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1、川芎茶調(diào)散在濕疹治療中的作用急性濕疹一般是由多種內(nèi)外因素引起的一種常見的、具有明顯滲出傾向的皮膚炎癥反應(yīng),臨床一般以丘皰疹為主。在中醫(yī)學(xué)里有濕瘡;、繡球瘡;、浸淫瘡;之稱,且好發(fā)于顏面、手足、前臂、小腿、外陰等處,彌散成片,邊緣不清,瘙癢劇烈,抓騷、摩擦等物理刺激可造成滲出結(jié)痂及片狀糜爛。急性者以濕熱為主,中醫(yī)辨證多為濕熱浸淫證,由此可知,清熱、祛風(fēng)、祛濕是急性濕疹治療的三大原則。目前,該病的治療多采用西醫(yī)抗過敏療法,但其存在一定的不良反應(yīng)。近年來(lái)發(fā)現(xiàn),利用中醫(yī)傳統(tǒng)驗(yàn)方治療急性濕疹有獨(dú)特的臨床價(jià)值。川芎茶調(diào)散是治療頭痛的常用方劑,在現(xiàn)代臨床中具有解熱鎮(zhèn)痛抗炎的作用,對(duì)治療蕁麻疹、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、
2、過敏性鼻炎等過敏性疾病亦有一定療效,但其在治療急性濕疹方面研究尚為數(shù)不多。通過對(duì)該方藥理及配伍關(guān)系進(jìn)行研究,初步推斷其可用于治療濕疹。本研究通過設(shè)計(jì)急性濕疹動(dòng)物模型,測(cè)定細(xì)胞因子的改變,初步探討了川芎茶調(diào)散在濕疹治療中的作用。課題組前期已經(jīng)對(duì)該藥物的其他免疫指標(biāo)做了初步研究,證實(shí)了川芎茶調(diào)散能降低小鼠耳腫脹度,提高胸腺、脾指數(shù),升高降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)濃度,在此基礎(chǔ)上,課題組進(jìn)一步深入研究了 IL-2、IgE 及 NO 等相關(guān)分子的水平及其作用機(jī)制。1、 材料和方法1.1 動(dòng)物:本校教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心提供的健康成年(13 周齡)昆明系小鼠75 只,體重 2530g。1.2 試劑:硫化鈉;2,
3、4-二硝基氟苯(濃度、配制方法同文獻(xiàn));IL-2試劑盒;IgE 試劑及抗體;水合氯醛;甲醛;Griess 試劑,按參考文獻(xiàn)自行配制;小鼠 IL-2 檢測(cè)試劑盒和 IgE 檢測(cè)試劑盒,購(gòu)自上海晨易生物科技有限公司。1.3 藥品:川芎茶調(diào)散由薄荷葉 12g、川芎 9g、荊芥 9g、細(xì)辛 3g、防風(fēng)4.5g、白芷 6g、羌活 6g、炙甘草 6g、茶葉 15g 組成,購(gòu)自漱玉平民大藥房。實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水按照 321 的比例將其配成高、中、低三種濃度(其中,高濃度組:0.5g/ml,中濃度組:0.25g/ml,低濃度組:0.125g/ml),37下超聲 40min 促進(jìn)溶解。1.4 主要器材:多功能自動(dòng)酶
4、標(biāo)分析儀;精密天平;醫(yī)用超聲波清洗器;低速離心機(jī);37電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱等。2、 實(shí)驗(yàn)步驟2.1 動(dòng)物分組:將 75 只小鼠隨機(jī)分為 5 組,每組 15 只,即空白組、模型組、川芎茶調(diào)散高濃度組、川芎茶調(diào)散中濃度組和川芎茶調(diào)散低濃度組。2.2 模型制備:參照文獻(xiàn)方法,將上述五組實(shí)驗(yàn)小鼠除空白組外腹腔注射麻醉,腹部脫毛后,實(shí)驗(yàn)當(dāng)天以 0.5%二硝基氯苯溶液涂于小鼠的腹部致敏,同時(shí),左耳涂等量丙酮做基質(zhì)對(duì)照。d2 強(qiáng)化一次,6d后在小鼠右耳內(nèi)側(cè)外涂0.2%二硝基氯苯激發(fā),24h后處死小鼠。2.3 治療給藥:觀察造模成功后當(dāng)天,除空白組和模型組以外,其他各組在致敏后 2h 開始用藥,持續(xù)用藥 7d,
5、1 次/d。2.4 檢測(cè)指標(biāo):小鼠用藥結(jié)束后,檢測(cè)其血清 IL-2、IgE 和 NO 濃度。2.4.1 血清 IL-2 的測(cè)定:按照文獻(xiàn)。進(jìn)行。小鼠經(jīng)眼球摘除取血 lml,1500r/min 離心 20min,取出血清置于微量離心管內(nèi),-80冰箱保存?zhèn)溆?,采?ELISA 法測(cè)定血清 IL-2,步驟按 IL-2 試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。2.4.2 血清 IgE 濃度測(cè)定:參考文獻(xiàn)。采用 ELISA 法,操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行,所有標(biāo)本均在同一批次內(nèi)檢測(cè)完成。2.4.3 血清 NO 濃度測(cè)定:以 Griess 法檢測(cè)血清中 NO2-水平,以反映血清中NO含量。按文獻(xiàn)進(jìn)行操作,擬合NO反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲
6、線,計(jì)算結(jié)果。2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以(x±s)表示,采用 SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析,設(shè)置檢驗(yàn)水準(zhǔn) α=0.05,以 P3、 結(jié) 果各組小鼠血清 IL-2、IgE 及 NO 濃度測(cè)定結(jié)果如表 1 所示。由表 1 可見,造模組與空白組相比,血清 IL-2、IgE 及 NO 水平均有顯著差異(P4、 討 論在現(xiàn)代臨床中,川芎茶調(diào)散主要用于治療感冒頭痛、偏頭痛、血管神經(jīng)性頭痛、慢性鼻炎頭痛等,而極少應(yīng)用于濕疹的治療?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn),方中成分有抗炎、抗過敏、止痛消腫等作用,對(duì)外感風(fēng)邪所致的過敏性疾病亦有獨(dú)特的作用。川芎茶調(diào)散對(duì)急性濕疹的作用機(jī)制可
7、能是通過調(diào)節(jié)細(xì)胞因子來(lái)實(shí)現(xiàn)的,其調(diào)節(jié)機(jī)制復(fù)雜。急性濕疹是由內(nèi)外激發(fā)因子引起的一種遲發(fā)型超敏反應(yīng),類似于變應(yīng)性接觸性皮炎。變應(yīng)性接觸性皮炎是 T 細(xì)胞介導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)。研究表明,Th1/Th2 失衡是超敏反應(yīng)性疾病發(fā)病中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)或始動(dòng)因素。IL-2 是 Thl 細(xì)胞及 NK 細(xì)胞分泌的重要細(xì)胞因子,有多方面免疫活性,可促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞和 NK 細(xì)胞的增生,在抗感染、抗腫瘤等細(xì)胞免疫中發(fā)揮著重要作用。但另一方面,在變應(yīng)性接觸性皮炎中,IL-2 也會(huì)異常升高,導(dǎo)致炎癥加重。如用藥后 IL-2 水平降低,則證明該藥物可有效抑制急性濕疹發(fā)病后 IL-2 的異常增高,減輕超敏反應(yīng)。IgE 是介導(dǎo)
8、型超敏反應(yīng)的主要介質(zhì),在急性濕疹中亦為重要作用物質(zhì)之一。該抗體水平降低,可表明機(jī)體內(nèi) IgE 介導(dǎo)的超敏反應(yīng)減弱。相關(guān)研究認(rèn)為,NO 在免疫應(yīng)答中具有多種作用,一方面,NO是各種的生理功能和防御機(jī)制的重要參與分子;另一方面,NO 產(chǎn)生過多可造成多種機(jī)體損害。在炎癥反應(yīng)中,NO 的含量往往有異常升高,故此調(diào)節(jié)其水平可有效影響炎癥反應(yīng)。在本實(shí)驗(yàn)中,用藥后血清 NO 含量明顯降低,顯示炎癥反應(yīng)有所減弱。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用 DNFB 誘導(dǎo)小鼠急性濕疹模型,用藥后測(cè)定血清IL-2、IgE 和 NO 水平,通過檢測(cè)相關(guān)細(xì)胞因子和分子水平變化檢測(cè)其免疫功能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,用藥后小鼠血清 IL-2、IgE 和 NO 水平均下降,與正常組相比,有顯著差異??梢?,該藥物具有一定的抗炎、抗超敏反應(yīng)、參與免疫調(diào)節(jié)的作用,有望進(jìn)一步開發(fā)作為臨床治療急性濕疹的有效藥物。參考文獻(xiàn):1宋賀.廣安門醫(yī)院濕疹患者調(diào)查分析及中醫(yī)證型研究D.北京中醫(yī)藥大學(xué)碩士論文,2012.2郭建生,郭倩瑤,馬麗,等.中藥川芎的現(xiàn)代藥理學(xué)研究進(jìn)展A.
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