節(jié) 熒光分析法PPT學習教案

1、會計學1 節(jié)節(jié) 熒光分析法熒光分析法 第1頁/共38頁 第2頁/共38頁 第3頁/共38頁 第4頁/共38頁 第5頁/共38頁 第6頁/共38頁 光吸收過程 失活過程 發(fā)光失活 分子間能量轉移失活 非輻射失活 熒光 磷光 振動馳豫 內(nèi)轉換 外轉換 系間竄躍 第7頁/共38頁 hc hc hE c c 1 ；， 射線X射線 紫外光 可見光 紅外光微波無線電波 /nm 0.01 10 400 760 5105 8105MHz 波長 頻率 短 高 長 低 第8頁/共38頁 吸收 熒光 磷光 激發(fā)單重態(tài)激發(fā)三重態(tài) 內(nèi)轉換振動馳豫 系間竄躍 振動馳豫 外轉換 基態(tài) 第9頁/共38頁 第10頁/共38頁

2、第11頁/共38頁 第12頁/共38頁 圖11-3蒽的激發(fā)光譜和熒光光譜 第13頁/共38頁 圖11-4 蒽(乙醇)的激發(fā)光譜和不同激發(fā)波長下的熒光發(fā)射光譜 /nm 第14頁/共38頁 吸收激發(fā)光的光子數(shù) 發(fā)射熒光的光子數(shù) 熒光產(chǎn)率 第15頁/共38頁 第16頁/共38頁 第17頁/共38頁 femex (nm)/(nm)/比較： 苯 205/278/0.11 萘 286/321/0.29 蒽 356/404/0.36 CH2OCOCH3 維生素A ex327nm；em510nm 第18頁/共38頁 聯(lián)苯 f0.2 芴f1.0 N OH N O Mg 8-羥基喹啉8-羥基喹啉鎂 第19頁/共3

3、8頁 1-二甲胺基萘-7-磺酸鹽 1-二甲胺基萘-8-磺酸鹽 f0.75 f0.03 SO3Na N H3C CH3 SO3Na N H3C CH3 第20頁/共38頁 第21頁/共38頁 表苯環(huán)上取代基對熒光的影響 化合物分子式F/nm相對熒光強度 苯C6H6270-31010 甲苯C6H5CH3270-32017 丙基苯C6H5C3H7270-32017 氟代苯C6H5F270-32010 氯代苯C6H5Cl275-3457 溴代苯C6H5Br290-3805 碘代苯C6H5I-0 苯酚C6H5OH285-36518 苯酚陰離子C6H5O-310-40010 甲氧基苯C6H5OCH3285

4、-34520 苯胺C6H5NH2310-40520 苯胺正離子C6H5NH3+-0 苯甲酸C6H5COOH310-3903 腈基苯C6H5CN280-36020 硝基苯C6H5NO2-0 第22頁/共38頁 第23頁/共38頁 NH3 NH2 NH OH H OH H pH值： 13 存在形式：離子 分子 離 子 有無熒光：無 藍色熒光 無 0 20 10 18 NHHC NHHC OHC OHHC 3562565656 光強度 相對熒 ： 第24頁/共38頁 第25頁/共38頁 H3C O N N CH H CH2 HO H H H2SO4H2O1/2 例如：硫酸奎寧在不同波長激發(fā)下的熒光光

5、譜 和散射光譜 第26頁/共38頁 32 0 448 448 36 0 32 0 35 0 40 0 35 0 激發(fā)350nm 硫酸奎寧 激發(fā)320nm 硫酸奎寧 激發(fā)350nm 0.1mol/LH2SO4 激發(fā)320nm 0.1mol/LH2SO4 強 度 (a ) 強 度 (b ) /nm /nm /nm /nm 圖11-6硫酸奎寧在不同波長激發(fā)下的熒光光譜和散射光譜 第27頁/共38頁 第28頁/共38頁 KcclIKF cl eIKF eII K IIKF cl cl 0 303. 2 0 303. 2 0 0 3 . 2 05. 0 1 Beer 時，上式簡化為當 定律 率為常數(shù)，取

6、決于熒光效 0 I I F 熒光分析定量依據(jù)： 熒光強度F與濃度c 成線性關系。 第29頁/共38頁 s s x x x s x s x ss c FF FF c c c FF FF cFF cFF 0 0 0 0 00 0 第30頁/共38頁 第31頁/共38頁 熒光分光光度計方框圖 光源 第一 單色 器 第二 單色器 檢測 器 放大 記錄器 I 0 I F 樣品 吸收池 第32頁/共38頁 A 光電熒光計 第一濾光片 第二濾光片 電表 光電管 樣品池 狹縫 汞弧燈 樣品池 檢測器 光源 B 熒光分光光度計 第33頁/共38頁 SO3Na N=N OH HO ON 8-羥基喹啉 石榴茜素R N OH 第34頁/共38頁 O O O N O O HO