浙科版高中生物一輪復(fù)習(xí)選修1.1-19版

1、 選修1 第1講微生物的利用 考點(diǎn)一培養(yǎng)基及無(wú)菌技術(shù)考點(diǎn)一培養(yǎng)基及無(wú)菌技術(shù)1.1.培養(yǎng)基培養(yǎng)基: :(1)(1)概念概念: :由適于微生物生長(zhǎng)繁殖需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)由適于微生物生長(zhǎng)繁殖需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)人工配制而成的基質(zhì)。人工配制而成的基質(zhì)。(2)(2)類(lèi)型類(lèi)型: :劃分劃分標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)種類(lèi)種類(lèi)特點(diǎn)特點(diǎn)用途用途按物理按物理性質(zhì)分性質(zhì)分固體固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基加入凝固劑加入凝固劑, ,如瓊脂、明膠、如瓊脂、明膠、硅膠等硅膠等常用于微生物分常用于微生物分離、鑒定、計(jì)數(shù)離、鑒定、計(jì)數(shù)和菌種保存等方和菌種保存等方面面劃分劃分標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)種類(lèi)種類(lèi)特點(diǎn)特點(diǎn)用途用途按物理按物理性質(zhì)分性質(zhì)分半固體半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基在液體

2、培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入少量凝中加入少量凝固劑而呈半固固劑而呈半固體狀態(tài)體狀態(tài)可用于觀察細(xì)菌可用于觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)、鑒定菌的運(yùn)動(dòng)、鑒定菌種等方面種等方面液體液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基不加任何凝固不加任何凝固劑劑常用于發(fā)酵工業(yè)常用于發(fā)酵工業(yè)和微生物擴(kuò)大培和微生物擴(kuò)大培養(yǎng)養(yǎng)劃分劃分標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)種類(lèi)種類(lèi)特點(diǎn)特點(diǎn)用途用途按用按用途分途分選擇選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基根據(jù)某一種或某一根據(jù)某一種或某一類(lèi)微生物的特殊營(yíng)類(lèi)微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或?qū)σ恍┪镳B(yǎng)要求或?qū)σ恍┪锢?、化學(xué)抗性而設(shè)理、化學(xué)抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基計(jì)的培養(yǎng)基培養(yǎng)、分離特定培養(yǎng)、分離特定的微生物的微生物鑒別鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基加入某種試劑或化加入某種試劑或化學(xué)藥品學(xué)藥品, ,使培

3、養(yǎng)后發(fā)使培養(yǎng)后發(fā)生某種變化的培養(yǎng)生某種變化的培養(yǎng)基基鑒別不同類(lèi)型的鑒別不同類(lèi)型的微生物微生物(3)(3)培養(yǎng)基成分培養(yǎng)基成分: :一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等生長(zhǎng)因子等, ,此外還要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)此外還要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pHpH、特殊營(yíng)、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。2.2.無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù): :(1)(1)滅菌的目的滅菌的目的: :無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外物被其他外來(lái)微生物污染外, ,還能有效避免操作者自還能有效避免操作者自身被微生物感染。身被微生物感染。(

4、2)(2)滅菌原因滅菌原因: :使所利用的微生物不被其他微生物污染。使所利用的微生物不被其他微生物污染。(3)(3)無(wú)菌操作的條件。無(wú)菌操作的條件。各種器皿必須是無(wú)菌的。各種器皿必須是無(wú)菌的。各種培養(yǎng)基必須是無(wú)菌的。各種培養(yǎng)基必須是無(wú)菌的。細(xì)菌轉(zhuǎn)移操作的過(guò)程必須是無(wú)菌的。細(xì)菌轉(zhuǎn)移操作的過(guò)程必須是無(wú)菌的。(4)(4)三種常用滅菌方法的比較三種常用滅菌方法的比較: :滅菌滅菌方法方法適用材料或用具適用材料或用具滅菌條件滅菌條件滅菌滅菌時(shí)間時(shí)間灼燒灼燒滅菌滅菌接種環(huán)、接種針或接種環(huán)、接種針或其他金屬用具其他金屬用具在酒精燈火焰的在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒充分燃燒層灼燒直至燒直至燒紅紅干熱干熱滅菌滅

5、菌玻璃器皿玻璃器皿( (吸管、吸管、培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿) )和金屬用和金屬用具等具等干熱滅菌箱干熱滅菌箱內(nèi)內(nèi),160,160170 170 加熱加熱1 12 h2 h高壓蒸高壓蒸汽滅菌汽滅菌培養(yǎng)基等培養(yǎng)基等100 kPa,121 100 kPa,121 151530 min30 min(5)(5)消毒和滅菌消毒和滅菌: :項(xiàng)目項(xiàng)目消毒消毒滅菌滅菌理化因素的理化因素的作用強(qiáng)度作用強(qiáng)度較為溫和較為溫和強(qiáng)烈強(qiáng)烈方方 法法煮沸消毒、巴氏消毒、煮沸消毒、巴氏消毒、化學(xué)藥劑消毒、紫外線(xiàn)化學(xué)藥劑消毒、紫外線(xiàn)消毒消毒灼燒滅菌、灼燒滅菌、干熱滅干熱滅菌、高壓蒸菌、高壓蒸汽滅菌汽滅菌項(xiàng)目項(xiàng)目消毒消毒滅菌滅菌消滅微生物消

6、滅微生物的數(shù)量的數(shù)量部分生活狀態(tài)的微生物部分生活狀態(tài)的微生物全部微生物全部微生物芽孢和孢子芽孢和孢子能否被消滅能否被消滅不能不能能能考點(diǎn)二大腸桿菌的培養(yǎng)和分離考點(diǎn)二大腸桿菌的培養(yǎng)和分離1.1.培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)步驟培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)步驟: :2.2.純化大腸桿菌的方法純化大腸桿菌的方法: :常用的微生物接種方法有劃線(xiàn)分離法和涂布分離法。常用的微生物接種方法有劃線(xiàn)分離法和涂布分離法。(1)(1)劃線(xiàn)分離法劃線(xiàn)分離法: :是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線(xiàn)的操作連續(xù)劃線(xiàn)的操作, ,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面?；谋砻?。(2)(

7、2)涂布分離法涂布分離法: :是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋, ,然然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面表面, ,進(jìn)行培養(yǎng)。進(jìn)行培養(yǎng)。3.3.兩種純化大腸桿菌方法的比較兩種純化大腸桿菌方法的比較: :比較比較項(xiàng)目項(xiàng)目劃線(xiàn)分離法劃線(xiàn)分離法涂布分離法涂布分離法工具工具接種環(huán)接種環(huán)玻璃刮刀玻璃刮刀原理原理通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線(xiàn)的操作養(yǎng)基表面連續(xù)劃線(xiàn)的操作, ,將聚集的菌種逐步稀釋分將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。在數(shù)次散到培養(yǎng)基表面。在數(shù)次劃線(xiàn)后培養(yǎng)劃線(xiàn)后培養(yǎng), ,可以

8、分離到可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的細(xì)胞群體眼可見(jiàn)的細(xì)胞群體, ,即菌即菌落落將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋, ,然然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)。瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里在稀釋度足夠高的菌液里, ,聚集在聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞, ,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落落比較比較項(xiàng)目項(xiàng)目劃線(xiàn)分離法劃線(xiàn)分離法涂布分離法涂布分離法優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)可以觀察菌落特征可以觀察菌落特征, ,對(duì)混合菌進(jìn)行分

9、離對(duì)混合菌進(jìn)行分離單菌落更易分開(kāi)單菌落更易分開(kāi), ,可以計(jì)可以計(jì)數(shù)數(shù), ,可以觀察菌落特征可以觀察菌落特征比較比較項(xiàng)目項(xiàng)目劃線(xiàn)分離法劃線(xiàn)分離法涂布分離法涂布分離法缺點(diǎn)缺點(diǎn)不適宜計(jì)數(shù)不適宜計(jì)數(shù)吸收量較小吸收量較小, ,操作較復(fù)雜操作較復(fù)雜, ,平板不干燥效果不好平板不干燥效果不好, ,容容易蔓延易蔓延目的目的使培養(yǎng)基上形成單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的子細(xì)使培養(yǎng)基上形成單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的子細(xì)胞群體胞群體菌落菌落考點(diǎn)三分離以尿素為氮源的微生物考點(diǎn)三分離以尿素為氮源的微生物1.1.實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理: :(1)(1)以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌時(shí), ,只有含有只有含有脲酶的細(xì)

10、菌能夠正常生長(zhǎng)脲酶的細(xì)菌能夠正常生長(zhǎng), ,據(jù)此可分離出以尿素為氮據(jù)此可分離出以尿素為氮源的微生物。源的微生物。(2)(2)細(xì)菌合成的脲酶能將尿素分解成細(xì)菌合成的脲酶能將尿素分解成NH3,NH3,使使pHpH升高升高, ,使使酚紅指示劑變紅。酚紅指示劑變紅。2.2.實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟: :3.3.注意事項(xiàng)注意事項(xiàng): :(1)(1)一般選擇菌落數(shù)在一般選擇菌落數(shù)在3030300300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。(2)(2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。(3)(3)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來(lái)表示。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來(lái)表示。(4)(

11、4)設(shè)置對(duì)照設(shè)置對(duì)照: :目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖桥懦龑?shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響結(jié)果的影響, ,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。類(lèi)型一培養(yǎng)基及無(wú)菌技術(shù)類(lèi)型一培養(yǎng)基及無(wú)菌技術(shù)1.(20171.(2017杭州模擬杭州模擬) )據(jù)報(bào)道據(jù)報(bào)道, ,葡萄球菌是一群革蘭氏葡萄球菌是一群革蘭氏陽(yáng)性球菌陽(yáng)性球菌, ,因常堆聚成葡萄串狀因常堆聚成葡萄串狀, ,故得名。多數(shù)為非致故得名。多數(shù)為非致病菌病菌, ,少數(shù)可導(dǎo)致疾病。葡萄球菌能分解卵黃中的卵少數(shù)可導(dǎo)致疾病。葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂磷脂, ,在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周?chē)鷷?huì)出在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周?chē)?/p>

12、會(huì)出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題?，F(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)(1)某小組想檢測(cè)某飲料中是否含有葡萄球菌以及該某小組想檢測(cè)某飲料中是否含有葡萄球菌以及該菌的含量菌的含量, ,請(qǐng)幫他們完善相關(guān)步驟。請(qǐng)幫他們完善相關(guān)步驟。配制培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基: :稱(chēng)取適量的牛肉膏、蛋白胨、稱(chēng)取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaClNaCl、瓊脂等瓊脂等, ,加入蒸餾水加入蒸餾水, ,攪拌加熱至完全溶解后攪拌加熱至完全溶解后_,_,分裝到錐形瓶后利用分裝到錐形瓶后利用_進(jìn)進(jìn)行滅菌行滅菌, ,在無(wú)菌狀態(tài)下加入卵黃液在無(wú)菌狀態(tài)下加入卵黃液(100 mL(100 mL 10% 10%滅菌滅菌NaClN

13、aCl溶液中加一個(gè)雞蛋黃溶液中加一個(gè)雞蛋黃, ,振蕩均勻振蕩均勻),),搖勻后立即倒搖勻后立即倒平板。平板。接種接種: :將將1 mL1 mL待檢測(cè)飲料稀釋待檢測(cè)飲料稀釋1010倍倍, ,在在5 5個(gè)平板上接個(gè)平板上接入入0.1 mL0.1 mL的稀釋液。將上述接種后的平板同時(shí)放在的稀釋液。將上述接種后的平板同時(shí)放在37 37 的恒溫箱中培養(yǎng)的恒溫箱中培養(yǎng)24 h24 h。觀察觀察: :觀察平板觀察平板,5,5個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為2020、1818、1212、1414、16,16,據(jù)此可得出每升飲料中的活菌數(shù)為據(jù)此可得出每升飲料中的活菌數(shù)為_(kāi)個(gè)。個(gè)。(2)(2)培養(yǎng)基中

14、的牛肉膏和蛋白胨為葡萄球菌生長(zhǎng)和繁培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨為葡萄球菌生長(zhǎng)和繁殖提供殖提供_。(3)(3)下列有關(guān)劃線(xiàn)分離法的操作正確的是下列有關(guān)劃線(xiàn)分離法的操作正確的是_。A.A.接種環(huán)在每次劃線(xiàn)前需在菌液中蘸取一次接種環(huán)在每次劃線(xiàn)前需在菌液中蘸取一次B.B.在超凈臺(tái)上進(jìn)行接種時(shí)必須保證紫外燈處于開(kāi)放狀在超凈臺(tái)上進(jìn)行接種時(shí)必須保證紫外燈處于開(kāi)放狀態(tài)態(tài)C.C.接種前接種前, ,應(yīng)先使接種環(huán)接觸培養(yǎng)基以達(dá)到冷卻的目應(yīng)先使接種環(huán)接觸培養(yǎng)基以達(dá)到冷卻的目的的, ,然后再取菌體然后再取菌體D.D.在每份固體培養(yǎng)基表面都可形成單菌落在每份固體培養(yǎng)基表面都可形成單菌落【解析【解析】(1)(1)配制培養(yǎng)基時(shí)配

15、制培養(yǎng)基時(shí), ,分裝前要調(diào)節(jié)分裝前要調(diào)節(jié)pH,pH,培養(yǎng)基培養(yǎng)基通常用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌處理。通常用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌處理。0.1 mL0.1 mL稀釋液稀釋液含細(xì)菌數(shù)為含細(xì)菌數(shù)為(20+18+12+14+16)(20+18+12+14+16)5=165=16個(gè)個(gè), ,可得出每升可得出每升飲料含有的活菌數(shù)為飲料含有的活菌數(shù)為1616101010103 310=1.610=1.610106 6( (個(gè)個(gè)) )。(2)(2)牛肉膏和蛋白胨能為葡萄球菌的生長(zhǎng)和繁殖提供碳牛肉膏和蛋白胨能為葡萄球菌的生長(zhǎng)和繁殖提供碳源和氮源。源和氮源。(3)(3)接種環(huán)在初次劃線(xiàn)前在菌液中蘸取一接種環(huán)在初次劃線(xiàn)

16、前在菌液中蘸取一次次,A,A錯(cuò)誤錯(cuò)誤; ;在超凈臺(tái)進(jìn)行操作時(shí)應(yīng)關(guān)閉紫外燈在超凈臺(tái)進(jìn)行操作時(shí)應(yīng)關(guān)閉紫外燈,B,B錯(cuò)誤錯(cuò)誤; ;接種前接種前, ,應(yīng)先使接種環(huán)接觸培養(yǎng)基以達(dá)到冷卻的目的應(yīng)先使接種環(huán)接觸培養(yǎng)基以達(dá)到冷卻的目的, ,然后再取菌體然后再取菌體, ,防止過(guò)高的溫度使菌體死亡防止過(guò)高的溫度使菌體死亡,C,C正確正確; ;劃劃線(xiàn)分離不一定在每個(gè)培養(yǎng)基上都出現(xiàn)單菌落線(xiàn)分離不一定在每個(gè)培養(yǎng)基上都出現(xiàn)單菌落,D,D錯(cuò)誤。錯(cuò)誤。答案答案: :(1)(1)調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)pHpH高壓蒸汽滅菌鍋高壓蒸汽滅菌鍋1.61.610106 6(2)(2)碳源和氮源碳源和氮源(3)C(3)C2.2.有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草

17、劑有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑, ,長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)境。研究發(fā)現(xiàn), ,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖甲、乙所示。如圖甲、乙所示。(1)(1)該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源碳源, ,其原因是其原因是_。(2)(2)純化菌株時(shí)純化菌株時(shí), ,通常使用的劃線(xiàn)工具是通常使用的劃線(xiàn)工具是_。劃。劃線(xiàn)的某個(gè)平板培養(yǎng)后線(xiàn)的某個(gè)平板培養(yǎng)后, ,第一劃線(xiàn)區(qū)域的劃線(xiàn)上都不間第一劃線(xiàn)區(qū)域的劃線(xiàn)上都不間斷地

18、長(zhǎng)滿(mǎn)了菌斷地長(zhǎng)滿(mǎn)了菌, ,第二劃線(xiàn)區(qū)域所劃的第一條線(xiàn)上無(wú)菌第二劃線(xiàn)區(qū)域所劃的第一條線(xiàn)上無(wú)菌落落, ,其他劃線(xiàn)上有菌落。造成劃線(xiàn)無(wú)菌落的操作失誤其他劃線(xiàn)上有菌落。造成劃線(xiàn)無(wú)菌落的操作失誤不可能是不可能是_。A.A.接種環(huán)灼燒后未冷卻接種環(huán)灼燒后未冷卻B.B.劃線(xiàn)未從第一區(qū)域末端開(kāi)始劃線(xiàn)未從第一區(qū)域末端開(kāi)始C.C.接種環(huán)沒(méi)有經(jīng)過(guò)滅菌接種環(huán)沒(méi)有經(jīng)過(guò)滅菌D.D.劃線(xiàn)時(shí)從空白處開(kāi)始劃線(xiàn)時(shí)從空白處開(kāi)始(3)(3)為探究苯磺隆的降解機(jī)制為探究苯磺隆的降解機(jī)制, ,將該菌種的培養(yǎng)液過(guò)濾將該菌種的培養(yǎng)液過(guò)濾離心離心, ,取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是_,_,該實(shí)該實(shí)

19、驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理?_,?_,為什么為什么?_?_?！窘馕觥窘馕觥?1)(1)選擇培養(yǎng)基只允許特定種類(lèi)的微生物生選擇培養(yǎng)基只允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)長(zhǎng), ,實(shí)驗(yàn)中要分離降解苯磺隆的菌株實(shí)驗(yàn)中要分離降解苯磺隆的菌株, ,因而所用選擇培因而所用選擇培養(yǎng)基必須以苯磺隆作為唯一碳源。養(yǎng)基必須以苯磺隆作為唯一碳源。(2)(2)純化菌株時(shí)純化菌株時(shí), ,通通常使用的劃線(xiàn)工具是接種環(huán)常使用的劃線(xiàn)工具是接種環(huán); ;接種環(huán)在平板上每一次接種環(huán)在平板上每一次劃線(xiàn)前劃線(xiàn)前, ,都要先灼燒滅菌并冷卻都要先灼燒滅菌并冷卻, ,而且要從上一次劃線(xiàn)而且要從上一次劃線(xiàn)末端而非空白處開(kāi)始劃線(xiàn)末端而非空白處開(kāi)始劃線(xiàn),

20、,不冷卻會(huì)燙死上次劃線(xiàn)末不冷卻會(huì)燙死上次劃線(xiàn)末端菌株端菌株, ,而空白處不存在菌株。而空白處不存在菌株。(3)(3)圖乙中將蛋白酶溶圖乙中將蛋白酶溶液加入上清液中液加入上清液中, ,可知蛋白酶用于水解上清液中的某可知蛋白酶用于水解上清液中的某蛋白質(zhì)蛋白質(zhì), ,由此可判定實(shí)驗(yàn)假設(shè)是目的菌株通過(guò)分泌某由此可判定實(shí)驗(yàn)假設(shè)是目的菌株通過(guò)分泌某種蛋白質(zhì)來(lái)降解苯磺隆種蛋白質(zhì)來(lái)降解苯磺隆, ,但是需要設(shè)置不加入蛋白酶但是需要設(shè)置不加入蛋白酶的對(duì)照實(shí)驗(yàn)的對(duì)照實(shí)驗(yàn), ,否則沒(méi)有說(shuō)服力否則沒(méi)有說(shuō)服力, ,因而實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不合理。因而實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不合理。答案答案: :(1)(1)只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)繁殖只有能

21、利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)繁殖(2)(2)接種環(huán)接種環(huán)C C(3)(3)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理缺少空白對(duì)照白質(zhì)不合理缺少空白對(duì)照類(lèi)型二大腸桿菌的培養(yǎng)和分離類(lèi)型二大腸桿菌的培養(yǎng)和分離1.(20171.(2017湖州模擬湖州模擬) )請(qǐng)回答下列與請(qǐng)回答下列與“大腸桿菌的培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)和分離和分離”實(shí)驗(yàn)有關(guān)的問(wèn)題實(shí)驗(yàn)有關(guān)的問(wèn)題: :(1)(1)該實(shí)驗(yàn)中該實(shí)驗(yàn)中, ,常采用常采用_培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)大培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)大腸桿菌腸桿菌; ;擴(kuò)大培養(yǎng)后再在擴(kuò)大培養(yǎng)后再在_培養(yǎng)基上劃線(xiàn)培養(yǎng)基上劃線(xiàn)進(jìn)行分離。進(jìn)行分離。(2)(2)分離大腸桿菌的兩種方法各有特點(diǎn)分離大腸

22、桿菌的兩種方法各有特點(diǎn), ,其中其中_法操作簡(jiǎn)單法操作簡(jiǎn)單, ,而而_法操作復(fù)雜法操作復(fù)雜些些, ,但是單菌落更易分開(kāi)。但是單菌落更易分開(kāi)。(3)(3)該實(shí)驗(yàn)中該實(shí)驗(yàn)中, ,將菌液在培養(yǎng)基上劃線(xiàn)后要蓋好培養(yǎng)皿將菌液在培養(yǎng)基上劃線(xiàn)后要蓋好培養(yǎng)皿, ,最后將培養(yǎng)皿最后將培養(yǎng)皿_,_,放在恒溫培養(yǎng)箱中培放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。養(yǎng)。(4)(4)利用大腸桿菌做實(shí)驗(yàn)利用大腸桿菌做實(shí)驗(yàn), ,使用過(guò)的器皿都必須進(jìn)行使用過(guò)的器皿都必須進(jìn)行_處理。處理?！窘馕觥窘馕觥?1)(1)大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)中大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)中, ,常采用常采用LBLB液體培養(yǎng)基對(duì)大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)液體培養(yǎng)基對(duì)大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大

23、培養(yǎng); ;在進(jìn)行劃線(xiàn)分在進(jìn)行劃線(xiàn)分離時(shí)離時(shí), ,則采用則采用LBLB固體培養(yǎng)基進(jìn)行劃線(xiàn)分離。固體培養(yǎng)基進(jìn)行劃線(xiàn)分離。(2)(2)分離大分離大腸桿菌的兩種方法各有特點(diǎn)腸桿菌的兩種方法各有特點(diǎn), ,其中劃線(xiàn)分離法操作簡(jiǎn)其中劃線(xiàn)分離法操作簡(jiǎn)單單, ,而涂布分離法操作相對(duì)復(fù)雜一些而涂布分離法操作相對(duì)復(fù)雜一些, ,但是單菌落更易但是單菌落更易分開(kāi)。分開(kāi)。(3)(3)該實(shí)驗(yàn)中該實(shí)驗(yàn)中, ,將菌液在培養(yǎng)基上劃線(xiàn)后要蓋好將菌液在培養(yǎng)基上劃線(xiàn)后要蓋好培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿, ,最后將培養(yǎng)皿倒置最后將培養(yǎng)皿倒置( (蓋在下面蓋在下面),),放在恒溫培養(yǎng)放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。箱中培養(yǎng)。(4)(4)利用大腸桿菌做實(shí)驗(yàn)利用大腸桿

24、菌做實(shí)驗(yàn), ,使用過(guò)的器皿都使用過(guò)的器皿都必須進(jìn)行滅菌處理必須進(jìn)行滅菌處理, ,防止污染。防止污染。答案答案: :(1)LB(1)LB液體液體LBLB固體固體(2)(2)劃線(xiàn)分離涂布分離劃線(xiàn)分離涂布分離(3)(3)倒置倒置(4)(4)滅菌滅菌2.2.下列是有關(guān)大腸桿菌的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)下列是有關(guān)大腸桿菌的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn), ,請(qǐng)回答請(qǐng)回答: :(1)(1)配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí)配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí), ,根據(jù)根據(jù)“細(xì)菌喜葷細(xì)菌喜葷, ,霉菌喜素霉菌喜素”的規(guī)律的規(guī)律, ,通常在培養(yǎng)基中加入蛋白胨和通常在培養(yǎng)基中加入蛋白胨和_作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì), ,為維持一定的滲透壓為維持一定的滲透壓, ,常需常

25、需加入一定量的加入一定量的_。(2)(2)大腸桿菌培養(yǎng)和分離的實(shí)驗(yàn)中大腸桿菌培養(yǎng)和分離的實(shí)驗(yàn)中, ,為了檢測(cè)接種、培為了檢測(cè)接種、培養(yǎng)過(guò)程是否受雜菌污染以及養(yǎng)過(guò)程是否受雜菌污染以及_,_,應(yīng)同時(shí)將未接種的培養(yǎng)應(yīng)同時(shí)將未接種的培養(yǎng)基放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)?；湃牒銣嘏囵B(yǎng)箱中培養(yǎng)。(3)(3)關(guān)于關(guān)于“大腸桿菌的培養(yǎng)和分離大腸桿菌的培養(yǎng)和分離”操作中操作中, ,下列敘述下列敘述正確的是正確的是_。A.A.高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí), ,打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零后到零后, ,開(kāi)啟鍋蓋開(kāi)啟鍋蓋B.B.倒平板時(shí)倒平板時(shí), ,應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊

26、, ,以免培養(yǎng)基濺以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上到皿蓋上C.C.為了防止污染為了防止污染, ,接種工具經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速接種工具經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落挑取菌落D.D.用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí), ,應(yīng)標(biāo)記在皿底上應(yīng)標(biāo)記在皿底上【解析【解析】(1)(1)細(xì)菌培養(yǎng)基通常加入蛋白胨和酵母提取細(xì)菌培養(yǎng)基通常加入蛋白胨和酵母提取物作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)物作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì), ,并加入一定量的氯化鈉維持滲透并加入一定量的氯化鈉維持滲透壓。壓。(2)(2)培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)過(guò)程中, ,為檢測(cè)接種、培養(yǎng)過(guò)程是否受雜為檢測(cè)接種、培養(yǎng)過(guò)程是否受雜菌污染以及無(wú)菌操作是否規(guī)范菌污染以及無(wú)菌操作是否規(guī)范, ,通

27、常將未接種的培養(yǎng)通常將未接種的培養(yǎng)基放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)作為對(duì)照基放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)作為對(duì)照, ,若出現(xiàn)菌落若出現(xiàn)菌落, ,說(shuō)明說(shuō)明上述操作存在雜菌污染。上述操作存在雜菌污染。(3)(3)高壓滅菌鍋隨著加熱高壓滅菌鍋隨著加熱, ,鍋鍋內(nèi)壓力升高內(nèi)壓力升高, ,有壓力后開(kāi)始計(jì)時(shí)滅菌有壓力后開(kāi)始計(jì)時(shí)滅菌15 min,15 min,滅菌后滅菌后, ,待高壓鍋或滅菌鍋壓力與大氣壓相同時(shí)待高壓鍋或滅菌鍋壓力與大氣壓相同時(shí)( (即沒(méi)有壓力即沒(méi)有壓力了了) )打開(kāi)鍋蓋打開(kāi)鍋蓋, ,此時(shí)壓力不為此時(shí)壓力不為0,A0,A錯(cuò)誤錯(cuò)誤; ;倒平板時(shí)倒平板時(shí), ,在超在超凈臺(tái)上將培養(yǎng)皿打開(kāi)上蓋的一邊凈臺(tái)上將培養(yǎng)皿打開(kāi)

28、上蓋的一邊, ,將培養(yǎng)基倒在培養(yǎng)將培養(yǎng)基倒在培養(yǎng)皿中皿中, ,立即蓋上上蓋立即蓋上上蓋, ,置于水平位置上置于水平位置上,B,B錯(cuò)誤錯(cuò)誤; ;接種工接種工具經(jīng)火焰灼燒滅菌后具經(jīng)火焰灼燒滅菌后, ,接種前接種前, ,應(yīng)先使接種工具接觸培應(yīng)先使接種工具接觸培養(yǎng)基以達(dá)到冷卻的目的養(yǎng)基以達(dá)到冷卻的目的, ,然后再取菌體然后再取菌體,C,C錯(cuò)誤錯(cuò)誤; ;可在培可在培養(yǎng)皿皿底上使用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中的菌落養(yǎng)皿皿底上使用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中的菌落,D,D正確。正確。答案答案: :(1)(1)酵母提取物氯化鈉酵母提取物氯化鈉(2)(2)無(wú)菌操作是否規(guī)無(wú)菌操作是否規(guī)范范(3)D(3)D類(lèi)型三分離以尿素為氮源的微生

29、物類(lèi)型三分離以尿素為氮源的微生物(2016(2016浙江浙江1010月選考真題節(jié)選月選考真題節(jié)選) )請(qǐng)回答從土壤中分離請(qǐng)回答從土壤中分離產(chǎn)脲酶細(xì)菌和脲酶固定化實(shí)驗(yàn)的有關(guān)問(wèn)題產(chǎn)脲酶細(xì)菌和脲酶固定化實(shí)驗(yàn)的有關(guān)問(wèn)題: :(1)LB(1)LB固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基: :取適量的蛋白胨、酵母提取物、取適量的蛋白胨、酵母提取物、NaClNaCl, ,加入一定量的蒸餾水溶解加入一定量的蒸餾水溶解, ,再加再加_,_,滅菌滅菌備用。備用。(2)(2)尿素固體培養(yǎng)基尿素固體培養(yǎng)基: :先將適宜濃度的尿素溶液用先將適宜濃度的尿素溶液用_滅菌過(guò)的滅菌過(guò)的G6G6玻璃砂漏斗過(guò)濾玻璃砂漏斗過(guò)濾, ,因?yàn)橐驗(yàn)镚6G6玻璃玻璃砂漏斗砂漏斗_,_,故用于過(guò)濾除菌。然后故用于過(guò)濾除菌。然后將尿素溶液加入已經(jīng)滅菌的含有酚紅的培養(yǎng)基中將尿素溶液加入已經(jīng)滅菌的含有酚紅的培養(yǎng)基中, ,備備用。用。(3)(3)取適量