培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng)

1、WORD整理版培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng)1. 培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán) 格按其規(guī)定進(jìn)行配制外一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料加以比較核對(duì)再依據(jù)自己的使 用目的加以選用，記錄其來(lái)源。2 培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)推各稱(chēng)，配方及其來(lái)源和各種成份的牌號(hào)。最 終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)?查，復(fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3. 培養(yǎng)基成分的稱(chēng)取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱(chēng)取并要注意防止錯(cuò)亂.最好一次完成，不要中斷。可將配 方置于傍側(cè)，每稱(chēng)完一種成分即在配

2、方上做出記號(hào)，并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊，置 于左側(cè)，每種稱(chēng)取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱(chēng)取完畢后.還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。4. 培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。最好使用不銹鋼鍋加熱溶化也可放入大燒杯或 大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)，以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用，應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化迄至煮沸。如為瓊脂培 養(yǎng)基，應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充

3、分混 合。在加熱溶化過(guò)程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，最后必須加以補(bǔ)足。5. 培養(yǎng)塞pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后，應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正，因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化，例如，牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH卻會(huì)有顯著的升高。因此，對(duì)這個(gè)步驟，操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的最終pH，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。6 培養(yǎng)基的過(guò)濾澄清液體培養(yǎng)基必須絕對(duì)澄清，瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無(wú)顯著沉淀，因此，須要采用過(guò)濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過(guò)濾法，濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形，以避免因液壓不均勻而引起濾紙

4、破裂。瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過(guò)濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過(guò)濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時(shí)、則須先用絨布將碎渣濾去，再用濾紙反復(fù)過(guò)濾。如過(guò)濾法不能達(dá)到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60C的培養(yǎng)基放入大 的三角燒瓶?jī)?nèi)，裝入量不得超過(guò)燒瓶容量的 1/ 2 ，每1000ml培養(yǎng)基加入1-2個(gè)雞蛋 的蛋白.強(qiáng)力振搖3-5分鐘，置高壓蒸汽滅菌器中、121C加熱20分鐘、取出趁熱以絨 布過(guò)濾即可。若能自行沉淀者，亦可靜置冰箱中1-2日、吸取其上清液即可。7. 培養(yǎng)基的分裝培養(yǎng)基的分裝，應(yīng)按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得 超過(guò)容器裝盛量的 2

5、/ 3 。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還雙用防水紙包扎（現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者）。分裝時(shí)最好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝 瓊脂抖面培養(yǎng)基時(shí)，分裝量應(yīng)以能形成2 / 3底層和1/ 3斜面的量為恰當(dāng)。分裝容器應(yīng)予先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒，以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝 20ml培養(yǎng)基于一小玻瓶中，隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌，以為測(cè)定該批培養(yǎng)基最終pH之用。8. 培養(yǎng)基的滅菌一般培養(yǎng)基可采用121C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中，如 無(wú)特殊規(guī)定，即可用此法滅菌。某些畏熱成分，如糖類(lèi)，應(yīng)另行配成20%如或更高的濃液，以過(guò)濾或間歇滅菌法消毒，以后再用無(wú)菌操作技

6、術(shù)、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液、體 液和抗生素等則應(yīng)從無(wú)菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50C左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出、待冷至55-60 C時(shí)，擺置成適當(dāng)斜面、待其自然凝固。9. 培養(yǎng)基的質(zhì)量測(cè)試每批培養(yǎng)基制備好以后應(yīng)仔細(xì)檢查一遍：如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去。并測(cè)定其最終pH,將全部培養(yǎng)基放入 36 1C恒溫箱培養(yǎng)過(guò)夜，如發(fā)現(xiàn)有菌生長(zhǎng)，即棄去。用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種1-2管或瓶培養(yǎng)基，培養(yǎng)24- 48小時(shí)，如無(wú)菌生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不好。應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次，如結(jié)果仍同前，則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去，不能使用。10. 培養(yǎng)基

7、的保存培養(yǎng)基應(yīng)存放于冷暗處，最好能放于普通冰箱內(nèi)。放置時(shí)間不宜超過(guò)一周，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過(guò)3天。每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制各記錄副頁(yè)或明顯標(biāo)簽。培養(yǎng)基的常規(guī)配制程序一、目的要求了解培養(yǎng)基的配制原理。了解培養(yǎng)基常規(guī)配制程序。了解培養(yǎng)基配制過(guò)程各環(huán)節(jié)的要求和注意事項(xiàng)。二、基本原理正確掌握培養(yǎng)基基的配制方法是從事微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)工作的重要基礎(chǔ)，由于微生物種類(lèi)及代謝類(lèi)型的多樣性，因而用于培養(yǎng)微生物培養(yǎng)基的種類(lèi)也很多， 它們的配方及配制方法雖各 有差異。但一般培養(yǎng)基的配制程序卻大致相同，例如器皿的準(zhǔn)備，培養(yǎng)基的配制與分裝，棉塞的制作，培養(yǎng)基的滅菌，斜面與平板的制作以及培養(yǎng)基的無(wú)菌檢查等基本環(huán)節(jié)大

8、致相向。三、實(shí)驗(yàn)材科（一）藥品待配各種培養(yǎng)的組成成分，瓊脂，1mol/L NaOH溶液，1mol/l （升，統(tǒng)一用大寫(xiě)）HCl溶液。（二）儀器天平或臺(tái)秤，高壓蒸汽滅菌鍋。（三）玻璃器皿移液管、試管、燒杯、量筒、錐形瓶、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。（四）其他物品藥匙、稱(chēng)量紙、pH試紙、記號(hào)筆、棉花、紗布、線(xiàn)繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報(bào)紙等。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一 ）玻璃器皿的洗滌和包裝1玻璃器皿的洗滌玻璃器皿在使用前必須洗刷干凈。將錐形瓶、試管、培養(yǎng)皿、量筒等浸入含有洗滌劑的水中，用毛刷刷洗，然后用自來(lái)水及蒸餾水沖凈。移液管先用含有洗滌劑的水浸泡。再用自來(lái)水及蒸餾水沖洗，洗刷干凈的玻璃器皿置于烘箱中烘干后備用。

9、2 滅菌前玻璃器皿的包裝(1) 培養(yǎng)皿的包裝培養(yǎng)皿由一蓋一底組成一套?？捎脠?bào)紙將幾套培養(yǎng)皿包成一包，或者將幾套培養(yǎng)皿直接置于特制的鐵皮圓筒內(nèi)，加蓋滅菌。包裝后的培養(yǎng)皿須經(jīng)滅菌之后才能使用。(2) 移液管的包裝在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脫脂棉)。它的作用是避免外界及口中雜菌吹入管內(nèi)，并防止菌液等吸入口中。 塞入此小段棉花應(yīng)距管口約 0.5cm左有。棉花自身長(zhǎng)度約1-1 5cm。塞棉花時(shí)，可用一外圈拉直的曲別針，將少許棉花塞入管口內(nèi)。 棉花要塞得松緊適宜，吹時(shí)以能通氣而又不使棉花滑下為準(zhǔn)。先將報(bào)紙裁成寬約 5cm左右的長(zhǎng)紙條，然后將已塞好棉花的移液管尖端放在長(zhǎng)條報(bào)紙的一 端，約成45度角，

10、折疊紙條包住尖端，用左手握住移液管身，右手將移液管壓緊，在桌面 上向前搓轉(zhuǎn)，以螺旋式包扎起來(lái)。上端剩余紙條，折疊打結(jié)，準(zhǔn)備滅菌(見(jiàn)圖5 1 1)。(二) 液體及固體培養(yǎng)基的配制過(guò)程1 液體培養(yǎng)基配制(1) 稱(chēng)量一般可用1/100粗天平稱(chēng)量配制培養(yǎng)基所需的各種藥品。先按培養(yǎng)基配方計(jì)算各成分的用量，然后進(jìn)行準(zhǔn)確稱(chēng)量。(2) 溶化 將稱(chēng)好的藥品置于一燒杯中，先加入少量水(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要可用自來(lái)水或蒸餾水)，用玻棒攪動(dòng)，加熱溶解。(3) 定容 待全部藥品溶解后，倒入一量筒中，加水至所需體積。如某種藥品用量太少 時(shí)，可預(yù)先配成較濃溶液，然后按比例吸取一定體積溶液，加入至培養(yǎng)基中。(4) 調(diào)pH 一般用pH

11、試紙測(cè)定培養(yǎng)基的 pH。用剪刀剪出一小段 pH試紙，然后用鑷子夾取此段pH試紙，在培養(yǎng)基中蘸一下，觀看其pH范圍，如培養(yǎng)基偏酸或偏堿時(shí)，可用1mol/l NaOH或1mol/l HCl溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。調(diào)節(jié)pH時(shí)，應(yīng)逐滴加入NaOH或HCI溶液，防止局部 過(guò)酸或過(guò)堿，破壞培養(yǎng)基中成分。邊加邊攪拌，并不時(shí)用pH試紙測(cè)試，直至達(dá)到所需 pH 為止。（5）過(guò)濾 用濾紙或多層紗布過(guò)濾培養(yǎng)基。一般無(wú)特殊要求時(shí)，此步可省去。2 固體培養(yǎng)基的配制配制固體培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)將已配好的液體培養(yǎng)基加熱煮沸，再將稱(chēng)好的瓊脂（1.5% -2% ）加入,并用玻棒不斷攪拌，以免糊底燒焦。繼續(xù)加熱至瓊脂全部融化， 最后補(bǔ)足因蒸發(fā)而失

12、去水分。（三）培養(yǎng)基的分裝根據(jù)不同需要，可將己配好培養(yǎng)基分裝入試管或錐形瓶?jī)?nèi)， 分裝時(shí)注意不要使培養(yǎng)基沾 污管口或瓶口，造成污染。如操作不小心，培養(yǎng)基沾污管口或瓶口時(shí)，可用鑷子夾一小塊脫脂棉，擦去管口或瓶口的培養(yǎng)基，并將脫脂棉棄去。1 .試管的分裝取一個(gè)玻璃漏斗，裝在鐵架上，漏斗下連一根橡皮管，橡皮管下端再與另一玻璃管相接，橡皮管的中部加一彈簧夾。分裝時(shí)，用左手拿住空試管中部，并將漏斗下的玻璃管嘴插入試管 內(nèi)，以右手拇指及食指開(kāi)放彈簧夾，中指及無(wú)名指夾住玻璃管嘴，使培養(yǎng)基直接流入試管內(nèi)（圖 5 1 2）。裝入試管培養(yǎng)基的量視試管大小及需要而定，若所用試管大小為15X 150 mm時(shí)，液體培養(yǎng)基

13、可分裝至試管高度 1 /4左右為宜；如分裝固體或半固體培養(yǎng)基時(shí)，在瓊脂完全融化后， 應(yīng)趁熱分裝于試管中。用于制作斜面的固體培養(yǎng)基的分裝量為管高1/5（約34m1）;半固體培養(yǎng)基分裝量為管高的1 /3為宜。2. 錐形瓶的分裝用于振蕩培養(yǎng)微生物用時(shí)，可在250 m1錐形瓶中加入50 ml的液體培養(yǎng)基，若用于制作平板培養(yǎng)基用時(shí)，可在250 m1錐形瓶中加入150ml培養(yǎng)基，然后再加入3g瓊脂粉（按2% 計(jì)算），滅菌時(shí)瓶中瓊脂粉同時(shí)被融化。（四）棉塞的制作及試管、錐形瓶的包扎為了培養(yǎng)好氣性微生物，需提供優(yōu)良通氣條件，同時(shí)為防止雜菌污染，則必須對(duì)通入試管或錐形瓶?jī)?nèi)空氣預(yù)先進(jìn)行過(guò)濾除菌。通常方法是在試管及

14、錐形瓶口加上棉花塞等。1 .試管棉塞的制作制棉塞時(shí)，應(yīng)選用大小、厚薄適中的普通棉花一塊，鋪展于左手拇指和食指扣成的圓孔上,用右手食指將棉花從中央壓入團(tuán)孔中制成棉塞，然后直接壓入試管或錐形瓶口。也可借用玻將裝好培養(yǎng)基并塞好棉塞或蓋好管帽的試管擁成一捆，外面包上一層牛皮紙。用鉛筆注明培養(yǎng)基名稱(chēng)及配制日期，滅菌待用。2錐形瓶棉塞制作通常在棉塞外包上一層紗布，再塞在瓶口上。有時(shí)為了進(jìn)行液體振蕩培養(yǎng)加大通氣量，則可用8層紗布代替棉塞包在瓶口上。目前也有采用無(wú)菌培養(yǎng)容器封口膜直接蓋在瓶口，既保證良好通氣，過(guò)濾除菌又操作簡(jiǎn)便，故極受歡迎。在裝好培養(yǎng)基并塞好棉塞或包上八層紗布或蓋好培養(yǎng)容器封口膜的錐形瓶口上，

15、再包上一層牛皮紙并用線(xiàn)繩捆好，滅菌待用。（五）培養(yǎng)基的火菌培養(yǎng)基經(jīng)分裝包扎之后，應(yīng)立即進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，100Pa滅菌20min （滅菌條件根據(jù)培養(yǎng)基不同有所差異，含糖培養(yǎng)基105C, 30min）。如因特殊情況不能及時(shí)滅菌，則應(yīng)暫存 于冰箱中。（六）斜面和平板的制作1 斜面的制作將已滅菌裝有瓊脂培養(yǎng)基的試管，趁熱置于木棒上，使成適當(dāng)斜度，凝固后即成斜面（圖5 1 5）。斜面長(zhǎng)度不超過(guò)試管長(zhǎng)度1/2為宜。如制作半固體或固體深層培養(yǎng)基時(shí)，火菌后則應(yīng)垂直放置至冷凝。2. 平板的制作將裝在錐形瓶或試管中已滅菌的瓊脂培養(yǎng)基融化后，待冷至50 C左右傾入無(wú)菌培養(yǎng)皿中。溫度過(guò)高時(shí)，皿蓋上的冷凝水太多， 溫

16、度低于50C,培養(yǎng)基易于凝固而無(wú)法制作平板。平板的制作應(yīng)采用無(wú)菌操作，左手拿培養(yǎng)皿，右手拿錐形瓶的底部或試管，左于同時(shí)用小指和手掌將棉塞打開(kāi)，灼燒瓶口，月左手大拇指將培養(yǎng)皿蓋打開(kāi)一縫，至瓶口正好伸入， 傾入10-12m1的培養(yǎng)基，迅速蓋好皿蓋，置于桌上，輕輕旋轉(zhuǎn)平皿、使培養(yǎng)基均勻分布于 整個(gè)平皿中、冷凝后即成平板 （圖5 1 6）。（七）培養(yǎng)基的無(wú)菌檢查滅菌后的培養(yǎng)基，一般需進(jìn)行無(wú)菌檢查。最好從中取出1-2管（瓶），置于37C恒溫箱中培養(yǎng)1 2天，確定無(wú)菌后方可使用。（八）無(wú)菌水的制備在每個(gè)250 mL的錐形瓶?jī)?nèi)裝99mL的蒸餾水并塞上棉塞。在每支試管內(nèi)裝 4.5m1蒸餾 水。塞上棉塞或蓋上塑

17、料試管蓋。再在棉塞上包上一張牛皮紙。高壓蒸汽滅菌，100 Pa滅菌20分鐘。、MS培養(yǎng)蘋(píng)母液的配制母液成分規(guī)定量倍數(shù)稱(chēng)取量tmg)母液體和(nil)配制1升培養(yǎng)基吸取社定容編種類(lèi)1丸元素KNO3IW01019000)000100NH4NO316501016500MgSCM 7H2O3701037011KH2PCH1701017002CaCI2 - 2H2O44010440010001003微 量,兀素MnSO4 * 4H2O2Z31002230(XX)107nSO4 * 7H2O亂6100960H3BO36,2100KI100S3Na2Vo04 * 7H2O0.2510025IH2O27,81

18、0027805(機(jī)甘氮酸2.010010050010fi；股毗哆酚6510025鹽股銘按素0.11005煙酸0.5100256肌酸00100500()50010n.a： i.大量足索按賴(lài)便用時(shí)離io桔的數(shù)值箱:取.分別將各種化舍物稱(chēng)量后，隱注意* L大量元素按能使用時(shí)高10倍的數(shù)值稱(chēng)取.分別將各種化舎物稱(chēng)量后.除 CaClrllhO 獨(dú)配制外.其余化合物掘合在50伽1燒杯中加適量蒸耀水落用玻髀IMt 捋促溶例入WWnd睿量JK申用慕IS水定容至刻置小II権中保存貼上標(biāo)養(yǎng)注明化合 物名禰（或編號(hào)h濃縮倍數(shù).配制日期和配制睿姓客 CCh立HQ配制同上賢于另f 口 瓶中.2.鍛嚴(yán)元圭譯液的叱制按愛(ài)求

19、敢繃1M祐的數(shù)ff禰馭 d別將各種化介物秋就除飲鹽* FcSUMlIQ和 N時(shí)EDTA.2氐作為一粗單獨(dú)配制外比余化化物川混育聞十燒林內(nèi)尢I少旨蒸飴水帑解后.忑：.；塢弄基配方痘印如何去徐自動(dòng)化倉(cāng)庫(kù)細(xì)胞培莽基怎祥學(xué)手繪插定薦在000ml麗粗中.置小口粗中保存.站上標(biāo)鎖3. 諛駅配制將FcSQ/FHiO和血聲”入羽心分別?5T 450ml SfS* + r加舲tfS要 不斷檢拌，幣解后.兩離混合.洞PH節(jié)上加水定容至WQOml,置于小口瓶中，貼上標(biāo)簽.4. 有機(jī)物母械配制.按母浪要求液堀50倍徐蕊糖按3鐘獨(dú)1臨時(shí)稱(chēng)量外.其余分別稱(chēng)盤(pán) 盲*落解宜容在500容按瓶中胃于小口軌中滋存.骷上標(biāo)簽.5.

20、母戕最好*. 2Y9的冰箱屮世依 特別是有機(jī)類(lèi)樹(shù)JSL貯存時(shí)間不直過(guò)*無(wú)機(jī)鹽母液 嚴(yán)好在一卩打內(nèi)用完如發(fā)規(guī)仃希曲和頁(yè)就產(chǎn)主.就不能再使用I -制鈾閔液和營(yíng)養(yǎng)墻養(yǎng)華時(shí)所用蒸懾水或無(wú)禹:T水必須符金標(biāo)爪聶求-化亍妁眉色硯M 高純度的析純九2.諭就藥恂采用咼靈咸踐的尺半*倚種針品專(zhuān)用一幽世“主反調(diào)節(jié)劑母itt配制為了撞作方便.節(jié)釣晡間，生長(zhǎng)週節(jié)劑也可如同配制理液L樣，先配成原液這祥IE制 dfe JbLi Millfw I I I JWT-1 db abhd T |_|I III F=0&c= news-Sccf = 1 &c h =06 . I -III d r . I . . - I I b I

21、 v I I I I I I I d I d I I I I I Rfr.氏九.II 1 I J. F/J J TV fJVi： ITVII?rI和叩出“円 V rn T 7CnL.rJA T| rlLi|J,l培養(yǎng)舉時(shí)只婆稍加計(jì)翼.按需耍址取叩可a不風(fēng)藥tl在配制時(shí)若不洛于*r可不同的瘩劑先幡昭 義乙酸NAA）.即陰乙 備（IAA），木爾爺GAJ- 2.肛口等主悵衣和*米爲(wèi)ZTJ可和H少誡5%灑盼舞解*然 麻加加如潛卻不完全再加熱。激動(dòng)秦（KT和&咔基哩睜BA可 J fi 1W.L的 拈黴中.葉腹離用少昴韓敲忒解搟Wife Mme生繪惆卄物氐 帶解呱/i. 100ml SWJdffi屮定埶

22、配制的粽液毎基升則含有生 札洞節(jié)物暁甩制Jg-IE要求在1S溫（0-4V）保存.配制培養(yǎng)基時(shí)如毎升（1000ml） 需址加的生長(zhǎng)囲節(jié)刑物Jfi為03噸H *兩収I ml母液即可.二.辭養(yǎng)輩配制和匱閑-養(yǎng)覽養(yǎng)基配制程序（-）.液吸取量的計(jì)（J配制培養(yǎng)基的升數(shù)公式匚母榔取量=母液律朝（CC） X譚液鍛編倍數(shù)用莽基婆求向角魚(yú)公式2：埠池吸取最* （各種牛.丘調(diào)節(jié)劑namccffjsf二）各種廚液按肢睜編號(hào)權(quán)列A.犬量元素；B. UC1.呀兇；c. 元柔I血罠盤(pán)n訂機(jī)物,F.生故素尋乙酸WJ：配制0.5iifi/itil的AA禰取StlfflE k NM博少量勺阮 潛宿藩Iff 石加燕惴水址棄程1飼帥

23、1；山蒯也付現(xiàn)加激動(dòng)1UKT）配制9, Wil的KT稱(chēng)阪酥T 用少常1N HCT蒂解后*加議箱木定容至lOOmL（三配制培養(yǎng)基門(mén)訓(xùn)0恤）I 瓊弗：稱(chēng)取商:肺加入麵伽I裁懾也 加朋爵輛克率完傘祈解夷止”2.3%用斯量牧好的白糖代替，稱(chēng)取盹白獄 弭丁器有涮臍的如曲燕慍水屮幹種愣液的吸戦V培養(yǎng)華IL） 用50ml燈筒量取丸量元京母覦A和CaCkZHzO母液-&） KXJml 分別用移液廿或吸世駆取微宦元S fCL就鹽（D）10ml專(zhuān)業(yè)資料學(xué)習(xí)參考 用lOnJ移賊管或毗活贓H丈仃機(jī)物（H） 10ml4） 棉取矚盍將上邇洛波全部攏合丁球I&列世權(quán)漕液屮.混合均勻右.加熱至aorA右.用BB度訐 或希密P

24、H試紙測(cè)定培養(yǎng)華的PH 一翌養(yǎng)求$.8-6.0過(guò)戰(zhàn)過(guò)堿則用IN NaoH和IN HCL謂 整。一* 你 用一亍橫有膠管的分冀襦趟熱幫壻養(yǎng)睪l）ml堵養(yǎng)基弁軼飼2S3O個(gè)三角陋 “何個(gè)二用瓶妁30ml直右一故占試官、-JDlHi容恫1同-1出左右）??；培芥呈釧修叫三-包農(nóng)：療軌好的三如版川封口唳址扎好*林圈用芥呈代巧即心辿和滅繭州具消理和詵濟(jì)：齊種母液按禺伉靑擺帶齊.刑過(guò)的怕筒，樣液骨、燒機(jī)、鉗錨齊用水 沈濟(jì)于?豁右按減庁族囘原處亠三*高壓裁汽典繭錨的使用方法其體操作生驟1. 衙k錨貞木金平把架；2. 把包扎好曲晤養(yǎng)墓裝入高壓訓(xùn)；3. 證上熬樂(lè)鍋盞，上犠螺帽CS意對(duì)軸擰戟嫌帽）去上F閥和安全閥.4. 然后援通電源.5. 壓為計(jì)哥詐o.MMPmfH,打幵放氣樹(shù).4除冷空氣此步程竜豆）.6. 擾除冷空氣Gj關(guān)卯放吒閥越壓力升到OJIMPa 吋.開(kāi)始計(jì)算滅菌時(shí)間.具體方 法n當(dāng)