套需常更換每四小時(shí)換一次4.2 從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)取出的試劑放入即用冰箱室試劑存放專區(qū)暫存。4.3 記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)。4.4 記錄恒溫箱的溫度計(jì)讀數(shù)。4.5 臨床標(biāo)本的接收、保存，細(xì)菌手工鑒定或上機(jī)前處理在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。4.6 標(biāo)本的接收處理和保存按臨床標(biāo)本的管理程序進(jìn)行：Pro-Sam。4.7 不同檢測(cè)項(xiàng)目的樣本核酸的提取和保存按相應(yīng)檢測(cè)項(xiàng)目的SOP 進(jìn)行。4.8 標(biāo)本接種或涂片在本區(qū)的標(biāo)本處理臺(tái)內(nèi)進(jìn)行，接種后培養(yǎng)基按要求進(jìn)行培養(yǎng)。菌落觀察和處理在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。4.9 詳細(xì)做好實(shí)驗(yàn)記錄

8、和儀器使用記錄。4.10 保持室內(nèi)空氣流通，且在實(shí)驗(yàn)完畢后，按實(shí)驗(yàn)室清潔消毒程序進(jìn)行清潔、消毒工作。引用的文件及表格5.1 臨床標(biāo)本的管理程序進(jìn)行：proc_smpl_11.2 項(xiàng)目SOP：sop -tb;sop_tc;sop_ng;sop_hbv;sop_hcv1.3 實(shí)驗(yàn)室清潔程序：Pro-Cle。5.4 恒溫箱溫度記錄表：Tab-temp_record5.5 溫濕度計(jì)記錄表：Tab-temp_record細(xì)菌自動(dòng)分析區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的：規(guī)定在本區(qū)進(jìn)行的工作，確保靶核酸擴(kuò)增的準(zhǔn)確性和有效性。適用范圍：血培養(yǎng)、自動(dòng)分析和報(bào)告簽發(fā)。職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP。3.2

9、 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。標(biāo)準(zhǔn)操作：4.1 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)工作服。實(shí)驗(yàn)中須戴手套、帽子，手套需常更換。4.2 本實(shí)驗(yàn)室采取VITEK32 微生物自動(dòng)分析技術(shù)，因此，微生物自動(dòng)鑒定和分析和肥達(dá)氏試驗(yàn)、外菲氏試驗(yàn)等均在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。4.3 鑒定板在標(biāo)本處理區(qū)準(zhǔn)備后帶入該區(qū)，放入充液箱充填，充填菌懸液后加塞，余液連同試管放入消毒桶中消毒，由工人過(guò)后洗滌回收試管。4.4 每月必須進(jìn)行至少一次所有試卡的質(zhì)控，每新到的批號(hào)試劑要進(jìn)行質(zhì)控，過(guò)關(guān)方能投入使用。4.5 依據(jù)不同檢測(cè)項(xiàng)目SOP 要求設(shè)定微生物檢驗(yàn)工作程序，并記錄備案

10、；未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人允許，不得隨意更改。4.6 檢測(cè)報(bào)告的簽發(fā)依據(jù)檢測(cè)結(jié)果報(bào)告程序：Pro-Rep。4.7 做好儀器和實(shí)驗(yàn)記錄。4.8 保持室內(nèi)空氣流通，且在實(shí)驗(yàn)完畢后，清潔、消毒工作臺(tái)面。引用的文件：5.1 檢測(cè)結(jié)果報(bào)告程序：proc_rept_15.2 項(xiàng)目SOP：sop -tb;sop_tc;sop_ng;sop_hbv;sop_hcv5.3 實(shí)驗(yàn)室清潔程序：proc_lab_7紫外消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的：每天實(shí)驗(yàn)后，下班后對(duì)工作區(qū)進(jìn)行必要的紫外線消毒一小時(shí)，保正實(shí)驗(yàn)室的清潔。適用范圍：適用于本室各工作區(qū)中按裝于天化板上的紫外線消毒燈。職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP。

11、3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。操作程序：4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后先對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行必要的清潔工作；4.2 根據(jù)需要設(shè)定時(shí)間，通常為30 分鐘，根據(jù)需要適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間。4.3 關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)；4.4 整個(gè)紫外線消毒過(guò)程中，相關(guān)工作人員不能離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室，以防火災(zāi)發(fā)生。消毒液配制使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序1、目的：配制消毒液，用消毒液擦拭實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、用具及浸泡實(shí)驗(yàn)廢棄物。2、適用范圍：分子生物實(shí)驗(yàn)室的工作人員3、職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)及時(shí)配制消毒液，熟知并遵守本SOP，嚴(yán)防污染發(fā)生。3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出

12、，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。4、工作程序：4.1 確定要配制消毒液的量。4.2 將36%的次氯酸鈉配制成10%的稀溶液。以1000 毫升為例，取278 毫升的36%的次氯酸鈉母液，加蒸餾水至1000 毫升。4.3 消佳凈：20g 加水4000ml,作用20-30 分鐘。4.4 所配制的消毒液只限在當(dāng)天內(nèi)使用，隔夜如使用時(shí)應(yīng)根據(jù)本SOP 重新配制。普通冰箱使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的：確保冰箱的正常使用。適用范圍：本SOP 適用于本室各類用途使用的普通冰箱、冰柜。職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP。3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)

13、下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。操作程序：4.1 開(kāi)、關(guān)機(jī)：試劑冰箱按說(shuō)明書要求放好后，插上電源線，冷藏室溫度開(kāi)關(guān)置于4，冷凍室溫度開(kāi)關(guān)置于 -20，2 小時(shí)后用溫度計(jì)確認(rèn)。系統(tǒng)進(jìn)入正常運(yùn)行狀態(tài)后即可正常使用。4.2 關(guān)機(jī)：若冰箱較長(zhǎng)時(shí)間不用或需要送修時(shí)需按以下步驟操作：（1）關(guān)閉冰箱電源，并拔下電源插頭。（2）清空冰箱內(nèi)的所有貯存物，并妥善放置到其它冰箱內(nèi)。打開(kāi)冰箱門，等待冰箱內(nèi)的霜化完。（3）用肥皂水擦洗干凈冰箱內(nèi)膽，后用10%次氯酸鈉液擦洗一次。（4）保持冰箱門打開(kāi)待其自然干燥。引用的表格5.1 冰箱溫度記錄表：Tab-temp_record回目錄超低溫冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程確保低溫冰箱的

14、正常使用。適用范圍：本SOP 適用于 公司的 型超低溫冰箱。職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。操作程序4.1 接通電源，將冰箱的開(kāi)關(guān)置ON 位置，此時(shí)溫度顯示屏顯示冰箱的實(shí)際溫度，且數(shù)字不停地閃爍。4.2 溫度設(shè)定：以調(diào)節(jié)冰箱溫度為-70為例說(shuō)明，按SET 鍵，溫度指示顯示-85，且“8”閃爍，按“”鍵直至“8“變?yōu)椤?”；按“”鍵，此時(shí)溫度指示為“-75”，“5”閃爍，按“”鍵直至“5“變?yōu)椤?”，按SET 鍵，此時(shí)溫度指示“-70”，且不閃爍。4

15、.3 設(shè)定溫度時(shí)應(yīng)注意，一般應(yīng)以10遞減方式進(jìn)行，即每次設(shè)定的溫度低于冰箱實(shí)際溫度10，待冰箱達(dá)到設(shè)定溫度時(shí)再進(jìn)行調(diào)節(jié)，直至達(dá)到所需溫度。4.3 如超低溫度遇較長(zhǎng)時(shí)間停電，其溫度顯示會(huì)不斷閃爍，且報(bào)警指示燈（ALARM）也閃爍，此時(shí)應(yīng)按上述方法調(diào)節(jié)。4.4 由冰箱管理人或其委托人每工作日記錄冰箱溫度，冰箱溫度記錄表貼于冰箱門，每月更換1次，存檔。4.5 超低溫冰箱由專人保管，試劑和物品應(yīng)按指定位置存放。4.6 超低溫冰箱全室共用，若室外人員需存放試劑或標(biāo)本，須經(jīng)管理人同意。引用的表格：5.1 冰箱溫度記錄表：tab_temp_record回目錄潔凈工作臺(tái)使用操作規(guī)程目的：正確使用潔凈工作臺(tái)。本

16、SOP 適用于實(shí)驗(yàn)室使用的所有國(guó)產(chǎn)醫(yī)用潔凈工作臺(tái)。職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。操作程序：4.1 新安裝或長(zhǎng)期未使用的工作臺(tái)，使用前必須用超凈真空吸塵器或不產(chǎn)生纖維的物品認(rèn)真進(jìn)行清潔工作。4.2 接通電源，使用前應(yīng)提前1530 分鐘同時(shí)開(kāi)啟紫外燈和風(fēng)機(jī)組工作。4.3 當(dāng)需要調(diào)節(jié)風(fēng)機(jī)風(fēng)速時(shí)，用工作臺(tái)操作面板上的風(fēng)速調(diào)節(jié)鈕進(jìn)行調(diào)節(jié)。風(fēng)機(jī)、照明均由批示燈指示其工作狀態(tài)，工作時(shí)，發(fā)光。4.4 工作臺(tái)面上禁止存放不必要的物品，以保持工作區(qū)的潔凈氣流不受干擾

17、。4.5 禁止在工作臺(tái)面上記錄書寫，工作時(shí)應(yīng)盡量避免作明顯擾動(dòng)氣流的動(dòng)作；禁止在預(yù)過(guò)濾進(jìn)風(fēng)口部位放置物品，以免擋住進(jìn)風(fēng)口造成進(jìn)風(fēng)量減少，降低凈化能力。4.6 使用結(jié)束后，用消毒液清理工作臺(tái)面后打開(kāi)紫外燈，1530 分鐘后關(guān)閉紫外燈，關(guān)閉潔凈臺(tái)電源。4.7 長(zhǎng)期不使用的工作臺(tái)請(qǐng)撥下電源插頭?；啬夸沄ITEK32 全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序（待補(bǔ)充）回目錄移液器使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的：正確使用移液器，確保移液的精確性。適用范圍：本實(shí)驗(yàn)室使用的可調(diào)式移液。職責(zé)：實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格按照本SOP 進(jìn)行操作。操作程序：4.1 轉(zhuǎn)動(dòng)旋鈕設(shè)定移液量，設(shè)定的移液量不可超出該移液器規(guī)定的范圍。4.2 裝上

18、配套的Tip。4.3 前進(jìn)移液法4.3.1 將按鈕壓至第一停點(diǎn)位置；4.3.2 將移液管管嘴浸入液面下23mm 深處，然后慢慢松開(kāi)按鈕吸入液體。待移入管嘴吸滿液體后，將管嘴撤出液面，擦掉管嘴外側(cè)的所有液滴。4.3.3 輕輕壓下操作按鈕至第一停點(diǎn)位置，放出液體。約1 秒鐘后，繼續(xù)將操作按鈕向下壓至第二停點(diǎn)位置。待管嘴液體放干凈后，將管嘴貼在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中，撤出管嘴。4.3.4 松開(kāi)按鈕使之回到起點(diǎn)位置。需要時(shí)，可更換管嘴繼續(xù)移液操作。4.4 倒退移液法：適用于高粘度液體及/或易起泡沫液體的移液。4.4.1 將操作按鈕向下壓至第二停點(diǎn)位置。4.4.2 將移液管管嘴浸入試劑瓶液面下2

19、3mm 深處，然后慢慢松開(kāi)鈕吸入液體。待移入管嘴吸滿液體后，將管嘴撤出液面，擦掉管嘴外側(cè)的所有液滴。4.4.3 輕輕壓下操作按鈕至第一停點(diǎn)位置，放出液體。4.4.4 遺留在管嘴時(shí)的液體或者隨管嘴一起扔掉，或者放回原來(lái)的容器中。4.5 重復(fù)操作法：重復(fù)操作移液法可以快速、簡(jiǎn)便地重復(fù)轉(zhuǎn)移同體積的同種液體。4.5.1 將操作按鈕向下壓至第二停點(diǎn)位置。4.5.2 將移液管管嘴浸入液面下23mm 深處，然后慢慢松開(kāi)按鈕吸入液體。待移入管嘴吸滿液體后，將管嘴貼在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中。4.5.3 輕輕壓下操作按鈕至第一停點(diǎn)位置，放出液體。待放完所需體積液體后，把按鈕停在第一停點(diǎn)位置，不包括在移液量

20、之內(nèi)的少量液體仍留在管嘴內(nèi)，管嘴外的液滴則需包括在移液量之內(nèi)。4.5.4 將管嘴浸入試劑液面下不遠(yuǎn)處，然后慢慢松開(kāi)按鈕使管嘴重新吸入液體。4.5.5 重復(fù)步序4.5.3 和4.5.4 繼續(xù)移液操作，就可重復(fù)轉(zhuǎn)移相同體積液體?；啬夸涬x心機(jī)操作標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的：使每個(gè)工作人員能正確地使用本儀器。范圍：本SOP 僅適用于各類普通離心機(jī)。職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。操作：4.1 開(kāi)機(jī)：接通電源，打開(kāi)儀器電源開(kāi)關(guān)，離心機(jī)自檢。4.2 按“Open”鍵，打

21、開(kāi)機(jī)蓋，旋開(kāi)轉(zhuǎn)子蓋，平衡放入離心管，旋緊轉(zhuǎn)子蓋，關(guān)上機(jī)蓋，此時(shí)“Open”鍵的指標(biāo)燈亮。（如果接通電源后，機(jī)蓋為開(kāi)的狀態(tài)，則無(wú)需此步操作）。4.3 離心條件的設(shè)定：通過(guò)按“Temp”、“Speed”、“Time”鍵的上下箭頭分別設(shè)定離心的溫度、速度和時(shí)間。其中離心速度可分為每分鐘轉(zhuǎn)速（rpm）和離心力（cfg）兩種，可通過(guò)同時(shí)按下“Speed”鍵的上下鍵頭相互轉(zhuǎn)換。4.4 運(yùn)行：離心條件設(shè)定好后，按“Start/Stop”鍵，離心機(jī)啟動(dòng)，“Open”鍵的指標(biāo)燈滅。當(dāng)達(dá)到設(shè)定的時(shí)間后，離心機(jī)自動(dòng)停止，并發(fā)出提示音，“Open”鍵的指標(biāo)燈亮，按“Open”鍵，打開(kāi)機(jī)蓋，旋開(kāi)轉(zhuǎn)子蓋，取出離心管。*若

22、進(jìn)行樣本的短暫離心，只需按“Short”鍵數(shù)秒即可。*若需在離心過(guò)程中停止離心，則需再按一次“Start/Stop”鍵。4.5 關(guān)機(jī)：離心完畢后，應(yīng)及時(shí)用干的軟布拭去離心室的冷凝水，關(guān)閉離心機(jī)電源，并記錄離記機(jī)使用情況。回目錄冰箱維護(hù)和保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的：對(duì)冰箱進(jìn)行適當(dāng)?shù)木S護(hù)，以確保冰箱的正常使用。適用冰箱范圍：本實(shí)驗(yàn)室使用的各種品牌、型號(hào)的冰箱。職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。操作方法4.1 冰箱應(yīng)放置于水平地面并留有一定的散熱空間。4.2 外

23、接電源電壓必須匹配，并要求有良好的接地線。4.3 冰箱內(nèi)禁止存放與本實(shí)驗(yàn)室無(wú)關(guān)的物品。4.4 放入冰箱內(nèi)的所有試劑、樣品、質(zhì)控品等必須密封保存。4.5 保持冰箱出水口通暢；非自動(dòng)除霜冰箱應(yīng)定期除霜；定期清潔冰箱，清潔時(shí)切斷電源，用軟布蘸水擦拭冰箱內(nèi)外，必要時(shí)可用中性洗滌劑。4.6 每日由專人負(fù)責(zé)觀察冰箱內(nèi)溫度并記錄于表中，記錄表貼于門上，每月一張，一年裝訂成冊(cè)存檔。4.7 若溫度超出規(guī)定范圍，調(diào)節(jié)溫控使其回到正常范圍，并進(jìn)行記錄。4.8 若溫控調(diào)節(jié)無(wú)效，報(bào)請(qǐng)?jiān)O(shè)備科維修，修理后須驗(yàn)收合格并簽字后方能正常使用。引用的表格5.1 冰箱溫度記錄表：tab_temp_record電熱恒溫水浴箱操作程序1

24、 目的：保證水浴箱工作溫度恒定。2 該SOP 變動(dòng)程序：本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人。3 適用水浴箱范圍：電熱恒溫水浴箱4 標(biāo)準(zhǔn)操作：4.1 水浴箱應(yīng)置于堅(jiān)固的水平臺(tái)上，電源電壓須匹配。4.2 在水浴箱內(nèi)注入清潔溫水至總高度1/21/3 處。4.3 打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，把溫度控制器的溫度調(diào)節(jié)旋鈕至設(shè)定溫度。4.4 當(dāng)水槽內(nèi)測(cè)定溫度達(dá)到設(shè)定溫度時(shí)，加熱中斷、指示燈熄滅，溫度保持穩(wěn)定。4.5 在每次水浴箱使用前，放入標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)同時(shí)監(jiān)測(cè)實(shí)際水溫，以校正溫度。4.6 水浴箱工作溫度波動(dòng)范圍是：預(yù)設(shè)+2 范圍。4.7 每天應(yīng)使用水銀溫度計(jì)水浴

25、箱應(yīng)記錄每天溫度；如溫度超出正常范 圍，該溫度應(yīng)劃上紅圈，并把修正操作記錄下來(lái)。4.8 水浴箱內(nèi)外應(yīng)保持清潔，外殼忌用腐蝕性溶液擦拭。4.9 儀器不用時(shí)，需套好防塵罩，以免溫度控制器受潮影響使用。5.0 引用的表格：tab_temp_bath潔凈工作臺(tái)維護(hù)和保養(yǎng)程序目的：對(duì)潔凈工作臺(tái)進(jìn)行適當(dāng)維護(hù)，以保證凈化能力。適用范圍：本SOP 適用于實(shí)驗(yàn)室使用的醫(yī)用潔凈工作臺(tái)（BC1300 型）。職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。程序：4.1 根據(jù)環(huán)境潔凈程度，

26、定期將預(yù)過(guò)濾器中的濾料拆下清洗，一般間隔時(shí)間為36 個(gè)月。4.2 每次使用潔凈臺(tái)后，均需對(duì)潔凈臺(tái)進(jìn)行清潔。4.3 定期（一般每半年1 次）計(jì)測(cè)工作區(qū)風(fēng)速，如發(fā)現(xiàn)不符合技術(shù)參數(shù)要求，則可調(diào)大風(fēng)機(jī)供電電壓。當(dāng)風(fēng)機(jī)組電壓調(diào)到最大時(shí)，工作區(qū)風(fēng)速仍達(dá)不到0.3m/s，則必須更換高效空氣過(guò)濾器。（由廠家或院儀器維修人員進(jìn)行）4.4 做好維護(hù)記錄。引用的表格：5.1 儀器設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)記錄表：sop_cl_1可移動(dòng)紫外消毒車使用操作程序1 目的：正確使用紫外消毒車進(jìn)行消毒。2 適用范圍：適用于本室使用的ZXC 型紫外線消毒車（上海躍進(jìn)醫(yī)用光學(xué)器械廠生廠）。3 職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本S

27、OP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。操作程序：4.1 打開(kāi)保護(hù)門；4.2 用手托住燈臂往上抬至需要位置；4.3 插上電源，打開(kāi)帶燈開(kāi)關(guān)；4.4 根據(jù)需要設(shè)定時(shí)間；4.5 使用完畢將按鈕摁到底，同時(shí)另一手托住燈臂慢慢將燈管放進(jìn)燈箱內(nèi)關(guān)上保護(hù)門。4.6 不同實(shí)驗(yàn)區(qū)的紫外線消毒車勿混用。5 消毒記錄表：tab_cl_record加樣器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的：保證加樣器加樣的準(zhǔn)確性。加樣器范圍：各種品牌、型號(hào)的固定、可調(diào)和多通道加樣器。職責(zé)：本SOP 由室負(fù)責(zé)人執(zhí)行落實(shí)。校準(zhǔn)程序4.1 校準(zhǔn)環(huán)境和用具要求：4.

28、1.1 室溫：2025，測(cè)定中波動(dòng)范圍不大于0.5。4.1.2 電子天平：放置于無(wú)塵和震動(dòng)影響的臺(tái)面上，房間盡可能有空調(diào)。稱量時(shí)為保證天平內(nèi)的濕度（相對(duì)濕度6090），天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10ml 蒸餾水的小燒杯。4.1.3 小燒杯：510ml 體積。4.1.4 測(cè)定液體：溫度為2025的去氣雙蒸水。4.1.5 選擇校準(zhǔn)體積： 擬校準(zhǔn)體積；加樣器標(biāo)定體積的中間體積；最小可調(diào)體積（不小于擬校準(zhǔn)體積的1）。(4)如為固定體積加樣器，則只有一種校準(zhǔn)體積。4.2 校準(zhǔn)步驟：4.2.1 將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積，選擇合適的吸頭；4.2.2 調(diào)節(jié)好天平；4.2.3 來(lái)回吸吹蒸餾水3 次，以使吸頭濕潤(rùn)，用紗布拭

29、干吸頭；4.2.4 垂直握住加樣器，將吸頭浸入液面23mm 處，緩慢（13 秒）一致的吸取蒸餾水；4.2.5 將吸頭離開(kāi)液面，靠在管壁，去掉吸頭外部的液體；4.2.6 將加樣器以30角放入稱量燒杯中，緩慢一致地將加樣器壓至第一檔，等待13 秒，再壓致第二檔，使吸頭里的液體完全排出；4.2.7 記錄稱量值；4.2.8 擦干吸頭外面；4.2.9 按上述步驟稱量10 次；4.2.10 取10 次稱量值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量，按附表所列蒸餾水Z 因子計(jì)算體積：體積=重量/Z 因子4.2.11 按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)節(jié)加樣器4.3 新購(gòu)的合格的移液器出廠前經(jīng)過(guò)廠家校準(zhǔn)，使用前無(wú)需校準(zhǔn)。4.4 每年移

30、液器進(jìn)行校準(zhǔn)一次，自?；蛴蓮S家有關(guān)部門校準(zhǔn)。4.5 做好校準(zhǔn)記錄。引用的表格儀器設(shè)備校準(zhǔn)記錄表：tab_pipt_cal離心機(jī)維護(hù)保養(yǎng)操作程序目的：對(duì)離心機(jī)進(jìn)行正確的維護(hù)，以保證儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn)。適用范圍：本SOP 僅適用于本室使用的離心機(jī)。職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。操作程序：4.1 離心室的清潔：為了避免樣本等殘留物的污染，應(yīng)經(jīng)常對(duì)離心機(jī)外殼和離心室進(jìn)行清潔處理。對(duì)離心室清潔，應(yīng)先打開(kāi)離心機(jī)蓋，撥掉電源線，用專用設(shè)備將離心機(jī)轉(zhuǎn)子旋下，再用中性去

31、污劑（70%的異丙醇/水混合物或乙醇去污染）清潔離心室；離心室內(nèi)的橡膠密封圈經(jīng)去污劑處理后，用水沖洗，再用甘油潤(rùn)滑。4.2 轉(zhuǎn)子的清潔：轉(zhuǎn)子會(huì)被樣本殘留物污染，也可能會(huì)被某些化學(xué)試劑腐蝕，因此應(yīng)對(duì)轉(zhuǎn)子每月進(jìn)行清潔維護(hù)。每月用中性的清潔劑清潔轉(zhuǎn)子一次，并在儀器使用記錄本上作好記錄，以延長(zhǎng)轉(zhuǎn)子的壽命。4.3 離心完畢后，應(yīng)及時(shí)用干的軟布拭去離心室的冷凝水。（此步僅適用于冷凍離心機(jī)）4.4 離心結(jié)束后，使離心機(jī)蓋打開(kāi)，然后關(guān)機(jī)。溫度計(jì)校準(zhǔn)程序目的：保證溫度計(jì)的精確性。適用范圍：適用于本實(shí)驗(yàn)室所使用的溫度計(jì)。職責(zé)：本SOP 由室負(fù)責(zé)人落實(shí)。程序4.1 由設(shè)備科人員送質(zhì)檢局對(duì)溫度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。4.2 每年

32、進(jìn)行1 次。4.3 經(jīng)校準(zhǔn)過(guò)的溫度計(jì)可作為微量恒溫器溫度校溫的參照。引用表格：5.1 儀器設(shè)備校準(zhǔn)記錄：tab_inst_cal臨床非培養(yǎng)標(biāo)本的采集及處理操作程序目的：規(guī)范臨床待檢標(biāo)本的正確采集、送檢和處理。適用范圍：微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的所有臨床檢測(cè)標(biāo)本。職責(zé)：3.1 所有采集標(biāo)本的人員均需按本SOP 操作，實(shí)驗(yàn)室工作人員有責(zé)任向臨床醫(yī)生、護(hù)士或病人宣教。3.2 本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。操作程序4.1 本實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)標(biāo)本為：血清或血漿、痰、生殖道拭子標(biāo)本、尿液及腦脊液和胸腹水。4.2 做好標(biāo)本簽收，核對(duì)檢驗(yàn)單與標(biāo)本標(biāo)簽是

33、否清楚無(wú)誤，送檢標(biāo)本是否正確、合格，給所有標(biāo)本按順序編號(hào)，按如下操作規(guī)程操作。4.3 查找抗酸菌操作:將標(biāo)本置于水浴蒸箱加溫殺菌30 分鐘，取標(biāo)本殘留物或沉淀物加溫涂布玻片，液性標(biāo)本以3000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5 分鐘，取標(biāo)本殘留物或沉淀物加溫涂布玻片并標(biāo)注編號(hào)后固定，行抗酸染色，先滴加抗酸染色第一液加溫(用酒精燈在玻片下來(lái)回加溫置染色液冒熱氣，但無(wú)氣泡產(chǎn)生為宜)染色10 分鐘，自來(lái)水沖洗凈染液，以硫酸美蘭復(fù)染2 分鐘，水洗涼干。鏡檢與報(bào)告：油鏡下查找分枝、不規(guī)則紅色桿菌，按如下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果報(bào)告。1)、鏡檢100-300 個(gè)視野（時(shí)間不少于4 分鐘）未發(fā)現(xiàn)抗酸菌，繼續(xù)觀察至300 個(gè)視野仍未發(fā)現(xiàn)抗

34、酸菌者報(bào)告抗酸菌（）；2)、鏡檢100 個(gè)視野找到抗酸菌1-2 條者，報(bào)告抗酸菌可疑（），或重涂片或重送標(biāo)本檢查；3)、鏡檢100 個(gè)視野找到抗酸菌3-9 條者，報(bào)告抗酸桿菌陽(yáng)性（）；4)、鏡檢10 個(gè)視野找到抗酸菌1-9 條者，報(bào)告抗酸桿菌陽(yáng)性（2）；5)、鏡檢每個(gè)視野找到抗酸菌1-9 條者，報(bào)告抗酸桿菌陽(yáng)性（3）；6)、鏡檢每個(gè)視野找到抗酸菌多于9 條者，報(bào)告抗酸桿菌陽(yáng)性（4）。4.4 查找普通細(xì)菌操作：液性標(biāo)本取離心沉淀物涂片，拭子或膿性標(biāo)本直接涂布玻片并標(biāo)注編號(hào)后固定。同時(shí)取大腸標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC25922)和金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)株（ATCC25922）涂片，一起行革蘭氏染色，先滴加第一液

35、染色1 分鐘，水洗，加第二液媒染1 分鐘，水洗干凈；以95%酒精脫色30 秒鐘后立即水洗，再加第四液復(fù)染30 秒鐘，水洗后涼干。油鏡下查找菌體并觀察球桿比例；觀察質(zhì)控菌是否合格。4.5 墨汁染色查找隱球菌：液性標(biāo)本離心取沉淀物涂片，膿性或拭子標(biāo)本直接涂片并寫號(hào)，以無(wú)菌接種環(huán)粘取少量印度墨汁與玻片上標(biāo)本混勻，壓蓋玻片，先低倍鏡下找到視野再轉(zhuǎn)離倍鏡觀察。若找到透亮，圓形強(qiáng)折光，有厚莢膜的菌體報(bào)告墨汁染色陽(yáng)性；否則報(bào)告陰性。4.6 白帶常規(guī)檢查：鹽水管直接將棉簽點(diǎn)至玻片后以高倍鏡檢有無(wú)滴蟲；涂片標(biāo)注編號(hào)后固定，行革蘭氏染色，先滴加第一液染色1 分鐘，水洗，加第二液媒染1 分鐘，水洗干凈；以95%酒精

36、脫色30 秒鐘后立即水洗，再加第四液復(fù)染30 秒鐘，水洗涼干后鏡檢查找革蘭氏陰性雙球菌、霉菌或陽(yáng)性球菌、線索細(xì)胞等。陰道清潔度的按如下判斷標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告：度：陰道桿菌為主，并可見(jiàn)大量上皮細(xì)胞。度：有部份陰道桿菌，但亦有部份膿細(xì)胞和雜菌，上皮細(xì)胞少見(jiàn)。度：僅見(jiàn)少量陰道桿菌和上皮細(xì)胞，有大量膿細(xì)胞和雜菌。度：鏡下無(wú)陰道桿菌，除少量上皮細(xì)胞外，主要的幾乎全是膿細(xì)胞和大量雜菌。4.7 肥達(dá)試驗(yàn)：標(biāo)本標(biāo)明編號(hào)，以3000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5 分鐘；取試管架，按每標(biāo)本排5 排試管，每排5 支；各標(biāo)本用加樣器取100l 血清置于一支稀釋用試管(注明檢驗(yàn)號(hào))中，加入1.9ml 0.9%生理鹽水混勻，第一排加入1：20

37、倍稀釋血清各0.2ml，成1：40 倍；后稀釋管再加入1.0ml 0.9%生理鹽水，成1：40 倍稀釋，加入第二排試管各0.2 ml。同樣方法對(duì)倍稀釋至第四排試管，第五排各加入0.2ml 0.9%生理鹽水作陰性對(duì)照。從冰箱中拿出肥達(dá)反應(yīng)試驗(yàn)稀釋菌懸液，第一列各加入H 診斷菌液0.2 ml,第二列各加入O 診斷菌液0.2 ml，第三列各加入甲型診斷菌液0.2 ml,第四列各加入乙型診斷菌液0.2 ml, 第五列各加入丙型診斷菌液0.2 ml,混勻，置37水浴箱18-24 小時(shí)。結(jié)果判斷：菌體沉淀至試管底成圓點(diǎn)為陰性管，出現(xiàn)散在顆粒狀凝集為陽(yáng)性管。以最高稀釋管出現(xiàn)散在顆粒狀凝集為報(bào)告滴度。若陰性對(duì)

38、照出現(xiàn)凝集則需重新稀釋配制診斷菌懸液重做試驗(yàn)。4.8 外菲氏試驗(yàn)：標(biāo)本標(biāo)明編號(hào)，以3000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5 分鐘；取試管架，按每標(biāo)本排3 排試管，每排5 支；各標(biāo)本用加樣器取100l 血清置于一支稀釋用試管(注明檢驗(yàn)號(hào))中，加入1.9ml0.9%生理鹽水混勻，第一排加入1：20 倍稀釋血清各0.2ml，成1：40 倍；稀釋管留1.0ml 再加入1.0ml 0.9%生理鹽水，成1：40 倍稀釋，加入第二排試管各0.2 ml。同樣方法對(duì)倍稀釋至第四排試管，第五排各加入0.2ml 0.9%生理鹽水作陰性對(duì)照。從冰箱中拿出外菲氏反應(yīng)試驗(yàn)稀釋菌懸液，第一列各加入OX19 診斷菌液0.2 ml,第二列各加

39、入OX2 診斷菌液0.2 ml，第三列各加入OXK 診斷菌液0.2 ml,混勻，置37水浴箱18-24 小時(shí)。結(jié)果判斷：菌體沉淀至試管底成圓點(diǎn)為陰性管，出現(xiàn)散在顆粒狀凝集為陽(yáng)性管。以最高稀釋管出現(xiàn)散在顆粒狀凝集為報(bào)告滴度。若陰性對(duì)照出現(xiàn)凝集則需重新稀釋配制診斷菌懸液重做試驗(yàn)。5.2 拒收標(biāo)本記錄表：tab_rejec臨床標(biāo)本的保存程序目的：臨床標(biāo)本正確保存，以便必要是復(fù)查。適用范圍：微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的所有臨床檢測(cè)標(biāo)本。職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員必須熟知并遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督管理。3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。程

40、序：4.1 未檢測(cè)的標(biāo)本經(jīng)預(yù)處理后及時(shí)置-20保存。4.2 標(biāo)本當(dāng)天檢測(cè)可置4保存，如當(dāng)天不檢測(cè)應(yīng)置-20保存。報(bào)告發(fā)出后丟棄。4.3 原始樣本在報(bào)告發(fā)出前均需置4保存，不得丟棄。報(bào)告發(fā)出后保存2 天，以備查。保存2天后標(biāo)本由室負(fù)責(zé)人酌情處理。實(shí)驗(yàn)室崗位職責(zé)運(yùn)行程序(暫行)1. 目的：確保日常工作的順利進(jìn)行。2. 適用范圍：本實(shí)驗(yàn)室工作人員。3. 職責(zé)：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP。3.2 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。4 為更好的使日常工作有序進(jìn)行，盡可能以負(fù)責(zé)的態(tài)度，連續(xù)地完成每一個(gè)檢驗(yàn)的發(fā)報(bào)，保證結(jié)果

41、的可靠性，每日盡可能安排兩個(gè)工作人員上班，分為兩個(gè)崗位，各自的工作崗位職責(zé)如下。1 崗位班、2 崗位班采用輪轉(zhuǎn)制。如遇有當(dāng)班同事休息或值班，第3 人就頂上其所上的班。4.1 崗位1 班(負(fù)責(zé)樣本接收、核對(duì)、接種以及上日進(jìn)行的鑒定和藥敏結(jié)果進(jìn)行分析、發(fā)報(bào)等工作)。4.1.1 上班后檢查細(xì)菌自動(dòng)分析儀、血液自動(dòng)培養(yǎng)儀工作是否正常，并做好記錄。4.1.2 從冰箱內(nèi)取出當(dāng)天所需的各種平板：5%綿羊血平皿、中國(guó)藍(lán)培養(yǎng)皿、淋病奈瑟菌培養(yǎng)皿、麥康凱平皿等。4.1.3 負(fù)責(zé)對(duì)上日進(jìn)行的鑒定和藥敏結(jié)果進(jìn)行分析。4.1.4 負(fù)責(zé)報(bào)告單的打印、核對(duì)、登記與錄入等工作，簽發(fā)已核對(duì)的所有報(bào)告。4.1.5 做好菌種的保存

42、，對(duì)一些難得的菌株、標(biāo)準(zhǔn)菌株等要注意保存，并做好記錄。4.1.6 接收樣本：核對(duì)各樣本與化驗(yàn)單名是否一致，核查各送檢樣本是否符合要求，否則立即與病房聯(lián)系以便作出相應(yīng)的處理，如退單或重送樣本等，并做好聯(lián)系情況的記錄。4.1.7 樣本編號(hào)：對(duì)合格的樣本作出編號(hào)。4.1.8 普通培養(yǎng)樣本的接種選擇： 痰液、咽拭子分別接種：血平皿、麥康凱平皿； 尿液接種：取100l 接種血平皿、麥康凱平皿； 泌尿生殖道：血平板、麥康凱平板； 大便：SS 或中國(guó)蘭、血平板； 各種無(wú)菌體液、腦脊液、膿液等標(biāo)本：血平皿、麥康凱平皿，用增菌肉湯增菌； 衣原體、支原體培養(yǎng)+藥敏，按說(shuō)明書接種支原體專用培養(yǎng)基； 真菌培養(yǎng)，各種標(biāo)

43、本均接種沙保弱平皿和真菌斜面培養(yǎng)基； 所有標(biāo)本在接種的同時(shí)應(yīng)進(jìn)行涂片或?qū)ζ涑猎M(jìn)行革蘭或抗酸染色，并做相應(yīng)的記錄。 規(guī)定：臨床申請(qǐng)單未明確注明培養(yǎng)目的時(shí)，一律按普通培養(yǎng)進(jìn)行處理。標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后特殊培養(yǎng)標(biāo)本需在1 小時(shí)內(nèi)接種，普通培養(yǎng)標(biāo)本不得超過(guò)2 小時(shí)。4.1.9 培養(yǎng)：一般標(biāo)本接種后，平板應(yīng)置于35OC 培養(yǎng)箱培養(yǎng)，接種過(guò)腦脊液標(biāo)本、泌尿生殖道標(biāo)本的血平板還應(yīng)置于5%-10%CO2 環(huán)境中；結(jié)核培養(yǎng)置于37OC 培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每星期檢查兩次有否可疑菌落生長(zhǎng)。收到的普通血培養(yǎng)瓶(如AER)應(yīng)進(jìn)行瓶?jī)?nèi)氣壓平衡處理，厭氧培養(yǎng)瓶直接放入培養(yǎng)箱中。4.1.10 對(duì)新到崗的實(shí)習(xí)或進(jìn)修人員應(yīng)認(rèn)真交代本崗位

44、的一切事宜并且認(rèn)真作好帶教工作。4.1.11 厭氧培養(yǎng)應(yīng)接種血平皿或厭氧平皿置于厭氧袋中培養(yǎng)，同時(shí)接種BMP 進(jìn)行普通培養(yǎng)。4.1.12 標(biāo)本培養(yǎng)處理后幫助2 班將需要的各種標(biāo)本收集并滅菌處理。4.1.13 負(fù)責(zé)配制培養(yǎng)基，并做好記錄。5.1 崗位2 班（負(fù)責(zé)菌株鑒定與藥敏的分析、涂片檢查標(biāo)本的報(bào)告、室內(nèi)質(zhì)控等）。5.1.1 上班后首先核查各個(gè)培養(yǎng)箱、冰箱的工作溫度是否在設(shè)定的范圍內(nèi)，并做好記錄；檢查各種培養(yǎng)基及試劑的庫(kù)存量，做好需配制的培養(yǎng)基或需領(lǐng)出的試劑的記錄工作，對(duì)需購(gòu)買的試劑、平板、培養(yǎng)基、染色液等應(yīng)及時(shí)記錄并告訴室組長(zhǎng)，以便及時(shí)計(jì)劃報(bào)主任批準(zhǔn)。5.1.2 做好室內(nèi)常用實(shí)驗(yàn)試劑如觸酶、

45、凝固酶、氧化酶或蛋白胨水的質(zhì)量控制，并做好記錄。5.1.3 負(fù)責(zé)處理上日接種標(biāo)本的菌種鑒定與藥敏試驗(yàn)，觀察血液增菌培養(yǎng)瓶，如發(fā)現(xiàn)有細(xì)菌生長(zhǎng)，應(yīng)按三級(jí)報(bào)告制度處理。觀察培養(yǎng)平板，分析、挑取可疑菌落涂片革蘭染色，能上機(jī)的做好觸酶、凝固酶、氧化酶或接種蛋白胨水等相應(yīng)的檢查后上機(jī)，還不能上機(jī)或手工試驗(yàn)的則選用相應(yīng)的平板分純。用于鑒定或藥敏試驗(yàn)的菌落應(yīng)選取培養(yǎng)18-24 小時(shí)的純菌落進(jìn)行試驗(yàn)。5.1.4 對(duì)一些不適合用儀器檢測(cè)的細(xì)菌，改用手工簽定或用標(biāo)準(zhǔn)的K-B 法進(jìn)行藥敏。碰到異常的耐藥模式，如碰到耐萬(wàn)古霉素的葡萄球菌、糞腸球菌，耐泰能的大腸埃希菌、克雷伯菌屬、腸桿菌屬等報(bào)告時(shí)一定要慎重。遇到可疑多重

46、耐藥菌株時(shí)，加做特殊的藥敏紙片幫助鑒定。5.1.5 負(fù)責(zé)控感標(biāo)本的處理與報(bào)告，物體表面菌落計(jì)數(shù)標(biāo)本應(yīng)于收到標(biāo)本后2 小時(shí)內(nèi)處理，消毒液標(biāo)本應(yīng)于4 小時(shí)內(nèi)處理。處理方法按控感監(jiān)控標(biāo)本處理與報(bào)告進(jìn)行。5.1.6 涂片染色： 抗酸染色嚴(yán)格按照操作規(guī)程，胸腹水、尿液、腦脊液等標(biāo)本應(yīng)在5000 轉(zhuǎn)/分高速離心10 分鐘后，取沉淀涂厚片，自然干燥后固定，按要求染色后鏡檢。 G-雙球菌涂片，應(yīng)用滾動(dòng)式涂片法從波片一端涂向另一端，反復(fù)幾次，火焰固定后進(jìn)行革蘭氏染色。 腦脊液隱球菌涂片，應(yīng)快速離心后倒去上清液，沉淀涂片、加相應(yīng)的優(yōu)質(zhì)墨汁混勻后鏡檢。5.1.7 對(duì)新到崗的實(shí)習(xí)或進(jìn)修人員應(yīng)認(rèn)真交代本崗位的一切事宜并

47、且認(rèn)真作好帶教工作。6 注：崗位職責(zé)分開(kāi)是相對(duì)的，同事間需要互相協(xié)作，互相幫助，共同完成當(dāng)天的工作。如遇到三個(gè)人上班，則其中一個(gè)做好室內(nèi)日常記錄的檢查完善和控制感染標(biāo)本的處理工作。如遇一個(gè)人上班，則擔(dān)負(fù)1 崗位班、2 崗位班的所有工作。普通培養(yǎng)陰性操作程序1、仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn)，否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。2、標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告：1)拭子、分泌物標(biāo)本 標(biāo)本涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置35溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至7

48、2 小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。2)尿液標(biāo)本 取5ml 尿液,3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置35溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72 小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。3)引流液 標(biāo)本3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置35溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72 小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。4)痰液或咽

49、拭子標(biāo)本 無(wú)菌接種環(huán)可疑處采樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置35溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72 小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本 以無(wú)菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置35溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72 小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。6)留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本 標(biāo)本置無(wú)菌管中，加入增菌液2ml，35溫箱培養(yǎng)48 小時(shí)觀察培養(yǎng)液有無(wú)混濁，采樣涂于普通血平板、麥康凱平

50、板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置35溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72 小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。真菌培養(yǎng)陰性操作程序1、仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn)，否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。2、標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告：1)拭子、分泌物標(biāo)本 標(biāo)本涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置25溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。2)尿液標(biāo)本 取5ml 尿液

51、,3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置25溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。3)引流液 標(biāo)本3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置25溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。4)痰液或咽拭子標(biāo)本 無(wú)菌接種環(huán)可疑處采樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置25溫箱培

52、養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本 以無(wú)菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置25溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。6)留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本 標(biāo)本置無(wú)菌管中，加入增菌液2ml，35溫箱培養(yǎng)48 小時(shí)觀察培養(yǎng)液有無(wú)混濁，采樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置25溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第

53、4 天未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌?？琉B(yǎng)菌培養(yǎng)陰性操作程序1、仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn)，否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。2、標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告：1)拭子、分泌物標(biāo)本 標(biāo)本涂于普通血瓊脂平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫線分離后置C02 缸，35溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5 天未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。2)尿液標(biāo)本 取5ml 尿液,3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始線，再畫線分離后置C02 缸，35溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5 天未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。3)引流液 標(biāo)本3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀