植物組織培養(yǎng)試卷

1、植物組織培養(yǎng)試卷一、名詞解釋： 每題 3分，共 15 分 1初代培養(yǎng)基：是指用來第一次接種外植體的培養(yǎng)基。 2脫分化：一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷 組織的現(xiàn)象。一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈 傷組織的現(xiàn)象。3液體培養(yǎng)：指在進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中不加瓊脂等凝固劑，一般需要通過振 蕩等方法解決培養(yǎng)基的通氣情況。4細(xì)胞全能性：一個(gè)細(xì)胞能產(chǎn)生一個(gè)完整植株的固有能力，或植物細(xì)胞具有全 部的遺傳信息，不管是性細(xì)胞還是體細(xì)胞，在特定環(huán)境下，能進(jìn)行表達(dá)而產(chǎn)生 一個(gè)獨(dú)立完整的個(gè)體。5再分化：愈傷組織形成不定芽或不定根或胚狀體。二、填空每空 1 分，共 40

2、分1植物組織培養(yǎng)過程中，最常用的培養(yǎng)基是 ，培養(yǎng)基的 pH 因外植體的來源不同而異，常用和調(diào)節(jié)pH,大多數(shù)植物的 pH 要求調(diào)節(jié)在范圍內(nèi)。2 可以通過 、 、等措施預(yù)防褐變的發(fā)生。3 植 物組織培養(yǎng)時(shí), 外 植 體 可 以是 、 、。4 應(yīng)用微尖嫁接技術(shù)進(jìn)行脫毒培養(yǎng)無病毒苗，主要程序?yàn)槭?發(fā)生。 6 在配制培養(yǎng)基時(shí)，可以在培養(yǎng)基中添加 ，利用 其吸附能 力，可 以 降低褐變 的發(fā)生 ， 但它對物 質(zhì) 的 吸 附 。 7 培養(yǎng)基的滅菌要求壓力為 、溫度 為 、維持時(shí)間為 。 8 組織培養(yǎng)中常用的生長素有吲 哆乙酸IAA, 2, 4-二氯苯氧乙酸2, 4-D,吲哆丁酸IBA,萘乙酸NAA, 它們的

3、作用強(qiáng)弱順序?yàn)?。 9. 莖尖微 繁殖過程一般包括五個(gè)階段,即 、 、 、 、 。 10莖尖分生組織培養(yǎng)的目的主要是,其莖尖一般取 毫米。為了使脫毒效果更好,可以將莖尖分生組織培養(yǎng)與 結(jié)合起來。脫毒處理的 試管苗,在用于生產(chǎn)之前,必須進(jìn)行 。 11 污染的原因從病源菌 上分析主要有兩大類 、 。三、判斷正誤,并改錯(cuò)。 每題 2 分,共 20 分 1一般將微量元素母液均配制成 10倍,在配制培養(yǎng)基時(shí), 使用量為 10ml/L 。 細(xì) 胞分裂素 / 生長素的比值較高時(shí),有利于愈傷組織的誘導(dǎo)。2 對于金邊虎尾蘭等遺傳學(xué)上的嵌合體植物,要是組織培養(yǎng)繁殖的植株保持 原有的園藝價(jià)值,只能通過葉培養(yǎng)。3 植

4、物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)使用不當(dāng)時(shí),材料也容易褐變,生長素有刺激多酚氧化 酶活性提高的作用。4 利用莖尖分生組織進(jìn)行脫毒培養(yǎng)時(shí),莖尖外植體大小與脫毒效果成正比。 5某些植物通過愈傷組織培養(yǎng)可以獲得無病毒苗。6無病毒植株不具有抗病毒的能力,而且在去除病毒之后,體內(nèi)營養(yǎng)和生理狀況發(fā)生改變，因而對其他病毒和病原體的侵染更為敏感，因此在種植脫毒苗的一定要隔離種植。 7微繁不定芽的產(chǎn)生有兩個(gè)途徑，一是不定芽不通過愈傷組織由外植體直接產(chǎn) 生，二是外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，由愈傷組織上產(chǎn)生不定芽。后一途徑相對 較為優(yōu)越，因?yàn)橥ㄟ^愈傷組織不會(huì)出現(xiàn)一些突變。 8細(xì)胞的全能性，可以通過分裂細(xì)胞的脫分化和再分化過程得以表達(dá)。

5、9培養(yǎng)基中的鐵鹽，常用不易分解的乙二胺四乙酸鐵螯合物，以防在pH 較高時(shí)鐵被氧化為不溶的氫氧化鐵。四、簡答題：每題 5 分，共 15 分 1植物生長物質(zhì)如何調(diào)控外植體形態(tài)發(fā)生？ 答案要點(diǎn)： 在植物組織培養(yǎng)過程中，常用的植物激素有生長素類和細(xì)胞分裂素 類，在高生長素如使用高濃度 2, 4 D時(shí)能促進(jìn)外植體的脫分化，在生長素 / 細(xì)胞分裂素比值較高時(shí)，促進(jìn)不定根的發(fā)生，比值較低時(shí)促進(jìn)不定芽的發(fā)生。 2為什么要對脫毒苗進(jìn)行屢次檢定？ 答案要點(diǎn)：由莖尖分生組織培養(yǎng)獲得的試管苗，經(jīng)第一次擴(kuò)繁后要對試管苗進(jìn) 行病毒檢測，以確定材料的脫毒情況。因?yàn)閯內(nèi)∏o尖的大小直接關(guān)系到脫毒效 果，一船剝?nèi)〉那o尖愈小成苗率

6、愈低，但脫毒率高，而培養(yǎng)的莖尖愈大，成苗 率愈高，但脫毒率低。脫毒苗中病毒有可能再次出現(xiàn)，病毒的再現(xiàn)可能有三方面的原因，一是脫毒不徹底，脫毒后試管苗血清檢測沒有病毒反映，是因 為植株體內(nèi)病毒含量非常少，以致檢測不到，試管苗屢次繼代后，病毒逐漸積 累，從而再次出現(xiàn)病毒侵染；二是一些弱系病毒或一些暫時(shí)沒有條件檢測到的 病毒，在強(qiáng)系病毒脫掉后快速繁殖造成危害，三是由于操作及其它一些原因造成的病毒再次侵染3莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)的目的和取材大小可分為哪幾種類型？各有何特點(diǎn)？答案要點(diǎn)：莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為莖尖分生組織培養(yǎng)和普通 莖尖培養(yǎng)兩種類型。莖尖分生組織培養(yǎng)主要是指對莖尖長度不超過 0.l

7、 mm ，最 小只有幾十微米的莖尖進(jìn)行培養(yǎng)，這種培養(yǎng)可獲得無病毒植株。但這樣小的莖 點(diǎn)別離實(shí)際上是很困難的，而且成苗時(shí)間也很長，需要一年乃至更長的時(shí)間。因此在莖尖分生組織培養(yǎng)中往往采用帶有I2個(gè)葉原基的生長錐進(jìn)行培養(yǎng)。普通莖尖培養(yǎng)是指對幾毫米乃至幾十毫米長的莖尖、芽尖及側(cè)芽的培養(yǎng)，這類莖 尖的培養(yǎng)技術(shù)簡單，操作方便，莖尖容易成活，成苗所需要的時(shí)間短，能加快 繁殖速度。五、綜述題每題 10 分，共 10 分試管苗移栽時(shí)應(yīng)注意哪些事項(xiàng)？1保持試管苗的水分平衡 2要選擇適宜的基質(zhì) 3要防止雜菌滋生 4要注意 光、溫的管理。二、填空每空 1 分，共 40分1MS、 HCL、 NaOH、 5.66.0

8、2 適宜外植體、最正確的培養(yǎng)基、連續(xù)轉(zhuǎn)接、加抗氧化劑、加活性炭。 3 器官、組織、細(xì)胞、去掉細(xì)胞壁的原生質(zhì)體 4 無菌砧木、 莖尖準(zhǔn)備、嫁接、嫁接苗培養(yǎng)、 移植 5 器官、胚胎 6 活性炭、無選擇性。7 .10005000LX、16h、252 C無菌外植體的10.82 ，4-D、 NAA、 IBA 、 IAA 9建立、芽的增殖、中間繁殖體的增殖、誘導(dǎo)生根、試管苗的移栽毒、0.1熱處理、病毒檢定11. 細(xì)菌、真菌二、判斷正誤，并改錯(cuò)。1. x 一般將微量元素母液均配制成 100倍，在配制培養(yǎng)基時(shí)，使用量為10ml/L2.x 細(xì)胞分裂素 /生長素的比值較高時(shí)，有利于愈傷組織芽的誘導(dǎo)。 3.x 對于

9、金邊 虎尾蘭等遺傳學(xué)上的嵌合體植物，要是組織培養(yǎng)繁殖的植株保持原有的園藝價(jià) 值，只能通過莖尖和側(cè)芽培養(yǎng)。4.x植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)使用不當(dāng)時(shí)，材料也容 易褐變，細(xì)胞分裂有刺激多酚氧化酶活性提高的作用。5. X利用莖尖分生組織進(jìn)行脫毒培養(yǎng)時(shí)，莖尖外植體大小與脫毒效果成反比。6. V某些植物通過愈傷組織培養(yǎng)可以獲得無病毒苗。7. V無病毒植株不具有抗病毒的能力，而且在去除病毒之后，體內(nèi)營養(yǎng)和生理狀況發(fā)生改變，因而對其他病毒和病原 體的侵染更為敏感，因此在種植脫毒苗的一定要隔離種植。8. X微繁不定芽的產(chǎn)生有兩個(gè)途徑，一是不定芽不通過愈傷組織由外植體直接產(chǎn)生，二是外植 體誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，由愈傷組織上產(chǎn)

10、生不定芽。前一途徑相對較為優(yōu)越，因 為通過愈傷組織會(huì)出現(xiàn)一些突變。9. V細(xì)胞的全能性，可以通過成熟細(xì)胞的脫分化和再分化過程得以表達(dá)。10 .V培養(yǎng)基中的鐵鹽，常用不易分解的乙二胺四乙酸鐵螯合物，以防在 pH較高時(shí)鐵被氧化為不溶的氫氧化鐵。一、填空： 10 個(gè)小題，每題 2 分，共 20 分1 、組織培養(yǎng)植株再生的途徑主要有兩條： 一是 ，另一個(gè)是 。2 、試管苗的生態(tài)環(huán)境與外界環(huán)境條件相比有四大差異：即 。 3 、 B5 培養(yǎng)基特點(diǎn)是 ； MS 培養(yǎng)基的特點(diǎn)是 。 4 、使用植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)時(shí)要注意： 、 。 5 、莖尖分生組織培養(yǎng)主要是對 莖尖進(jìn)行培養(yǎng)，目的是 。 6 、由胚乳培養(yǎng)得到的植

11、株，除少數(shù)是 _ 倍體外，多數(shù)是由 細(xì)胞組成的嵌合體。 7 、受精胚珠培養(yǎng)的目的：一是 ，二是 。 8 、 是檢測花粉發(fā)育時(shí)期的簡便有效方法，常用染 色劑是 。 9 、離體培養(yǎng)的花粉粒成苗途徑與花藥培養(yǎng)相同，即有 和 兩條途徑。 10 、鑒定雜種植株的方法有 、 、 和 。二、名詞解釋： 10 個(gè)小題，每題 2 分，共 20 分 植物組織培養(yǎng) : 將植物的離體器官、組織、細(xì)胞放在離體無菌條件下，在人工 控制的環(huán)境條件下，培養(yǎng)在人工配置培養(yǎng)基上，使其生長、分化成植株的過程。 外植體 : 由活體植物體上提取下來的，接種在培養(yǎng)基上的無菌細(xì)胞、組織或器 官等。微尖嫁接技術(shù) : 指在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)實(shí)生

12、砧木，嫁接無病毒莖尖以培養(yǎng)脫毒 苗的技術(shù)。脫分化 : 將已分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體的抑制性影響下解脫出 來，恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性。花藥培養(yǎng) : 是 將花粉發(fā)育至一定階段的花藥接種到人工培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)， 以形成花粉胚或愈傷組織進(jìn)而分化成植株的技術(shù)。 花粉培養(yǎng)： 是將花粉從花 藥中別離出來進(jìn)行離體培養(yǎng)的過程。平板培養(yǎng)法 : 把單個(gè)細(xì)胞與融化的瓊脂培養(yǎng)基均勻混合，并平鋪一薄層在培養(yǎng) 皿底上的培養(yǎng)方法。無病毒苗 : 指不含該種植物的主要危害病毒，即經(jīng)檢測主要病毒在植物體內(nèi)的 存在表現(xiàn)陰性反響的苗木 無土栽培：也稱水培，就是不用土壤，而用無機(jī)化肥溶液，即營養(yǎng)液來栽培植 物的技術(shù)。 ? 連續(xù)培養(yǎng)

13、 : 指在培養(yǎng)過程中，以不斷抽取懸浮培養(yǎng)物并注入等 量新鮮培養(yǎng)基，使培養(yǎng)物不斷得到養(yǎng)分補(bǔ)充，保持其恒定體積的培養(yǎng)基。胚狀體 ： 指在組織培養(yǎng)中，由一個(gè)非合子細(xì)胞 體細(xì)胞 ，經(jīng)過胚胎發(fā)生和胚 胎發(fā)育過程形成的具有雙極性的胚狀結(jié)構(gòu)。三、選擇題：單項(xiàng)選擇題， 10 個(gè)小題，每題 1.5 分，共 15 分1 、將細(xì)胞分裂素類物質(zhì)配制成 0.5-1mg/ml 的母液時(shí)，可先用少量的 溶 解，再定容到所需的體積。 A 、 95% 酒精 B 、 0.1mol NaOH C 、 85% 酒精 D 、 0.1mol HCl 2 、外植體接種時(shí)，刀、剪、鑷子等用具一般在使用前浸泡 在 中，用時(shí)在火焰上灼燒滅菌，

14、冷卻后使用。 A 、 70% 酒精 B 、 85% 酒 精 C 、 95% 酒精 D 、 0.1% 升汞 3 、 KNO 3 和 NH 4 2 SO 4 含量高， 不含鉬的培養(yǎng)基是 。 A 、 White 培養(yǎng)基 B 、 N 6 培養(yǎng)基 C 、 MS 培養(yǎng) 基 D 、 B 5 培養(yǎng)基 4 、培養(yǎng)室的濕度一般保持在 。 A 、 50%-60% B 、 60%-70% C 、 70%-80% D 、 80%-90% 5 、培養(yǎng)基進(jìn)行高壓滅菌時(shí)，當(dāng) 壓力升到 108kPa 時(shí)維持 15-20min ，即可到達(dá)滅菌目的。此時(shí)滅菌鍋內(nèi)的溫 度可達(dá)。A、101 C B、110 C C、121 C D、12

15、0 C 6 、瓊 脂在固體培養(yǎng)基中的用量一般為 g/L 。 A 、 6-10 B 、 0.6-1.0 C 、 2-6D 、 0.2-0.6 7 、進(jìn)行莖尖培養(yǎng)脫毒時(shí)，通常以帶 1-3 個(gè)幼葉原基的莖尖 作外植體較適宜。 那么莖尖的長度約為 。 A 、 0.1-0.3mm B 、 0.3-0.5mm C 、 0.4-0.6mm D 、 0.6-0.8mm 8 、適合水稻、小麥、玉米等禾谷類作物花藥 培養(yǎng)的培養(yǎng)基是 。 A 、 MS 培養(yǎng)基 B 、 B 5 培養(yǎng)基 C 、 N 6 培養(yǎng)基 D 、 White 培養(yǎng)基 9 、在細(xì)胞懸浮液成批培養(yǎng)過程中，細(xì)胞數(shù)目會(huì)不斷發(fā)生變 化，其中細(xì)胞數(shù)目迅速增加，

16、增長速率保持不變的是 。 A 、減慢期 B 、 延遲期 C 、對數(shù)生長期 D 、靜止期 10 、在組織培養(yǎng)中，可通過 獲 得單倍體植株。 A 、受精胚珠的培養(yǎng) B 、胚培養(yǎng) C 、未授粉子房的培養(yǎng) D 、 胚乳培養(yǎng)四、簡答題：( 5 個(gè)小題，每題 5 分，共 25 分)1 、什么是植板率？小細(xì)胞團(tuán)的計(jì)數(shù)方法有幾種？ 植板率是指已形成細(xì)胞團(tuán)的單細(xì)胞與接種總細(xì)胞數(shù)的百分?jǐn)?shù)。 小細(xì)胞團(tuán)的 計(jì)數(shù)方法：在低倍顯微鏡直接計(jì)算視野中的小細(xì)胞團(tuán)數(shù)。細(xì)胞團(tuán)顯影法。在暗室中，在平板下放一張印相紙，翻開平板上方的光源，平板上的細(xì)胞團(tuán)就 印到相紙上，然后沖洗相紙即得細(xì)胞團(tuán)呈白色、培養(yǎng)基呈淡黑色的照片，再計(jì) 算白點(diǎn)的數(shù)

17、目，即為形成細(xì)胞團(tuán)的數(shù)目。2 、試管苗與常規(guī)苗相比有哪些特點(diǎn)？(1) 生長細(xì)弱； (2) 光合作用差 (3) 葉片氣孔數(shù)目少，活性差 (4) 根的吸收功能 弱(5) 對逆境的適應(yīng)和抵抗能力差3 、闡述外植體的成苗途徑。1) 外植體先形成愈傷組織，再形成完整植株 (1) 同時(shí)長芽和根 (2) 先長芽， 再長根 (3) 先長根，再長芽 2) 形成胚狀體，再發(fā)育成完整植株 3) 外植體直 接形成芽和根。4 、 目前鑒定脫毒苗的方法有哪些？直接檢測法； 指示植物法； 抗血清鑒定法； 分子生物學(xué)鑒定法： 1、雙鏈 RNA法(dsRNA) : 2、互補(bǔ)DNA(cDNA)檢測法：電鏡檢查法5、試管苗的生根培

18、養(yǎng)時(shí)應(yīng)注意哪些方面？1)用無機(jī)鹽濃度低的 White 及 12，13 或 14 MS、 B 5 培養(yǎng)基 2)適當(dāng)加大生長素 - NAA 的濃度，不用或少用細(xì)胞分裂素。也 可在無激素的培養(yǎng)基上 生根。 3 )降低蔗糖的濃度到 1.0-1.5% ，以增強(qiáng)植株的自養(yǎng)能力。 4 )參加 1%左右的活性碳；以免培養(yǎng)基過硬 5 )將光強(qiáng)度增加到 3000-10000 lux ， 以提高 小植株的光合能力 6 )光周期可用 24 小時(shí)光照或 16 小時(shí)， 8 小時(shí)黑 暗以利于形態(tài)建成。五、論述題：( 3 個(gè)小題，任選 2 個(gè)，每題 10 分，共 20 分)1 、無菌操作接種外植體時(shí)，應(yīng)注意哪些方面？(1)

19、在接種 4h 前用甲醛熏蒸接種室 ； (2) 在接種前 15- 20min ，翻開超凈 工作臺(tái)的風(fēng)機(jī)以及臺(tái)上的紫外燈； (3) 接種員先洗凈雙手，在緩沖間換好專用 實(shí)驗(yàn)服，并換穿拖鞋等； (4) 上工作臺(tái)后，用酒精棉球擦拭雙手，特別是指甲 處。然后 70%酒精噴霧降塵，并擦拭工作臺(tái)面； (5) 接種工具蘸 95%酒精，灼 燒； (6) 接種時(shí)將試管斜著，使試管口在酒精燈火焰上轉(zhuǎn)動(dòng)，灼燒數(shù)秒鐘。接 完種后，將管口在火焰上再灼燒數(shù)秒鐘。 (7) 接種時(shí)，接種員雙手不能離開工 作臺(tái)，不能說話、走動(dòng)和咳嗽等； (8) 接種完畢后要清理干凈并用酒精擦工作 臺(tái)。2 、如何純化別離的植物原生質(zhì)體并鑒定其活力

20、？原生質(zhì)體的純化： 1 )離心沉淀法：應(yīng)用原生質(zhì)體的比重大于溶液的性質(zhì)， 將原生質(zhì)體沉于底部。 2 )漂浮法：應(yīng)用滲透劑含量較高的洗滌液使原生質(zhì)體 漂浮于液體外表。 3 )界面法：選用兩種不同滲透濃度的溶液，使原生質(zhì)體介 于兩種溶液之間。 原生質(zhì)體活力的測定： 1 )、形態(tài)識(shí)別：形態(tài)上完整，呈圓 形，含有飽滿的細(xì)胞質(zhì)， 顏色鮮艷的即為存活的原生質(zhì)體。 2 )、染色識(shí)別： 1 、 0.1% 酚蕃紅或 Evans 藍(lán)染色，有活力的不被染色，死亡的被染上色。 2 、雙 醋酸鹽熒光素 ( FDA )染色法： 熒光顯微鏡下有熒光的即為有活性的原生質(zhì)體。3 、 無土栽培過程中應(yīng)注意哪些問題？ 1 、配制營

21、養(yǎng)液時(shí)，忌用金屬容器，更不能用它來存放營養(yǎng)液，最好使用 玻璃、搪瓷、陶瓷器皿。 2 、配制營養(yǎng)液時(shí)如使用自來水，應(yīng)參加少 量的乙二胺四乙酸鈉或腐殖酸鹽化合物來處理水中氯化物和硫化物。 3 基質(zhì)應(yīng)選用具有保水性、 排水性和一定強(qiáng)度及穩(wěn)定性， 而且無害的物質(zhì)。 4 在栽培中，需經(jīng)常測營養(yǎng)液中的 pH ，使其保持恒定。 5 在水培中，植 物需從營養(yǎng)液中吸氧，注意增加營養(yǎng)液中氧的含量。一、填空： 10 個(gè)小題，每題 2 分，共 20 分 1 、 體細(xì)胞胚胎發(fā)生 ， 器官發(fā)生 2 、 高溫、高濕、弱光和無菌 3 、含較低的銨鹽，較高的硝酸鹽和 鹽酸硫胺素 ； 無機(jī)鹽的濃度高。 4 、種類和濃度 、 生長

22、素和細(xì)胞分裂素的 比值 5 、莖尖長度不超過 0.1mm ，最小只有幾十微米的 ， 獲得無病毒植株。 6 、三，各種倍性 7 、用來打破種子的休眠 ， 挽救胚的發(fā)育，以獲得雜交種 8 、 壓片染色法 ， 醋酸洋紅 9 、胚狀體成苗 ， 愈傷組織再分化成苗 10 、 形態(tài)學(xué)鑒定、細(xì)胞學(xué)觀察、 DNA 內(nèi)切圖譜分析、同工酶分析三、選擇題 1.D 2.C 3.B 4.C 5.C 6.A 7.B 8.C 9.C 10.C一、填空： 10 個(gè)小題，每題 2 分，共 20 分 1 、原生質(zhì)體的別離方法 有 和 。 2 、胚胎培養(yǎng)包括 。3 、 White 培養(yǎng)基特點(diǎn)是 ； N 6 培養(yǎng)基的特點(diǎn)是 。 4

23、、進(jìn)行紙橋培養(yǎng)的最大優(yōu)點(diǎn)是 ；缺點(diǎn)是 。 5 、組織培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)選擇具有 外植體。 6 、花藥和花粉培養(yǎng)時(shí)，適宜的花粉發(fā)育時(shí)期是 。 7 、在細(xì)胞培養(yǎng)中，常由分散性較好的 來制備單細(xì)胞，也 可以用 從植物不同組織直接制備單細(xì)胞。 8 、原生質(zhì)體培養(yǎng)時(shí)常用的三個(gè)指標(biāo)： 、 和 。 9 、原生質(zhì)體融合的方法有 、 和 。 10 、細(xì)胞全能性學(xué)說的內(nèi)容為： 二、名詞解釋： 每題 2 分，共 20 分1 、外植體 : 是指植物組織培養(yǎng)中的各種接種材料。包括植物體的各種器官、 組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體等。2、愈傷組織培養(yǎng) : 是指將母體植株上的各個(gè)局部切下，形成外植體，接種到無 菌的培養(yǎng)基上，進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)

24、、生長和發(fā)育的一門技術(shù)。3 、胚培養(yǎng) : 是指將胚從種子、子房或胚珠中別離出來，在進(jìn)行組織培養(yǎng)，使 其生長發(fā)育形成幼苗的過程。4 、看護(hù)培養(yǎng)法 : 指用一塊活潑生長的愈傷組織來看護(hù)單個(gè)細(xì)胞，并使其生長 和增殖的方法。5、體細(xì)胞雜交 : 即原生質(zhì)體融合，就是使別離下來的不同親本的原生質(zhì)體，在 人工控制的條件下，像性細(xì)胞受精作用那樣互相融合成一體。6、快速繁殖 微繁殖 ：用組織培養(yǎng)的方法，使植物的局部器官、組織在人工 控制的適宜條件下，迅速擴(kuò)大培養(yǎng)，并移植到溫室或農(nóng)田繁殖出大量幼苗的繁 殖方法。7 、紙橋培養(yǎng)法：用酒杯狀的濾紙代替瓊脂，使杯底朝上塞入試管中，與液體 培養(yǎng)基接觸，將離體莖尖置于濾紙上

25、方進(jìn)行培養(yǎng)。8 、體細(xì)胞胚胎發(fā)生途徑 : 由外植體形成胚狀體，經(jīng)類似合子胚發(fā)育過程形成 新植株的過程。9 、 無病毒苗：是指不含該種植物的主要危害病毒，即經(jīng)檢測主要病毒在植物 內(nèi)的存在表現(xiàn)陰性反響的苗木 10、 胚狀體 ： 指在組織培養(yǎng)中，由一個(gè)非合子細(xì)胞 體細(xì)胞 ，經(jīng)過胚胎發(fā)生 和胚胎發(fā)育過程形成的具有雙極性的胚狀結(jié)構(gòu)。三、選擇題：單項(xiàng)選擇題， 10 個(gè)小題，每題 1.5 分，共 15 分1 、無菌操作接種時(shí)， 在操作前和操作期間要經(jīng)常用 擦拭雙手和臺(tái)面。 A 、 70% 酒精 B 、 85% 酒精 C 、 95% 酒精 D 、 0.1% 升汞 2 、在組織培養(yǎng)中， 一般用蔗糖作為碳源， 其

26、濃度為 。 A 、 1%-3%B 、 3%-5%C 、 5%-10%D 、 1%-5% 3 、在進(jìn)行花藥和花粉培養(yǎng)時(shí)，最適宜的花粉發(fā)育時(shí)期是。 A 、成熟花粉粒 B 、單核花粉期 C 、二核花粉期 D 、三核花粉期 4 、無機(jī)鹽的濃 度高，尤其硝酸鹽的用量大， 還含有一定數(shù)量銨鹽的培 養(yǎng)基是 。 A 、 White 培養(yǎng)基 B 、 N 6 培養(yǎng)基 C 、 MS 培養(yǎng)基 D 、 B 5 培養(yǎng)基 5 、進(jìn)行莖尖培 養(yǎng)脫毒時(shí)，通常以帶 1-3 個(gè)幼葉原基的莖尖作外植體較適宜；那么莖尖的長度約 為 。 A 、 0.1-0.3mm B 、 0.3-0.5mm C 、 0.4-0.6mm D 、 0.6-

27、0.8mm 6 、 培養(yǎng)室溫度一般要求常年保持在 左右。A、25 C B、22 C C、28 C D、24 C 7、在組織培養(yǎng)中，可通過 獲得單倍體植株。 A 、受精胚珠的培養(yǎng) B 、胚培養(yǎng) C 、胚乳培養(yǎng) D 、 未授粉子房的培養(yǎng) 8 、大多數(shù)植物在進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，要求培養(yǎng)基的 pH 為 。 A 、 5.6-5.8 B 、 5.8-6.0 C 、 6.0-6.2 D 、 6.3-6.5 9 、適合雙 子葉植物花藥培養(yǎng)的培養(yǎng)基是 。 A 、 MS 培養(yǎng)基 B 、 B 5 培養(yǎng)基 C 、 N 6 培養(yǎng)基 D 、 White 培養(yǎng)基 10 、將生長素類物質(zhì)配制成 0.5-1mg/ml 的母 液時(shí)，

28、可先用少量的 溶解，再定容到所需的體積。 A 、 100% 酒精 B 、 0.1mol NaOH C 、 85% 酒精 D 、 0.1mol HCl四、簡答題： 5 個(gè)小題，每題 5 分，共 25 分1 、簡述莖尖微繁技術(shù)的過程(1) 無菌培養(yǎng)體系的建立 (2) 芽的增殖 (3) 中間繁殖體的增殖 (4) 誘導(dǎo)生 根 (5) 試管苗的移植2 、 無土栽培與常規(guī)土壤栽培相比有哪些優(yōu)點(diǎn)？3 、單倍體植株染色體加倍的方法有哪些？1) 自然加倍 2) 人工加倍： 用秋水仙素溶液浸苗、處理愈傷組織和用含 0.4% 秋水仙素的羊毛脂涂抹單倍體植株的頂芽、腋芽，可得到能結(jié)實(shí)的二倍體植株。3) 愈傷組織反復(fù)繼

29、代培養(yǎng)后，經(jīng)分化培養(yǎng)可得到二倍體植株。4 、組織培養(yǎng)一般進(jìn)行哪幾道工序？1) 、培養(yǎng)器皿的清洗； 2) 、培養(yǎng)基的配制、分裝和高壓滅菌； 3) 、無菌操作 材料的外表滅菌和接種； 4) 、將培養(yǎng)物放到培養(yǎng)室培養(yǎng)； 5) 、試管苗的馴化、 移栽和初期管理。5 、愈傷組織的器官發(fā)生有哪 4 種情況？ (1)愈傷組織僅有根或芽器官的分別形成，即無根的芽或無芽的根；( 2)先形成芽，再在芽伸長后，在其莖的基部長出根而形成小植株，多數(shù)植物屬這種 情況； ( 3)先產(chǎn)生根，再從根的基局部化出芽而形成小植株。這種情況較難 誘導(dǎo)芽的形成，尤其對于單子葉植物； ( 4 )先在愈傷組織的鄰近不同部位 分別形成芽和根，然后兩者結(jié)合起來形成一株小植株。少見五、論述題：( 3 個(gè)小題，任選 2 個(gè)，每題 10 分，共 20 分)1 、什么是細(xì)胞懸浮培養(yǎng)？簡述成批培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)的的特點(diǎn)。細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是 使離體的植物細(xì)胞懸浮在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行的無菌培養(yǎng)。 1 ) 成批培養(yǎng)的特點(diǎn)： (1) 細(xì)胞生長在固定體積的培養(yǎng)基上， 直至養(yǎng)分耗盡 (2) 用攪拌的方法使細(xì)胞團(tuán)和細(xì)胞均勻分布 3 細(xì)胞數(shù)目呈現(xiàn)慢 快 慢 停止生長的變化 4 必須更換新鮮培養(yǎng)基才能進(jìn)行下一批培養(yǎng)。 2 連續(xù)培 養(yǎng)的特點(diǎn)： 1 由于不斷參加新鮮培養(yǎng)基，保證了養(yǎng)分的充分供給，不