日本分光fp6500熒光分光光度計(jì)儀器說明書

1、前言此儀器手冊(cè)用于儀器使用指導(dǎo)。并有意指導(dǎo)第一次使用的用戶如何適當(dāng)應(yīng)用儀器，并為有經(jīng)驗(yàn)使用者作參考。在使用儀器前，請(qǐng)仔細(xì)閱讀此儀器手冊(cè)，確認(rèn)您完全理解它的內(nèi)容。此手冊(cè)對(duì)操作者在操作所有過程中都易于理解。當(dāng)不用儀器時(shí)，請(qǐng)妥善保存手冊(cè)。如丟失手冊(cè)，請(qǐng)從您的當(dāng)?shù)豭asco公司代理手中獲到代替手冊(cè)。注意：此軟件，您可用同樣的用戶界面來分析各種光譜儀的廣泛數(shù)據(jù)。此手冊(cè)解釋了jasco光譜儀應(yīng)用數(shù)據(jù)軟件提供的所有功能。我們盡力對(duì)所有的jasco儀器應(yīng)用此軟件的用戶解釋清楚所有的功能。但是如果您找不到一特定功能的說明，請(qǐng)與jasco在當(dāng)?shù)氐拇砺?lián)系。售后服務(wù)儀器的售后服務(wù)聯(lián)系當(dāng)?shù)氐膉asco代理。另外，移動(dòng)

2、儀器到另一個(gè)地方請(qǐng)聯(lián)系您的jasco代理。根據(jù)零件號(hào)從您的jasco代理中更換損耗零件。如果不知道零件號(hào)，向您的jasco代理提供貴儀器的機(jī)型和序列號(hào)。不要返還污染的有害于jasco員工健康的樣品或零件。注釋（1） 對(duì)由于樣品使用導(dǎo)致的間接損害，jasco不負(fù)任何直接或間接責(zé)任。（2） 禁止用jasco軟件不經(jīng)授權(quán)復(fù)制軟件轉(zhuǎn)移或授權(quán)第三方用此軟件揭發(fā)關(guān)于此軟件的機(jī)密信息更改軟件在多個(gè)工作站、網(wǎng)絡(luò)終端或其他方式（在網(wǎng)絡(luò)專利使用權(quán)轉(zhuǎn)讓協(xié)議情況下不可應(yīng)用，最終解釋權(quán)為jasco）應(yīng)用此軟件（3） 對(duì)于產(chǎn)品的改進(jìn)，如沒注釋，此手冊(cè)內(nèi)容服從更改。（4） 此手冊(cè)完整，正版發(fā)行。（5） 此手冊(cè)不保證任何專利

3、或其他權(quán)力有效。（6） 通常，公司名稱和產(chǎn)品名稱為各個(gè)公司的商標(biāo)或注冊(cè)商標(biāo)。（7） jasco和jasco標(biāo)識(shí)為jasco公司的注冊(cè)商標(biāo)。保修期限jasco所售商品，除個(gè)別情況外，從出貨之日起到材料和技術(shù)有問題一年之內(nèi)免費(fèi)保修。如果在保修期內(nèi)，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品任何問題，jasco將免費(fèi)維修或更換損壞部件或產(chǎn)品。以下情況不保修損壞。1） 不適當(dāng)或不充分安裝2） 不適當(dāng)操作、維護(hù)、調(diào)整或校準(zhǔn)。3） 未經(jīng)許可修改或誤用。4） 授權(quán)jasco代理不提供損耗零件的使用。5） 由于不適當(dāng)溶液、樣品或環(huán)境氣體腐蝕作用。6） jasco不可控力，包括自然災(zāi)害。7） 損耗部件保修期有其他說明。在保修期間提供所有零件的保

4、修。超過原始產(chǎn)品保修期維修。對(duì)于質(zhì)量維修服務(wù)，確認(rèn)您儀器的機(jī)型和序列號(hào)后，聯(lián)系您在當(dāng)?shù)氐膉asco代理。目錄前言i售后服務(wù)ii注釋ii保修期限iii目錄iv1 介紹11.1 關(guān)于此手冊(cè)11.2 前言11.3 符號(hào)說明11.4 熒光光譜儀軟件窗口22 啟動(dòng)/關(guān)閉順序及spectra manager42.1 啟動(dòng)順序42.1.1 打開熒光光譜儀42.1.2 打開電腦進(jìn)入windows42.1.3 spectra manager 啟動(dòng)順序42.2 關(guān)閉順序62.2.1 退出測(cè)量或分析系統(tǒng)62.2.2 關(guān)閉光譜儀和主機(jī)62.3 spectra manager參考63. 定量分析和光譜測(cè)量103.1 定

5、量分析介紹103.1.1 定量分析程序概要103.1.2 啟動(dòng)程序123.1.3 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線133.1.4 修改標(biāo)準(zhǔn)曲線173.1.5 保存定量分析方法173.1.6 未知物測(cè)量183.1.7 保存數(shù)據(jù)183.1.8 打印結(jié)果193.1.9 退出定量分析203.2 光譜測(cè)量介紹203.2.1 光譜測(cè)量概述203.2.2 啟動(dòng)光譜測(cè)量程序223.2.3 設(shè)置光譜測(cè)量模式233.2.4 設(shè)置測(cè)量參數(shù)233.2.5 樣品測(cè)量243.2.6 保存譜圖263.2.7 打印結(jié)果263.2.8 關(guān)閉儀器274. quantitative analysis 程序詳解284.1 file菜單284.1.1 n

6、ew.294.1.2 open.304.1.3 save314.1.4 save as.314.1.5 page setup.324.1.6 print setup.324.1.7 print.334.1.8 exit334.2 method菜單334.2.1 new.334.2.2 open.394.2.3 save as.394.2.4 modify.404.2.5 information.404.3 measurement菜單404.3.1 measurement.414.3.2 parameters.414.3.3 blank correction.424.3.4 shutter424

7、.4 edit菜單434.4.1 copy picture434.4.2 copy bitmap434.4.3 copy text434.4.4 invalid434.4.5 data input.434.4.6 title.444.5 view菜單444.5.1 font.444.5.2 format.454.5.3 cell width.454.5.4 scale.464.5.5 pattern.464.5.6 grid.474.5.7 style.474.5.8 marker.484.6 window菜單494.7 help菜單495. spectrum measurement 光譜測(cè)量

8、程序詳解505.1 measurement 菜單515.1.1 start515.1.2 parameter.參數(shù)525.1.3 goto wavelength.595.1.4 auto zero595.1.5 shutter595.1.6 exit605.2 view菜單605.2.2 pattern.605.2.3 grid.615.2.4 style.615.2.5 font.625.3 help菜單636time course measurement 程序詳解646.1 measurement菜單646.1.1 start646.1.2 parameter.646.2 view菜單67

9、6.3 help菜單677 fixed wavelength measurement687.1 start687.2 blank, blank correct687.3 parameters.698 fp intensity monitor719. phospho. spectrum measurement磷光光譜測(cè)量(僅限fp-6500/6600)739.1 measurement菜單739.1.1 start739.1.2 parameters.749.2 view菜單769.3 help菜單7610. phosphorescence lifetime measurement磷光壽命測(cè)量（

10、僅限fp-6500/6600）7710.1 measurement菜單7710.1.1 start7710.1.2 parameters.7810.2 view菜單7910.3 help菜單7911. 信噪比測(cè)量（fp-6300功能）8012 environment環(huán)境設(shè)定8212.1 hardware setting菜單8212.2 diagnosis 菜單8312.3 accessories setting8313 附錄8613.1 安裝光譜管理軟件8613.1.1 安裝前8613.1.2 軟盤安裝光譜管理軟件8613.2 指定串行端口（rs-232c）931 介紹本章介紹了此手冊(cè)的用途與

11、組成。1.1 關(guān)于此手冊(cè) 此手冊(cè)包括12章和一個(gè)附錄。在使用熒光光譜儀前，請(qǐng)認(rèn)真閱讀此手冊(cè)，確保對(duì)光譜儀的各項(xiàng)操作都完全了解。 以下microsoft windows簡(jiǎn)稱windows。 注意：此說明書用于fp-6300/6500/6600。請(qǐng)注意三者應(yīng)用上的不同。如需要，請(qǐng)閱讀相關(guān)信息。第一章 介紹本章對(duì)各種符號(hào)進(jìn)行了解釋說明，并列出此手冊(cè)的組成部分。在使用spectra manager軟件前請(qǐng)閱讀本部分。第二章 開始/關(guān)閉程序及jasco公司的spectra manager軟件。本章介紹了熒光光譜儀的操作程序，包括開始/關(guān)閉系統(tǒng)。主機(jī)獨(dú)立應(yīng)用時(shí)的特殊操作將在下面部分給以詳細(xì)介紹。另外，本章

12、介紹了spectra manager應(yīng)用菜單程序。第三章 定量分析和光譜測(cè)量本章介紹了定量分析和光譜測(cè)量。介紹內(nèi)容同樣適用于那些在windows和熒光光譜測(cè)量方面經(jīng)驗(yàn)較少者使用。第四章到第十一章 標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量程序詳解這幾章詳細(xì)介紹了測(cè)量程序每個(gè)部分的功能。第十二章 外部環(huán)境詳解本章主要介紹了如何放置儀器及自診斷功能。附錄本附錄介紹了如何安裝軟件及適宜的串行端口設(shè)置。1.2 前言此熒光光譜軟件在windows下運(yùn)行。因此，一些windows中的基本操作也適用于本軟件。本說明書沒有介紹windows中的基本操作，如打開菜單、選擇命令、復(fù)制文件等。對(duì)于從未使用過或頭一次使用windows的用戶請(qǐng)?jiān)谑褂么?/p>

13、軟件前先熟悉windows的基本操作。1.3 符號(hào)說明以下是在此說明書中出現(xiàn)的符號(hào)。一般符號(hào)符號(hào)含義measurement 菜單parameter. 命令information 對(duì)話窗菜單、命令和文字框的名稱用“”括號(hào)括起，對(duì)菜單、命令和文字框等功能作簡(jiǎn)要說明。, 按鈕的名稱用“”。鍵盤操作符號(hào)含義shift ctrl方框中的符號(hào)可以在鍵盤中找到。alt , f用逗號(hào)分開的鍵連續(xù)敲擊，如左側(cè)的alt鍵被點(diǎn)擊，而后f鍵被點(diǎn)擊。shift + 這兩個(gè)用“+”分開的鍵同時(shí)點(diǎn)擊。如左側(cè)，shift鍵被點(diǎn)擊的同時(shí)另一個(gè)鍵也被點(diǎn)擊。鼠標(biāo)操作符號(hào)含義point移動(dòng)鼠標(biāo)到指定位置。right-click快速點(diǎn)

14、擊鼠標(biāo)右鍵。left-click快速點(diǎn)擊鼠標(biāo)左鍵。double-click連續(xù)快速點(diǎn)擊鼠標(biāo)左鍵兩次。drag指定一個(gè)項(xiàng)目，點(diǎn)擊左鍵并拖動(dòng)到指定位置，釋放。1.4 熒光光譜儀軟件窗口這一部分介紹了在熒光光譜軟件中各個(gè)部分的位置和功能。以spectrum measurement 窗口為例說明。fig. 1.1 spectrum measurement 窗口項(xiàng)目功能標(biāo)題欄 (title bar)顯示文件名稱。激活窗口標(biāo)題欄與非激活窗口有不同的顏色。菜單欄 (menu bar)包括程序菜單。每個(gè)菜單包括了一系列的命令。監(jiān)視器欄 (monitor bar)顯示目前測(cè)量參數(shù)。最大化窗口 (maximize

15、 button)擴(kuò)大窗口使其全屏。如果當(dāng)前窗口已經(jīng)最大化，此按鍵就被還原鍵所代替。點(diǎn)擊還原鍵使窗口回到原來的大小和位置，也就是最大化時(shí)的尺寸和位置。最小化窗口 (minimize button)使激活窗口變?yōu)閳D標(biāo)。退出窗口 (exit button)關(guān)閉激活窗口。2 啟動(dòng)/關(guān)閉順序及spectra manager本章描述了熒光光譜儀和計(jì)算機(jī)的啟動(dòng)與關(guān)閉順序，及熒光光譜儀和spectra manager的應(yīng)用。2.1 啟動(dòng)順序2.1.1 打開熒光光譜儀把光譜儀上的電源開關(guān)打到開（on）的位置。fig. 2.1 電源開關(guān)位置當(dāng)光譜儀電源打開后，電源指示燈被點(diǎn)亮。光源大約需要5分鐘左右來穩(wěn)定，然后進(jìn)

16、行測(cè)量。2.1.2 打開電腦進(jìn)入windows打開電腦主機(jī)和顯示器的電源開關(guān)。關(guān)于windows啟動(dòng)的有關(guān)信息請(qǐng)參考windows的說明書。2.1.3 spectra manager 啟動(dòng)順序（1）進(jìn)入windows 后，jasco的spectra manager被激活（如圖2.2）。出現(xiàn)spectra manager窗口（如圖2.3）。fig. 2.2 從開始菜單中選擇spectra managerfp-6300 fp-6500/6600fig. 2.3 spectra manager 窗口注意：spectra manager窗口中列出了所有與熒光光譜儀有關(guān)的應(yīng)用程序。圖2.3中顯示的是標(biāo)準(zhǔn)

17、應(yīng)用程序，除標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用程序外，選裝的應(yīng)用程序也會(huì)出現(xiàn)在spectra manager的窗口中，我們將在2.3節(jié)加以介紹。（2）從應(yīng)用程序列表中，雙擊所需要的程序，選定的程序開啟，相應(yīng)的窗口被打開。熒光光譜儀會(huì)隨軟件自動(dòng)開啟，儀器需要預(yù)熱大約2分鐘。儀器啟動(dòng)信息通過程序顯示出來。例如，當(dāng)spectrum measurement程序開始時(shí)，顯示初始化窗口（如圖2.4），接著出現(xiàn)spectrum measurement窗口（如圖2.5）。注意：第五章將詳細(xì)描述spectrum measurement程序。fig. 2.4 開始時(shí)的初始化窗口fig. 2.5 spectrum measurement 窗

18、口2.2 關(guān)閉順序這一部分介紹了光譜儀和電腦的關(guān)閉程序。2.2.1 退出測(cè)量或分析系統(tǒng)通過以下步驟可以退出measurement或analysis系統(tǒng)。（1）從file或measurement菜單中選擇exit。如果數(shù)據(jù)被修改或者沒有保存，將彈出對(duì)話框問是否保存數(shù)據(jù)，閱讀信息并點(diǎn)擊適合的選項(xiàng)。（2）選擇application-exit選項(xiàng)關(guān)閉spectra manager窗口，退出spectra manager。（3）退出windows。2.2.2 關(guān)閉光譜儀和主機(jī) （1）關(guān)閉電腦主機(jī)和顯示器的開關(guān)。不要忘記關(guān)閉顯示器的開關(guān)。（2）確保樣品室是空的，然后再把光譜儀的開關(guān)打到關(guān)閉（off）位置。

19、2.3 spectra manager參考spectra manager是一個(gè)應(yīng)用平臺(tái)，用于啟動(dòng)光譜測(cè)量、定量分析和光譜儀環(huán)境設(shè)置等程序，以及選擇開啟/關(guān)閉光譜儀和設(shè)置串行端口等。fp-6300 fp-6500/6600fig. 2.6 spectra manager 窗口圖 2.6 是標(biāo)準(zhǔn)measurement和analysis項(xiàng)目菜單。當(dāng)安裝附加選項(xiàng)，附加選項(xiàng)也出現(xiàn)在此菜單中。analysis菜單出現(xiàn)在左側(cè)，而measurement菜單在右側(cè)。開始測(cè)量雙擊菜單中的項(xiàng)目。如果光譜儀還沒有啟動(dòng)，選項(xiàng)與光譜儀同時(shí)開始啟動(dòng)。注意：如果同一臺(tái)計(jì)算機(jī)上還連有其它jasco光譜儀器，電腦可識(shí)別不同的儀器

20、，從instrument下拉菜單中選擇要使用的儀器。窗口中的界面變?yōu)樗x擇儀器的應(yīng)用程序。在有些情況下需要改變串行端口（在“13.2 指定串行端口”中詳述）。在標(biāo)準(zhǔn)光譜儀中，以下選項(xiàng)在spectra manager中都有記錄。測(cè)量程序（1）quantitative measurement 定量測(cè)量程序這個(gè)程序測(cè)量已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物，然后根據(jù)通常所使用的定量方法，繪制出一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)此曲線標(biāo)定未知物的濃度。（2）spectrum measurement 光譜測(cè)量程序此程序可測(cè)量樣品的激發(fā)、發(fā)射和同步光譜。測(cè)量后的譜圖數(shù)據(jù)可自動(dòng)傳輸?shù)絪pectra analysis程序中。（3）time cou

21、rse measurement時(shí)間過程測(cè)量程序此程序測(cè)量在固定波長(zhǎng)下樣品隨時(shí)間的變化規(guī)律。此數(shù)據(jù)也可以自動(dòng)傳輸?shù)絪pectra analysis程序中。（4）fixed wavelength measurement固定波長(zhǎng)測(cè)量程序此程序測(cè)量在固定波長(zhǎng)下樣品強(qiáng)度。固定一個(gè)激發(fā)波長(zhǎng)，可同時(shí)測(cè)量最多4個(gè)發(fā)射波長(zhǎng)下的強(qiáng)度；固定一個(gè)發(fā)射波長(zhǎng)，也可以同時(shí)測(cè)量最多4個(gè)激發(fā)波長(zhǎng)下的強(qiáng)度。（5）fp intensity measurement熒光強(qiáng)度測(cè)量程序此程序允許在任何波長(zhǎng)下發(fā)射強(qiáng)度的簡(jiǎn)單測(cè)量。（6）3d fluorescence measurement三維熒光光譜測(cè)量程序此程序可以測(cè)量三維發(fā)射光譜或三維激

22、發(fā)光譜。三維發(fā)射光譜用于研究樣品的最適宜激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)。測(cè)量數(shù)據(jù)可以自動(dòng)傳輸?shù)?d fluorescence analysis程序中。最適宜的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)可在3d fluorescence analysis程序中查看。（在“三維熒光光譜測(cè)量/分析程序操作說明”中介紹）。（7）environment環(huán)境設(shè)定程序此程序設(shè)置系統(tǒng)硬件、硬件的自檢和可選附件等。（8）phospho. spectrum measurement磷光光譜測(cè)量程序（僅限fp-6500/6600）這個(gè)程序測(cè)量樣品的磷光光譜。（9）phospho. lifetime measurement程序（僅限fp-6500/6600）此程

23、序用激發(fā)光照射樣品，然后關(guān)閉激發(fā)一側(cè)的擋板（shutter），測(cè)量樣品磷光強(qiáng)度隨時(shí)間變化的趨勢(shì)。（10）validation程序（僅限fp-6500/6600）此程序用來測(cè)試光譜儀的性能。操作者可以根據(jù)程序的提示放置樣品，然后方便對(duì)儀器進(jìn)行性能評(píng)價(jià)。（參見“有效程序操作說明” ）（11）spectrum correction 光譜修正程序（僅限fp-6500/6600）通常測(cè)量得到的激發(fā)光譜中包含照射到樣品上激發(fā)光的特征光譜（包括光源和激發(fā)單色器），而發(fā)射光譜中則包含發(fā)射單色器和檢測(cè)器的特性光譜。此程序可修正這些特征光譜對(duì)數(shù)據(jù)測(cè)量的影響。（參見“光譜修正操作程序說明” ）（12）s/n mea

24、surement 信噪比測(cè)量程序（僅限fp-6300）此程序通過測(cè)量水的拉曼峰來計(jì)算光譜儀的信噪比。這是檢測(cè)儀器性能的方法之一。分析程序（1）spectra analysis程序此程序可保存、打印和處理光譜數(shù)據(jù)或時(shí)間過程測(cè)量數(shù)據(jù)（譜圖比較、峰查找、平滑、求導(dǎo)、y軸變換等）。（參見“光譜分析操作程序說明”）（2）spectrum search程序此程序可從保存在硬盤上的譜圖中，搜索出想要的譜圖（參見“光譜分析操作程序說明”）（3）jasco canvas報(bào)告輸出程序此程序可自由輸出光譜、測(cè)量參數(shù)和注釋等，并打印出報(bào)告，也包含一些繪圖及文本輸入功能。（參見“jasco canvas說明” ）（4）

25、3d fluorescence analysis三維熒光譜圖分析程序此程序可用來查找三維譜圖中的最大激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)。（參見“三維熒光譜圖測(cè)量/分析操作程序說明” ）菜單欄application應(yīng)用analysis 開啟當(dāng)前選擇的分析程序measurement 開啟當(dāng)前選擇的測(cè)量程序exit 退出spectra manager程序注意：此程序還可以在窗口中雙擊菜單選項(xiàng)。instruments儀器start 初始化光譜儀開始通訊，此過程需要2分鐘。通常，此操作沒有必要，因?yàn)楫?dāng)測(cè)量程序開始時(shí)光譜儀自動(dòng)初始化。stop 停止與光譜儀的通訊。通常，此操作也不必要，因?yàn)楫?dāng)測(cè)量程序關(guān)閉時(shí)與光譜儀的通訊也終止

26、了。port setting. 改變與光譜儀的通訊端口。端口默認(rèn)設(shè)置為com1串行端口option. 附件注冊(cè)。參見可選附件儀器手冊(cè)。about. 顯示光譜儀驅(qū)動(dòng)程序版本信息。help幫助contents 顯示幫助內(nèi)容窗口。search topic 顯示幫助關(guān)鍵詞窗口。about. 顯示系統(tǒng)信息。system information. 顯示spectra manager軟件版本信息。3. 定量分析和光譜測(cè)量本章介紹了定量分析和光譜測(cè)量功能。各種參數(shù)簡(jiǎn)單列出來是為了給出一個(gè)清晰的操作流程圖。請(qǐng)熟悉以下列出的程序。更多的詳細(xì)信息請(qǐng)參閱各部分的相關(guān)說明。注：本章以fp-6500為例進(jìn)行說明。3.1

27、定量分析介紹以下部分簡(jiǎn)要地描述了quantitative analysis程序和它的操作流程。另外，還有如何生成標(biāo)準(zhǔn)曲線、未知物的含量測(cè)定、保存及打印結(jié)果等。3.1.1 定量分析程序概要3.1.1.1 定量分析程序在quantitative analysis程序中，除標(biāo)準(zhǔn)的單波長(zhǎng)測(cè)量模式（例如：一個(gè)激發(fā)波長(zhǎng)，一個(gè)發(fā)射波長(zhǎng)）外，還有發(fā)射模式和激發(fā)模式可供選擇。發(fā)射模式：在固定的激發(fā)波長(zhǎng)下，測(cè)定發(fā)射光譜。激發(fā)模式：在固定的發(fā)射波長(zhǎng)下，測(cè)定激發(fā)光譜。根據(jù)不同的樣品可選擇一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)波長(zhǎng)來計(jì)算峰高。圖3.1列出了定量分析的三種可能方法。注意：在標(biāo)準(zhǔn)的單波長(zhǎng)測(cè)量模式中，發(fā)射模式和激發(fā)模式無效。fig

28、. 3.1 定量分析方法（1） 單波長(zhǎng)定量分析（圖3.1（1）。用于常規(guī)樣品（2） 雙波長(zhǎng)定量分析（圖3.1（2）。用于基線（背景）修正（3） 三波長(zhǎng)定量分析（圖3.1（3）。用于基線（背景）修正下面公式用于三波長(zhǎng)定量分析計(jì)算。其中wl1是波長(zhǎng)，e(1)是在此波長(zhǎng)下的強(qiáng)度。quantitative analysis程序具有以下特性。 單波長(zhǎng)定量分析 在發(fā)射模式中，雙波長(zhǎng)定量分析（在發(fā)射光譜中選用兩個(gè)波長(zhǎng)）。 在發(fā)射模式中，三波長(zhǎng)定量分析（在發(fā)射光譜中選用三個(gè)波長(zhǎng)）。 在激發(fā)模式中，雙波長(zhǎng)定量分析（在激發(fā)光譜中選用兩個(gè)波長(zhǎng)）。 在激發(fā)模式中，三波長(zhǎng)定量分析（在激發(fā)光譜中選用三個(gè)波長(zhǎng)）。 根據(jù)需要

29、在以下形式中選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)曲線。fig. 3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線形式 操作者可指出是否要用標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量數(shù)據(jù)（測(cè)量的濃度/強(qiáng)度）計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.1.1.2 定量分析操作啟動(dòng)定量分析程序 見3.1.2部分創(chuàng)建一個(gè)文件 確定定量分析方式和測(cè)量參數(shù)確定標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)，輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度 見3.1.3部分測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)樣品空白測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)樣品顯示標(biāo)準(zhǔn)曲線處理（檢查和修改）標(biāo)準(zhǔn)曲線 見3.1.4部分保存標(biāo)準(zhǔn)曲線 見3.1.5部分測(cè)量未知樣品 見3.1.6部分保存結(jié)果 見3.1.7部分打印結(jié)果 見3.1.8部分退出定量分析程序 見3.1.9部分3.1.2 啟動(dòng)程序雙擊spectra manager窗口中的quantitative

30、 analysis程序。fig. 3.3 spectra manager 窗口“正在初始化”信息將彈出。在初始化過程中，測(cè)量參數(shù)傳輸?shù)焦庾V儀中。當(dāng)傳輸完成后，程序啟動(dòng)，出現(xiàn)下列窗口。fig. 3.4 quantitative analysis 窗口3.1.3 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（1） 選擇file - new.，出現(xiàn)下列對(duì)話框。fig. 3.5 open parameters 對(duì)話框（2） 點(diǎn)擊打開下列對(duì)話框。fig. 3.6 quantitative measurement parameters 對(duì)話框（3） 設(shè)置測(cè)量參數(shù)quantitative measurement parameters 對(duì)話

31、框顯示儀器默認(rèn)設(shè)置。以下參數(shù)可以被更改。響應(yīng)時(shí)間： 1 sec方式： 三波長(zhǎng)模式： 發(fā)射激發(fā)波長(zhǎng)： 247nm發(fā)射波長(zhǎng)： 峰值=460nm，基準(zhǔn)1=350nm，基準(zhǔn)2=600nm注意：定量分析的詳細(xì)介紹見3.1.1.1部分。1) 點(diǎn)擊箭頭所指的response下拉菜單。然后選1 sec，設(shè)置響應(yīng)時(shí)間為一秒鐘。按要求改變其他參數(shù)。2) 在波長(zhǎng)選項(xiàng)上點(diǎn)擊3 wavelength，選擇項(xiàng)按鈕表示為()。3) 在模式選擇中點(diǎn)擊emission。第一個(gè)對(duì)話框用來輸入激發(fā)波長(zhǎng)，另三個(gè)對(duì)話框分別用來輸入峰值、基準(zhǔn)1和基準(zhǔn)2（發(fā)射波長(zhǎng)）。4) 用鍵盤輸入247到激發(fā)波長(zhǎng)項(xiàng)。輸入460到發(fā)射波長(zhǎng)峰值項(xiàng)，再分別輸

32、入350和600到基準(zhǔn)1和基準(zhǔn)2。（4） 點(diǎn)擊傳輸測(cè)量參數(shù)到光譜儀中。當(dāng)操作完成，將出現(xiàn)calibration curve parameters對(duì)話框。在此對(duì)話框中指定標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度。fig. 3.7 參數(shù)傳輸對(duì)話框fig. 3.8 calibrate curve parameters 對(duì)話框（5） 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)1) 用與設(shè)置測(cè)量參數(shù)同樣的方法來設(shè)置從calib. curve到proportional的參數(shù)。2) 如果已知標(biāo)準(zhǔn)品的空白值，將其輸入到standard blank一欄中。如果不知標(biāo)準(zhǔn)空白，將隨后進(jìn)行測(cè)量，在此情況下，步驟2)和3)就沒有必要了。3) 選中 enab

33、le blank，手動(dòng)輸入的標(biāo)準(zhǔn)空白將參與計(jì)算。（6） 輸入濃度1) 點(diǎn)擊標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)顯示欄中的std#01一行，光標(biāo)將移至這一行。2) 在calibration data setting的conc.文本欄中輸入第一個(gè)濃度點(diǎn)的濃度后點(diǎn)擊。此濃度將在標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)欄中出現(xiàn)，光標(biāo)自動(dòng)移向下一行。注意：如果標(biāo)準(zhǔn)樣品的強(qiáng)度已知，就不需要再測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)樣品。輸入適當(dāng)?shù)膹?qiáng)度，選中enable calib. data，然后點(diǎn)擊即可。3) 對(duì)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品重復(fù)步驟2)操作。4) 在數(shù)據(jù)顯示欄中點(diǎn)擊std#01一行。將光標(biāo)移至第一行。（7） 點(diǎn)擊 。quantitative measurement對(duì)話框?qū)⒋蜷_，接下來將進(jìn)

34、行標(biāo)準(zhǔn)空白和標(biāo)準(zhǔn)樣品的測(cè)量。注意：當(dāng)出現(xiàn) quantitative measurement 對(duì)話框時(shí)將覆蓋calibration curve parameters對(duì)話框。要查看calibration curve parameters對(duì)話框，可點(diǎn)擊并拖動(dòng)quantitative measurement對(duì)話框的標(biāo)題欄直到可以看到calibration curve parameters對(duì)話框?yàn)橹?。兩個(gè)對(duì)話框都將被激活。根據(jù)步驟（5）和（6）的說明更改標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)。fig. 3.9 quantitative measurement 對(duì)話框（8） 擋板狀態(tài)確認(rèn)點(diǎn)擊按鈕（激發(fā)側(cè)擋板按鈕）或按鈕（發(fā)射側(cè)擋板

35、按鈕）。當(dāng)圖標(biāo)變成黃色燈泡時(shí)表示發(fā)射側(cè)擋板被打開。注意：在測(cè)量前，首先要確認(rèn)擋板是打開還是關(guān)閉。擋板通常用來保護(hù)檢測(cè)器和防止樣品分解。激發(fā)側(cè)擋板在開始測(cè)量之前應(yīng)始終保持關(guān)閉狀態(tài)，目的是防止樣品受到激發(fā)光照射后分解。（9） 測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)空白1) 選擇blank按鈕。2) 把標(biāo)準(zhǔn)空白放入樣品室的樣品池支架上。樣品室在光譜儀的左前端。fig. 3.10 樣品室3) 點(diǎn)擊，測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)空白。測(cè)量值自動(dòng)顯示在calibration curve parameters頁面中的standard blank一欄中，選中enable blank允許空白值參與計(jì)算。注意1：點(diǎn)擊樣品室旁的measurement start

36、switch按鈕（見圖3.10）可代替按鈕。注意2：當(dāng)點(diǎn)擊，calibration curve parameters對(duì)話框關(guān)閉，標(biāo)準(zhǔn)空白值將從標(biāo)準(zhǔn)樣品的強(qiáng)度中減去。因此，標(biāo)準(zhǔn)空白和標(biāo)準(zhǔn)樣品可以以不同的先后順序測(cè)量。（10） 標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)量在測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)樣品前確定光標(biāo)在標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)顯示欄的第一行的位置。點(diǎn)擊std#01行移動(dòng)光標(biāo)到第一行。1) 選擇standard一項(xiàng)。2) 在樣品池中放入第一個(gè)濃度點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)樣品。3) 點(diǎn)擊開始標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)量。強(qiáng)度值自動(dòng)顯示在calibration curve parameters對(duì)話框的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)顯示欄。use?欄將從-改變到use，光標(biāo)自動(dòng)移到下一行。注意：標(biāo)準(zhǔn)空白值沒有從

37、標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)度顯示值中減去。4) 對(duì)每個(gè)樣品重復(fù)步驟2)和3)操作。5) 完成標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)量，點(diǎn)擊，關(guān)閉quantitative measurement對(duì)話框。（11） 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)擊calibration curve parameters對(duì)話框中的。標(biāo)準(zhǔn)樣品強(qiáng)度值減去標(biāo)準(zhǔn)空白，calibration curve窗口打開。同時(shí)，method information和data sheet窗口也將被打開。注意：如果選擇method - new生成標(biāo)準(zhǔn)曲線，則只有calibration curve和 method information窗口打開。fig. 3.11 data sheet 窗口3.1.4 修

38、改標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)擊calibration curve標(biāo)題欄。激活calibration curve窗口，查看標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果標(biāo)準(zhǔn)曲線有必要進(jìn)行修改，選擇method - modify.，屏幕彈出calibration curve parameters對(duì)話框（見圖3.8）。這時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)可以被修改，標(biāo)準(zhǔn)樣品可以被重新測(cè)量。如果不修改曲線，不準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)可以被重新測(cè)得的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)替代。注：用一條標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)量過未知物后，這條標(biāo)準(zhǔn)曲線將不可被修改。（1） 重新測(cè)量1) 移動(dòng)光標(biāo)到不正確數(shù)據(jù)行。2) 點(diǎn)擊，打開quantitative measurement對(duì)話框，重復(fù)標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)量。（2） 替換原有數(shù)據(jù)1)

39、移動(dòng)光標(biāo)到不準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)一行。2) 取消選定enable calib. data，然后點(diǎn)擊。use?欄將從use改變到-。3.1.5 保存定量分析方法定量分析方法（標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)）和測(cè)量參數(shù)可以保存到磁盤中。（1） 選擇method - save as.，屏幕彈出下面的對(duì)話框。fig. 3.12 save parameters 對(duì)話框（2） 在parameter name一欄中輸入最多32個(gè)字符的標(biāo)準(zhǔn)曲線的文件名。最多可輸入32個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線文件。注意：點(diǎn)擊，打開comments對(duì)話框，可以輸入樣品名稱、操作者和組織機(jī)構(gòu)等信息。（3） 點(diǎn)擊，保存定量分析方法。3.1.6 未知物測(cè)量（1） 選擇meas

40、urement - measurement.。將出現(xiàn)下列對(duì)話框。fig. 3.13 quantitative measurement 對(duì)話框注：在測(cè)量前，點(diǎn)擊按鈕確定發(fā)射與激發(fā)兩側(cè)的擋板都被打開（見3.1.3部分第八條細(xì)則）。為了避免激發(fā)光照射使樣品分解，在開始測(cè)量之前請(qǐng)始終保持激發(fā)側(cè)擋板處于關(guān)閉狀態(tài)。（2） 樣品空白測(cè)量選擇measurement - blank correction，測(cè)量樣品空白值。注：如果沒有測(cè)量樣品空白，標(biāo)準(zhǔn)樣品空白值將作為樣品空白值被使用。1) 選擇blank2) 將樣品空白放入樣品池中。3) 點(diǎn)擊，樣品空白被測(cè)量，測(cè)量后的結(jié)果顯示在data sheet窗口中。4)

41、對(duì)每個(gè)樣品重復(fù)步驟2)和3)操作。注意：當(dāng)計(jì)算濃度時(shí)，樣品空白被從樣品的強(qiáng)度值中扣除掉。在樣品測(cè)量過程中，樣品空白可以重復(fù)測(cè)量?？瞻字翟陔S后的樣品測(cè)量中始終有效。如果需要重新測(cè)量一個(gè)樣品，移動(dòng)光標(biāo)到data sheet窗口該樣品數(shù)據(jù)所在一行，重復(fù)測(cè)量。當(dāng)前數(shù)據(jù)被重新測(cè)得的數(shù)據(jù)覆蓋掉。測(cè)量后光標(biāo)移動(dòng)到下一行，如果想指定某一行樣品的重新測(cè)量，以下兩項(xiàng)操作中的一項(xiàng)必須被執(zhí)行。 在測(cè)量前關(guān)閉quantitative measurement對(duì)話框，選擇measurement - parameters.，打開quantitative measurement - parameters對(duì)話框，輸入指定樣品數(shù)。

42、 測(cè)量后，用data sheet的修改功能改寫數(shù)據(jù)（見4.4部分）。注意：無效的數(shù)據(jù)可以不被應(yīng)用。（見4.4.4部分）3.1.7 保存數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)和定量分析方法都可保存到磁盤中。（1） 選擇file - save as.打開以下對(duì)話框。fig. 3.14 save as 對(duì)話框注意：點(diǎn)擊，打開comments對(duì)話框。可輸入樣品名稱、操作者和組織機(jī)構(gòu)等信息。（2） 從save in:下拉菜單中選擇目標(biāo)目錄。（3） 設(shè)置save as type到j(luò)asco qnt.(*.jqa)。（4） 在file name文本欄中輸入文件名，不必輸入擴(kuò)展名。（文件擴(kuò)展名是文件名的一部分，“.”號(hào)后面的是擴(kuò)展名。）（

43、5） 點(diǎn)擊保存數(shù)據(jù)。3.1.8 打印結(jié)果定量分析數(shù)據(jù)可以被打印。（1） 選擇file - print setup.。出現(xiàn)下面的對(duì)話框。點(diǎn)擊，確認(rèn)打印設(shè)置。注意：根據(jù)不同打印機(jī)，對(duì)話框內(nèi)容可能不同。fig. 3.15 print setup 對(duì)話框（2） 選擇file - page setup.。出現(xiàn)下列對(duì)話框。選擇您希望打印的項(xiàng)目，點(diǎn)擊，確認(rèn)選擇。對(duì)話框?qū)㈥P(guān)閉。fig. 3.16 print format 對(duì)話框（3） 選擇file - print。出現(xiàn)下列對(duì)話框。注意：根據(jù)打印機(jī)不同，對(duì)話框中內(nèi)容稍有差別。fig. 3.17 print 對(duì)話框（4） 點(diǎn)擊打印定量分析數(shù)據(jù)。3.1.9 退出定

44、量分析測(cè)量完畢后，選擇file - exit回到spectra manager窗口。注意：如果沒有保存data sheet 或 calibration curve數(shù)據(jù)，詢問是否保存的提示信息將出現(xiàn)。根據(jù)要求做適當(dāng)?shù)倪x擇。3.2 光譜測(cè)量介紹這一部分介紹了啟動(dòng)spectrum measurement程序、測(cè)量樣品、保存譜圖和打印數(shù)據(jù)的步驟。3.2.1 光譜測(cè)量概述3.2.1.1 spectrum measurement光譜測(cè)量程序此儀器可測(cè)量以下五種類型的光譜：（1） 熒光發(fā)射光譜（簡(jiǎn)稱“emission” 或“em”光譜）熒光發(fā)射光的波長(zhǎng)通常比激發(fā)波長(zhǎng)要長(zhǎng)。發(fā)射光譜定義為通過在指定的波長(zhǎng)范圍內(nèi)

45、掃描em側(cè)單色器，所獲得的由固定波長(zhǎng)的激發(fā)光照射樣品產(chǎn)生的發(fā)射光的光譜。（2） 熒光激發(fā)光譜（簡(jiǎn)稱“excitation” 或“em”光譜）熒光激發(fā)光譜定義為固定一個(gè)發(fā)射波長(zhǎng)，通過掃描比發(fā)射波長(zhǎng)短的范圍內(nèi)的激發(fā)單色器所獲得的譜圖。通常發(fā)射光譜與吸收光譜類似。（3） 發(fā)射同步光譜（簡(jiǎn)稱“synchronous” 或“sync”光譜）同步光譜定義為通過掃描相同波長(zhǎng)間隔的發(fā)射和激發(fā)單色器所獲得的譜圖，這類光譜對(duì)于定量分析多組份樣品有特殊的用處。（4） 激發(fā)單光束光譜（或簡(jiǎn)稱“ex single”光譜）激發(fā)單光束光譜是對(duì)激發(fā)光能量的波長(zhǎng)分布的測(cè)量。測(cè)量結(jié)果反映光源和激發(fā)單色器的特性，可以用來查看激發(fā)單

46、色器的能量。（5） 發(fā)射單光束光譜（或簡(jiǎn)稱“em single”光譜）發(fā)射單光束光譜是對(duì)照射到發(fā)射單色器的光的波長(zhǎng)分布的測(cè)量。要測(cè)量發(fā)射單色器的波長(zhǎng)特性，可以先從激發(fā)單色器引出一束白光，然后通過放置在樣品室中的漫反射板，將白光引入發(fā)射單色器，再測(cè)量發(fā)射單光束光譜。也可以關(guān)閉激發(fā)一側(cè)的擋板，然后在樣品室中放置化學(xué)發(fā)光的物質(zhì)，再測(cè)量發(fā)射單光束光譜。在光譜測(cè)量程序中，可以通過改變measurement mode來選擇不同的測(cè)量模式。在spectrum measurement程序中無法打印或保存譜圖。光譜掃描結(jié)束后，譜圖自動(dòng)被輸出到spectra analysis程序中，譜圖可以在spectra an

47、alysis程序中保存或打印。在spectra analysis中，可以同時(shí)打開多個(gè)譜圖，并可以將多個(gè)譜圖疊加到一張譜圖上顯示。3.2.1.2 程序概述這一部分描述了硫酸奎寧溶液的發(fā)射光譜測(cè)量、譜圖保存及打印測(cè)量結(jié)果的操作步驟。打開電源并進(jìn)入windows 見2.1部分 啟動(dòng)光譜測(cè)量程序 見3.2.2部分 設(shè)置光譜模式 見3.2.3部分 設(shè)置測(cè)量參數(shù) 見3.2.4部分 測(cè)量樣品 見3.2.5部分 保存譜圖 見3.2.6部分 打印結(jié)果 見3.2.7部分 退出（關(guān)閉儀器） 見3.2.8部分3.2.2 啟動(dòng)光譜測(cè)量程序在spectra manager窗口中雙擊spectrum measurement

48、。光譜測(cè)量程序啟動(dòng)，將出現(xiàn)下列窗口。fig. 3.18 spectrum measurement 窗口選擇measurement，彈出下拉菜單如下：fig. 3.19 measurement 菜單菜單中出現(xiàn)下列操作。start 開始光譜測(cè)量parameter. 設(shè)置測(cè)量參數(shù)goto wavelength. 移動(dòng)光譜儀波長(zhǎng)到指定波長(zhǎng)處auto zero 設(shè)置當(dāng)前波長(zhǎng)下測(cè)量值為0shutter 打開/關(guān)閉擋板e(cuò)xit 退出光譜測(cè)量程序，回到spectrum manager窗口3.2.3 設(shè)置光譜測(cè)量模式打開parameters對(duì)話框，在measurement mode一欄中單擊向下的箭頭，從下拉菜

49、單中選擇合適的光譜測(cè)量模式。（1） 選擇measurement - parameter.，出現(xiàn)如下的對(duì)話框：fig 3.20 parameters 對(duì)話框（2） 點(diǎn)擊向下箭頭，顯示measurement mode下拉菜單：emission發(fā)射光譜測(cè)量excitation激發(fā)光譜測(cè)量synchronous同步光譜測(cè)量ex single激發(fā)單光束光譜測(cè)量em single發(fā)射單光束光譜測(cè)量fig. 3.21 measurement mode 菜單（3） 點(diǎn)擊emission，測(cè)量發(fā)射光譜。出現(xiàn)parameters對(duì)話框，顯示發(fā)射光譜測(cè)量參數(shù)。3.2.4 設(shè)置測(cè)量參數(shù)(1) 選擇measurement - parameter.。出現(xiàn)spectrum measurement - parameters對(duì)話框。點(diǎn)擊data f