復(fù)習(xí)題2基因重組與基因工程

1、復(fù)習(xí)題 2 基因重組與基因工程一、A型題 1.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)常用的連接外源性DNA和載體DNA的酶是：（ A ） ADNA連接酶 BDNA聚合酶 CDNA聚合酶 DDNA聚合酶 E反轉(zhuǎn)錄酶 2.用來鑒定DNA的技術(shù)是：（ B ） ANorthern印跡 BSouthern印跡 CWestern印跡D親和層析 E離子交換層析 3.下列那項(xiàng)不是重組DNA技術(shù)中常用的工具酶：（ D ） A限制性核酸內(nèi)切酶 BDNA連接酶 CDNA聚合酶 DRNA聚合酶 E反轉(zhuǎn)錄酶 4.關(guān)于限制性核酸內(nèi)切酶的敘述，下列哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的？（ E ） A限制性核酸內(nèi)切酶分為三類，用于基因工程的為酶 B限制性核酸內(nèi)切酶切割后可產(chǎn)生粘

2、性末端或平端 C識別的核苷酸序列個(gè)數(shù)可以是6個(gè)或8個(gè) D. 識別的序列一般具有回文結(jié)構(gòu)E識別的DN A為單鏈 5.關(guān)于基因工程的敘述，下列哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的？（ B ） A基因工程也稱基因克隆 B只有質(zhì)粒DNA可作為載體 C重組體DNA轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞 D需獲得目的基因 E需對重組DN A進(jìn)行純化、篩選 6.有關(guān)質(zhì)粒的敘述，下列哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的？（ E ） A小型環(huán)狀雙鏈DNA分子 B可小到23Kb大到數(shù)百個(gè)Kb C能在宿主細(xì)胞中獨(dú)立自主地進(jìn)行復(fù)制 D常含有耐藥基因 E只有一種限制性核酸內(nèi)切酶切口 7下列哪項(xiàng)不是重組DN A的連接方式？（ C ） A粘性末端與粘性末端的連接 B平端與平端的連接C. 粘

3、性末端與平端的連接 D人工接頭連接 E同聚物加尾連接 8 DNA克隆不包括下列哪項(xiàng)步驟？（ E ）A選擇一個(gè)適合的載體 B限制性核酸內(nèi)切酶在特異位點(diǎn)裂解質(zhì)粒和目的基因 C用連接酶連接載體DNA和目的DNA，形成重組體 D用載體的相應(yīng)抗生素抗性篩選含重組體的細(xì)菌 E重組體用融合法導(dǎo)入細(xì)胞 9基因重組是指DNA分子的：（ A ） A共價(jià)連接 B氫鍵連接 C離子鍵連接 D交換 E退火 10在分子生物學(xué)中，重組 DNA又稱為：（ D ） A.酶工程 B.蛋白質(zhì)工程 C.細(xì)胞工程 D.基因工程 E.DNA工程11基因工程中，不常用到的酶是（ E ） A限制性核酸內(nèi)切酶 BDNA聚合酶 CDNA連接酶 D

4、逆轉(zhuǎn)錄酶 EDNA解酶 12能識別DNA的特異序列，并在識別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA的一類酶稱為：（ B ）A. DNA內(nèi)切酶 B限制性內(nèi)切核酸酶C非限制性內(nèi)切核酸酶 D限制性外切核酸酶 E非限制性外切核酸酶 13cDNA是指：（ A ）A在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與 RNA互補(bǔ)的 DNA B在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與 DNA互補(bǔ)的 DNA C在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與 RNA互補(bǔ)的 RNA D在體內(nèi)經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與 RNA互補(bǔ)的 RNA E在體內(nèi)經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與 RNA互補(bǔ)的 DNA 14質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)是：（ A ） A環(huán)狀雙鏈DNA B環(huán)狀單鏈DNA C環(huán)狀單鏈RNA D線狀雙鏈DNA E線狀單鏈DN

5、A 15聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)常常縮寫為：（ E ） APRC BPER CPDR DBCR EPCR 16用于PCR反應(yīng)的酶是：（ E ） ADNA連接酶 B堿性磷酸酶 C逆轉(zhuǎn)錄酶 D限制性內(nèi)切核酸 ETaq DNA聚合酶 17基因工程中使目的基因與載體拼接的酶是：（ C ） ADNA聚合酶 BRNA聚合酶 CDNA連接酶 DRNA連接酶 E限制性核酸內(nèi)切酶 18互補(bǔ)篩選屬于：（ C ） A抗藥性標(biāo)志篩選 B酶聯(lián)免疫篩選 C標(biāo)志補(bǔ)救篩選 D原位雜交篩選 E免疫化學(xué)篩選 19確切地講，cDNA文庫包含：（ E ） A一個(gè)物種的全部基因信息 B一個(gè)物種的全部RNA信息 C一個(gè)生物體組織或細(xì)胞的全部基因信

6、息 D一個(gè)生物體組織或細(xì)胞的全部RNA信息 E一個(gè)生物體組織或細(xì)胞所表達(dá)mRNA信息 20下烈描述最能確切表達(dá)質(zhì)粒DNA作為克隆載體特性的是：（ D ） A小型環(huán)狀雙鏈DNA分子 B攜帶有某些耐藥基因C在細(xì)胞分裂時(shí)恒定地傳遞給子代細(xì)胞 D具有自我復(fù)制能力 E獲得目的基因 21.基因工程中常用限制性內(nèi)切酶的識別序列，正確的說法是：（ E ）A.聚胞苷酸B.聚腺苷酸C.6或8個(gè)任意核苷酸 D.4或6個(gè)任意核苷酸E 具有回文結(jié)構(gòu) 22基因工程的基本過程不包含：（ E ）A.DNA重組體的形成及轉(zhuǎn)化B.限制酶的切割C.載體及目的基因的分離D.重組體的篩選與鑒定E.重組體的序列分析 23.有關(guān)理想質(zhì)粒載

7、體的特征，正確的是：（ B ）A.其復(fù)制受宿主控制B.含有多種限制性內(nèi)切酶的單一切點(diǎn)C含有同一限制酶的多個(gè)切點(diǎn)D為線性單鏈DNAE不含耐藥基因24.下列那個(gè)物質(zhì)一般不用作基因工程的載體：（ C ）A噬菌體B質(zhì)粒C大腸桿菌基因組D反轉(zhuǎn)錄病毒DNAE人工酵母染色體25.基因工程的操作程序可簡單的概括為：（ E ）A將重組體導(dǎo)入宿主細(xì)胞并篩選B限制酶的應(yīng)用C將載體和目的基因接合成重組體D目的基因和載體的分離提純與鑒定E分、切、接、轉(zhuǎn)、篩26.基因表達(dá)的多級調(diào)控不包括：（ A ）ADNA復(fù)制B轉(zhuǎn)錄起始C轉(zhuǎn)錄后加工D. 翻譯起始E. 翻譯后加工27.下列基因工程中的目的基因的來源，最不常用的是：（ C

8、）A. 人工合成DNAB從mRNA合成cDNAC. 從真核生物染色體DNA中直接分離D從基因文庫中獲取E從細(xì)菌基因組DNA中直接分離28.型限制性內(nèi)切酶是：（ B ）A有內(nèi)切酶和甲基化酶活性B.僅有內(nèi)切酶活性，甲基化酶活性由另外一種酶提供C有外切酶和甲基化酶活性D限制性識別非甲基化的核苷酸序列E僅有外切酶活性，甲基化酶活性由另外一種酶提供29.基因工程操作應(yīng)用的許多載體質(zhì)粒都有抗生素的抗性基因，這是為了便于：（ D ）A外源基因插入質(zhì)粒B.宿主菌的生物繁殖C質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化D帶有目的基因的宿主菌的篩選E目的基因的表達(dá)30.有關(guān)目的基因與載體連接的敘述錯(cuò)誤的是：（ E ）A.可以同一限制酶切割產(chǎn)生粘性

9、末端連接B.平末端切口可采用“尾接法”C平末端切口可直接連接D均需DNA連接酶參與E不同限制型內(nèi)切酶切割不能連接1基因工程的單元操作順序是（ A ）酶切，連接，轉(zhuǎn)化，篩選，驗(yàn)證 酶切，轉(zhuǎn)化，連接，篩選，驗(yàn)證連接，轉(zhuǎn)化，篩選，驗(yàn)證，酶切 驗(yàn)證，酶切，連接，篩選，轉(zhuǎn)化酶切，連接，篩選，轉(zhuǎn)化，驗(yàn)證2下列五個(gè) DNA 片段中含有回文結(jié)構(gòu)的是（ D、E ） GAAACTGCTTTGAC GAAACTGGAAACTG GAAACTGGTCAAAG GAAACTGCAGTTTC GAAACTGCAGAAAG3T 4 -DNA 連接酶是通過形成磷酸二酯鍵將兩段 DNA 片段連接在一起，其底物的關(guān)鍵基團(tuán)是（ D

10、 ） 2 -OH 和 5 -P 2 -OH 和 3 -P 3 -OH 和 2 -P 3 -OH 和 5 -P 5 -OH 和 3 -P4噬菌體l-DNA 體外包裝的上下限是天然l-DNA 長度的（ D ） 25 - 50 % 50 - 100 % 75 - 100 % 75 - 105 % 100 - 125 %8分子雜交的化學(xué)原理是形成（ E ） 共價(jià)鍵 離子鍵 疏水鍵 配位鍵 氫鍵9促紅細(xì)胞生長素（ EPO ）基因能在大腸桿菌中表達(dá)，但卻不能用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細(xì)胞生長素，這是因?yàn)椋?E ） 人的促紅細(xì)胞生長素對大腸桿菌有毒性作用 人的促紅細(xì)胞生長素基因在大腸桿菌中極不穩(wěn)定

11、大腸桿菌內(nèi)毒素與人的促紅細(xì)胞生長素特異性結(jié)合并使其滅活 人的促紅細(xì)胞生長素對大腸桿菌蛋白水解酶極為敏感 大腸桿菌不能使人的促紅細(xì)胞生長素糖基化10鳥槍法克隆目的基因的戰(zhàn)略適用于（ A ） 原核細(xì)菌 酵母菌 絲狀真菌 植物 人類11cDNA第一鏈合成所需的引物是（ D ） Poly A Poly C Poly G Poly T 發(fā)夾結(jié)構(gòu)12cDNA法獲得目的基因的優(yōu)點(diǎn)是（ B ） 成功率高 不含內(nèi)含子 操作簡便 表達(dá)產(chǎn)物可以分泌 能糾正密碼子的偏愛性13人工合成 DNA 的單元操作包括（ E ）I 去保護(hù) II 偶聯(lián) III 封端 IV 氧化 I + II II + IV I + II + II

12、I II + III + IV I + II + III + IV二、B型題 A抗藥性篩選 B分子雜交篩選 CRNA反轉(zhuǎn)錄 D免疫學(xué)方法 E體外翻譯 1用于鑒定質(zhì)粒是否轉(zhuǎn)化的一般方法是：（ A ） 2用于鑒定轉(zhuǎn)化子細(xì)胞是否含有目的基因的常用方法是：（ B ） 3利用目的基因表達(dá)產(chǎn)物的特異性抗體來篩選含有目的基因的轉(zhuǎn)化子細(xì)胞價(jià)方法是：（ D ）A限制性核酸內(nèi)切酶 BDNA連接酶 C反轉(zhuǎn)錄酶 D. Taq DNA聚合酶 E堿性磷酸酶 4.識別DNA回文結(jié)構(gòu)并對其雙鏈進(jìn)行切割的是：（ A ）5.用于PCR反應(yīng)的酶是：（ D ） 6.將目的基因與載體進(jìn)行拼接的酶是：（ B ）A轉(zhuǎn)染 B轉(zhuǎn)化 C感染 D

13、轉(zhuǎn)導(dǎo) E轉(zhuǎn)位7以質(zhì)粒為載體，細(xì)菌為宿主的導(dǎo)入方式是：（ B ） 8以噬菌體為載體，細(xì)菌為宿主的導(dǎo)入方式是：（ D ） 9以病毒為載體，哺乳動物細(xì)胞為宿主的導(dǎo)入方式是：（ C ） A.94 B.85 C.50 D.72 E.10010.PCR變性溫度一般為：（ A ）11.PCR退火溫度一般為：（ C ）12.PCR延伸溫度一般為：（ D ）A分 B 切 C接 D 轉(zhuǎn) E 篩13獲取目的基因?qū)儆诨蚬こ讨械牟襟E是（ A ）14.DNA連接酶用于基因工程中的步驟是（ C ）15.DNA重組子轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞的步驟是（ D ）16.限制性內(nèi)切酶切割目的基因和載體的步驟是（ B ）17.對含有DNA重組體

14、的宿主細(xì)胞進(jìn)行篩選的步驟是（ E ）三、C型題 A、含有該生物的全部基因 B、含有該生物的結(jié)構(gòu)基因C、兩者都是 D、兩者都不是1、基因組文庫（ A ）2、cDNA文庫（ B ）A、需要逆轉(zhuǎn)錄酶 B、需要限制性內(nèi)切酶C、兩者都是 D、兩者都不是3、建立cDNA文庫 （ C ）4、建立基因組文庫（ B ）A、連接酶 B、逆轉(zhuǎn)錄酶 C、兩者都是 D、兩者都不是5、建立cDNA文庫需要（ C ）6、建立基因組文庫需要（ A ） 四、X型題 1.可用于基因工程載體的DNA分子有： ( BDE ) A染色體DNA B病毒DNA C細(xì)菌DNA D噬菌體DNA E質(zhì)粒DNA 2.重組 DNA技術(shù)的基本過程包括

15、：( ACDE ) A目的基因的獲取 BPCR反應(yīng) C克隆載體的構(gòu)建 D目的基因與載體的連接 E重組體分子導(dǎo)入受體菌 3.基因克隆又稱為：( AC ) A重組 DNA B重組 RNA CDNA克隆 DRNA克隆 E蛋白質(zhì)復(fù)制 4.組成PCR反應(yīng)體系的物質(zhì)包括：( BD ) ARNA引物 BTaq DNA聚合酶 CRNA聚合酶 DDNA模板 EddNTP 5.對于重組體的篩選，屬于直接選擇法的是：( BCD ) A免疫化學(xué)法 B原位雜交法 CSouthern印跡 D補(bǔ)救標(biāo)志篩選 E抗藥性標(biāo)志篩選 6.對于重組體的篩選，屬于非直接選擇法的是：( AE ) A免疫化學(xué)法 B原位雜交法 CSouthe

16、rn印跡 D補(bǔ)救標(biāo)志篩選 E酶聯(lián)免疫篩選 7.限制性核酸內(nèi)切酶切割 DNA時(shí)可產(chǎn)生：( ABCE ) A5粘性末端 B3粘性末端 C平末端 D單鏈缺口 E粘性末端 8.基因工程中目的基因的來源有：( ABCDE ) A化學(xué)合成 BPCR合成 CcDNA文庫 D基因組文庫 E組織細(xì)胞中染色體DNA直接提取 9.基因工程中外源性基因又稱為：( ABD ) A目的基因 B目的 DNA C目的 RNA Dtarget DNA E外源 RNA 10重組DNA技術(shù)中常用的工具酶有：( ABCDE ) A限制性核酸內(nèi)切酶 BDNA聚合酶 CDNA連接酶 D反轉(zhuǎn)錄酶 E末端轉(zhuǎn)移酶 11作為基因工程的載體必須具

17、備的條件是：( ABCD ) A能獨(dú)立自主復(fù)制 B易轉(zhuǎn)化 C易檢測（含有抗藥性基因等） D具有限制性內(nèi)切核酸酶的位點(diǎn) E易提取獲得五、填空題 1基因工程的一個(gè)理想的載體必須具備的條件有_至少有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)_、_有克隆位點(diǎn)、具備轉(zhuǎn)化的功能、遺傳標(biāo)記基因_、_具有較高的裝載能力_。 2基因工程常用的載體DNA分子有_、_和_。 3一個(gè)完整的DNA克隆過程應(yīng)包括_的獲取、_的選擇與構(gòu)建、_與載體的拼接、重組體導(dǎo)入_、篩選與鑒定出_。4目的基因獲取的途徑或來源有_、_、_、_。 5基因工程過程中重組體直接篩選法的方式有_、_、_。 6當(dāng)細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí)，_就可以從一個(gè)細(xì)胞（細(xì) 菌）轉(zhuǎn)

18、移到另一細(xì)胞（細(xì)菌），這種類型的DNA轉(zhuǎn)移稱為_作用。 7重組DNA技術(shù)中常用的工具酶有_、_、_、_。 8.Klenow沒的活性有：5 3聚合酶活性；3 5外切酶活性9. 人工化學(xué)合成DNA新形成的核苷酸的合成方向是 3 5，合成的DNA5末端是-OH; 3 末端是-OH10.進(jìn)行PCR擴(kuò)增DNA時(shí)，反應(yīng)體系應(yīng)加入模板DNA，Taq酶、一對引物、d NTP和緩沖液。5.現(xiàn)代生物工程主要包括 基因工程， 酶工程， 細(xì)胞 工程， 發(fā)酵 工程。6使DNA的結(jié)構(gòu)分析問題從根本上得到了解決的兩項(xiàng)關(guān)鍵性工程技術(shù)分別是DNA分子的體外切割與連接技術(shù)和DNA分子的核酸序列分析技術(shù)。7基因工程的工具酶主要有限

19、制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。8基因克隆載體主要有質(zhì)粒、噬菌體、病毒三大類。9基因克隆載體應(yīng)具備的條件是有克隆位點(diǎn)（外源DNA插入點(diǎn)），能攜帶外源DNA進(jìn)入受體細(xì)胞， 能自主復(fù)制；具有選擇標(biāo)記，便于重組體的篩選和鑒定；10將外源性重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞的途徑有 轉(zhuǎn)化（或轉(zhuǎn)染）、雜交、轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞融合、顯微注射等方式。11目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞成功的關(guān)鍵是：選用合適的克隆載體、選用合適的受體細(xì)胞、選用合適的基因轉(zhuǎn)移方法。12基因克隆受體細(xì)胞有原核細(xì)胞和真核細(xì)胞。13克隆基因的進(jìn)一步鑒定常采用限制性內(nèi)切酶分析、分子雜交、PCR擴(kuò)增、DNA側(cè)序等方法。18限制性酶的發(fā)現(xiàn)標(biāo)志著DNA重組時(shí)代的開始。（ ）

20、19.1982年世界上第一個(gè)基因重組藥物人胰島素在美國問世產(chǎn)生了巨大的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。（ ）20.根據(jù)基因操作的目的不同，可以將基因治療分為基因置換治療和基因增強(qiáng)治療。（ ）21.根據(jù)治療對象不同可將基因治療分為性細(xì)胞基因治療和體細(xì)胞基因治療。（ ）22.1982年世界上第一個(gè)基因重組藥物人干擾素在美國問世產(chǎn)生了巨大的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。（ ）23. 根據(jù)基因操作的目的不同，可以將基因治療分為性細(xì)胞基因治療和體細(xì)胞基因治療。（ ）24. 單克隆抗體技術(shù)是動物細(xì)胞工程技術(shù)。（ ）25用同一種限制酶切割含有目的基因的外源DNA和載體DNA，產(chǎn)生的DNA片段的粘性末端是相同的（ ）26用同一種限

21、制酶切割含有目的基因的外源DNA和載體DNA，產(chǎn)生不同的DNA片段的粘性末端（ ）27基因工程、細(xì)胞工程、發(fā)酵工程和酶工程它們之間是相互關(guān)聯(lián)和交叉滲透（ ）六、名詞解釋1.回文結(jié)構(gòu)（ palindrome） 2.目的 DNA（target DNA） 3.-互補(bǔ)（alpha complementatlon） 4.基因組 DNA文庫（genomic DNA library） 5.cDNA文庫（cDNA library） 6.DNA克?。―NA cloning七、簡答題 1.什么叫基因克隆？簡述基因克隆的步驟。 2.限制性內(nèi)切核酸酶有哪些特點(diǎn)？ 3.簡述重組DNA技術(shù)中獲取目的基因的途徑。 4.已知有一mRNA分子，你怎樣才能使它翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)？簡述其過程。 5.作為基因工程的載體必須具備哪些條件？ 八、論述題 1.簡述互補(bǔ)篩選重組體質(zhì)粒細(xì)菌的原理。 2.基因工程中重組體篩