豬繁殖與呼吸綜合征病毒課件

1、豬繁殖與呼吸綜合征病毒1 豬繁殖與呼吸綜合征病毒豬繁殖與呼吸綜合征病毒 (PRRSV)(PRRSV) 豬繁殖與呼吸綜合征病毒2 PRRSVPRRSV屬于屬于尼多病毒目、動脈炎病毒科，該科尼多病毒目、動脈炎病毒科，該科 還包括馬動脈炎病毒（還包括馬動脈炎病毒（EAVEAV）、鼠乳酸脫氫酶）、鼠乳酸脫氫酶 增高癥病毒（增高癥病毒（LDVLDV）、猴出血熱病毒（）、猴出血熱病毒（SHFVSHFV） PRRSV LDV EAV SHFV 一、豬繁殖與呼吸綜合征病毒的分類地位一、豬繁殖與呼吸綜合征病毒的分類地位 豬繁殖與呼吸綜合征病毒3 豬繁殖與呼吸綜合征豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)(PRRS)，又稱

2、藍耳病，又稱藍耳病 19871987年年首次暴發(fā)于美國北卡羅納州首次暴發(fā)于美國北卡羅納州“神秘病神秘病”， 導致至少導致至少100100萬頭豬死亡萬頭豬死亡 19911991年，年，PRRSPRRS席卷歐洲大陸席卷歐洲大陸 19961996年，年，PRRSPRRS在我國首次爆發(fā)；同年，丹麥再次暴在我國首次爆發(fā)；同年，丹麥再次暴 發(fā)發(fā)PRRSPRRS，全國，全國40-50%40-50%的母豬出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎和斷奶的母豬出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎和斷奶 前仔豬的大量死亡前仔豬的大量死亡 20002000年，美國再次大爆發(fā)年，美國再次大爆發(fā)PRRSPRRS，并將其列為當前最，并將其列為當前最 嚴重的豬病毒性傳染病

3、嚴重的豬病毒性傳染病 目前，目前，PRRSPRRS遍及世界養(yǎng)豬國，并呈流行態(tài)勢遍及世界養(yǎng)豬國，并呈流行態(tài)勢 二、二、PRRSVPRRSV的發(fā)現(xiàn)與流行的發(fā)現(xiàn)與流行 豬繁殖與呼吸綜合征病毒4 三、豬繁殖與呼吸綜合征的危害三、豬繁殖與呼吸綜合征的危害 母豬母豬早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、 弱仔弱仔 公豬公豬精液品質(zhì)下降精液品質(zhì)下降 初生仔豬初生仔豬高死亡率高死亡率 其它年齡豬其它年齡豬呼吸系統(tǒng)疾病呼吸系統(tǒng)疾病 豬繁殖與呼吸綜合征病毒5 根據(jù)美國農(nóng)業(yè)部根據(jù)美國農(nóng)業(yè)部20052005年統(tǒng)計的資料表明，年統(tǒng)計的資料表明，20042004年，年， 藍耳病導致的直接經(jīng)濟損失為藍耳病導致的直接經(jīng)濟損失為

4、5.60325.6032億美元。億美元。（ Neumann et al. J Am Vet Med Assoc. 2005 Aug Neumann et al. J Am Vet Med Assoc. 2005 Aug 1;227(3):385-92)1;227(3):385-92)。 豬繁殖與呼吸綜合征的危害豬繁殖與呼吸綜合征的危害 豬繁殖與呼吸綜合征病毒6 20062006年，高致病性年，高致病性PRRSPRRS在我國在我國1010多個省市大規(guī)多個省市大規(guī) 模爆發(fā)，至少模爆發(fā)，至少200200萬頭豬發(fā)病，不僅對我國養(yǎng)豬萬頭豬發(fā)病，不僅對我國養(yǎng)豬 業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失，而且導致了嚴重的環(huán)業(yè)造

5、成巨大的經(jīng)濟損失，而且導致了嚴重的環(huán) 境問題。境問題。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒7 自自20092009年年6 6月份以來，安徽、湖北等地出現(xiàn)月份以來，安徽、湖北等地出現(xiàn)PRRSPRRS疫疫 情，分析了情，分析了6-116-11月份從安徽、湖北、湖南等省份月份從安徽、湖北、湖南等省份 采集的采集的394394頭發(fā)病豬的感染情況，發(fā)現(xiàn)高致病性頭發(fā)病豬的感染情況，發(fā)現(xiàn)高致病性 PRRSVPRRSV變異株陽性率為變異株陽性率為75.6%75.6%。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒8 四、四、PRRSV病毒粒子與基因組病毒粒子與基因組 豬繁殖與呼吸綜合征病毒9 PRRSV為有囊膜的單股正鏈RNA病毒 病毒粒子呈

6、球形，直徑為48-83nm， 平均大小為50-65nm 核衣殼直徑25-30nm，核衣殼呈二 十面體對稱 外繞一脂質(zhì)雙層膜，囊膜表面有明 顯的纖突 PRRSV病毒粒子病毒粒子 AAA 豬繁殖與呼吸綜合征病毒10 藍耳病病毒基因組組成與復制藍耳病病毒基因組組成與復制 豬繁殖與呼吸綜合征病毒11 主要結(jié)構(gòu)蛋白主要結(jié)構(gòu)蛋白GP5GP5 GP5GP5蛋白：由蛋白：由ORF5ORF5編碼，是編碼，是PRRSVPRRSV最主要的保護性最主要的保護性 抗原?？箍乖??？笹P5GP5的單抗能中和病毒的單抗能中和病毒, ,而且目前唯一確而且目前唯一確 定的中和表位位于定的中和表位位于GP5GP5的胞外區(qū)，是研究的

7、胞外區(qū)，是研究PRRSPRRS新新 型疫苗的良好目標基因。型疫苗的良好目標基因。 豬繁殖與呼吸綜合征病毒12 主要結(jié)構(gòu)蛋白主要結(jié)構(gòu)蛋白M M M M蛋白：由蛋白：由ORF6ORF6編碼，是編碼，是PRRSVPRRSV中最保守的蛋中最保守的蛋 白，是一種非糖基化蛋白。與白，是一種非糖基化蛋白。與GP5GP5通過二硫鍵通過二硫鍵 連接形成異源二聚體連接形成異源二聚體 豬繁殖與呼吸綜合征病毒13 主要結(jié)構(gòu)蛋白主要結(jié)構(gòu)蛋白N N N N蛋白：即核衣殼蛋白，由蛋白：即核衣殼蛋白，由ORF7ORF7編碼，免疫原性編碼，免疫原性 極強，但針對此蛋白的抗體均是非中和性的抗體。極強，但針對此蛋白的抗體均是非中和

8、性的抗體。 甚至有研究表明桿狀病毒表達的甚至有研究表明桿狀病毒表達的N N蛋白不僅不能提蛋白不僅不能提 供保護，反而對保護有干擾作用。供保護，反而對保護有干擾作用。 可能的原因？可能的原因？ 豬繁殖與呼吸綜合征病毒14 非結(jié)構(gòu)蛋白非結(jié)構(gòu)蛋白 解析非結(jié)構(gòu)蛋白的結(jié)構(gòu)與功能是目前研究的重點解析非結(jié)構(gòu)蛋白的結(jié)構(gòu)與功能是目前研究的重點 豬繁殖與呼吸綜合征病毒15 EAVEAV非結(jié)構(gòu)蛋白研究非結(jié)構(gòu)蛋白研究 豬繁殖與呼吸綜合征病毒16 五、五、PRRSVPRRSV的生物學特性的生物學特性 一種血清型，兩種基因型（歐洲型、美洲型），兩一種血清型，兩種基因型（歐洲型、美洲型），兩 種基因型間的全基因組序列同源性

9、僅為種基因型間的全基因組序列同源性僅為50-60%50-60%，但，但 臨床表現(xiàn)、病理變化非常相似（是如何進化的？）臨床表現(xiàn)、病理變化非常相似（是如何進化的？） 具有比較嚴格的宿主細胞特異性，在體內(nèi)，肺泡巨具有比較嚴格的宿主細胞特異性，在體內(nèi)，肺泡巨 噬細胞是其主要靶細胞噬細胞是其主要靶細胞 通過受體介導的內(nèi)吞侵入細胞。目前已經(jīng)確定的受通過受體介導的內(nèi)吞侵入細胞。目前已經(jīng)確定的受 體主要有：硫酸乙酰肝素、唾液酸粘附素、體主要有：硫酸乙酰肝素、唾液酸粘附素、CD163CD163 豬繁殖與呼吸綜合征病毒17 六、六、PRRSVPRRSV的的4 4大特征大特征 1 1、高度變異、高度變異 2 2、免

10、疫抑制、免疫抑制 3 3、持續(xù)感染、持續(xù)感染 4 4、抗體依賴性增強、抗體依賴性增強 豬繁殖與呼吸綜合征病毒18 （1 1）高度變異）高度變異 豬藍耳病病毒基因組結(jié)構(gòu)豬藍耳病病毒基因組結(jié)構(gòu) 豬繁殖與呼吸綜合征病毒19 l1996-20091996-2009年國內(nèi)年國內(nèi)PRRSVPRRSV分離株基分離株基 因組的遺傳進化，揭示我國因組的遺傳進化，揭示我國PRRSVPRRSV 存在存在4 4個亞型個亞型 l代表毒株：代表毒株： 疫苗株疫苗株 CH-1aCH-1a株株 HB-1(2002)HB-1(2002)株株 JXA1JXA1株株 1996-20091996-2009年中國分離株年中國分離株 全

11、基因組聚類分析全基因組聚類分析 （6767株株P(guān)RRSVPRRSV） 豬繁殖與呼吸綜合征病毒20 1996-20091996-2009年中國分離株年中國分離株 ORF5ORF5基因進化樹分析基因進化樹分析 (496(496株株P(guān)RRSVPRRSV的的ORF5ORF5序列序列) ) 07QN HeNY1 XJ07 AHES3 DY07 LA TQ FX07 JN GXHZ12 HuNXB ZJ06 SY0608 GXHZ4 BQ Henan-1 GY Henan-1(2) GXHZ16 HuN711 EF534356 HeNMN BQ07 HeNWY LJ JX-1 JXHR GXHZ21 GX

12、HZ14 GXHZ19 SD HSH08 HeN-14 GDSD1 YNYX3 YNYX1 NXZHW NXZHN NXHY Rongchang-1 GSLZH YN03 YN02 GZZB GZWM GZKB GZKY GZHW1 GZDJ GZHX GZCJ GZHL GZWB ZJWL HZ061226 SDWF2 henan07-1 FH NB070319 SZ-L WJ-1 SH HBGS JX0504 WJ-3 FY HB-Tsh1 HB-Xt1 Jiangxi Hainan-2 Hainan-1 LC07 BB07 CX07 TQ07 WF07 TWO7 KS06 LS06 SH

13、02 CZ07 NB HLJMZ3 HLJMZ1 HLJMZ2 GXLZ7 HeN-9 HeN-4 SZH08 Jiangxi-1 HUB HB1 HB3 HB2 SD5 XH-GD WUH3 HPBEDV JXA1 SD14 HUN11 ZX07 CL07 WJ-2 AHZHP HuN829 HuN504 HeN-1 HUB2 HUB1 YH 06-JS-1 HeN-16 06-HZ-2 HeN-15 HeN-10 HUN4 JX143 06-SH-2 NX06 FY080108 SHX 06-JX-2 07NM BJsy06 HeN-LY JX1 ZJCJ HEN46 HeN-13 Hun

14、an-3 HeNPD JXNS HZ070105 WUH2 07HEN 07HEBTJ 06-TZ SD4 Guizhou-1 Hunan-2 GXHZ13 GD(2) HUN4(2) NM1 07HBEZ Hunan-1 CA HEB1 HUN3 SD7 HuN329 JSyx FY060915 SD3 HNly HUN7 HUN5 BJ HeN-JY NT JS-B LY07 Jiangxi(2) SC07 06-JX 06-HZ-1 GXHZ2 JiangSu AHL81 ZSB JXQS1 HBX05 Jiangxi-3 Jiangxi-3(2) Jiangxi-2 AH-1 HNsf

15、 ZS070921 GD1 GD3 GD4 GD2 06-JX-5 06-JX-3 FZ SCH07 AH1 ShanDong-3 SD-JN ShanDong-3(2) 06-JS-2 AHZC YN2008 SX2007 GS2008 XL2008 JX2006 HN2007 GD2007 SHH JXwn06 TJ JLYS LN TJDMJ TJZHJ3 TJZHJ2 HUNX4 HUN17 GXLZ5 GXHP-4 GXHP-2 GXHP-6 GXHP-5 GXHP-3 HNyz HNld GD 07BJ GDY1/2007 GDY2/2007 GDYF106-JX-4 HUNH4

16、XS HUN6 HUNH2 HUN15 HeNE1 WUH1 AHYT JXTZ JXCD9 JXYC HBTZ JXD05 JXA10 JXNC8 JXB21 JXZ3 JXBH3 JXC2 AHCFZC HLJZY HLJDF JX5 JX-2(2) HUN2 JX4 JX3 HUN16 AHCFSH AHXA YN10 BD-8 EU075303 HQ-5 PRRSV-J31 AHHG JXGD HeNZK HM-1 GC-2 GCH-3 ST-7 HQ-6 HB-4(hs) HUNL1 AHXS4 AHAQ3 AHHB NB/04 Wujin/06 HeN-2 HeN-2(2) HeN

17、-5 HeN-8 SX-2 Yizheng/06 Rugao/06 Lianyungang/05 04-HZ-3 Siyang/06 GDZC1 CC-2 JXH72 JXHUA1 HBD32 HBH52 HBA81 SH061130 HBD41 SX-3 HBXT HeN-6 Taizhou/06 HeNYE4 HeNXY2 Changzhou/05 TZ-1 SD-ZQ TZ-2 Zhenjiang/05 HeN-12 GDHZ1 Tianchang/05 SX-1 05-JX-1 HBAN1 HB-1/3.9 HB-1(3.9) HB-1(sh)/2002 HZ-1 NB-3 HZ-4

18、SX-4 HZ-2 HB-3(cz) HB-3(cz)(2) AHHU2 04-HZ-1 HZ-X/2003 JX-3 GDCZ2 NB-1 GDDG1 GDCZ1 GD-1 AHXZ AHW01 05-QZ Suzhou/05 JX-2 XS070425 YN06 Yunnan-08 HeN-11 HBSY5 HB066 HBJZ2 AHTM JXQS3 WZ HeN-7 HBSZ Em2007 HBX04 HBJM2 HB-2(sh)/2002 CH-1a CH-1R YA1 CH2004 CH2003 CH2002 JA142 NVSL SP S-1 LMY ZJJ07 16244B F

19、J04A SD1 SD-2 SD6 PRRSV03 PRRSV02 VR-2332 PA8 JXHS PL97-1 PL97-1-LP1 YN08 YN01 YN05 CC-1 YN04 YN09 YN07 AY684971 GS2003 GS2002 GS2004 HZ07 AF090173 RespPRRS MLV MLV RespPRRS Repro ZJJ04 QZ ZJJ05 NH04 XX03 HBC86 HBH61 HeN-3 SX071226 SD2 SD-1 LY03 AY885248 WF03 PRRSV01 S1 HT06 AY737282 LS05 TW07-1 AY5

20、13611 FJ-1 MN184A MN184B LV4.2.1 LV 0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 l1996-20091996-2009年國內(nèi)年國內(nèi)PRRSVPRRSV分離株分離株ORF5ORF5基因的遺傳進化基因的遺傳進化 ，發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)GP5GP5蛋白不僅存在抗原漂移蛋白不僅存在抗原漂移 豬繁殖與呼吸綜合征病毒21 HP-PRRSVHP-PRRSV的溯源的溯源(1)(1) 豬繁殖與呼吸綜合征病毒22 HP-PRRSVHP-PRRSV的溯源的溯源(2)(2) 豬繁殖與呼吸綜合征病毒23 Based on GP5(2002) Based on GP5(2006)

21、 Based on Genome and GP5(2009) 疫苗疫苗 株株 CH-1a HB-1 HB-1強毒株強毒株 疫苗株疫苗株 CH-1a HB-1 HP-PRRSV Li et al., 2010 HP-PRRSVHP-PRRSV的溯源的溯源(3)(3) 豬繁殖與呼吸綜合征病毒24 l藍耳病病毒在我國高度變異藍耳病病毒在我國高度變異 病毒本身的特性（病毒本身的特性（RNARNA病毒）：突變、病毒）：突變、 缺失、插入缺失、插入 免疫壓力免疫壓力 疫苗疫苗/ /疫苗、強毒疫苗、強毒/ /強毒、強毒強毒、強毒/ /疫苗株疫苗株 間的重組間的重組 豬繁殖與呼吸綜合征病毒25 （2）免疫抑制

22、）免疫抑制 Temporal sequence of events after infection of a pig with PRRSV (From Lopez et al, 2004) 慢慢 中和抗體？中和抗體？ 細胞免疫？細胞免疫？ 豬繁殖與呼吸綜合征病毒26 IFN replicatio n PRRSV proteins IKK TBK1 IPS-1IPS-1 STINGSTING PRRSVPRRSV抑制干擾素抑制干擾素 等天然免疫反應等天然免疫反應 PRRSVPRRSV編碼蛋白誘編碼蛋白誘 導的細胞免疫能導的細胞免疫能 力也不強力也不強 抑制細胞免疫抑制細胞免疫 豬繁殖與呼吸綜合征病毒27 非中和表位的誘騙效應？非中和表位的誘騙效應？ 過度糖基化的屏蔽效應