凝集反應(yīng)匯編

1、人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社第十三章第十三章 凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社凝集反應(yīng)概念、特點(diǎn)及類型。凝集反應(yīng)概念、特點(diǎn)及類型。直接凝集反應(yīng)原理、方法類型及臨床應(yīng)用。直接凝集反應(yīng)原理、方法類型及臨床應(yīng)用。間接凝集反應(yīng)原理、方法類型及臨床應(yīng)用。間接凝集反應(yīng)原理、方法類型及臨床應(yīng)用?？骨虻鞍自囼?yàn)原理、方法類型及臨床應(yīng)用。抗球蛋白試驗(yàn)原理、方法類型及臨床應(yīng)用。冷凝集試驗(yàn)的原理和臨床應(yīng)用。冷凝集試驗(yàn)的原理和臨床應(yīng)用。本章要點(diǎn)本章要點(diǎn)人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社返回總目錄返回總目錄目錄目錄 概述概述1第一節(jié)第一節(jié) 直接凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)2第二節(jié)第二節(jié) 間接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)3第三節(jié)第三

2、節(jié) 抗球蛋白試驗(yàn)抗球蛋白試驗(yàn)4第四節(jié)第四節(jié) 冷凝集試驗(yàn)冷凝集試驗(yàn)5小結(jié)小結(jié)6人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社 早在早在18961896年，年，WidalWidal就利用傷寒病人的血清與傷寒就利用傷寒病人的血清與傷寒桿菌發(fā)生特異性凝集的現(xiàn)象，有效地診斷傷寒病。桿菌發(fā)生特異性凝集的現(xiàn)象，有效地診斷傷寒病。 至至19031903年，年，LandsteinerLandsteiner在特異性血凝現(xiàn)象的基礎(chǔ)在特異性血凝現(xiàn)象的基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)了人類上發(fā)現(xiàn)了人類ABOABO血型，并于血型，并于19301930年獲得了諾貝爾醫(yī)年獲得了諾貝爾醫(yī)學(xué)獎。學(xué)獎。 概述概述人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社一、概念一、概念 細(xì)菌、紅細(xì)胞

3、等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后，在適細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后，在適當(dāng)電解質(zhì)存在下，形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。當(dāng)電解質(zhì)存在下，形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。 顆粒性抗原還包括可溶性抗原（或抗體）與載體顆粒顆粒性抗原還包括可溶性抗原（或抗體）與載體顆粒(O(O型人紅細(xì)胞、綿羊紅細(xì)胞、聚苯乙烯膠乳、炭粒等型人紅細(xì)胞、綿羊紅細(xì)胞、聚苯乙烯膠乳、炭粒等) )結(jié)合成的致敏顆粒。結(jié)合成的致敏顆粒。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社二、特點(diǎn)二、特點(diǎn)1.1.抗原分子大，介質(zhì)中成均勻的顆粒懸液?？乖肿哟螅橘|(zhì)中成均勻的顆粒懸液。2.2.抗原抗體復(fù)合物以抗原為主?？乖贵w復(fù)合物以抗原為主。3.3.試驗(yàn)時稀釋抗體。

4、試驗(yàn)時稀釋抗體。4.4.效價(jià)報(bào)告抗體的稀釋度。效價(jià)報(bào)告抗體的稀釋度。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社三、主要技術(shù)類型三、主要技術(shù)類型人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社第一節(jié)第一節(jié) 直接凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng) 細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒抗原，在適當(dāng)電解質(zhì)參與下可細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆?？乖谶m當(dāng)電解質(zhì)參與下可直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集，稱為直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集，稱為直接凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)（direct agglutinationdirect agglutination）。）。 凝集反應(yīng)中的抗原稱為凝集原（凝集反應(yīng)中的抗原稱為凝集原（agglutinogenagglutinogen），），抗體稱為凝集素（抗體稱為

5、凝集素（agglutininagglutinin）。）。 常用的凝集試驗(yàn)有玻片法和試管法兩種。常用的凝集試驗(yàn)有玻片法和試管法兩種。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社一、玻片凝集試驗(yàn)一、玻片凝集試驗(yàn)+ +人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社 臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用: :1.1.菌種鑒定菌種鑒定2.2.血清學(xué)分型血清學(xué)分型3.3.血型鑒定血型鑒定 方法評價(jià)方法評價(jià): :1.1.操作簡單、快速操作簡單、快速2.2.敏感度低敏感度低3.3.定性檢測定性檢測人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社 二、試管凝集試驗(yàn)二、試管凝集試驗(yàn) 在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可

6、見的凝集現(xiàn)象。的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社 為半定量試驗(yàn)方法，在微生物學(xué)檢驗(yàn)中常用已知菌為半定量試驗(yàn)方法，在微生物學(xué)檢驗(yàn)中常用已知菌液與一系列稀釋的受檢血清混合，保溫后觀察每管液與一系列稀釋的受檢血清混合，保溫后觀察每管內(nèi)抗原凝集程度，通常以產(chǎn)生明顯凝集現(xiàn)象的最高內(nèi)抗原凝集程度，通常以產(chǎn)生明顯凝集現(xiàn)象的最高稀釋倍數(shù)作為血清中抗體的效價(jià)，亦稱為滴度。稀釋倍數(shù)作為血清中抗體的效價(jià)，亦稱為滴度。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社 臨床應(yīng)用：臨床應(yīng)用：1.1.肥達(dá)試驗(yàn)肥達(dá)試驗(yàn)Widal testWidal test2.2.外斐氏試驗(yàn)外斐氏試驗(yàn)Weil-Weil-felix

7、testfelix test3.3.交叉配血試驗(yàn)交叉配血試驗(yàn) 方法評價(jià)：方法評價(jià)：1.1.半定量試驗(yàn)半定量試驗(yàn)2.2.操作簡便、快速操作簡便、快速3.3.敏感度不高敏感度不高4.4.可有假陽性可有假陽性人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社第二節(jié)第二節(jié) 間接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng) 將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面，將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面，然后與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)，在電解質(zhì)的作用下，然后與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社一、載體一、載體 RBCRBC 聚苯乙烯膠乳聚苯乙烯膠乳 載體的種類載體的種類 離

8、子交換樹脂離子交換樹脂 活性炭活性炭 明膠顆粒明膠顆粒人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社載體的條件：載體的條件：1.1.不溶于水，理化性質(zhì)穩(wěn)定且無化學(xué)和免疫學(xué)活性。不溶于水，理化性質(zhì)穩(wěn)定且無化學(xué)和免疫學(xué)活性。2.2.大小均勻，密度與介質(zhì)相近。大小均勻，密度與介質(zhì)相近。3.3.能直接吸附和通過偶聯(lián)劑牢固結(jié)合抗原抗體。能直接吸附和通過偶聯(lián)劑牢固結(jié)合抗原抗體。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社二、方法類型二、方法類型 根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝集反應(yīng)的根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝集反應(yīng)的方式不同，間接凝集反應(yīng)可分為方式不同，間接凝集反應(yīng)可分為4 4類類: : 1. 1.正向間接凝集試驗(yàn)正向間接凝集

9、試驗(yàn) 2.2.反向間接凝集試驗(yàn)反向間接凝集試驗(yàn) 3.3.間接凝集抑制試驗(yàn)間接凝集抑制試驗(yàn) 4.4.協(xié)同凝集試驗(yàn)協(xié)同凝集試驗(yàn)人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社三、間接血凝試驗(yàn)三、間接血凝試驗(yàn)抗原致敏抗原致敏紅細(xì)胞紅細(xì)胞紅細(xì)胞紅細(xì)胞+ +抗原抗原抗原致敏紅抗原致敏紅細(xì)胞凝集細(xì)胞凝集抗體抗體人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社四、膠乳凝集試驗(yàn)四、膠乳凝集試驗(yàn) 膠乳凝集試驗(yàn)也是間接凝集反應(yīng)，因所用的膠乳凝集試驗(yàn)也是間接凝集反應(yīng)，因所用的載體顆粒為聚苯乙烯膠乳而得名。載體顆粒為聚苯乙烯膠乳而得名。人民衛(wèi)生出

10、版社人民衛(wèi)生出版社膠乳凝集抑制試驗(yàn)檢測膠乳凝集抑制試驗(yàn)檢測HCGHCG： 標(biāo)本中加入相應(yīng)量的標(biāo)本中加入相應(yīng)量的HCGHCG抗體，抗體與尿中抗體，抗體與尿中HCGHCG結(jié)結(jié)合，再加入合，再加入HCGHCG膠乳抗原，本應(yīng)凝集反應(yīng)受到抑制，說膠乳抗原，本應(yīng)凝集反應(yīng)受到抑制，說明尿中含明尿中含HCGHCG，妊娠反應(yīng)陽性。，妊娠反應(yīng)陽性。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社第三節(jié)第三節(jié) 抗球蛋白試驗(yàn)抗球蛋白試驗(yàn) 抗球蛋白試驗(yàn)由抗球蛋白試驗(yàn)由CoombsCoombs于于19451945年建立，故又稱為年建立，故又稱為CoombsCoombs試驗(yàn)，是檢測抗紅細(xì)胞不完全抗體的經(jīng)典試驗(yàn)，是檢測抗紅細(xì)胞不完全抗體的經(jīng)典方

11、法。方法。 CoombsCoombs利用抗球蛋白抗體作為第二抗體，連接結(jié)利用抗球蛋白抗體作為第二抗體，連接結(jié)合在紅細(xì)胞表面抗原的不完全抗體，使紅細(xì)胞凝合在紅細(xì)胞表面抗原的不完全抗體，使紅細(xì)胞凝集。常用試驗(yàn)方法有直接抗球蛋白試驗(yàn)和間接抗集。常用試驗(yàn)方法有直接抗球蛋白試驗(yàn)和間接抗球蛋白試驗(yàn)。球蛋白試驗(yàn)。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社一、直接抗球蛋白試驗(yàn)一、直接抗球蛋白試驗(yàn) 人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社 直接抗球蛋白試驗(yàn)既可用玻片法定性測定，也可用試管法作半定量分析。 常用于新生兒溶血癥、自身免疫性溶血性貧血和醫(yī)源性溶血性疾病等的檢測。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社二、間接抗球蛋白試驗(yàn)二、間接抗球蛋白試

12、驗(yàn)人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社 此試驗(yàn)可用于檢測母體Rh（D）抗體，以便及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥的出現(xiàn)。 可用于對紅細(xì)胞不相容輸血所產(chǎn)生的血型抗體進(jìn)行檢測。 還可對某些細(xì)菌、立克次體感染后產(chǎn)生的不完全抗體進(jìn)行檢測。 人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社第四節(jié)第四節(jié) 冷凝集試驗(yàn)冷凝集試驗(yàn) 冷凝集試驗(yàn)是用于檢測血清中冷凝集素的方法。冷凝集試驗(yàn)是用于檢測血清中冷凝集素的方法。 冷凝集素（冷凝集素（cold agglutinincold agglutinin）是冷反應(yīng)型抗紅）是冷反應(yīng)型抗紅細(xì)胞抗體，具有較強(qiáng)的凝集紅細(xì)胞的作用，屬于細(xì)胞抗體，具有較強(qiáng)的凝集紅細(xì)胞的作用，屬于IgMIgM型抗體，可存在于正常人血

13、清中，但是正常人型抗體，可存在于正常人血清中，但是正常人血清抗紅細(xì)胞抗原的血清抗紅細(xì)胞抗原的lgMlgM冷凝集素效價(jià)比較低。冷凝集素效價(jià)比較低。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社 冷凝集試驗(yàn)可協(xié)助診斷肺炎支原體感染引起的肺炎，可用于輔助診斷冷凝集素綜合征、傳染性單核細(xì)胞增多癥、瘧疾、肝硬化、淋巴瘤及多發(fā)性骨髓瘤等。 冷凝集試驗(yàn)是傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)方法，但是其敏感度和特異性不強(qiáng)。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社小小 結(jié)結(jié)方法類型方法類型原理原理臨床用途臨床用途方法評價(jià)方法評價(jià)玻片凝集試驗(yàn)玻片凝集試驗(yàn)抗原與抗體在玻片上直接反抗原與抗體在玻片上直接反應(yīng)應(yīng)血型的鑒定、菌種診血型的鑒定、菌種診斷或分型斷或分型簡便、快速，

14、敏感度低，簡便、快速，敏感度低，多用于定性試驗(yàn)多用于定性試驗(yàn)試管凝集試驗(yàn)試管凝集試驗(yàn)抗原與系列倍比稀釋的血清抗原與系列倍比稀釋的血清在試管內(nèi)反應(yīng)在試管內(nèi)反應(yīng)交叉配血、輔助診斷交叉配血、輔助診斷傷寒和斑疹傷寒傷寒和斑疹傷寒操作簡單，敏感度不高，操作簡單，敏感度不高，為半定量試驗(yàn)為半定量試驗(yàn)間接凝集試驗(yàn)間接凝集試驗(yàn)抗原（抗體）致敏載體，檢抗原（抗體）致敏載體，檢測標(biāo)本中相應(yīng)抗體（抗原）測標(biāo)本中相應(yīng)抗體（抗原）檢測病原微生物和自檢測病原微生物和自身免疫病相關(guān)抗體身免疫病相關(guān)抗體操作簡單、快速，敏感操作簡單、快速，敏感度和特異性高度和特異性高間接凝集抑制間接凝集抑制試驗(yàn)試驗(yàn)抗原致敏載體檢測是否存在抗原致敏載體檢測是否存在與致敏抗原相同的抗原與致敏抗原相同的抗原絨毛膜促性腺激素絨毛膜促性腺激素(HCG)(HCG)的檢測的檢測靈敏度高于上面間接凝靈敏度高于上面間接凝集試驗(yàn)集試驗(yàn)協(xié)同凝集試驗(yàn)協(xié)同凝集試驗(yàn)抗體致敏金黃葡萄球菌顆?？贵w致敏金黃葡萄球菌顆粒作為診斷試劑檢測抗原作為診斷試劑檢測抗原適用于細(xì)菌的直接