蘭州地區(qū)HCV基因變異與干擾素免疫應(yīng)答關(guān)系的探討

1、蘭州地區(qū)HCV 基因變異與干擾素-應(yīng)答關(guān)系的探討張文杰1 杜紹財(cái)2 饒慧瑛2 李朝霞1 田淑菊1 毛維武 1 龔晏萱 1屈延1 1甘肅省第二人民醫(yī)院感染科，2 北京大學(xué)人民醫(yī)院，北京大學(xué)肝病研究所 摘要 目的 探討蘭州地區(qū)丙型肝炎病毒（HCV）1b基因型5非編碼區(qū)（5NCR）基因變異株的感染狀態(tài)，及其與干擾素-療效的關(guān)系。方法 應(yīng)用限制性內(nèi)切酶酶切分析檢測40例HCV 1b型中5-NCR基因變異，以及9例干擾素-治療患者中的5-NCR基因變異。結(jié)果 在40例HCV 1b型中存在5種感染狀態(tài)（1）有Mbo I切點(diǎn)24/40（60.0%）（2）無Mbo I切點(diǎn)變異株5/40（12.5%）（3）有M

2、bo I和無Mbo I切點(diǎn)混合感染株7/40（17.5%）（4）有BamH I切點(diǎn)變異株2/40（5%）（5）有Mbo I雙切點(diǎn)變異株2/40（5%）。9例干擾素-治療的丙型肝炎患者中，5例獲得持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（SVR），4例無應(yīng)答，對其進(jìn)行5-NCR變異株檢測。其檢測結(jié)果表明，5例干擾素-應(yīng)答病例中，2例為2a型，3例為無MboI切點(diǎn)的1b型。4例抗干擾素-病例中，1例為2a型，但在某節(jié)段存在著1b與2a混合狀態(tài)，另3例為無MboI。結(jié)論 本文研究結(jié)果提示，在丙型肝炎患者血清中存在單一的Mbo I切點(diǎn)的樣品，24/40（60.0%）可能是HCV野生株感染的狀態(tài)。本文報(bào)道的9例干擾素-抗病毒治療

3、的丙肝病人中，除2型之外，在1型中，-221位均為無Mbo I切點(diǎn)株，在這7例普通干擾素-無效病例中，改用長效干擾素-聯(lián)合抗病毒治療后，其中5例HCV RNA陰轉(zhuǎn)，相當(dāng)于71.4%。關(guān)鍵詞丙型肝炎；基因變異；干擾素- HCV Gene Mutation in Lanzhou and the Interferon- Induced Immune Response ZHANG Wen-jie1, DU Shao-cai2, RAO Hui-ying2 ,LI Zhao-xia1（1 Department of Infectious Diseases, the Second Peoples Hosp

4、ital of Gansu Province，Lanzhou 730000,2 Hepatology Institute, Peking University Peoples Hospital, Beijing 100044）【Abstract】Objective To study the relationship between gene mutation of 5 noncoding region (5NCR) of hepatitis C virus (HCV) genotype 1b with infection state and interferon-alpha (IFN-) th

5、erapy effect of chronic hepatitis C. Methods Sera of 9 patients were collected before, during and after IFN therapy and sera of 40 HCV 1b patients were collected. HCV 5NCR fragments were amplified from these samples by use of RT-PCR assay and sequenced after using restriction endonuclease Mbo I and

6、BamH I. Results There were 5 infection states of 40 HCV 1b patients: (1) 24 patients (24/40, 60.0%) with Mbo I restriction site, (2) 5 patients (5/40, 12.5%) variant without Mbo I restriction site, (3) 7 patients (7/40, 17.5%) coinfection variant with and without of Mbo I restriction site, (4) 2 pat

7、ients (2/40, 0.5%) variant with BamH I restriction site, (5) 2 patients (2/40, 0.5%) variant with two Mbo I restriction sites. In the 5 patietns with sustained virological response (SVR), 2 for HCV genotype 2a, 3 for HCV genotype 1b without Mbo I restriction site. In the 4 patietns with nonresponder

8、, 1 for coinfection of HCV genotype 1b and 2a, 3 for HCV genotype 1b without Mbo I restriction site. Conclusion Of 40 HCV genotype 1b serum samples, 60.0% patients were for one Mbo I restriction site. Of 9 IFN- therapy patients, 3 were for HCV genotype 2a, 6 were for HCV genotype 1b without Mbo I re

9、striction site at position 221. SVR of Peg-IFN-2a plus ribavirin of 7 patients was 71.4%.【Key Words】Chronic hepatitis C; Gene mutation ; Interferon-干擾素-（interferon-, IFN-）有抗病毒免疫調(diào)節(jié)及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等作用，為目前治療丙型肝炎病毒（hepatitis C virus, HCV ) 感染的主要藥物，然而有相當(dāng)部分患者經(jīng)IFN-系統(tǒng)治療后不能獲得持久的病毒轉(zhuǎn)陰1-2。近年來，對干擾素-的劑型進(jìn)行了改進(jìn)，研制成聚乙二醇化干擾素-，

10、俗稱長效干擾素-，臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí)長效干擾素- 180g/w，在48周時，病毒陰轉(zhuǎn)率達(dá)到60%，而普通干擾素-的陰轉(zhuǎn)率僅19%，聚乙二醇化干擾素-聯(lián)合利巴韋林持續(xù)病毒應(yīng)答率（sustained virological response, SVR）達(dá)81%3。2008年，于建武等報(bào)道4，快速和早期病毒學(xué)應(yīng)答對慢性丙型肝炎患者SVR的預(yù)測價值，提示普通干擾素-治療在12周時，HCVRNA濃度還未下降，可提前更改治療方案。研究顯示長效干擾素-也有20%40%的肝炎患者存在復(fù)發(fā)和無應(yīng)答狀態(tài)，認(rèn)為這種病例與基因變異和不同基因型的混合感染有關(guān)，為證實(shí)丙型肝炎病毒(HCV) 5-NCR基因變異是否與干擾素-應(yīng)答

11、有關(guān)，本文對40例1b型患者及9例干擾素-治療患者進(jìn)行了HCV 5-NCR基因變異研究。已有大量的研究資料證實(shí)，5-NCR變異與基因型相關(guān)，1型-6型之間有型特異變異特征和型特異酶切位點(diǎn)。本文采1-6型通用引物擴(kuò)增HCV cDNA，即可用于定性檢測HCV RNA，又可用于檢測基因型和1b型5-NCR基因變異，探討5-NCR變異與干擾素-治療免疫應(yīng)答的關(guān)系?，F(xiàn)將40例1b型 5-NCR變異檢測結(jié)果和9例干擾素-治療患者的5-NCR變異檢測結(jié)果報(bào)道如下。材料和方法一、材料1. 40例HCV RNA陽性1b型血清，2005-2006年期間收集，-70保存。9例干擾素-治療系列血清為2007-2009

12、年期間收集。2. 限制性內(nèi)切酶：BsrBI、Hinf I 、Hae、BstU I、Apo I 、BamH I 、Mbo I 均為Biolabs產(chǎn)品。3. HCV 5-NCR PCR擴(kuò)增引物序列，按照孫南雄報(bào)道的序列合成5。4. HCV 1b 全基因參考序列，見以下美國NCBI GenBank資料。 AB049088、AF165049、AF165050、AF165051、AF165052、AF165054、AF165059、AF165060、AF165061、AF165062、AF165063、AF165064、D50480、D50481、D50482、D50483、D50484、D50485、

13、D10750、D11168、D90208、M58335、S62220、AF165055、AF165056、AF165057、D85516、AB080299、D14853、AF054247、AF054248、AF054249、AJ132996、AJ132997、AJ238799、AF483269、AF139524，D10934、L02836、AY460204，為中國1b型全基因株。二、方法 1. 分型方法：采用文獻(xiàn)的HCV 5NCR酶切分型法6，對HCV RNA陽性血清分型后，選取HCV 1b型樣品檢測HCV 5-NCR變異。 2. BamH 和Mbo酶切方法，取產(chǎn)物3ul，BamH或Mbo 5

14、個單位，10buffer 2ul，滅菌水15ul，總體積20ul，37酶切2小時。 3. HCV 5-NCR基因變異株的檢測，PAGE或2%瓊脂糖膠均可。HCV 5-NCR基因變異的判斷標(biāo)準(zhǔn)：在257bp的PCR產(chǎn)物中，僅有Mbo I單切點(diǎn)為野生株，產(chǎn)生2個Mbo 切點(diǎn)或無Mbo切點(diǎn)及產(chǎn)生BamH 切點(diǎn)或部分有切點(diǎn)、部分無切點(diǎn)均判為變異株。4. 干擾素-治療劑量：普通干擾素-即IFN-2b ，安福隆公司生產(chǎn)，300MU隔日一針，療程為一年。長效干擾素-（PEG-IFN-2a，派羅欣），上海羅氏生產(chǎn)，180或270ug，一周一次，療程為一年。5. 利巴韋林：所有患者均聯(lián)合使用利巴韋林（利巴韋林量

15、依據(jù)患者體重計(jì)算，10-15mg/kg/d），治療過程中監(jiān)測血紅蛋白及其他不良反應(yīng)。6. HCV RNA熒光定量試劑：上海實(shí)業(yè)科華生物技術(shù)有限公司的HCV核酸擴(kuò)增熒光定量試劑盒，按說明書操作。結(jié) 果1. 40例HCV 1b基因型患者5NCR基因變異檢測結(jié)果： 5NCR基因變異類型檢出例數(shù)百分率僅有Mbo I單切點(diǎn)（野生株）24例60.0%無Mbo I切點(diǎn)（變異株）5例 12.5%有Mbo I切點(diǎn)和無Mbo I切點(diǎn)混合株7例17.5%有 BamH I切點(diǎn)（變異株）2例5%有Mbo I雙切點(diǎn)（變異株）2例5%1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 M 15 16 -500

16、bp -100bp圖1.1-16為HCV1b型 5NCR 257bp擴(kuò)增產(chǎn)物3 微升電泳結(jié)果，M為100bp 200bp 300bp 400bp 500bp分子標(biāo)志物1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 M -500bp -100bp圖2.1-16為HCV1b型 5NCR 257bp擴(kuò)增產(chǎn)物，Mbo I酶切，電泳結(jié)果，M為100bp 200bp 300bp 400bp 500bp分子標(biāo)志物，1，3，4，8，9，10，11，12，13，15有單一的Mbo I酶切點(diǎn)，產(chǎn)生154bp，103bp兩個片段，5，14無Mbo I酶切點(diǎn)，仍保持257bp大小，2，6

17、，7有Mbo I酶切點(diǎn)和無Mbo I酶切點(diǎn)同時在存在，16有2個Mbo I酶切點(diǎn)。17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 30 32 M -500bp -100bp圖3.17-32為HCV1b型 5NCR 257bp擴(kuò)增產(chǎn)物，Mbo I酶切，電泳結(jié)果，M為100bp 200bp 300bp 400bp 500bp分子標(biāo)志物，18，20，21，22，23，24，25，28，29，30，32有單一的Mbo I酶切點(diǎn)，產(chǎn)生154bp，103bp兩個片段，27，30無Mbo I酶切點(diǎn)，仍保持257bp大小，17，26，有Mbo I酶切點(diǎn)和無Mbo I酶切點(diǎn)同

18、時在存在，19有2個Mbo I酶切點(diǎn)。2. 干擾素-治療丙型肝炎患者5NCR變異檢測結(jié)果為了進(jìn)一步了解干擾素-治療丙型肝炎臨床療效與基因變異的關(guān)系，對9例干擾素-治療患者的系列血清進(jìn)行HCV 5-NCR變異的研究。9例中，除病例7和病例8僅使用普通干擾素-之外，其余7例均因普通干擾素-無效改用長效干擾素-聯(lián)合利巴偉林抗病毒治療。病例1-5干擾素-治療有效患者中，2例為2a型，3例為1b，病例6-9干擾素-治療無效患者中，l例為2a與1b混合型，3例為1b型。結(jié)果表明，在抗干擾素-病例中，在-221位均無MboI切點(diǎn)。病例1，女，50歲，2007-6-16開始以普通干擾素-300MU，隔日一次，

19、聯(lián)合利巴韋林700mg/d 抗病毒治療，治療3月時即取得早期病毒學(xué)應(yīng)答，治療48周后停藥，停藥三個月后出現(xiàn)復(fù)發(fā)，再次使用派羅欣135g/w聯(lián)合利巴韋林700mg/d 抗病毒治療，2008-11-11開始，治療四周時即取得快速病毒學(xué)應(yīng)答，治療48周，期間HCV RNA一直低于最低檢測線，療程結(jié)束后停藥（見表1），HCV 5-NCR基因變異株，無Mbo酶切位點(diǎn)。表1 為HCV 1b型患者治療前后ALT與HCV RNA檢測結(jié)果樣品編號采血日期HCV RNA定量（拷貝/毫升）ALT (IU/ml)HCV RNA5NCR基因型070605038.75 E+00485+1b070925051.87 E+0

20、0440080402043.50 E+0064308122304小于1.0 E + 0034409030301小于1.0 E + 0036509060501小于1.0 E + 0033509090905小于1.0 E + 00325病例2 女 45歲，2008-1-2開始使用普通干擾素-300MU，隔日一次，聯(lián)合利巴韋林900mg/d 抗病毒治療，治療3月時即取得早期病毒學(xué)應(yīng)答，治療24周后出現(xiàn)病毒反彈，2008-8-18開始，改用派羅欣180g/w聯(lián)合利巴韋林900mg/d 抗病毒治療，治療四周時即取得快速病毒學(xué)應(yīng)答，治療48周，期間HCV RNA一直低于最低檢測線，療程結(jié)束后停藥（見表2）

21、。 表2為HCV 2a型患者治療前后ALT與HCV RNA檢測結(jié)果樣品編號采血日期HCV RNA定量（拷貝/毫升）ALT(IU/ml)HCV RNA5NCR基因型071229051.66 E + 00646+2a08022007小于1.0 E + 00323+080327012.46 E +00744080806091.11 E +0042508062703小于1.0 E + 0031509020810小于1.0 E + 0033009040803小于1.0 E + 00323病例3，女，50歲，開始使用普通干擾素-300MU，隔日一次，聯(lián)合利巴韋林900mg/d 抗病毒治療，治療3月時即取得

22、早期病毒學(xué)應(yīng)答，治療24周后出現(xiàn)病毒反彈，后改用派羅欣1350g/w聯(lián)合利巴韋林900mg/d 抗病毒治療，治療四周時即取得快速病毒學(xué)應(yīng)答，治療36周時因?yàn)槌霈F(xiàn)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎停止治療，期間HCV RNA一直低于最低檢測線，治療結(jié)束后3個月復(fù)查HCV RNA仍低于最低檢測線（見表3）。表3 為HCV2a 型患者治療前后ALT與HCV RNA檢測結(jié)果樣品編號采血日期HCV RNA定量（拷貝/毫升）ALT (IU/ml)HCV RNA5NCR基因型080429103.40 E +00778+2a08012505小于1.0 E + 0032308080805小于1.0 E + 003270811170

23、22.78 E +0075609012302小于1.0 E + 0034509032605小于1.0 E + 00325病例4，女，41歲， 2007-12-23開始使用普通干擾素-300MU，隔日一次，聯(lián)合利巴韋林1000mg/d 抗病毒治療，治療6月時尚未取得病毒學(xué)應(yīng)答，遂停藥，于2008-7-4開始改用派羅欣135g/w聯(lián)合利巴韋林1000mg/d 抗病毒治療，治療四周時即取得快速病毒學(xué)應(yīng)答，治療48周，期間HCV RNA一直低于最低檢測線，療程結(jié)束后停藥（見表4），HCV 5NCR無Mbo I切點(diǎn)。表4為HCV 1b型患者治療前后ALT與HCV RNA檢測結(jié)果樣品編號采血日期HCV R

24、NA定量（拷貝/毫升）ALT(IU/ml)HCV RNA5NCR基因型071126088.50 E +006128071211121.93 E+00854080429053.40 E+00765080627064.98 E+00760+1b08080803小于1.0 E + 0034208100304小于1.0 E + 0032608120601小于1.0 E + 0032409030308小于1.0 E + 0033509041704小于1.0 E + 00325病例5，女，50歲，2008-9-2開始以普通干擾素-300MU，隔日一次，聯(lián)合利巴韋林600 mg/d 抗病毒治療，至2009-

25、2-16出現(xiàn)病毒反彈，于2009-2-20開始，改用派羅欣135g/w聯(lián)合利巴韋林600mg/d 抗病毒治療，治療四周時即取得快速病毒學(xué)應(yīng)答，治療48周，期間HCV RNA一直低于最低檢測線，療程結(jié)束后停藥（見表5），HCV 5NCR無Mbo I切點(diǎn)。表5 為HCV 1b型患者治療前后ALT與HCV RNA檢測結(jié)果樣品編號采血日期HCV RNA定量（拷貝/毫升）ALT(IU/ml)HCV RNA5NCR基因型080919054.66 E +00556+1b081027051.02 E +0052108121206小于1.0 E + 00320090218045.50 E +0053409032

26、604小于1.0 E + 0034009051906小于1.0 E + 0033109081405小于1.0 E + 00326病例6，女，48歲，2008-11-18開始使用普通干擾素-300MU，隔日一次，聯(lián)合利巴韋林900mg/d 抗病毒治療，治療1月時即取得早期病毒學(xué)應(yīng)答，治療24周后出現(xiàn)病毒反彈，2009-4-10開始，改用派羅欣135g/w聯(lián)合利巴韋林900mg/d 抗病毒治療，治療六周時未取得快速病毒學(xué)應(yīng)答，遂改用派羅欣135g/w聯(lián)合利巴韋林900mg/d，治療第四周時取得快速病毒學(xué)應(yīng)答，現(xiàn)已經(jīng)治療38周，期間HCV RNA一直低于最低檢測線，仍在治療中（見表6），HCV 5N

27、CR以有Mbo I切點(diǎn)為主，有少量無Mbo I切點(diǎn)cDNA。表6為HCV 1b型患者治療前后ALT與HCV RNA檢測結(jié)果樣品編號采血日期HCV RNA定量（拷貝/毫升）ALT(IU/ml)HCV RNA5N CR基因型081117087.29 E +00526+081214105.37 E +0034208121506小于1.0 E + 0032909012303小于1.0 E + 00321090408031.60 E +00647090519075.64 E +00551+1b09062902小于1.00 E +00335病例7，男，75歲，2007-6-1至2007-9-4 使用普通干

28、擾素-100 MU，隔日一次，2007-7-1改用普通干擾素-300 MU，隔日一次，抗病毒治療期間HCV RNA一直波動于104左右，2008-6-28停藥（見表7）。表7為HCV 2 a /1b型患者治療前后ALT與HCV RNA檢測結(jié)果樣品編號采血日期HCV RNA定量（拷貝/毫升）ALT (IU/ml)HCV RNA5NCR基因型070522013.27 E +00461+2 a070605024.56 E +00565070727013.84 E +00575070906054.03 E +00354071126066.40 E +006101+080307066.41 E +005

29、85+2 a /1 b080606026.20 E +00482081013011.57 E +00370090408083.27 E +00545+2 a病例8，男，43歲，于2007-11-8開始間斷使用普通干擾素-100 MU，隔日一次，抗病毒治療期間HCV RNA一直波動于104左右，2009-06停藥（見表8），HCV 5NCR無Mbo I切點(diǎn)。表8為HCV 1b型患者治療前后ALT與HCV RNA檢測結(jié)果樣品編號采血日期HCV RNA定量（拷貝/毫升）ALT （IU/ml）HCV RNA5NCR基因型070925061.18 E +00557+1 b071211051.28 E +

30、00796080125078.51 E +00470+090326028.16 E +004101+090922091.34 E +00426+病例9，男，46歲，2007-4-13至2008-2-16，普通干擾素-300 MU，隔日一次，2008-2-18開始，派羅欣180g/w，治療一療程，治療期間出現(xiàn)2型糖尿病以及甲狀腺功能亢進(jìn)，遂停藥，于2009-6-8開始，派羅欣270g/w，共16針，治療期間HCV RNA曾低于最低檢出限，但反復(fù)出現(xiàn)波動，治療效果差，現(xiàn)已停藥（見表9），HCV 5NCR無Mbo I切點(diǎn)。表9為HCV 1b型患者治療前后ALT與HCV RNA檢測結(jié)果樣品編號采血日期

31、HCV RNA定量（拷貝/毫升）ALT (IU/ml)HCV RNA 5NCR基因型07060501小于1.0 E + 00321070815064.93 E +00565+070925011.64 E +00556071211011.43 E +00586080125032.02 E +00590080206032.68 E +00422080307031.28 E +00490080415034.51 E +00568080429011.26 E +006110+1b080516114.63 E +00372080822035.22 E +00391080919032.28 E +0046

32、0081027038.97 E +00455+1b081215081.34 E +0059109031901小于1.0 E + 00335+1b090710024.85 E +00440090723033.84 E +00676+1b09090201小于1.0 E + 0035009090902小于1.0 E + 00342+四、討 論已有報(bào)道7，HCV lb型5NCR變異狀態(tài)，研究顯示，在147例1b型丙型肝炎患者薦中，存在五種表現(xiàn)；僅有Mbo I切點(diǎn)株80例(54.42%)，無Mbo I切點(diǎn)株26例(17.69%)，存在兩個Mbo I切點(diǎn)株6例(4.08)，無Mbo I切點(diǎn)和有Mbo I切

33、點(diǎn)同時存在株18例(12.24)，有切點(diǎn)株17例(11.56%)。早在2000年就有報(bào)道在HCV NS5區(qū)檢測HCV RNA和酶切分型時，發(fā)現(xiàn)在同基因型（1b型）內(nèi)存在基因變異，無癥狀的HCV RNA陽性患者與血清ALT升高的HCV RNA陽性患者有明顯區(qū)別。前者在8580位未檢測出基因變異，而后者在8580位存在基因變異，在2a型中也存在同基因型變異。提示NS5b基因變異，可能與肝損害和體內(nèi)病毒的復(fù)制有關(guān)。 2009年報(bào)道8，在美國GenBank基因庫的38株1b型5NCR序列中，在-117位，30/38例為GGACCC，1/38例為GGCCCC，7/38例為GGTCCC，序列無Mbo切點(diǎn)和

34、BamH 切點(diǎn)，而中國株存在GGATCC序列，因此產(chǎn)生了Mbo GATC切點(diǎn)，和BamH GGATCC切點(diǎn)，無論產(chǎn)生新Mbo 切點(diǎn)還是產(chǎn)生BamH切點(diǎn)，兩者均為基因變異所致，此外，如果在同一個體內(nèi)存在GGACCC、GGATCC，GGTCCC、GGATCC，GGCCCC、GGATCC，在這3種條件下，應(yīng)用Mbo 或BamH限制性內(nèi)切酶分析，可能會產(chǎn)生有切點(diǎn)的cDNA和無切點(diǎn)的cDNA同時在一個人的血清中出現(xiàn)，提示在同一體內(nèi)存在2株以上病毒株。 序列分析結(jié)果還證實(shí)，在HCV 5NCR的-221位，30/38例GATC序列有Mbo切點(diǎn)，8/38為GATT序列則無Mbo 切點(diǎn)。如果在同一份樣品中同時存

35、在GATC、GATT、或GATN兩株或多株病毒，應(yīng)用Mbo酶切分析時可表現(xiàn)出1部分cDNA被Mbo切開，則另部分cDNA不能被切開。發(fā)現(xiàn)這種變棄株的存于普通干擾素-治療無效的病例中。因此，這種基因變異的表現(xiàn)，我們可稱為HCV 5NCR基因變異或同基因型的混合株感染。 本文對蘭州地區(qū)的40例1b型患者進(jìn)行HCV 5NCR基因變異檢測時，發(fā)現(xiàn)24/40例 （60.0%）有Mbo 單切點(diǎn)，5/40例（12.5%）無Mbo切點(diǎn)，7/40例（17.5%）有Mbo 切點(diǎn)和無Mbo 切點(diǎn)cDNA時存在為同基因混合株，2/40（0.5%）變異株有BamH切點(diǎn)，2/40例（0.5%）有兩個Mbo 雙切點(diǎn)變異株。

36、提示GGACCC序列變異時， 形成GGATCC時可產(chǎn)生BamH 切點(diǎn)和Mbo 切點(diǎn)。 為探討HCV 5NCR變異與抗病毒治療的關(guān)系，本文對5例長效干擾素-治療后HCV RNA陰性患者和HCV RNA持續(xù)陽性患者進(jìn)行5-NCR變異株檢測。其檢測結(jié)果表明，5例長效干擾素-應(yīng)答病例中， 2例為2a型，3例為1b型，無MboI切點(diǎn)。4例抗干擾素-病例中，例7為2a型，在詒療期間，轉(zhuǎn)氨酶升高的同時的血清，存在著1b與2a混合狀態(tài)，另3例為1b型無MboI切點(diǎn)株。此結(jié)果顯示；僅評有無MbI切點(diǎn)不能判斷那種基因型與抗干擾素-有關(guān)。以前的研究資料證實(shí)，在同一患中，存在著無Mbo I切點(diǎn)和有Mbo I切點(diǎn)同時存在株18例(12.24)，但缺乏干擾素-治療的資料。本文報(bào)道的9例丙型肝炎患者中，病例7、病例8始終應(yīng)用普通干擾素-治療，HCVRNA持續(xù)陽性。在1 b型中，-221位均為無MboI切點(diǎn)株，在這7例普通干擾素-無效病例中，改用長效干擾素-聯(lián)合抗病毒治療后，其中5例陰轉(zhuǎn)，相當(dāng)于71.4%。