如何正確采集病原微生物標本教學(xué)課件

1、 1.提高病原微生物的送檢率，強調(diào)在使用抗 生素之前采集標本； 2.提高送檢標本的質(zhì)量； 3.提高實驗室的檢測能力。 期待明年的耐藥數(shù)據(jù)能真正反映我院病原 菌的分布和耐藥情況，可以用作經(jīng)驗選藥 的依據(jù)。 實驗前因素實驗前因素實驗室因素實驗室因素 實驗后因素實驗后因素 血液和骨髓的采集血液和骨髓的采集; 痰標本的采集痰標本的采集; 咽拭子標本的采集咽拭子標本的采集; 尿液標本的采集尿液標本的采集; 膿、創(chuàng)傷感染標本的采集膿、創(chuàng)傷感染標本的采集; 穿刺液標本的采集穿刺液標本的采集; 糞便標本的采集糞便標本的采集; 采血的時機？ 采血的方法？ 正確的采血量應(yīng)該是多少? 血培養(yǎng)陰/陽性有什么臨床意義？

2、 n有不明原因的發(fā)熱、體溫過低等癥狀； n懷疑有菌血癥或膿毒癥如休克、寒顫等; n嚴重的局部感染； n呼吸頻率加快等。 1.有發(fā)熱等癥狀時； 2.在使用抗生素的情況下； 3.懷疑有亞急性心內(nèi)膜炎時。 濃度 1：細菌 （溫度）2：內(nèi)毒素 3：體溫 1 2 3 時間 女性患者，懷疑為亞急性心內(nèi)膜炎 入院，入院后當(dāng)天連續(xù)送三次血培養(yǎng)均 為陰性，但臨床上有明顯的膿毒血癥癥 狀。微生物室注意到三次血培養(yǎng)的抽血 時間為4pm,6pm和9pm，與主管醫(yī)生溝 通后，建議兩小時內(nèi)連續(xù)送三次血培養(yǎng)。 結(jié)果第二批血培養(yǎng)中有二次為陽性，均 培養(yǎng)出草綠色鏈球菌。 懷疑有亞急性心內(nèi)膜炎或?qū)Ч芟嚓P(guān)性菌血 癥時： 12小時內(nèi)

3、采集三份血標本 1.如果用注射器，應(yīng)先采集厭氧瓶；如果用真菌采血的軟管， 應(yīng)先采集需氧瓶； 采血時的皮膚消毒推薦采用三步消毒法： 1 首先用70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30秒鐘以上。 2 然后用一根碘酊或碘伏棉簽消毒皮膚（1%2%碘酊30 秒或10%碘伏消毒60秒），從穿刺點向外以1.5cm2cm直 徑畫圈進行消毒。 3 最后用70%酒精脫碘。 注意對碘過敏的患者，只能用70%酒精消毒，消毒60秒鐘， 待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血。 血養(yǎng)瓶消毒程序： 1 用70%酒精或碘溶液(不要使用碘)消毒 血培養(yǎng)瓶橡皮塞子。 2 酒精作用約60秒。 3 在血液注入血培養(yǎng)瓶之前,用無菌紗布 清除橡皮塞子

4、表面剩余的酒精,然后注入血 液。 1.推薦24h內(nèi)連續(xù)采集三次血培養(yǎng)標本； 一次血培養(yǎng)約可以檢出72的血流感染，二次 約可檢出約93，三次約可檢出約97； 2.如果培養(yǎng)48h以后為陰性，若臨床懷疑為菌血 癥的應(yīng)在24h內(nèi)再連續(xù)采集三次血培養(yǎng)標本； 3.不主張每天采集血培養(yǎng)標本。 1.培養(yǎng)出革蘭陰性菌、金黃色葡萄球菌、 腸球菌等時，多數(shù)可以確認為病原菌； 2.培養(yǎng)出凝固酶陰性葡萄球菌、草綠色 鏈球菌、芽胞桿菌等時，感染？污染？ 需多次多部位/天 采血。 24小時內(nèi)連續(xù)采集三次血培養(yǎng) 標本。 1.采血的量不太準確，很多培養(yǎng)采血量遠遠超 量； 2.采血的時機不夠準確，采血時機與體溫變化 的關(guān)系不太熟

5、悉； 3.采集標本的次數(shù)和頻率不太準確，很多醫(yī)生 喜歡每天采集一次或僅采集一次； 1.疑為細菌性或真菌性骨髓炎的患者； 2.疑為傷寒感染的患者； 要求采集肺深部的痰液，不要唾液。一般 采用自然咳痰法，但以氣管鏡采集法標本 質(zhì)量最好。 自然咳痰法 ； 氣管鏡采集法； 小兒取痰法； (4) 導(dǎo)管尖送檢； 所有病人的下呼吸道標本應(yīng)在采集后立即送至微生 物室，并于1小時內(nèi)接種 室溫下放置1h會降低肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌 的分離率而定植于上呼吸道的非致病菌則會過度 生長 下呼吸道標本勿放冰箱或運輸時勿置于冰塊中 痰肉眼觀察: 記錄標本外觀 唾液、帶血、粘液樣、水樣、膿性的、粘液 膿性、膿性粘液樣 顯微

6、鏡檢查：取膿性部分涂在玻片上 作革蘭染色. 低倍視野下看涂片，記錄5個視野下 平均細胞數(shù)。 分類 WBC 鱗狀上皮細胞 6 25 25 25 10-25 3 25 25 2 10-25 25 1 25 分類中13類不做培養(yǎng)，要求重新留取標本； 4、5類為合格標本；6類為氣管穿刺液時，如未見白 細胞，而鱗狀上皮細胞10/低倍，亦應(yīng)重新留取標本。 1.痰標本的合格程度偏低，全院痰標本的合 格率不到40%； 2.標本的轉(zhuǎn)運時間過長，很多標本送到實驗 室已經(jīng)超過2小時。 標本采集應(yīng)在用藥前，最好在清晨，囑患 者用清水漱口，由檢查者將舌向外拉，使 懸雍垂向外牽引，將咽拭子超過舌根到達 咽后壁或懸雍垂的后

7、側(cè)，在咽部肉眼見明 顯發(fā)紅或有假膜處局部反復(fù)涂抹棉拭(注意 不要碰著口腔粘膜)，放入無菌試管內(nèi)立即 送檢。 中段尿采集法 導(dǎo)尿法 膀胱穿刺取尿法 留尿法 1.隨機尿代替中段尿送檢，特別是門診 病人； 2.部份標本存在污染情況； 3.部份插管患者采集了尿袋中的尿液； 4.標本中的轉(zhuǎn)運時間過長。 首先用無菌生理鹽水拭凈病灶表面的污染雜菌。 對已破潰的膿腫用無菌的棉拭子取深部的膿液和 分泌物；未破潰的膿腫消毒皮膚后，用無菌注射 器抽取膿液及分泌物立即送檢。如深部膿腫在送 需氧培養(yǎng)的同時應(yīng)考慮送厭氧培養(yǎng)，厭氧培養(yǎng)標 本應(yīng)隔絕空氣立即送檢。當(dāng)創(chuàng)傷出血時，敷用藥 物2h以內(nèi)及燒傷在12h內(nèi)不應(yīng)采集標本，此

8、時獲 得陽性結(jié)果的機會很少。 應(yīng)在患者用藥之前或停藥12d后進行穿 刺，標本應(yīng)立即送檢或保存于4冰箱。 腦脊液標本應(yīng)保溫（2537），抽2ml 直接注入小兒瓶中,同時再另抽12ml于無 菌容器同時送檢并立即送檢。 自然排便采集法自然排便采集法 直腸拭子采集法直腸拭子采集法 有腹瀉的病人，在送培養(yǎng)標本的同時可以 送細菌涂片檢查。抗生素相關(guān)性腹瀉性腹 瀉，培養(yǎng)是陰性，但涂片檢查卻可以看到 細菌比例失調(diào)，涂片臨床意義大于培養(yǎng)。 1.培養(yǎng)陽性的分離菌不一定是真的病原 菌，特別從有菌部位來的，如痰標本； 2.無菌部位培養(yǎng)出來的病原菌應(yīng)當(dāng)連續(xù) 監(jiān)測，若病原菌發(fā)生改變或治療效果不 佳時應(yīng)考慮更換抗生素； 3.細菌的耐藥性在治療過程中可以會發(fā) 生改變，要注意觀察是否有耐藥性的變 遷。 醫(yī)院感染(nosocomial infections)：也稱為 醫(yī)院內(nèi)感染，是指在患者在住院期間獲得 的感染。 醫(yī)院感染的基本