可口革囊星蟲低溫凍藏新鮮度

1、摘 要本實驗以可口革囊星蟲感官評價、基本營養(yǎng)成分、化學指標、菌落總數(shù)作為新鮮度指標，研究在不同凍藏溫度下星蟲保鮮的效果。結果表明：-18、-33和-80凍藏90d，星蟲水分含量、pH、菌落總數(shù)表現(xiàn)為下降趨勢，水分含量分別下降4.76%、2.97%、1.58%；pH分別下降0.69、0.44、0.24；菌落總數(shù)分別下降0.1、0.49、0.91；星蟲凍結損失率、揮發(fā)性鹽基氮、組胺都有所上升，凍結損失率分別上升28.20%、25.48%、23.58%；揮發(fā)性鹽基氮分別上升4.9mg/100g、3.78mg/100g、1.96mg/100g；組胺分別上升3.51mg/100g、2.52mg/100g

2、、1.99mg/100g，其他指標變化不明顯。在-80凍藏下星蟲的各項指標數(shù)據(jù)均低于-18和-33，表明凍藏溫度越低星蟲的保鮮效果越好。關鍵詞：可口革囊星蟲；低溫凍藏；新鮮度AbstractIn this experiment, the sensory evaluation, basic nutrients, chemical indicators and the total number of colonies were used as the freshness indicators to study the effects of different freezing storage te

3、mperatures. The results showed that the moisture content, pH value and the total number of colonies decreased by 4.76%, 2.97% and 1.58%, pH value decreased by 0.69, 0.44 and 0.24, the total number of colonies decreased by 0.1, 0.49 and 0.91, the frozen loss rate, volatile base nitrogen and histamine

4、 increased by 28.20% and 25.4%, respectively 8%, 23.58%; volatile base nitrogen increased by 4.9mg/100g, 3.78mg/100g and 1.96mg/100g respectively; histamine increased by 3.51mg/100g, 2.52mg/100g and 1.99mg/100g respectively, and other indexes did not change significantly. The results showed that the

5、 lower the freezing temperature was, the better the preservation effect was.Key words: Phascolosoma esculenta ;Cryopreservation;Freshness目 錄1 引 言11.1 可口革囊星蟲簡介11.2 凍藏保鮮技術簡介11.3 研究內容及意義22 材料和方法22.1 材料22.1.1 原材料22.1.2 主要試劑22.1.3 主要儀器22.2 方法32.2.1 樣品處理32.2.2星蟲感官評價32.2.3 基本營養(yǎng)成分指標42.2.4 化學指標52.2.5 菌落總數(shù)的測定

6、63 結果與分析63.1 不同凍藏溫度對星蟲感官評價的影響63.2 不同凍藏溫度對星蟲基本營養(yǎng)成分的影響73.2.1 水分含量73.2.2 膠原蛋白含量73.2.3 鹽溶性蛋白和水溶性蛋白含量83.3 不同凍藏溫度對星蟲化學指標的影響93.3.1 凍結損失率93.3.2 pH值103.3.3 揮發(fā)性鹽基氮（TVBN）103.3.4 組胺113.4 不同凍藏溫度對菌落總數(shù)的影響124 結論12參 考 文 獻13致 謝15低溫凍藏對可口革囊星蟲新鮮度的影響1 引 言1.1 可口革囊星蟲簡介可口革囊星蟲(Phascolosoma esculenta )，俗稱沙蟲、海丁、土釘、泥蒜，為星蟲動物門、革囊

7、星蟲綱、革囊星蟲目、革囊星蟲科、革囊星蟲屬的中國特有物種，在浙江、福建、廣東、廣西等地廣泛分布1。閩南風味小吃“土筍凍”便是以它作為原料，廣受消費者們喜愛和食用，可口革囊星蟲不僅可以做為食物，而且還可以入藥。在我國中華海洋本草中評價可口革囊星蟲，不僅能有效改善陰虛潮熱，氣血不足的癥狀，還具有腎經(jīng)、歸脾的功效，常常用作治療虛火上炎及滋陰補腎的治療藥物，被譽為海冬蟲夏草、動物人參2。可口革囊星蟲體內富含蛋白質，不飽和脂肪酸，多糖，微量元素等各種營養(yǎng)物質3-5，其中蛋白質含量占可口革囊星蟲干重的60%-70%，總脂肪和多糖含量分別占干重的7%左右，為典型高蛋白低脂肪海產(chǎn)品6?？煽诟锬倚窍x含有豐富的多

8、種氨基酸，其中必需氨基酸含量高，約占氨基酸總量的35%左右7?？煽诟锬倚窍x棲息在潮濕泥質的洞穴中，可抵御高溫、低溫、缺氧和重金屬環(huán)境等不利條件，具有重要的海洋生物資源經(jīng)濟價值8?，F(xiàn)如今，國內外對可口革囊星蟲的很多方面已有研究，集中于功能基因克隆分析、繁殖和養(yǎng)殖技術、生物活性、生理生態(tài)學、營養(yǎng)成分等。1.2 凍藏保鮮技術簡介凍藏保鮮技術，是指水產(chǎn)品的中心溫度下降到-15以下后水產(chǎn)品體內組織中大部分水的分被凍結，水產(chǎn)品內部的生物和物理變化受到劇烈抑制，因此，凍藏溫度下的水產(chǎn)品可以長期保藏。現(xiàn)在21世紀市場上水產(chǎn)品銷售和保存最廣泛的保鮮技術是凍藏，因為凍藏讓微生物細胞液大部分凍結造成生理干燥，還最大

9、限度抑制酶的活性和微生物繁殖，最主要的是還讓很多生物化學反應無法進行。因此凍藏保鮮能在數(shù)月或一年的時間內保持水產(chǎn)品的新鮮度和感官品質。但是數(shù)月或者一年后在凍藏過程中的水產(chǎn)品還是會發(fā)生干耗、汁液流失、蛋白質變性、脂肪氧化和感官下降等現(xiàn)象。凍結速度和凍藏溫度決定水產(chǎn)品中冰晶形成的數(shù)量、大小和分布情況，從而對水產(chǎn)品冷藏期間的品質有很大的影響9。目前，國內外有關凍藏保鮮對水產(chǎn)品保鮮方面研究主要集中在探索凍藏期間水產(chǎn)品的品質變化，主要以感官、質構、汁液流失、PH、硫代巴比妥酸值、揮發(fā)性鹽基氮值、菌落總數(shù)等指標研究凍藏條件下魚肉品質變化10。高琪11以感官、質構、色澤、持水性、硫代巴比妥酸值、微觀組織結構

10、為指標，研究鼓風凍結、空氣凍結和浸漬凍結對鳙魚頭品質的影響。錢攀12研究了氣體快速凍結和液體快速凍結對鳙魚質構、微觀組織結構、持水力、PH、Ca2+-ATPase活性指標的影響。Aguilera Barraza等13以質構、鹽溶性蛋白含量、揮發(fā)性鹽基氮值為指標，研究凍藏對大西洋鮭魚品質的影響。Erikson等14研究了不同凍結方式對凍藏期間鱈魚質構、微觀結構、水分含量、持水能力、汁液流失的影響。1.3 研究內容及意義本研究考察不同凍藏溫度對可口革囊星蟲新鮮度的影響，實驗以感官評價、基本營養(yǎng)成分（水分含量、膠原蛋白含量、鹽溶性蛋白含量和水溶性蛋白含量）、化學指標（凍結損失率、pH、揮發(fā)性鹽基氮、

11、組胺）、微生物指標（菌落總數(shù)）作為鮮度指標，研究在凍藏溫度為-18、-33和-80，下鮮度指標的變化，皆在探討不同凍藏溫度對保鮮效果的影響，為可口革囊星蟲凍藏保鮮提供理論依據(jù)。2 材料和方法2.1 材料2.1.1 原材料可口革囊星蟲購自寧德東湖市場2.1.2 主要試劑雙縮腺試劑、蛋白標準溶液、氯化鈉、Tris、鹽酸、氫氧化鈉、氧化鎂、硼酸、三氯乙酸、甲基紅、95%乙醇、亞甲基藍、正戊醇、碳酸鈉、對硝基苯胺、亞硝酸鈉、磷酸組胺、營養(yǎng)瓊脂等購于國藥集團化學試劑有限公司。2.1.3 主要儀器主要儀器見表2-1表2-1 實驗儀器實驗儀器型號廠家電子天平高速分散器立式壓力蒸汽滅菌器冠亞快速水分測定儀真空

12、冷凍干燥機多功能電磁爐生化培養(yǎng)箱-18冰箱-33低溫保存箱超低溫冰箱高速冷凍離心機智能酸度計雙人垂直流超凈工作臺紫外分光光度計PRACTUM124型XHF-DYXQ-LS-100SSFY-20DFDU-2110C21-RK2101BPC-250FBCD-190TMPKDW-40W380MDF-382E（CN）3-16PKBante920型SW-CJ-2D型T6-1650F賽多利斯科學儀器有限公司寧波新芝生物科技股份有限公司上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設備廠深圳冠亞水分儀科技有限公司東京理化器械珠式會社廣東美的生活制造有限公司上海-恒科學儀器有限公司吉島海爾集團海爾集團松下制冷（大連）有限公司德國賽

13、多利斯SIGMA上海般特儀器有限公司蘇州凈化設備有限公司北京普析通用儀器有限公司152.2 方法2.2.1 樣品處理將新鮮的可口革囊星蟲去內臟清洗干凈，瀝干。實驗分為對照組（新鮮樣品）和實驗組，實驗組分別為-18凍藏組、-33凍藏組、-80凍藏組。每實驗組樣品的量按照全程實驗所需要量進行準備，以100g/份小包裝進行自封包裝，于冰箱低溫貯藏。對照組（新鮮樣品）于當天測定鮮度指標，實驗組于第30d、60d、90d進行鮮度指標測定。2.2.2星蟲感官評價組成感官評定小組的每人各取1只完整星蟲肉作為實驗材料，其它步驟參照GB2733-2015食品安全國家標準 鮮、凍動物性水產(chǎn)品中感官要求結合星蟲本身

14、性質制定可口革囊星蟲感官評價標準，見表2-2.感官評定小組由實驗室10人組成，分別從星蟲色澤、氣味、組織狀態(tài)三個方面進行評分，取10人評分的平均值作為最終評定結果。表2-2 可口革囊星蟲感官評價標準表項目 標準好/5分 較好/4分 一般/3分 較差/2分 差/1分色澤 色澤正常， 色澤正常， 色澤略暗淡， 色澤暗淡， 色澤暗淡呈正常星蟲 星蟲內皮偏白， 呈少許黃綠色， 呈現(xiàn)黃綠色， 呈現(xiàn)明顯黃綠色外黑內白色， 肌肉切面 肌肉切面 肌肉切面 肌肉切面肌肉切面 有光澤 有光澤 無光澤 無光澤富有光澤氣味 具有濃郁的 具有清淡的 星蟲具有的 星蟲具有的 有強烈星蟲香味， 星蟲香味， 香味消失， 鮮味

15、消失， 氨臭味出現(xiàn) 清新 較清新 無異味 有較淡氨臭味出現(xiàn)組織 肌肉緊密 肌肉較緊密 肌肉不緊密 肌肉不緊密 肌肉不緊密狀態(tài) 富有彈性 有彈性 但不松散 局部松散 且松散紋理清晰 紋理較清晰 較有彈性 稍有彈性 無彈性表面濕潤清爽 表面較濕潤清爽 表面略粘膩 表面較粘膩 表面粘膩 無汁液滲出 無汁液滲出 有少量汁液滲出 有較多汁液滲出 有大量汁液滲出2.2.3 基本營養(yǎng)成分指標（1）水分含量測定取2g星蟲肉作為實驗材料，其它步驟參照GB5009.3-2016食品安全國家標準 食品中水分的測定的直接干燥法進行測定。（2）膠原蛋白含量測定取10g星蟲肉作為實驗材料，其它步驟參照 Heu 等15的方

16、法進行測定。（3）蛋白質含量測定參照王艾平等16方法，采用考馬斯亮藍法進行測定。以標準蛋白濃度為橫坐標，吸光值為縱坐標繪制標準曲線，如圖2-1，標準曲線方程y=0.2979x+0.6346，R2=0.9956。圖2-1 蛋白濃度標準曲線（4）鹽溶性蛋白和水溶性蛋白的含量測定 取2g星蟲肉作為實驗材料，其它步驟參照Tadpitchayangkoon等17的方法進行測定。 2.2.4 化學指標（1） 凍結損失率測定取5g星蟲肉作為實驗材料，其它步驟參照Boonsumrej S等18的方法進行測定。（2） pH值測定取2g星蟲肉作為實驗材料，其它步驟參照Salih AM等19的方法進行測定。（3）

17、揮發(fā)性鹽基氮（TVBN）測定取20g星蟲肉作為實驗材料，其它步驟參照GB5009.228-2016食品安全國家標準 食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定中半微量定氮法進行測定。（4） 組胺測定取5g星蟲肉作為實驗材料，其他步驟參照GB5009.208-2016食品安全國家標準 食品中生物胺的測定中分光光度法進行測定。以組胺含量為橫坐標，吸光值為縱坐標繪制標準曲線，如圖2-2，標準曲線方程y=0.012x+0.0033，R2=0.9947.圖2-2 組胺含量標準曲線2.2.5 菌落總數(shù)的測定取1g星蟲肉作為實驗材料，其他步驟參照 GB/T4789.2-2016食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定

18、中規(guī)定的方法進行測定。3 結果與分析3.1 不同凍藏溫度對星蟲感官評價的影響凍藏期間星蟲的感官分數(shù)變化趨勢如圖3-1所示，星蟲感官分數(shù)隨著凍藏時間的延長均呈現(xiàn)下降的趨勢。不同凍藏溫度下的星蟲0d到60d的感官分數(shù)只有細微下降的趨勢，凍藏60d后的星蟲感官分數(shù)下降趨勢較為明顯。這是因為隨著凍藏時間的延長特別是在凍藏后期由于蛋白質、內源酶以及微生物的作用，讓星蟲出現(xiàn)輕微腐敗和少量腥臭味，這樣就極大降低了星蟲的感官品質20。從實驗結果可知感官分數(shù)降低幅度與凍藏溫度密切相關。-80比-18和-33的感官分數(shù)下降較為平緩，稍具有良好的感官品質，因此-80凍藏能保持良好的感官品質。圖3-1 不同凍藏溫度下

19、可口革囊星蟲感官分數(shù)的變化3.2 不同凍藏溫度對星蟲基本營養(yǎng)成分的影響3.2.1 水分含量據(jù)圖3-2可知，可口革囊星蟲在不同凍藏溫度-18、-33和-80下，可口革囊星蟲水分含量隨著凍藏溫度升高及凍藏時間延長而呈現(xiàn)出明顯下降的趨勢。-80下可口革囊星蟲的水分含量比-18和-33水分含量高，這因為低溫凍藏時與冰晶的形成有關，溫度越低，形成的冰晶越細小細胞破裂的幾率就比凍藏溫度高的小。圖3-2 不同凍藏溫度下可口革囊星蟲水分含量的變化3.2.2 膠原蛋白含量由圖3-3可知，可口革囊星蟲在-18、-33和-80凍藏溫度下，膠原蛋白含量呈現(xiàn)下降趨勢。膠原蛋白含量隨時間下降的結果與其他研究結果21是吻合

20、。下降趨勢與凍藏溫度和時間有著緊密的聯(lián)系，凍藏溫度越低，則膠原蛋白含量減少的比溫度高的緩慢。凍藏溫度越高凍結點越慢到達，形成的冰晶越大，造成膠原蛋白纖維空間結構損傷膠原蛋白分子嚴重分解。圖3-3 不同凍藏溫度下可口革囊星蟲膠原蛋白含量的變化3.2.3 鹽溶性蛋白和水溶性蛋白含量由圖2-1可知，蛋白標準曲線方程為y=0.2979x+0.6346，且R2=0.9956，滿足實驗標準曲線的要求。又由圖3-4可知，可口革囊星蟲最初的鹽溶性蛋白含量為2.739mg/g。隨著凍藏時間延長而緩慢下降22。在凍藏90d，-18下可口革囊星蟲含量為2.404mg/g，下降了12.23；-33下可口革囊星蟲含量為

21、2.608mg/g，下降了4.78；-80下可口革囊星蟲含量為2.678mg/g，下降了2.23。這說明-18比-33和-80凍藏溫度下可口革囊星蟲的鹽溶性蛋白溶解性下降的更快，-18下凍藏對鹽溶性蛋白溶解性的影響更大。由圖3-5可知，可口革囊星蟲最初的水溶性蛋白含量為1.331mg/g。凍藏90d后，-18下可口革囊星蟲含量為1.578mg/g，上升了18.56；-33下可口革囊星蟲含量為1.426mg/g，上升了7.14；-80下可口革囊星蟲含量為1.387mg/g，上升了4.21。-18、-33和-80凍藏溫度下水溶性蛋白含量上升，但-18較為明顯，說明-18比-33和-80對可口革囊星

22、蟲水溶性蛋白溶解性的影響更大。圖3-4 不同凍藏溫度下可口革囊星蟲鹽溶性蛋白含量的變化圖3-5 不同凍藏溫度下可口革囊星蟲水溶性蛋白含量的變化3.3 不同凍藏溫度對星蟲化學指標的影響3.3.1 凍結損失率可口革囊星蟲凍結損失率如圖3-6所示，其中-18、90d星蟲的凍結損失率最高，為28.20%，-33和-80相對較低，其中-33的凍結損失率最高為25.48%，-80為23.58%。由此可以看出凍藏的溫度越高，凍結速度越慢，冰晶凍結點溫度越慢到達，這樣就不利于主要存在細胞間隙的游離水形成冰晶，造成了細胞的變性和破裂，并增大了溶質損傷效應。凍結速度越慢，此過程更加顯著23。此實驗結果和廖媛媛23

23、的研究結果相似，凍結速度越慢，凍結損失率越大。圖3-6 不同凍藏溫度下可口革囊星蟲凍結損失率的變化3.3.2 pH值pH是反映肉類新鮮度的重要指標之一，直接影響肉的風味24-25。pH變化如圖3-7所示，凍藏期間pH降低主要與星蟲肉內部糖原及ATP降解產(chǎn)生磷酸和乳酸有關，而pH增加主要是因為微生物與內源蛋白酶降解蛋白質產(chǎn)生的堿性物質26-27。本實驗新鮮星蟲pH為7.37，到第30d的時候不同凍藏溫度星蟲的pH分別為7.01、7.13、7.23均有所下降。30d到60d不同凍藏溫度星蟲的pH有細微的升高，到60d的時候-18、-33和-80pH分別為7.09、7.18、7.29；過了60d后p

24、H下降較為明顯，-18、-33和-80pH分別為6.68、6.93、7.13。從以上數(shù)據(jù)可知-80凍藏溫度下星蟲的pH比-33和-18凍藏溫度下星蟲的pH高。圖3-7 不同凍藏溫度下可口革囊星蟲pH值的變化3.3.3 揮發(fā)性鹽基氮（TVBN）不同凍藏溫度和時間可口革囊星蟲TVBN值如圖3-8所示，新鮮可口革囊星蟲的TVBN值為0.7mg/100g，隨著不同凍藏溫度和時間的延長，可口革囊星蟲的TVBN值逐漸增加。-18、-33和-80星蟲凍藏90d后，TVBN值分別為5.6mg/100g、4.48mg/100g、2.66mg/100g，-18比-33和-80TVBN值高，是因為凍藏溫度越高時間越

25、長星蟲肉中微生物繁殖越多將蛋白質等底物分解也越多，產(chǎn)生的含氮物質多星蟲腐敗變質程度高。圖3-8 不同凍藏溫度下可口革囊星蟲揮發(fā)性鹽基氮含量的變化3.3.4 組胺圖2-2為組胺標準曲線，由圖2-2可知，組胺標準曲線方程為y=0.012x+0.0033，且R2=0.9947，滿足實驗標準曲線的要求。由圖3-9可知新鮮樣組胺含量為6.03mg/100g，90d后-18、-33和-80組胺含量分別上升3.51mg/100g、2.52mg/100g、1.99mg/100g，從以上數(shù)據(jù)可以分析出凍藏溫度越低抑制組胺脫羧酶活性的效果越好，組胺含量增長越慢。圖3-9 不同凍藏溫度下可口革囊星蟲組胺含量的變化3

26、.4 不同凍藏溫度對菌落總數(shù)的影響如圖3-10所示，星蟲菌落總數(shù)凍藏前30d都有下降的趨勢，-8030d下降明顯，是因為凍藏溫度越低殺死不耐低溫的微生物越多，凍藏了-33和-18的菌落總數(shù)下降趨勢較為相似。凍藏30d后這三種不同凍藏溫度和時間下的星蟲的菌落總數(shù)都略有上升，到60d后基本保持穩(wěn)定，只有細微上升的趨勢。眾所周知，在冷凍期間，隨著微生物轉入休眠狀態(tài)，微生物腐敗可被有效減緩28。這說明凍藏對抑制微生物的生長有一定作用，同時也證明了凍藏溫度越低且時間長抑制微生物生長效果越好。圖3-10不同凍藏溫度下可口革囊星蟲菌落總數(shù)的變化4 結論本實驗通過感官評價，并測定基本營養(yǎng)成分指標（水分含量、膠

27、原蛋白含量、鹽溶性蛋白和水溶性蛋白含量）、化學指標（凍結損失率、pH、揮發(fā)性鹽基氮、組胺）、微生物指標（菌落總數(shù)）等鮮度指標，研究了不同凍藏溫度對可口革囊星蟲新鮮度的影響。結果表明，-80的凍藏溫度對星蟲保鮮能力最好，-80凍藏可有效提高星蟲感官評價分數(shù)、凍藏溫度越低對水分、膠原蛋白含量、鹽溶性蛋白和水溶性蛋白含量、凍結損失率造成的損失就越少，也間接地提高了消費者對凍藏星蟲的接受度；同時減緩了星蟲pH、揮發(fā)性鹽基氮、組胺和菌落總數(shù)增長趨勢，降低星蟲腐敗變質程度。凍藏溫度越低越能夠有效維持星蟲的新鮮品質，延長其貨架期，為未來星蟲的貯藏及加工或其它水產(chǎn)品貯藏提供新思路及理論依據(jù)。根據(jù)實驗結果得出-

28、80比-18和-33凍藏保鮮效果好，雖然-80效果好，但是耗能太大，所以-80實際應用于市場上進行凍藏保鮮還是有一定困難的，對于這一問題的具體解決辦法我們還有待進一步的研究。參 考 文 獻1李鳳魯,周紅,王瑋.中國沿海星蟲動物門名錄J.青島海洋大學學報,1992,(02):72-88.2管華詩,王曙光.中華海洋本草第3卷海洋無脊椎動物藥M.上海:上?？茖W技術出版社,2009:78-90.3周化斌,張永普,吳洪喜,等.可口革囊星蟲的營養(yǎng)成分分析與評價J.海洋湖沼通保,2006,02:62-68.4周迎松,丁理發(fā),徐繼林,等.可口革囊星蟲主要營養(yǎng)要素的分析J.營養(yǎng)學報,2007,29(4):413

29、-414.5杜磊.可口革囊星蟲蛋白提取及酶法制備降血壓肽的研究D.上海:華東理工大學,2012.6黃曉春,蘇秀榕,蘇月萍.沙蠶和星蟲的營養(yǎng)成分研究J.水產(chǎn)科學,2005,24(6):10-11.7項歡.可口革囊星蟲多肽對小鼠學習記憶能力的影響D.浙江:寧波大學,2014.8劉艷,侯付景,周君,等.可口革囊星蟲鐵結合蛋白的分子進化和系統(tǒng)發(fā)育研究J.海洋與湖沼,2013,44(4):973-979.9石徑.中華管鞭蝦凍藏過程中品質變化規(guī)律及機理研究D.北京:中國農(nóng)業(yè)大學,2018.10蔣曉慶.草片魚低溫貯藏過程中膠原變化及品質控制研究D:碩士學位論文.無錫:江南大學,2016.11高琪.鳙魚頭冷凍

30、加工與品質改良技術的研究D:碩士學位論文.無錫:江南大學,2015.12錢攀.液體快速凍結對鳙魚品質影響的研究D:碩士學位論文.杭州:浙江工商大學,2017.13Aguilera Barraza F A,Leon R A,Px A.Kinctics of protcin and textural changes in Atlantic salmonn under frozen storage J.Food Chemistry,2015,1829(6):120-127.14Erikson U,K jorsvik E,Bardal T,et al.Quality of Atlantic Cod f

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32、量條件的優(yōu)化J.河南農(nóng)業(yè)科學,2014,43(3):150-153.17Tadpitchayangkoon P,Park J W,Mayer S G,et al.Structural changes and dynamic rheological properties of saroplasmic proteins subjected to pH-shift method.Journal of Agricultural & Food Chemistry,2010,58(7):4241-4249.18Boonsumrej S,Chaiwanichsiri S,Tantratian S,et al

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