培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量動(dòng)態(tài)變化

1、培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化量的動(dòng)態(tài)變化（必修（必修3 P68）酵母菌出芽生殖酵母菌出芽生殖酵母菌的新陳代謝類(lèi)型：兼性厭氧型酵母菌的新陳代謝類(lèi)型：兼性厭氧型無(wú)氧呼吸無(wú)氧呼吸C6H12O66H2O6O2 6CO212H2O能量能量酶酶有氧呼吸有氧呼吸C6H12O6 2C2H5OH2CO2能量能量酶酶一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康膙1 1通過(guò)探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化，通過(guò)探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化，嘗試嘗試建構(gòu)建構(gòu)種群增長(zhǎng)的種群增長(zhǎng)的數(shù)學(xué)模型數(shù)學(xué)模型。v2 2用數(shù)學(xué)模型用數(shù)學(xué)模型解釋解釋種群數(shù)量的變化。種群數(shù)量的變化。v3 3學(xué)會(huì)使用學(xué)會(huì)使用血球計(jì)數(shù)板血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)。進(jìn)

2、行計(jì)數(shù)。二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理1 1、酵母菌可以用、酵母菌可以用液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌來(lái)培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長(zhǎng)情況與種群的增長(zhǎng)情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、培養(yǎng)液中的成分、空間、PHPH、溫度、溫度等等因素有關(guān)，我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的因素有關(guān)，我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時(shí)間酵母菌數(shù)量和時(shí)間為坐標(biāo)軸做為坐標(biāo)軸做曲線曲線，從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況。，從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況。2 2、利用血球計(jì)數(shù)板在、利用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下顯微鏡下直接計(jì)數(shù)是一種常用的細(xì)直接計(jì)數(shù)是一種常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)法，這種方法可以胞計(jì)數(shù)法，這種方法可以直接直接測(cè)定樣品中全部的

3、細(xì)胞數(shù)測(cè)定樣品中全部的細(xì)胞數(shù)目，所以一般用于單細(xì)胞微生物數(shù)量的測(cè)定，由于目，所以一般用于單細(xì)胞微生物數(shù)量的測(cè)定，由于血球血球計(jì)數(shù)板上的計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)板上的計(jì)數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞數(shù)目來(lái)計(jì)算單位體積的可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞數(shù)目來(lái)計(jì)算單位體積的細(xì)胞的總數(shù)。細(xì)胞的總數(shù)。 是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中四條下凹的槽，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面，刻有一個(gè)方格間又被一短橫槽隔為

4、兩半，每半邊上面，刻有一個(gè)方格網(wǎng)。網(wǎng)。 XB-K-25 XB-K-25為計(jì)數(shù)為計(jì)數(shù)板的型號(hào)和規(guī)格，板的型號(hào)和規(guī)格，表示此計(jì)數(shù)板分表示此計(jì)數(shù)板分2525個(gè)中格；個(gè)中格； 0.1mm 0.1mm為蓋上蓋為蓋上蓋玻片后計(jì)數(shù)室的玻片后計(jì)數(shù)室的高；高； 1/400mm 1/400mm2 2表示表示計(jì)數(shù)室面積是計(jì)數(shù)室面積是1mm1mm2 2，分，分400400個(gè)小個(gè)小格，每小格面積格，每小格面積是是1/400 mm1/400 mm2 2。 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的使用原理血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的使用原理方格網(wǎng)方格網(wǎng)方格網(wǎng)上刻有方格網(wǎng)上刻有9 9個(gè)大方格，其中個(gè)大方格，其中只有中間的一個(gè)只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室，大方格為計(jì)

5、數(shù)室，供微生物計(jì)數(shù)用。供微生物計(jì)數(shù)用。這一大方格的長(zhǎng)這一大方格的長(zhǎng)和寬各為和寬各為1mm1mm，深度為深度為0.1mm0.1mm，其體積為其體積為0.1mm30.1mm3。每個(gè)大方格中有每個(gè)大方格中有1616個(gè)中格個(gè)中格或或2525個(gè)中格個(gè)中格計(jì)數(shù)室通常有兩種規(guī)計(jì)數(shù)室通常有兩種規(guī)格。格。 一種是大方格內(nèi)一種是大方格內(nèi)分為分為1616中格，每一中中格，每一中格又分為格又分為2525小格；小格； 另一種是大方格另一種是大方格內(nèi)分為內(nèi)分為2525中格，每一中格，每一中格又分為中格又分為1616小格。小格。 25*16規(guī)格的，通常數(shù)規(guī)格的，通常數(shù)五五個(gè)個(gè)中方格的總菌數(shù)（中方格的總菌數(shù)（五點(diǎn)取樣五點(diǎn)取樣

6、），），然后求得每個(gè)小方格的平均值，然后求得每個(gè)小方格的平均值，再乘上再乘上400，就得出一個(gè)大方格，就得出一個(gè)大方格中的總菌數(shù)，然后再換算成中的總菌數(shù)，然后再換算成10ml菌液中的總菌數(shù)。菌液中的總菌數(shù)。16*25數(shù)數(shù)四四個(gè)中方格（對(duì)角線）個(gè)中方格（對(duì)角線）每每1ml1ml菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)：菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)：酵母細(xì)胞數(shù)酵母細(xì)胞數(shù)/ml=80/ml=80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/80/804 4000010104 4稀釋倍數(shù)（稀釋倍數(shù)（25251616）酵母細(xì)胞數(shù)酵母細(xì)胞數(shù)/ml=100/ml=100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/100/100400400101

7、04 4稀釋倍數(shù)（稀釋倍數(shù)（16162525）例例1 1、檢測(cè)員將、檢測(cè)員將1 mL1 mL水樣稀釋水樣稀釋1010倍后，用抽樣檢倍后，用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量，已知每個(gè)計(jì)數(shù)測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量，已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由室由25251616400400個(gè)小格組成，容納液體的總體個(gè)小格組成，容納液體的總體積為積為0 01 mm31 mm3?，F(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示現(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a a、b b、c c、d d、e 5e 5個(gè)中格個(gè)中格8080個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n n個(gè)，則上述水樣個(gè)，則上述水樣中約有藍(lán)藻中約有藍(lán)藻 個(gè)個(gè)mLmL。（參考答案：（參考答案：5n5n1

8、0105 5 ）1 1鏡檢計(jì)數(shù)室。鏡檢計(jì)數(shù)室。在加樣前，先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污在加樣前，先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)；物，則需清洗，吹干后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)； 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板使用的方法步驟血細(xì)胞計(jì)數(shù)板使用的方法步驟2 2加樣品。加樣品。將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上加蓋專用的蓋將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿計(jì)數(shù)一次性充滿計(jì)數(shù)室，防止產(chǎn)生氣泡，室，防止產(chǎn)生氣泡，充入細(xì)胞懸液的量以不超過(guò)

9、計(jì)充入細(xì)胞懸液的量以不超過(guò)計(jì)數(shù)室臺(tái)面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)數(shù)室臺(tái)面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去；液可用濾紙吸去；3 3計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)稍待片刻（約稍待片刻（約5min5min），待酵母菌細(xì)胞全部沉降），待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部后，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，到計(jì)數(shù)室底部后，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，先在低倍鏡下找到計(jì)數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換先在低倍鏡下找到計(jì)數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計(jì)數(shù)并記錄。高倍鏡觀察、計(jì)數(shù)并記錄。三、實(shí)驗(yàn)探究過(guò)程三、實(shí)驗(yàn)探究過(guò)程（一）提出問(wèn)題：（一）提出問(wèn)題： 培養(yǎng)一種酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的？培養(yǎng)一種酵母菌種群的數(shù)量是怎

10、樣隨時(shí)間變化的？（二）作出假設(shè)：（二）作出假設(shè)：環(huán)境中的資源和空間有限的條件下，酵母菌種群的數(shù)量呈環(huán)境中的資源和空間有限的條件下，酵母菌種群的數(shù)量呈S S型增長(zhǎng)。型增長(zhǎng)。（三）設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)（三）設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)v全班同學(xué)全班同學(xué)分成甲、乙、丙等若干實(shí)驗(yàn)組分成甲、乙、丙等若干實(shí)驗(yàn)組。v分別用分別用等量等量培養(yǎng)液，在培養(yǎng)液，在相同適宜相同適宜環(huán)境中培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)等量等量酵母菌。酵母菌。v每天每天用血球計(jì)數(shù)板，采用抽樣檢測(cè)的方法用血球計(jì)數(shù)板，采用抽樣檢測(cè)的方法計(jì)數(shù)一個(gè)小方格計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)內(nèi)的酵母菌數(shù)量并作記錄，的酵母菌數(shù)量并作記錄，連續(xù)連續(xù)7 7天。天。v7 7天后，各組向全班匯報(bào)本小組天后，各組向全班匯報(bào)本

11、小組7 7天的數(shù)據(jù)，算出每一天數(shù)據(jù)天的數(shù)據(jù)，算出每一天數(shù)據(jù)的全班的全班平均值平均值，根據(jù)平均值畫(huà)出酵母菌種群數(shù)量的，根據(jù)平均值畫(huà)出酵母菌種群數(shù)量的增長(zhǎng)曲線增長(zhǎng)曲線。（四）實(shí)驗(yàn)過(guò)程（四）實(shí)驗(yàn)過(guò)程v1 1、材料用具：、材料用具： 探究所需要的菌種和無(wú)菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液、試管、血探究所需要的菌種和無(wú)菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液、試管、血球計(jì)數(shù)板（球計(jì)數(shù)板（1mm1mm1mm1mm0 01mm1mm方格）、滴管、顯微鏡等。方格）、滴管、顯微鏡等。v2 2、方法步驟和記錄：、方法步驟和記錄：（1 1）取相同試管若干支，分別加入）取相同試管若干支，分別加入5ml5ml肉湯培養(yǎng)液，塞上棉塞。肉湯培養(yǎng)液

12、，塞上棉塞。（2 2）用高壓鍋進(jìn)行高壓蒸汽滅菌后冷卻至室溫，標(biāo)記甲、乙、丙等）用高壓鍋進(jìn)行高壓蒸汽滅菌后冷卻至室溫，標(biāo)記甲、乙、丙等（3 3）將酵母菌母液分別加入試管各）將酵母菌母液分別加入試管各5ml5ml，搖勻后用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，搖勻后用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)起始酵母液個(gè)數(shù)，做好記錄。起始酵母液個(gè)數(shù)，做好記錄。（4 4）將各試管送進(jìn)恒溫箱，）將各試管送進(jìn)恒溫箱，2525下培養(yǎng)下培養(yǎng)7 7天。天。v3 3、現(xiàn)象觀察、現(xiàn)象觀察 每天同一時(shí)間，各組取出本組的試管，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母每天同一時(shí)間，各組取出本組的試管，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌個(gè)數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察菌個(gè)數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7 7天。天。培

13、養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量7天中的變化記錄表 菌數(shù)菌數(shù) 時(shí)間時(shí)間（五）實(shí)驗(yàn)結(jié)論（五）實(shí)驗(yàn)結(jié)論v1 1、根據(jù)表格平均值，以、根據(jù)表格平均值，以時(shí)間時(shí)間為橫坐標(biāo)，為橫坐標(biāo)，酵母菌的酵母菌的數(shù)量數(shù)量為縱坐標(biāo)，繪制出培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量為縱坐標(biāo)，繪制出培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量7 7天中的變化曲線（種群增長(zhǎng)曲線）。天中的變化曲線（種群增長(zhǎng)曲線）。v2 2、培養(yǎng)液酵母菌種群數(shù)量隨時(shí)間呈、培養(yǎng)液酵母菌種群數(shù)量隨時(shí)間呈S S型增長(zhǎng)變化。型增長(zhǎng)變化。四、實(shí)驗(yàn)討論四、實(shí)驗(yàn)討論v2 2從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，建議你將試管輕輕震蕩幾從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，建議你將試管輕輕震蕩幾次。這是為什么？次。這是為什么

14、？ 使酵母菌在試管里分布均勻，提高計(jì)數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性。使酵母菌在試管里分布均勻，提高計(jì)數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性。v3 3本探究需要設(shè)置對(duì)照嗎？如果需要，請(qǐng)討論說(shuō)明怎樣設(shè)計(jì)；如本探究需要設(shè)置對(duì)照嗎？如果需要，請(qǐng)討論說(shuō)明怎樣設(shè)計(jì)；如不需要，請(qǐng)說(shuō)明理由。不需要，請(qǐng)說(shuō)明理由。 不需要，該實(shí)驗(yàn)在時(shí)間上形成前后對(duì)照。只要分組重復(fù)實(shí)驗(yàn)，不需要，該實(shí)驗(yàn)在時(shí)間上形成前后對(duì)照。只要分組重復(fù)實(shí)驗(yàn)，獲得平均數(shù)值，求得準(zhǔn)確即可。獲得平均數(shù)值，求得準(zhǔn)確即可。v4 4需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎？需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎？ 需要，提高數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。需要，提高數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。v5 5怎樣記錄結(jié)果？記錄表怎樣設(shè)計(jì)？（見(jiàn)上表）怎樣記錄結(jié)果？記錄表怎樣設(shè)計(jì)

15、？（見(jiàn)上表）每天同一時(shí)間，各組取出本組的試管，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌個(gè)每天同一時(shí)間，各組取出本組的試管，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌個(gè)數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7 7天。天。記錄表（見(jiàn)上表）記錄表（見(jiàn)上表）v6 6如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)采取怎樣的措如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)采取怎樣的措施？施？ 增加稀釋的倍數(shù)。增加稀釋的倍數(shù)。v7 7對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)？對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)？ 應(yīng)計(jì)數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù)，另兩邊不計(jì)數(shù)。應(yīng)計(jì)數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù)，另兩邊不計(jì)數(shù)。 練習(xí)：練習(xí)：某生物興趣小組開(kāi)展探究實(shí)

16、驗(yàn)，課題是：某生物興趣小組開(kāi)展探究實(shí)驗(yàn)，課題是：“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時(shí)間的變化關(guān)系培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時(shí)間的變化關(guān)系”。v實(shí)驗(yàn)材料、用具：實(shí)驗(yàn)材料、用具： 菌種和無(wú)菌培養(yǎng)液、試管、血球計(jì)數(shù)板（菌種和無(wú)菌培養(yǎng)液、試管、血球計(jì)數(shù)板（2mm2mm2mm2mm方格）、滴管、顯微鏡等。方格）、滴管、顯微鏡等。v酵母菌的顯微計(jì)數(shù)方法：酵母菌的顯微計(jì)數(shù)方法： 血球計(jì)數(shù)板：是帶有微小方格刻度的玻璃片，用血球計(jì)數(shù)板：是帶有微小方格刻度的玻璃片，用于在顯微鏡下對(duì)微生物的計(jì)數(shù)。于在顯微鏡下對(duì)微生物的計(jì)數(shù)。 將含有酵母菌的培養(yǎng)滴在計(jì)數(shù)板上，計(jì)算一個(gè)小將含有酵母菌的培養(yǎng)滴在計(jì)數(shù)板上，計(jì)算一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)

17、量，再以此為根據(jù)，估算試管中方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算試管中的酵母菌總數(shù)。連續(xù)觀察的酵母菌總數(shù)。連續(xù)觀察7d7d，并記錄每天的數(shù)量。，并記錄每天的數(shù)量。v根據(jù)以上敘述回答下列問(wèn)題：根據(jù)以上敘述回答下列問(wèn)題：（1 1）根據(jù)所學(xué)知識(shí)，該課題的實(shí)驗(yàn)假設(shè)是：開(kāi)始一段時(shí)間酵母）根據(jù)所學(xué)知識(shí)，該課題的實(shí)驗(yàn)假設(shè)是：開(kāi)始一段時(shí)間酵母菌呈菌呈“J J”型增長(zhǎng)，隨著時(shí)間的推移，型增長(zhǎng)，隨著時(shí)間的推移，酵母菌呈，酵母菌呈“S S”型增長(zhǎng)。型增長(zhǎng)。（2 2）本實(shí)驗(yàn)沒(méi)有設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，原因是）本實(shí)驗(yàn)沒(méi)有設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，原因是 。該實(shí)驗(yàn)是否需要重復(fù)實(shí)驗(yàn)？，。該實(shí)驗(yàn)是否需要重復(fù)實(shí)驗(yàn)？，試解釋原因。試解釋原因。（3 3）在吸取培養(yǎng)液計(jì)數(shù)前，要輕輕振蕩幾次試管，原因是）在吸取培養(yǎng)液計(jì)數(shù)前，要輕輕振蕩幾次試管，原因是 。該如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，。該如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)采取的措施是。難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)采取的措施是。（4 4）請(qǐng)你設(shè)計(jì)表格處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。）請(qǐng)你設(shè)計(jì)表格處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。