論蔗糖合成甜味劑——三氯蔗糖的測(cè)定方法

1、論蔗糖合成甜味劑三氯蔗糖的測(cè)定方法 摘要:采用高效液相色譜法，sugar-paktm1色譜柱，以二次水為流動(dòng)相，示差折光儀為檢測(cè)器，外標(biāo)法進(jìn)行定量分析，測(cè)定三氯蔗糖含量，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.11(n=5)，線性相關(guān)系數(shù)為0.99990，最小檢測(cè)濃度為0.2µg/ml。該方法準(zhǔn)確、可靠且無毒，是測(cè)定三氯蔗糖含量的有效方法。 關(guān)鍵詞:三氯蔗糖，高效液相色譜法，sugar-paktm1色譜柱 作者簡(jiǎn)介：王桂華，男，28歲：研究生學(xué)歷，在廣州甘蔗糖業(yè)研究所工作，研究方向：糖品檢測(cè)和標(biāo)準(zhǔn)化。 三氯蔗糖是以蔗糖為原料經(jīng)氯代而制得的一種非營(yíng)養(yǎng)型強(qiáng)力甜味劑，其化學(xué)名4，1，6三氯4，1，6三脫氧半乳

2、型蔗糖。目前三氯蔗糖已廣泛應(yīng)用于飲料、口香糖、乳制品、蜜餞、糖漿、面包、糕點(diǎn)、冰淇淋、果醬、果凍、布丁等加工食品中。另外，三氯蔗糖是一種新型非營(yíng)養(yǎng)性甜味劑1，2，是肥胖癥、心血管病和糖尿病患者理想的食品添加劑，因此它在保健食品和醫(yī)藥中的應(yīng)用不斷擴(kuò)大。我國(guó)衛(wèi)生部在1997年頒發(fā)的食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，可在飲料、醬菜、復(fù)合調(diào)味劑、配制酒、冰淇淋、糕點(diǎn)、水果罐頭、餅干及面包中使用該產(chǎn)品，允許添加量為0.25g/kg，在改性口香糖、蜜餞中的添加量為1.5g/kg。 由于目前食品添加劑三氯蔗糖含量的檢測(cè)無標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法,相關(guān)的報(bào)導(dǎo)較少。我們用waters高效液相色譜儀，以sugar-paktm

3、1為色譜柱,水為流動(dòng)相，示差折光檢測(cè)器檢測(cè),外標(biāo)法進(jìn)行定量分析,建立了三氯蔗糖的含量測(cè)定方法,該方法簡(jiǎn)便，可靠且無毒，分離效果好,適用于生產(chǎn)過程及其應(yīng)用廠家的監(jiān)測(cè)。 1實(shí)驗(yàn)部分 1.1儀器和試劑 waters1525hplc,waters2414示差折光檢測(cè)器,watersempower色譜管理軟件；二次水（0.45µm水相濾膜過濾），三氯蔗糖標(biāo)樣（美國(guó)sigma公司）。 1.2色譜條件 色譜柱：waterssugar-paktm1（6.5300mm）；流動(dòng)相：二次水（0.45µm水相濾膜過濾）；流速：0.5ml/min；進(jìn)樣量：10µl；柱溫：90；檢測(cè)器

4、：2414示差折光檢測(cè)器。 1.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 準(zhǔn)確稱取約50mg的三氯蔗糖標(biāo)準(zhǔn)品于50ml容量瓶中，用二次水溶解并定容，所得溶液用0.45µm水相濾膜過濾，濾液備用，濃度為1000µg/ml。 1.4樣品準(zhǔn)備 分別稱取樣品1、樣品2、樣品3約1g的樣品于3個(gè)25ml燒杯中,用二次水溶解，處理后移入50ml容量瓶中，并定容,試液用0.45µm水相膜過濾,濾液備用。 2結(jié)果 2.1色譜圖 在上述色譜條件下，三氯蔗糖在色譜柱上的保留時(shí)間是11.79min。圖1為三氯蔗糖標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖。 2.2工作曲線的繪制 精密配制三氯蔗糖系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，其含量依次為5.0、1

5、0.0、15.0、20.0、40.0µg/ml。按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定,以峰面積a對(duì)濃度c（µg/ml）作線性回歸方程，相關(guān)系數(shù)r為0.99990（n=5），最小檢測(cè)濃度為0.2µg/ml。 圖1三氯蔗糖色譜圖 2.3精密度試驗(yàn) 精確吸取樣品1濾液5份，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定,三氯蔗糖測(cè)定結(jié)果的rsd為0.11。 2.4回收率試驗(yàn) 將樣品（三氯蔗糖測(cè)定含量為50.80）配制成1µg/ml的溶液，分別與0.5µg/ml、1.0µg/ml、1.5µg/ml三氯蔗糖標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液，（各兩份）等量混合后，在上述色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果如表一所示。 表一三氯蔗糖樣品回收率試驗(yàn) 樣品 原有量（mg） 加入量（mg） 加標(biāo)后測(cè)得量（mg） 回收率（） 平均回收率（） 1 0.508 0.500 1.009 100.2 100.5 0.508 0.500 1.006 99.6 2 0.508 1.000 1.514 100.6 0.508 1.000 1.503 99.5 3 0.508 1.500 2.021 100.9 0.508 1.500 2.000 99.5 3討論 結(jié)果表明，采用高效液相色譜法，用sugar-paktm1色譜柱，以二次水為流動(dòng)相，示差折光儀為檢測(cè)器，外標(biāo)法進(jìn)行定量分析，測(cè)定三氯蔗糖含