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文檔簡介

1、選修一生物技術(shù)實踐知識點(diǎn)總結(jié)專題一1、發(fā)酵:利用微生物或其他生物的細(xì)胞在有氧或無氧條件下繁殖或積累其代謝產(chǎn)物的過程。類型:(1)根據(jù)是否需要氧氣分為:需版發(fā)酵和厭氧發(fā)酵。(2)根據(jù)產(chǎn)生的產(chǎn)物可分為:酒精發(fā)酵、乳酸發(fā)酵、醋酸發(fā)酵等酵母菌是兼性厭氧微生物。在有氧條件下,酵母菌進(jìn)行有氧呼吸,大量繁殖 c6h12o64-6o2-6co24-6h2o在無氧條件下,酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵c6h12o6-2c2h5oh+2co2酵母菌有氧呼吸時,產(chǎn)生能量多,可大量繁殖;無氧呼吸時,產(chǎn)生能量少,僅能滿足自身代謝,基本不繁殖;所以利用酵母菌進(jìn)行工業(yè)生產(chǎn)時先進(jìn)行通氣再密封。2、20c左右最適宜酵母菌繁殖酒精發(fā)酵時一

2、般將溫度控制在18。02593、在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌. 在發(fā)酵過程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅 色.在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因 無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。4、醋酸菌是一種好氧細(xì)菌。當(dāng)氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成 醋酸;當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?再將乙醛變?yōu)榇姿?。c2h5oh + o2-ch3cooh+h2o5、醋酸菌最適生長溫度為3035(。6、酒精檢驗:果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生,可以用重銘酸鉀來檢驗。在酸性條件下,重絡(luò)酸鉀與酒精反

3、應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。7、裝置各部位的作用充氣口:在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進(jìn)行充氣。排氣口:排出酒精發(fā)酵時產(chǎn)生的co?。出料口:是用來取樣的。與瓶身相連的長而彎曲的膠管:加水后防止空氣中微生物的污 染。該裝置的使用方法:使用該裝置制酒時,應(yīng)該關(guān)閉充氣口;留1/3的空間的目的是防 止發(fā)酵時汁液益出。制醋時,應(yīng)將充氣口連接氣泵,輸入氧氣(無菌空氣) 8、過程|挑選新鮮的水果(如葡萄)一沖洗一榨汁一酒精發(fā)酵一醋酸9、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵,如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用 的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。10、原理:毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨 基酸;脂肪酶可將脂

4、肪水解為甘油和脂肪酸。11、制作泡菜所用微生物是迪董,乳酸菌是因氨細(xì)菌。在無氧條件下,將葡萄糖 分解為乳酸o常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產(chǎn)酸 9 / 7奶。12、亞硝酸鹽檢測:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng) 后,與n-1一賽基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅魚螂匚專題二1、培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長,可以形成肉眼可見 的菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。2、按照培養(yǎng)基的用途,可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物

5、生長,同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,稱做選擇培養(yǎng)基。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點(diǎn),在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品(如剛 果紅)配制而成的,用以鑒別不同類別的微生物。3、培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、碳,氮源和無機(jī)鹽o4、培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對ph、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以與氧氣的要求。5、無菌技術(shù):獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,要注意以下幾個方面 (選修一教材p15)6、消毒是指使用較為退和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(丕包括芽捂和拖子)o消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法還有化學(xué)藥劑消毒(如酒 精、氯氣、石炭酸等)、精外線消毒。7、滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因

6、素殺死物體內(nèi)外所直的微生物,包括芽袍和苑子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。8、微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。9、尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,尿素并丕能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì) 菌將尿素分解成氨之后,才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素,是因為 他們能合成典。10、纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即ci酶、cx酶

7、和葡 萄糖昔酶,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素最終被水解成黃整糖,為微生物的生長提供營養(yǎng)。11分離分解纖維素的微生物的實驗流程土壤取樣一選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定)一 梯度稀釋一將樣品涂布到鑒別(剛果紅)纖維素分解菌的培養(yǎng)基上一挑選產(chǎn)生透明圈 的菌落12、剛果紅(選修一 p28)15 / 7專題三1、植物組織培養(yǎng)原理:植物細(xì)胞的全能性。由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程,稱為植物細(xì)胞的脫分化,或者叫 做去分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又可以重新分化成根或芽等器官, 這個過程叫做再分化。再分化形成的試管

8、苗,移栽到地里,可以發(fā)育成完整的植物 體。2、植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基是ms培養(yǎng)基,其中含有的大元素,微工元素,直 機(jī)物等。在配制好的ms培養(yǎng)基中,常常需要添加植物激素。接種前培養(yǎng)基需要用 高壓蒸汽滅菌,外植體需要消毒(常用酒精和氯化汞)消毒時既要考慮藥劑的消毒效 果,又要考慮植物的耐受性。3、植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激 素。在生長素存在的情況下,細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)趨勢。使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先生長素, 后細(xì)胞分裂素有利于分裂但不 分化先細(xì)胞分裂 素,后生長素細(xì)胞既分裂也分 化同時使用分化頻率提高生長素/細(xì)胞分裂素比值與結(jié) 果比值高時促根分化,抑制芽形

9、成比值低時促芽分化, 抑制根形成比值適中促進(jìn)愈傷組織生長行的培 進(jìn)花織 4.菊組養(yǎng),每日用日光燈照射12h o5、被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小抱子四分體時期、單核期(花藥離體培養(yǎng)選擇該時花藥中的花粉脫分化胚狀體再分化w-期)和雙核 期等階段。生根一移栽花藥中的花粉脫分化意傷組織再分化從芽6、通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株(即單倍體植株)一般有兩種途徑,這兩種途徑之間并沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類與其濃度配比 (見第3條表格)。7、不同植物的誘導(dǎo)成功率很不相同。親本的生理狀況:碰星期時的花藥比后期的更容易產(chǎn)生花粉植株,選擇月季的初花期。合適的花粉發(fā)育時期:一般來說,在單核期靠邊期,花藥培

10、養(yǎng)成功率最高。花蕾:選擇完全未開放的花蕾8、選擇花藥時,一般要通過饋檢來確定其中的花粉是否處于單核期。確定花粉發(fā)育時期的最常用的方法是讖酸淮紅法,花粉細(xì)胞核染成紅色。某些植物的花粉細(xì)胞核不 易著色,需采用焙花青-格磯法,這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色9、培養(yǎng)過程不需要光照,幼小植株形成后才需要光照。專題四1、果膠是植物細(xì)胞壁以與胞間層的主要組成成分之一,不溶于水,在果汁加工中不 僅會影響出汁率還會使果汁渾濁。2、果膠酶是一類酶的總稱,包括多聚半乳糖醛酸酶,果膠分解酶和果膠酯酶等。果膠酶能夠分解果膠,瓦解植物的細(xì)胞壁與胞間層使榨取果汁變得更容易,也使能渾濁的果汁變得澄清。3、酶的活性與影響酶活

11、性的因素(參考必修一 p78-85注意實驗設(shè)計的一般原則,注意自變量、因變量、無關(guān)變量。選修一 p43-44)4、探討加醯洗衣粉的洗劑效果(1)加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉,目前常用的酶制劑有四類:蛋白醯、脂肪和纖維素牌,其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性強(qiáng)白酹和堿性脂肪絡(luò)加酶洗衣粉可以降低表面活性劑和三聚磷酸鈉的用量,使洗滌劑朝低磷無磷方向 發(fā)展,減少對環(huán)境的污染。4、酵母細(xì)胞的固定化(1)使用固定化酶技術(shù),將這種酶固定在一種顆粒狀的載體上,再將這些酶顆粒裝到 一個反應(yīng)柱內(nèi),柱子底端裝上分布著許多小孔的篩板。障顆粒無法通過篩板的小孔, 而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。反應(yīng)柱能連續(xù)使用半年,大

12、大降低了生產(chǎn)成本,提高了 果糖的產(chǎn)和質(zhì)(2)固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技 術(shù),包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。酸更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法 固定,而細(xì)胞多采用包埋法固定化。固定化酶優(yōu)點(diǎn):髓能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,還可以被反復(fù)利用。固定化細(xì)胞優(yōu)點(diǎn):成本更低,操作更容易,可以催化一系列的化學(xué)反應(yīng)。專題五提取生物大分子的基本思路:是選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或 化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。一、dna的粗提取1、原理:(1)思路:dna與rna、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差 異,提取dna去除其它雜質(zhì)。(2) dna的溶解性:

13、dna和蛋白質(zhì)等其它成分在不同的nacl溶液中溶解度不 同,利用這一特點(diǎn),選用適當(dāng)?shù)臐舛染湍苁筪na充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或 者相反,以達(dá)到分離目的。(3) dna對酶、高溫和洗滌劑的耐受性原理(選修一 p54)2、dna的鑒定:在沸水浴的條件下,dna與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色。3、過程(選修一教材p55-p56)二、多聚鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段1. pcr全稱為多聚鏈?zhǔn)椒磻?yīng),它是指一種體外迅速擴(kuò)增dna片段的技術(shù) 的實驗技 術(shù)。2. pcr擴(kuò)增是在pcr自動擴(kuò)增儀中進(jìn)行的,具體反應(yīng)過程包括3個反應(yīng)步驟即變 性,復(fù)性,和延伸。3. pcr體外擴(kuò)增dna的過程類似細(xì)胞內(nèi)dna的復(fù)制的過程,兩者都需要

14、dna模 板,引物,四種脫物核昔酸,dna聚合酶都需要能所不同的是體內(nèi)解鏈?zhǔn)强?dna聚合酶,體外解鏈?zhǔn)强孔冃?,引物是一小段dna或rna,它能與dna母鏈 的一段堿基序列互補(bǔ)配對三、血紅蛋白的提取和分離蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì):形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和 力等千差萬別,由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。1、凝膠色譜法(分配色譜法):(1)原理:是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法,所用的凝膠實際上是一些微小的多孔性球體,分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)分子通過多孔凝膠顆粒的間隙,路程 短,流動快;分子量小的蛋白質(zhì)分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長,流動慢。相對 分子質(zhì)量不的蛋白質(zhì)分子因此得

15、以分離。(2)分離過程:混合物上柱一洗脫一大分子流動快、小分子流動慢一收集大分子一收集小分子(3)作用:分離蛋白質(zhì),測定生物大分子分子量,蛋白質(zhì)的脫鹽等。2、凝膠電泳法:(1)原理:許多重要的生物大分子如蛋白質(zhì)、核酸等,具有可解離的基團(tuán),在一定的ph下,這些基團(tuán)會帶上正電或負(fù)電。在電場的作用下這此帶電分子會向著與其所 帶電荷相反的電極移動。電泳利用了待分離樣品中不同蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)、電、 形狀和大小不同,在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同,導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在 電場中的運(yùn)動方向和運(yùn)動速度不同。(2)分離方法:瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds)。(3)分離過程:在一定ph下,使蛋白

16、質(zhì)基團(tuán)帶上正電或負(fù)電;加入帶負(fù)電荷多的 sds,形成“蛋白質(zhì)一sds復(fù)合物”,使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小。專題六1、植物芳香油的提取方法有蒸蝕、壓榨和萃取。2、水蒸氣蒸僧法是植物芳香油提取的常用方法。它的原理是利用水包將揮發(fā)性較 強(qiáng)的芳香油攜帶出來形成油水混合物,冷卻后,混合物又會重新分出油層和水層???分為水中蒸儲、水上蒸松、水氣蒸溜。有些原料不適宜于水中蒸慎,如柑橘、檸檬等 易焦糊,有效成分容易水解。通常用壓榨法。萃取法是將粉碎、干煤的植物原料用有 機(jī)溶劑浸泡,使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中的方法。芳香油溶解于有機(jī)溶劑后,只需蒸 發(fā)出有機(jī)溶劑,就可以獲得純凈的植物芳香油。有機(jī)溶劑必須事先精

17、制,除去雜質(zhì), 否則會影響芳香油的品質(zhì)3、玫瑰精油的提取過程:玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,能隨水蒸汽一同蒸 ,可用水汽蒸儲法和萃取法提取。用于提煉玫瑰精油的玫瑰花要在花開的盛花期采 收,在此階段花朵含油最高。加入nacl:使油水混合物中油和水的分離,可用分液漏斗分商油層和水層。無水naso/吸收油層中殘留的水分。4、橘皮精油的提取:橘皮精油的主要成分是檸檬烯,由于橘皮精油的有效成分在用 水蒸汽蒸僧時會發(fā)生部分水解,使用水中蒸僧法又會產(chǎn)生原料含糊的問題,所以一般用壓柞法。操作流程見(選修一 p74)石灰水:能夠破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防止壓榨時滑 脫,提高出油率。5、胡蘿卜素的提取見(選修一 p77-79)胡蘿卜素化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,不溶于水,微溶于酒精易溶 于石油醮等有機(jī)溶劑,因此可用萃取法提取。萃取的效率 主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量,同量受到原料顆粒的 大小,緊密程度、含水量、萃取的溫度和時間等的影響。過濾:除去萃取液中的不

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