鑒定板說明書升級版

1、鑒定板操作說明書(升級版 )腸桿菌 IDS-96 (SJ)非發(fā)酵菌 IDS-96 (SJ)鏈球菌/腸球菌IDS-96(SJ)葡萄球菌/微球菌IDS-96 (SJ)真菌 IDS-96 (SJ)腸桿菌 IDS-96 測試板使用說明書【概述】本測試板專供細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)中，對腸桿菌科細(xì)菌進(jìn)行鑒定和各種抗菌藥物的敏感度測定。將被測菌加入測試板經(jīng)孵育后，即可將屬于腸桿菌科的 22 個屬，以及非發(fā)酵菌中氧化酶陰性的細(xì)菌快速而準(zhǔn)確地鑒定到種，同時判斷被測菌對 20余種抗生素的MIC,分析其耐藥程度，打印出詳細(xì)的檢驗(yàn) 報告。是國內(nèi)迄今最完善而簡便實(shí)用的細(xì)菌分析系統(tǒng)。藥敏部分則完全按NCCLS（ 2007 ）文件的規(guī)

2、定執(zhí)行。菌株測試與國外同類產(chǎn)品進(jìn)行數(shù)百株菌種的平行比較符合率達(dá)95%左右。因此本產(chǎn)品具有較高的規(guī)范性和可靠性?！驹噭┖薪M成】1 腸桿菌科IDS-96 測試板10 塊2腸桿菌稀釋液（4ml/ 瓶）10 瓶3 腸桿菌藥敏培養(yǎng)液（10ml/ 瓶） 10 瓶4 簡易操作流程1份5 輔助試劑（ vp 試劑 A 、 vp 試劑 B 、靛基質(zhì)試劑、苯丙氨酸試劑、無菌石蠟油、 ）【生化試驗(yàn)操作方法】1. 所有的操作過程應(yīng)避免雜菌污染。2. 使用本測試板的被測菌應(yīng)符合以下三項(xiàng)要求：無特殊營養(yǎng)要求的革蘭氏陰性桿菌；氧化酶試驗(yàn)陰性； 18-24 小時分離培養(yǎng)的單個純菌落（或純培養(yǎng)物） 。3. 菌液制備：挑取純培養(yǎng)單

3、個菌落于腸桿菌稀釋液（ 4ml ）瓶內(nèi)壁研磨呈細(xì)菌懸液（ 0.5 麥?zhǔn)蠁?位可以參照標(biāo)準(zhǔn)比濁管，也可以使用本公司的濁度計(jì)） 。4. 用連續(xù)移液器（配無菌移液頭）吸取該菌液加入測試板A、 B 兩排和C1 4 的鑒定孔內(nèi)（共計(jì) 28 孔） ，每孔 100ul 。5.在 A1-A7 孔（GLU）、（HbS）、（URB、（ORN、（ARG、（LYS）、（。分別滴加石蠟油2 滴?！舅幟粼囼?yàn)操作方法】1、自腸桿菌稀釋液吸菌懸液100ul ，加至腸桿菌藥敏培養(yǎng)液內(nèi)，混勻，繼續(xù)加入測試板的其余各孔， （所有的藥敏孔及生長對照孔C+） ，每孔 100ul 。2、撕開不干膠的紙對齊貼于鑒定板，35-37 孵育。3

4、、剩余的菌液及移液頭浸入殺菌溶液內(nèi)浸泡滅菌。4、孵育過夜（18-24小時）后，先于 A12孔（VP）滴加VP試劑A、B各1滴，20分鐘后，再 于A11孔（IND）滴加靛基質(zhì)試劑一滴，數(shù)分鐘后，于 A10孔（PHE滴加苯丙氨酸試劑一滴，立即 判讀結(jié)果?！举A存及效期】1年【結(jié)果判讀】1 .將測試卡放進(jìn)微生物自動分析儀讀板，讀板完畢后，傳送到電腦，點(diǎn)擊“判別”鍵后，即 顯示被測菌名稱和各項(xiàng)藥敏的分析結(jié)果，并打印報告單。詳細(xì)操作請參照黑馬微生物分析系統(tǒng)6.0中4.10的自動測試卡檢測。2 .具體操作詳見黑馬微生物分析系統(tǒng)操作手冊。腸桿菌IDS-96測試板示意圖I H2SMDG ONPG GELSXT4

5、8CT4MRP8NOR8AMP3216PIP128 321616AMS32 16PTZ1286416CIP40.06AMK3216TET8:MI8II J L.-= = -=FD64 32 ATM16:PB4 uCIT MLT+PEN0.25 0.120.06：DCO OXA4 20.5汜c o oCLI421：F . CD OMXF1 0.5 MI8 inji l._NOR16 84!|H ; O OCFZ16 8 ；LEV2LAT32168AMC84ErNOVC+/廠、廠、Jk -ERY410.5AZI842PTZ168Ccc尸一VA16842SXT42CLR42CIP4I J21(JTE

6、T1684FD643221MRP1684IPM1684CXM168GEN1684TEC32-1680.030.250.54RIF41II14L LgTSOLa至 群段線行 3【注意事項(xiàng)】1 .本測試板各孔底物系在無菌條件下真空冷凍干燥，密封包裝，板蓋不可隨意掀起，以防空 氣雜菌污染，臨用時先置室溫預(yù)溫，再在無菌操作下打開。2 .使用前請仔細(xì)閱讀本說明書，微生物分析儀操作手冊和分析儀軟件中的“幫助”系統(tǒng)。3 .被測菌必須是新鮮的純培養(yǎng)物，嚴(yán)格避免從平皿上刮取兩種（或兩種以上）菌落，或用陳 舊的培養(yǎng)物進(jìn)行試驗(yàn)。4 .必須做好板外的鑒定試驗(yàn)：A革蘭氏染色鏡檢B 觸酶試驗(yàn) C凝聚因子試驗(yàn)（玻片法）上述

7、A、B為選板的依據(jù)，如果未做或做得不準(zhǔn)確，將可能導(dǎo)致選板錯誤，C為鑒定的“關(guān)鍵試驗(yàn)”，必須輸入其陰、陽性結(jié)果才能完成細(xì)菌的鑒定。上述板外試驗(yàn)的操作方法和要求詳見黑馬微生物分析系統(tǒng)軟件中的“幫助”欄。【貯存】2-8 C保存【廢棄培養(yǎng)物處理】高壓滅菌或焚燒后丟棄【有效期】1年附表A 反應(yīng)結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)孔號試驗(yàn)名稱結(jié)果陰性陽性A1URE尿素酶黃色紅色A2ORN鳥氨酸脫竣酶黃色紅色A3C氨基酸對照黃色或橙色A4MNEs甘露糖產(chǎn)酸紫色黃色A5TREs海藻糖產(chǎn)酸紫色黃色A6RAFs棉子糖產(chǎn)酸紫色黃色A7XYL木糖產(chǎn)酸紫色黃色A8MANs甘露醇產(chǎn)酸紫色黃色A9MALs麥芽糖產(chǎn)酸紫色黃色A10PYR叱咯烷酮酶黃

8、色粉紅色A11NIT硝酸鹽還原加試劑后黃或深黃色加試劑后紅或紅褐色A12VP加試劑后黃綠色加試劑后紅色（20分鐘后）B1ARAs阿拉伯糖紫色黃色B2NAG （N-乙酰氨基葡萄糖產(chǎn)酸）紫色黃色B3CELs纖維二糖產(chǎn)酸紫色黃色B4LAC乳糖產(chǎn)酸紫色黃色B5SUCs蔗糖產(chǎn)酸紫色黃色B6ESC七葉甘水解黃色或黃綠色褐色或黑色B7ONRG半乳糖普酶灰白色黃色B8ALP堿性磷酸酶白色黃色B9PGD白色黃色B10PGR白色黃色C10ER紅霉素耐藥清晰淡黃色混濁或沉淀C11NOV新生霉素耐藥清晰淡黃色混濁或沉淀C12C+藥敏陽性對照孔清晰淡黃色混濁或沉淀其余孔藥敏試驗(yàn)清晰淡黃色混濁或沉淀附B藥敏試驗(yàn)抗菌藥物表

9、類別藥物名稱（縮寫）NCCLS分組青霉素類青霉素（PEN）A苯座西林（OXA）A大環(huán)內(nèi)脂類紅霉素（ERY）B克拉霉素（CLR）B阿奇霉素（AZI ）B唾諾酮類環(huán)丙沙星（CIP）C諾氟沙星（NOR）U左氧沙星（LEV ）C莫西沙星（MXF ）C四環(huán)素類四環(huán)素（TET）C米諾環(huán)素（MI ）O磺胺類復(fù)方新諾明（SXT）B萬古霉素類萬古霉素（VAN ）B替考拉寧（TEC）C吠喃類吠喃妥因（FD）U林可類克林霉素（CLI ）B氨基糖昔類慶大霉素（GENC其它類利福平（RIF）C含0 -Lac抑制劑的青 霉素阿莫西林/棒酸（AMC ）B哌拉西林/他座巴坦（PTZ）C頭抱類頭抱吠辛（CXM ）C頭抱座林（C

10、FZ）C拉氧頭抱（LAT ）C碳青酶烯類亞胺培南（泰能）IPMC美羅培南（MRP）C注：NCCL砌組說明：A組：為一級試驗(yàn)的首選藥物，必須常規(guī)報告其敏感度，若敏感，治療時應(yīng)優(yōu)先選用。B組：也為一級試驗(yàn) 的首選藥物。但可以有選擇地報告，當(dāng)細(xì)菌對 A組藥物耐藥或其它原因不能使 用及無效時，可以選用治療。C組：替代性或補(bǔ)充性藥物， 有選擇地報告，在細(xì)菌對A、B組藥物耐藥或不適用時，可選本組替代。U組：僅用于治療泌尿道感染的藥物，其他部位分離的病菌不必報告。組：對該組細(xì)菌有臨床適應(yīng)癥但一般不允許常規(guī)試驗(yàn)與報告的藥物。真菌 IDS-96 測試板使用說明書【概述】本測試板專供在細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)中，對酵母樣真菌進(jìn)

11、行鑒定和各種抗真菌藥物的敏感度測定，將被測菌加入測試板經(jīng)孵育后，通過本系統(tǒng)分析，即可將屬于酵母樣真菌的 8 個屬快速而準(zhǔn)確地鑒定出來，同時判斷被測菌對常用的9種抗真菌藥物的MIC,分析其耐藥程度，打印出詳細(xì)的檢驗(yàn)報告。本測試板生產(chǎn)過程實(shí)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制，每批均采用標(biāo)準(zhǔn)菌種測試，與國外同類產(chǎn)品進(jìn)行近百株菌種的平行比較，符合率達(dá)90%以上，因此本產(chǎn)品具有較高的規(guī)范性和可靠性。【試劑盒組成】1 真菌IDS-96 測試板10 塊2 .真菌稀釋液（2ml/瓶）10瓶3 .真菌同化培養(yǎng)液（7 ml/瓶）10瓶4 .真菌藥敏培養(yǎng)液（7ml/瓶）10瓶5 簡易操作流程1 份【使用方法】1 所有的操作過程應(yīng)盡可

12、能避免雜菌污染。2 使用本測試板的被測菌應(yīng)符合以下要求：新鮮分離的單個純菌落（或純培養(yǎng)物） 。培養(yǎng)物經(jīng)顯微鏡檢查證實(shí)為酵母樣真菌。3 .菌液制備：挑取純培養(yǎng)單個菌落于真菌稀釋液（ 2ml）瓶內(nèi)壁研磨呈菌懸液，使其濁度為1 個麥?zhǔn)蠁挝弧? .用連續(xù)移液器（配無菌吸頭）吸取菌液100dl加到真菌同化培養(yǎng)液（7 ml/瓶）中，充分混勻，加到測試板 C1-11孔和D1-12孔，每孔100“。5 .擰開藥敏（MIC）培養(yǎng)液，用無菌吸嘴吸取100“ 加到E12藥敏陰性對照孔 C-o6 .再從稀釋液中吸取菌懸液100 dl加入真菌藥敏培養(yǎng)液（7ml/瓶）中，充分混勻后，分配到 E1-11 及 F2-12 ,

13、每孔 100 科 l。7 撕開不干膠的紙對齊貼于鑒定板,30 濕盒內(nèi)孵育。8 從稀釋液取菌懸液2 滴置小試管內(nèi)，加入 0.5ml 羊血清（小牛血清也可） ， 35孵育3 小時，立即用顯微鏡檢查芽管形成。10 . 剩余菌液及吸頭丟入殺菌溶液浸泡滅菌。11 .測試板孵育2472小時，每日觀察，當(dāng)D12陽性對照孔明顯變濁時，立即判讀結(jié)果?！窘Y(jié)果判讀】1 .將同化試驗(yàn)與空白對照孔比較，若同化試驗(yàn)孔比空白對照孔濁度高，判定為陽性；若同 化試驗(yàn)孔與空白對照孔濁度本一致，判定為陰性。2 .藥敏試驗(yàn)混濁為陽性，清亮為陰性。3 .對于氟康疑 FLZ、酮康吵KEK氟胞喀胞 FLU,由于存在殘余生長現(xiàn)象，需將藥敏試

14、驗(yàn)與 生長對照孔比較，MIC值判定為相對于生長對照有 50碰更多的生長減少時最低藥物濃 度，此孔需錄入未生長。4 .將板上各孔的陰、陽性反應(yīng)結(jié)果（見附表A）分別鍵入電腦屏幕上相應(yīng)的界面，點(diǎn)擊“判另鍵后，即顯示被測菌名稱和各項(xiàng)藥敏的分析結(jié)果，并打印報告單。5 .具體操作詳見黑馬微生物分析系統(tǒng)操作手冊。真菌鑒定防敏測試板示意圖肉 li II2KG LACMEL INO TRE MAL NAG ERY ARA MAN ACCELAMB4 ECO8 MIC8 KET8 VRC2 NYS8 ITR10.125C+fuJ LFLZ64 32SOR MLZ RHA MDG GLY XYL NIT AdSUC

15、 GAL1一ACT FLU32 16【注意事項(xiàng)】1 .測試板各孔底物系在無菌條件下冷凍干燥，密封包裝，不干膠紙不可隨意掀起，以 防空氣雜菌污染，臨用時先置室溫預(yù)溫，再在無菌操作下打開。2 .使用前請仔細(xì)閱讀本說明書、微生物分析儀操作手冊和分析儀軟件中的“幫助” 系統(tǒng)。3 .被測菌必須是新鮮分離的純培養(yǎng)物，嚴(yán)格避免從平皿上刮取兩種（或兩種以上）菌 落，或用陳舊的培養(yǎng)物進(jìn)行試驗(yàn)。4 .芽管試驗(yàn)需另取無菌小試管操作，該試驗(yàn)是鑒定白色念珠菌的關(guān)鍵試驗(yàn)，操作和鏡 檢時應(yīng)嚴(yán)格按規(guī)定進(jìn)行，許多動物血清（如兔、牛、羊、人等）及蛋清均可使用， 以小牛血清及羊血清較好。一定要在孵育三小時左右鏡檢，觀察時，取一滴孵

16、育后的血清置于玻片上，立即用紙倍鏡檢視，芽管看似酵母細(xì)胞的附枝，寬約胞體的1/2 ,長約胞體的34倍，芽管和胞體連接處不出現(xiàn)收縮現(xiàn)象，不能將某些酵母樣菌產(chǎn)生 的起始菌絲體誤作為芽管芽管與起始菌絲的區(qū)別見下表胞體出芽處特征出現(xiàn)時間芽管不出現(xiàn)收縮現(xiàn)象孵育4小時以內(nèi)起始菌絲呈緊縮現(xiàn)象孵育4小時以后【貯存】2-8 【廢棄培養(yǎng)物處理】 高壓滅菌或焚燒后丟棄【有效期】1年附表B藥敏試驗(yàn)抗菌藥物表縮寫代號藥物名稱FLU氟胞嗑咤FlucytocineFLZ氟康建FluconCzoleITR伊曲康建ItrCconCzoleVRC伏力康建voriconazoleECO益康建EconCzoleCMB兩性霉素B CmphotericinBNYS制霉菌素NystCtinMIC咪康建MiconCzoleKET酮康座KetoconCzole附表A反應(yīng)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)孔號試驗(yàn)名稱結(jié)果陰性陽性C12KG酮基-葡萄糖酸鹽同化清晰無混濁混濁C2LAC乳糖同化清晰無混濁混濁C3MEL密二糖同化清晰無混濁混濁C4INO肌醇同化清晰無混濁混濁C5TRE海藻糖同化清晰無混濁混濁C6MAL麥芽糖同化清晰無混濁混濁C7NAG乙酰-0 -D-葡萄糖昔同 化清晰無混濁混濁C8ERY赤鮮醇同化清晰無混濁混濁C9ARA阿拉伯糖同化清晰無混濁混濁C10MA