人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序課件

1、人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序一一.2 .2 基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序復(fù)習(xí)復(fù)習(xí):基因工程的基本操作步驟基因工程的基本操作步驟 提取目的基因，提取目的基因， 目的基因與運載體結(jié)合，目的基因與運載體結(jié)合， 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞， 目的基因的表達(dá)和檢測目的基因的表達(dá)和檢測 看課本看課本P8的圖的圖DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序一、目的基因的獲取一、目的基因的獲取DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序、什么叫基因文庫？、什么叫基因文庫？ 將含有某種生物不同基因的許多將含有某種生物不同基因的許

2、多DNA片斷，導(dǎo)入到片斷，導(dǎo)入到中，各中，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因，個受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫稱為基因文庫基因文庫基因文庫 基因組文庫基因組文庫部分基因文庫部分基因文庫（cDNA文庫）文庫）DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序基因組基因組文庫與文庫與部分基部分基因文庫因文庫的關(guān)系的關(guān)系DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序基因文庫的構(gòu)建模式圖基因文庫的構(gòu)建模式圖通過對通過對受體菌受體菌的培養(yǎng)而的培養(yǎng)而儲存基因儲存基因DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序依據(jù)：目的基因的有關(guān)信息。依據(jù)：目的基因的有關(guān)信息。 如：根據(jù)基因的核

3、苷酸序列如：根據(jù)基因的核苷酸序列 基因的功能基因在染色體上的位置基因的功能基因在染色體上的位置 基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA 基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性?；蚍g產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性。DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序 PCR:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)：是以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)：是以DNA變性、復(fù)制的某些特性為原理設(shè)計變性、復(fù)制的某些特性為原理設(shè)計的的 前提條件是必須對目的基因有一前提條件是必須對目的基因有一定的了解，定的了解，需要設(shè)計引物。需要設(shè)計引物。 DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序PCRPCR技術(shù)原理技術(shù)原理 及反應(yīng)過程及反應(yīng)過程1加熱加熱至至909095 95 目

4、的基因目的基因DNA解鏈解鏈2冷卻冷卻至至555560 60 ，引物結(jié)合到互補引物結(jié)合到互補DNADNA鏈鏈3 3加熱至加熱至707075 75 ，熱穩(wěn)定熱穩(wěn)定DNADNA聚合酶從聚合酶從從引物起始互補鏈的從引物起始互補鏈的合成合成 DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序1、基因表達(dá)載體的組成、基因表達(dá)載體的組成思考：作為基因工程表達(dá)載體，只需含有思考：作為基因工程表達(dá)載體，只需含有目的基因就可以完成任務(wù)嗎？為什么？目的基因就可以完成任務(wù)嗎？為什么？DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序 啟動子：位于基因的首端的一段特殊

5、啟動子：位于基因的首端的一段特殊的的DNA片斷，它是片斷，它是RNA聚合酶識別和聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出錄出mRNA，最終獲得蛋白質(zhì)，最終獲得蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)基調(diào)節(jié)基 因因操縱基操縱基 因因結(jié)構(gòu)基結(jié)構(gòu)基 因因RNA聚合酶聚合酶半乳糖苷酶半乳糖苷酶 酶酶 酶酶 RNA聚合酶聚合酶啟動子啟動子結(jié)構(gòu)蛋白基因結(jié)構(gòu)蛋白基因RNA聚合酶聚合酶DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序終止子終止子：位于基因的尾端的一段特位于基因的尾端的一段特殊的殊的DNA片斷，能終止片斷，能終止mRNA的的轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄標(biāo)記基因標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞的作用是為了

6、鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的中是否含有目的基因，從而將有目的基因的細(xì)胞篩選出來基因的細(xì)胞篩選出來DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序它們的作用是？它們的作用是？DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 1、導(dǎo)入植物細(xì)胞常用的方法是什、導(dǎo)入植物細(xì)胞常用的方法是什么？具么？具 體過程是怎樣的？體過程是怎樣的？ 2、導(dǎo)入動物細(xì)胞常用的方法是什、導(dǎo)入動物細(xì)胞常用的方法是什么？基本操作程序是怎樣的？么？基本操作程序是怎樣的？ 3、導(dǎo)入大腸桿菌的方法是怎樣的？、導(dǎo)入大腸桿菌的方法是怎樣的？鈣離子有什么作用？鈣離子有什么

7、作用？哪些細(xì)胞可以作為目的基因的受體？哪些細(xì)胞可以作為目的基因的受體？DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序 1、導(dǎo)入到植物細(xì)胞常用的方法有農(nóng)桿、導(dǎo)入到植物細(xì)胞常用的方法有農(nóng)桿菌感染法（雙子葉植物和祼子植物）、菌感染法（雙子葉植物和祼子植物）、基因槍法（單子葉植物）和花粉通道法基因槍法（單子葉植物）和花粉通道法 2、導(dǎo)入到動物細(xì)胞常用的方法是顯微、導(dǎo)入到動物細(xì)胞常用的方法是顯微注射法（先提純目的基因，再體外注射注射法（先提純目的基因，再體外注射入卵細(xì)胞或受精卵中，最后將含目的基入卵細(xì)胞或受精卵中，最后將含目的基因的受精卵移植到輸卵管或子宮中發(fā)育因的受精卵移植到輸卵管或子宮中發(fā)育成新個體。成新個體。 3、導(dǎo)入到大腸桿菌（原因？）時先用、導(dǎo)入到大腸桿菌（原因？）時先用Ca2+處理成感受態(tài)后與溶有載體處理成感受態(tài)后與溶有載體DNA的緩沖液混合的緩沖液混合,吸收吸收DNA分子分子,完成轉(zhuǎn)化完成轉(zhuǎn)化DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序DUCK179制作人教版教學(xué)基因工程的基本操作程序四、目的基因的檢測與鑒定四、目的基因的檢測與鑒定 導(dǎo)入目的基因后需要檢測哪些方面？導(dǎo)入目的基因后需要檢測哪些方面？各采取什么方法？各采取什么方法？ 什么是什么是DNA分子探針？檢測時的分子探針？檢測時的DNA探針通過什么原理來檢測目的探針通過什么原理來檢測目的基因和相應(yīng)的基因和相應(yīng)的