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1、 造血干細(xì)胞捐獻(xiàn)者血樣的造血干細(xì)胞捐獻(xiàn)者血樣的 hlahla基因定型及資料錄入基因定型及資料錄入 鄧志輝鄧志輝 深圳市輸血醫(yī)學(xué)研究所深圳市輸血醫(yī)學(xué)研究所 2005年年5月月16日日主要工作流程主要工作流程一、各一、各“工作站工作站”將審核、遴選合格的造血干細(xì)胞將審核、遴選合格的造血干細(xì)胞捐獻(xiàn)者血樣(貼有骨髓條碼),以及捐獻(xiàn)者樣本捐獻(xiàn)者血樣(貼有骨髓條碼),以及捐獻(xiàn)者樣本清單(捐獻(xiàn)者姓名及骨髓編號(hào)),一并送達(dá)我研清單(捐獻(xiàn)者姓名及骨髓編號(hào)),一并送達(dá)我研究所免疫遺傳實(shí)驗(yàn)室;究所免疫遺傳實(shí)驗(yàn)室;二、免疫遺傳實(shí)驗(yàn)室對(duì)捐獻(xiàn)者血樣進(jìn)行二、免疫遺傳實(shí)驗(yàn)室對(duì)捐獻(xiàn)者血樣進(jìn)行hla-ahla-a、b b和和dr
2、b1drb1基因定型,對(duì)送檢血樣的基因定型,對(duì)送檢血樣的hlahla基因定型結(jié)果負(fù)基因定型結(jié)果負(fù)責(zé);責(zé); 三、出具三、出具“捐獻(xiàn)者捐獻(xiàn)者h(yuǎn)lahla基因分型檢測(cè)結(jié)果基因分型檢測(cè)結(jié)果”報(bào)告。報(bào)告。主要內(nèi)容主要內(nèi)容 (1 1)捐獻(xiàn)者)捐獻(xiàn)者h(yuǎn)lahla基因定型血樣的運(yùn)輸基因定型血樣的運(yùn)輸 (2 2)hlahla相關(guān)基本概念相關(guān)基本概念 (3 3)hlahla分型(定型)技術(shù)分型(定型)技術(shù) hlahla血清學(xué)分型技術(shù)血清學(xué)分型技術(shù) hlahla基因分型技術(shù)基因分型技術(shù)捐獻(xiàn)者捐獻(xiàn)者h(yuǎn)lahla基因定型血樣的運(yùn)輸基因定型血樣的運(yùn)輸注意事項(xiàng):注意事項(xiàng):1 1、因、因“登記表登記表”中填寫(xiě)的內(nèi)容審核不合格
3、血中填寫(xiě)的內(nèi)容審核不合格血樣、以及經(jīng)樣、以及經(jīng)hbvhbv等化驗(yàn)檢查健康不合格的血樣,等化驗(yàn)檢查健康不合格的血樣,予以剔除;予以剔除;2 2、檢查血樣管有無(wú)破管;、檢查血樣管有無(wú)破管;3 3、路途遠(yuǎn)、條件許可,可放置適量干冰;、路途遠(yuǎn)、條件許可,可放置適量干冰;4 4、由專人運(yùn)送,防震、防顛覆;、由專人運(yùn)送,防震、防顛覆;5 5、合格的、合格的hlahla基因定型血樣與捐獻(xiàn)者樣本清單基因定型血樣與捐獻(xiàn)者樣本清單一并送往組織配型實(shí)驗(yàn)室。一并送往組織配型實(shí)驗(yàn)室。人類(lèi)白細(xì)胞抗原人類(lèi)白細(xì)胞抗原(human leucocyte antigen, hla)(human leucocyte antigen,
4、 hla)v1958年,年,dausset采用白細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn),檢測(cè)出第一個(gè)人類(lèi)采用白細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn),檢測(cè)出第一個(gè)人類(lèi)白細(xì)胞白細(xì)胞 抗原抗原mac(a2)。)。v為高度復(fù)雜的遺傳多態(tài)性系統(tǒng),每個(gè)人的為高度復(fù)雜的遺傳多態(tài)性系統(tǒng),每個(gè)人的hlahla千差萬(wàn)別,即人千差萬(wàn)別,即人體生物學(xué)的體生物學(xué)的“身份證身份證” ” , v不同的民族、同一民族不同的地域,不同的民族、同一民族不同的地域,hlahla基因及單倍型分布有基因及單倍型分布有其特點(diǎn),其特點(diǎn),vhlahla為人類(lèi)主要組織相容性系統(tǒng)(為人類(lèi)主要組織相容性系統(tǒng)(mhcmhc),與移植排斥反應(yīng)密),與移植排斥反應(yīng)密切相關(guān),又稱移植抗原。切相關(guān),又稱移
5、植抗原。v是機(jī)體是機(jī)體“識(shí)別自身識(shí)別自身”、“排除異已排除異已”的主要遺傳標(biāo)記,參與的主要遺傳標(biāo)記,參與免疫應(yīng)答反應(yīng)。免疫應(yīng)答反應(yīng)。 vhlahla基因家族位于人類(lèi)第基因家族位于人類(lèi)第6 6號(hào)染色體短臂,全長(zhǎng)號(hào)染色體短臂,全長(zhǎng)3.6 mb3.6 mb,hlahla基基因家族是迄今為止最復(fù)雜、多態(tài)性最豐富、免疫功能相關(guān)基因家族是迄今為止最復(fù)雜、多態(tài)性最豐富、免疫功能相關(guān)基因最集中、與疾病關(guān)聯(lián)最密切的一個(gè)區(qū)域。因最集中、與疾病關(guān)聯(lián)最密切的一個(gè)區(qū)域。hlahla抗原的分類(lèi)抗原的分類(lèi)vhla-ihla-i類(lèi):由一條具有多態(tài)性的類(lèi):由一條具有多態(tài)性的多肽鏈和一條沒(méi)有多態(tài)性多肽鏈和一條沒(méi)有多態(tài)性的的 2
6、2微球蛋白通過(guò)非共價(jià)鍵組成異二聚體。微球蛋白通過(guò)非共價(jià)鍵組成異二聚體。 經(jīng)典經(jīng)典hla-ihla-i類(lèi)抗原:包括類(lèi)抗原:包括hla-ahla-a、b b、c c位點(diǎn)抗原,分布于幾乎位點(diǎn)抗原,分布于幾乎所有有核細(xì)胞表面上。如所有有核細(xì)胞表面上。如t t淋巴細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、b b淋巴細(xì)胞等,血小板淋巴細(xì)胞等,血小板上吸附上吸附hla-ahla-a、b b抗原。抗原。 非經(jīng)典非經(jīng)典hla-ihla-i類(lèi)抗原:包括類(lèi)抗原:包括hla-ehla-e、g g 、f f位點(diǎn)抗原,抗原在位點(diǎn)抗原,抗原在特定時(shí)間選擇性分布。特定時(shí)間選擇性分布。vhla-iihla-ii類(lèi):由類(lèi):由34kd34kd的的 鏈和鏈和
7、29kd29kd的的鏈以非共價(jià)鍵連接而成,鏈以非共價(jià)鍵連接而成,包括包括hla-drhla-dr、dpdp、dqdq抗原;抗原; 僅分布于僅分布于b b淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突細(xì)胞等少數(shù)細(xì)胞表面。淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突細(xì)胞等少數(shù)細(xì)胞表面。vhla-hla-類(lèi):主要包括補(bǔ)體分子類(lèi):主要包括補(bǔ)體分子c2c2、c4c4及及bfbf等。等。hlahla抗原結(jié)構(gòu)抗原結(jié)構(gòu)hlahla的免疫原性及骨髓庫(kù)建庫(kù)工作中的免疫原性及骨髓庫(kù)建庫(kù)工作中常規(guī)檢測(cè)的常規(guī)檢測(cè)的hlahla位點(diǎn)位點(diǎn)vhlahla是一個(gè)高度復(fù)雜的遺傳多態(tài)性系統(tǒng),如:是一個(gè)高度復(fù)雜的遺傳多態(tài)性系統(tǒng),如: 經(jīng)典經(jīng)典hla-ihla-i類(lèi)抗原:類(lèi)抗
8、原:hla-ahla-a、b b、c c位點(diǎn)抗原;位點(diǎn)抗原; 非經(jīng)典非經(jīng)典hla-ihla-i類(lèi)抗原:類(lèi)抗原:hla-ehla-e、g g 、f f位點(diǎn)抗原位點(diǎn)抗原 hla-iihla-ii類(lèi):類(lèi):hla-drhla-dr、dpdp、dqdq位點(diǎn)抗原位點(diǎn)抗原vhlahla的免疫原性,主要以的免疫原性,主要以hla-ahla-a、b b和和drb1drb1的免疫原性較強(qiáng),的免疫原性較強(qiáng),因此,骨髓庫(kù)建庫(kù)工作中,通常僅對(duì)因此,骨髓庫(kù)建庫(kù)工作中,通常僅對(duì)hla-ahla-a、b b和和drb1drb1位點(diǎn)進(jìn)位點(diǎn)進(jìn)行定型。行定型。v無(wú)關(guān)供者骨髓移植中,無(wú)關(guān)供者骨髓移植中,nmdpnmdp、jmdpjm
9、dp有研究資料表明,供有研究資料表明,供/ /受受者對(duì)者對(duì)hla-chla-cw w基因的匹配程度,與基因的匹配程度,與gvhdgvhd、移植成活率相關(guān)。、移植成活率相關(guān)。hlahla基因基因v定位于人類(lèi)第定位于人類(lèi)第6 6號(hào)染色體短臂(號(hào)染色體短臂(6p21.316p21.31),全長(zhǎng)),全長(zhǎng)3.6 mb3.6 mb,占,占人類(lèi)基因組堿基數(shù)的人類(lèi)基因組堿基數(shù)的0.1%0.1%。vhla-ihla-i類(lèi)基因:有類(lèi)基因:有1010個(gè)遺傳座位,靠近染色體頂端,個(gè)遺傳座位,靠近染色體頂端,hla-ahla-a、b b、c c、e e、g g、 f f為表達(dá)基因,為表達(dá)基因,h h、j j、k k、l
10、 l為假基因,無(wú)基因?yàn)榧倩?,無(wú)基因產(chǎn)物。產(chǎn)物。v hla-hla-類(lèi)基因:靠近染色體著絲粒端,主要包括類(lèi)基因:靠近染色體著絲粒端,主要包括hla-drhla-dr、dpdp、dqdq基因座?;蜃lahla基因結(jié)構(gòu)基因結(jié)構(gòu)v體細(xì)胞為二倍體,同源體細(xì)胞為二倍體,同源染色體之間相互配對(duì),染色體之間相互配對(duì),v每一每一hlahla位點(diǎn)有位點(diǎn)有2 2個(gè)等位個(gè)等位基因,一個(gè)來(lái)自于母親,基因,一個(gè)來(lái)自于母親,另一個(gè)來(lái)自于父親。另一個(gè)來(lái)自于父親。v檢測(cè)檢測(cè)hla-ahla-a、b b和和drb1drb1三三個(gè)位點(diǎn),有個(gè)位點(diǎn),有6 6個(gè)等位基因,個(gè)等位基因,即即6 6個(gè)個(gè)hlahla分型數(shù)據(jù)。分型數(shù)據(jù)。
11、檢出的檢出的hlahla抗原及等位基因抗原及等位基因v2003年世界衛(wèi)生組織(年世界衛(wèi)生組織(who)hla因子命名委員會(huì)命名的因子命名委員會(huì)命名的hla等位基等位基因:因: hla座位座位 等位基因等位基因 特異性特異性 hla-a 250 24 hla-b 490 49 hla-cw 119 13 hla-drb1 315 17 hla-dpb1 99 6 hla-dqb1 53 7vhla 系統(tǒng)等位基因豐富,每個(gè)人的等位基因型千差萬(wàn)別,可以說(shuō)在隨機(jī)系統(tǒng)等位基因豐富,每個(gè)人的等位基因型千差萬(wàn)別,可以說(shuō)在隨機(jī)人群中,難以有完全相同的。人群中,難以有完全相同的。 hlahla的命名的命名1、血
12、清學(xué)命名:遺傳位點(diǎn)后用數(shù)字表示,如血清學(xué)命名:遺傳位點(diǎn)后用數(shù)字表示,如a1a1、a2a2、a3a3、b5b5等。等。 以大寫(xiě)字母以大寫(xiě)字母a a、b b、c c表示表示hlahla的遺傳座位;的遺傳座位;hlahla特異性以數(shù)字表示;除特異性以數(shù)字表示;除hla-ahla-a、b b位點(diǎn)抗原的特異性的命名數(shù)字不重復(fù)外,其它位點(diǎn)抗原連續(xù)獨(dú)位點(diǎn)抗原的特異性的命名數(shù)字不重復(fù)外,其它位點(diǎn)抗原連續(xù)獨(dú)立命名;立命名;c c位點(diǎn)抗原以位點(diǎn)抗原以c cw w為字首命名,以和補(bǔ)體系統(tǒng)區(qū)別。為字首命名,以和補(bǔ)體系統(tǒng)區(qū)別。2 2、hlahla等位基因命名原則:位點(diǎn)后加等位基因命名原則:位點(diǎn)后加“* *”,再加數(shù)字表
13、示。,再加數(shù)字表示。如如drb4drb4* *01 03 1 02 n01 03 1 02 n 第第1 1、2 2位數(shù)表示位數(shù)表示hlahla抗原的特異性,第抗原的特異性,第3 3、4 4位數(shù)表示等位基因(亞位數(shù)表示等位基因(亞型),結(jié)尾加型),結(jié)尾加n n表示無(wú)效等位基因或不表達(dá)基因。表示無(wú)效等位基因或不表達(dá)基因。v hlahla等位基因所對(duì)應(yīng)的血清學(xué)特異性,可查閱過(guò)等位基因所對(duì)應(yīng)的血清學(xué)特異性,可查閱過(guò)whowho公布的公布的hlahla字典。字典。v hlahla低分辨水平基因定型:確定低分辨水平基因定型:確定hlahla基因前基因前2 2位數(shù)。位數(shù)。vhlahla高分辨水平基因定型:確
14、定高分辨水平基因定型:確定hlahla基因第基因第4 4位以后的數(shù)字。位以后的數(shù)字。hla的生物學(xué)功能的生物學(xué)功能vhlahla參與免疫應(yīng)答反應(yīng),與抗原肽結(jié)合形成參與免疫應(yīng)答反應(yīng),與抗原肽結(jié)合形成hla-hla-抗原肽復(fù)合物,抗原提呈細(xì)胞將此復(fù)合抗原肽復(fù)合物,抗原提呈細(xì)胞將此復(fù)合物交由物交由t t淋巴細(xì)胞處理,淋巴細(xì)胞處理,t t細(xì)胞上的細(xì)胞上的t t細(xì)胞受體細(xì)胞受體(tcrtcr)能夠?qū)乖岢始?xì)胞上的)能夠?qū)乖岢始?xì)胞上的hla-hla-抗原肽抗原肽復(fù)合物產(chǎn)生雙識(shí)別,從而介導(dǎo)免疫反應(yīng)。復(fù)合物產(chǎn)生雙識(shí)別,從而介導(dǎo)免疫反應(yīng)。t t細(xì)胞受體對(duì)細(xì)胞受體對(duì)hla-hla-抗原肽復(fù)合物的抗原肽復(fù)合物
15、的雙識(shí)別作用雙識(shí)別作用人類(lèi)白細(xì)胞抗原(人類(lèi)白細(xì)胞抗原(hla)的應(yīng)用)的應(yīng)用vhla分型在骨髓和器官移植組織型分型在骨髓和器官移植組織型v法醫(yī)學(xué)親子鑒定和個(gè)體識(shí)別法醫(yī)學(xué)親子鑒定和個(gè)體識(shí)別v人類(lèi)種群學(xué)人類(lèi)種群學(xué)v安全輸血安全輸血v疾病相關(guān)聯(lián)的研究等領(lǐng)域疾病相關(guān)聯(lián)的研究等領(lǐng)域(如(如hla-b27)hla分型技術(shù)分型技術(shù)1、傳統(tǒng)的血清學(xué)和細(xì)胞學(xué)分型方法、傳統(tǒng)的血清學(xué)和細(xì)胞學(xué)分型方法 因需要有活性的細(xì)胞、定型血清或分型細(xì)胞來(lái)源困難、分型準(zhǔn)確性較因需要有活性的細(xì)胞、定型血清或分型細(xì)胞來(lái)源困難、分型準(zhǔn)確性較差等原因,已逐步被淘汰。差等原因,已逐步被淘汰。 2、pcr為基礎(chǔ)的為基礎(chǔ)的hla基因分型技術(shù)基因
16、分型技術(shù) 分型所需要的血樣量少,不需要有活性的細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好、結(jié)果的準(zhǔn)分型所需要的血樣量少,不需要有活性的細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好、結(jié)果的準(zhǔn)確性高,易于質(zhì)控和準(zhǔn)標(biāo)化。確性高,易于質(zhì)控和準(zhǔn)標(biāo)化。hla基因分型技術(shù)取代了血清學(xué)方法。基因分型技術(shù)取代了血清學(xué)方法。 當(dāng)前的當(dāng)前的“中國(guó)造血干細(xì)胞捐獻(xiàn)者資料庫(kù)中國(guó)造血干細(xì)胞捐獻(xiàn)者資料庫(kù)”的建庫(kù)技術(shù),不同于的建庫(kù)技術(shù),不同于以往的以往的“中華骨髓庫(kù)中華骨髓庫(kù)”。前者采用基因定型技術(shù)檢測(cè)。前者采用基因定型技術(shù)檢測(cè)hla-a、b、drb1基因,后者采用血清學(xué)方法檢測(cè)基因,后者采用血清學(xué)方法檢測(cè)hla-a、b抗原??乖??!爸袊?guó)造血干細(xì)胞捐獻(xiàn)者資料庫(kù)中國(guó)造血干細(xì)胞捐
17、獻(xiàn)者資料庫(kù)”對(duì)捐獻(xiàn)對(duì)捐獻(xiàn)者血樣者血樣hla基因分型技術(shù)的要求基因分型技術(shù)的要求v對(duì)對(duì)hla-ahla-a、b b和和drb1drb1進(jìn)行基因分型,分辨率達(dá)低分辨進(jìn)行基因分型,分辨率達(dá)低分辨水平。水平。v結(jié)果既報(bào)告每一樣本的基因型,同時(shí)報(bào)告對(duì)應(yīng)的特結(jié)果既報(bào)告每一樣本的基因型,同時(shí)報(bào)告對(duì)應(yīng)的特異性。異性。v通過(guò)各省級(jí)組織配型實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控,以及國(guó)家通過(guò)各省級(jí)組織配型實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控,以及國(guó)家“hlahla質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室”組織的室間質(zhì)控對(duì)組織的室間質(zhì)控對(duì)hlahla基因分型基因分型的準(zhǔn)確性進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控。的準(zhǔn)確性進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控。hla基因分型技術(shù)基因分型技術(shù)vpcr-序列特異性引物(序列特異性引物(
18、pcr-ssp)vpcr-sso流式磁珠分析流式磁珠分析vhla測(cè)序分型(測(cè)序分型(sbt)vpcr-序列特異性寡核苷酸探針(序列特異性寡核苷酸探針(pcr-ssop)v基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù)v參比鏈介導(dǎo)的構(gòu)象分析參比鏈介導(dǎo)的構(gòu)象分析(rsca) vhla單倍體基因測(cè)序單倍體基因測(cè)序hlahla基因分型的步驟基因分型的步驟 1、dna提取提取 2、pcr擴(kuò)增擴(kuò)增 3、pcr擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測(cè) 4、結(jié)果分析(判別受檢者、結(jié)果分析(判別受檢者h(yuǎn)la基因型)基因型) 5、hla基因定型報(bào)告基因定型報(bào)告 pcr-pcr-序列特異性引物(序列特異性引物(pcr-ssp)分型技術(shù))分型技術(shù) 基
19、本原理:基本原理: 使用序列特異性引物(使用序列特異性引物(ssp)特異性擴(kuò)增特異性擴(kuò)增hla等位基因,電泳等位基因,電泳分離分離pcr擴(kuò)增產(chǎn)物,根據(jù)是否存擴(kuò)增產(chǎn)物,根據(jù)是否存在在pcr產(chǎn)物以及片段大小,確定產(chǎn)物以及片段大小,確定相應(yīng)基因。相應(yīng)基因。 主要步驟:主要步驟: 1、dna提取提取 2、pcr擴(kuò)增擴(kuò)增 3、瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)、瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè) 4、結(jié)果分析、結(jié)果分析pcr-pcr-序列特異性引物(序列特異性引物(pcr-ssp)分型技術(shù))分型技術(shù)pcr-pcr-序列特異性引物序列特異性引物(pcr-ssp)分型技術(shù))分型技術(shù)v特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速、直觀等,特別適合于尸特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速、
20、直觀等,特別適合于尸腎移植的組織配型;所需設(shè)備簡(jiǎn)單,易于開(kāi)腎移植的組織配型;所需設(shè)備簡(jiǎn)單,易于開(kāi)展;為常規(guī)采用的經(jīng)典展;為常規(guī)采用的經(jīng)典hla基因分型技術(shù)?;蚍中图夹g(shù)。v應(yīng)用:適合于經(jīng)典應(yīng)用:適合于經(jīng)典hla-、類(lèi)分子的基類(lèi)分子的基因分型因分型v分辨率:低分辯、高分辯基因分型水平。分辨率:低分辯、高分辯基因分型水平。pcr-sso流式磁珠分析技術(shù)流式磁珠分析技術(shù) v基本原理:基本原理:以反向核酸雜交為基礎(chǔ),雜交產(chǎn)物以反向核酸雜交為基礎(chǔ),雜交產(chǎn)物采用流式磁珠儀進(jìn)行自動(dòng)檢測(cè),為高通量采用流式磁珠儀進(jìn)行自動(dòng)檢測(cè),為高通量hlahla基因定型技術(shù)?;蚨ㄐ图夹g(shù)。pcr-sso流式磁珠分析技術(shù)的特點(diǎn)(
21、一)流式磁珠分析技術(shù)的特點(diǎn)(一)v實(shí)驗(yàn)原理、引物設(shè)計(jì)、擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測(cè)等,與實(shí)驗(yàn)原理、引物設(shè)計(jì)、擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測(cè)等,與sspssp分分型技術(shù)不同。型技術(shù)不同。vpcr擴(kuò)增反應(yīng)結(jié)束后,將標(biāo)記探針的磁珠直接加入擴(kuò)增反應(yīng)結(jié)束后,將標(biāo)記探針的磁珠直接加入pcrpcr產(chǎn)物中,微量離心管(反應(yīng)板)置于產(chǎn)物中,微量離心管(反應(yīng)板)置于pcr擴(kuò)增儀擴(kuò)增儀上進(jìn)行分子雜交;上進(jìn)行分子雜交;v雜交產(chǎn)物用流式磁珠儀進(jìn)行自動(dòng)進(jìn)樣檢測(cè),用雜交產(chǎn)物用流式磁珠儀進(jìn)行自動(dòng)進(jìn)樣檢測(cè),用hlahla分分析軟件確定析軟件確定hla基因型?;蛐汀?流式磁珠分析技術(shù)的特點(diǎn)(二)流式磁珠分析技術(shù)的特點(diǎn)(二)v配合配合dnadna全自動(dòng)全自動(dòng)
22、dnadna提取儀及多個(gè)提取儀及多個(gè)pcrpcr基因擴(kuò)增儀,具基因擴(kuò)增儀,具有高通量、操作簡(jiǎn)便、快速特點(diǎn)。適合骨髓庫(kù)、臍有高通量、操作簡(jiǎn)便、快速特點(diǎn)。適合骨髓庫(kù)、臍血庫(kù)大批量樣本的血庫(kù)大批量樣本的hla基因分型工作?;蚍中凸ぷ?。v基于流式磁珠分析技術(shù),已有多家商品化、低分辯基于流式磁珠分析技術(shù),已有多家商品化、低分辯水平的水平的hlahla基因分型試劑盒。基因分型試劑盒。v可用于可用于hla-ahla-a、b b、c c、drb1drb1和和dqb1dqb1座位的基因分型。座位的基因分型。hlahla測(cè)序分型(測(cè)序分型(sbtsbt)技術(shù))技術(shù) hla-座位座位 檢測(cè)對(duì)象檢測(cè)對(duì)象 hla-a第第2,3,4 外顯子的正、反向序列外顯子的正、反向序列 hla-b第第2,3,4 外顯子的正、反向序列外顯子的正、反向序列 hla-cw第第2,3外顯子正、反向序列外顯子正、反向序列 hla-drb1第第2外顯子正、反向序列,外顯子正、反向序列,condon 86反反向序列。向序列。 hla-dqb1第第2外顯子正、反向序列,第外顯子正、反向序列,第3外顯子的外顯子的反向測(cè)序。若存在反向測(cè)序。若存在dqb1*0201/0202 或或 0301/0309,分析第,分析第3外顯子的測(cè)序結(jié)果。外顯子的測(cè)序結(jié)果。hlahla測(cè)序分型(測(cè)序分型(sbtsbt)技術(shù))技術(shù)v國(guó)際公認(rèn)
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