(完整版)院感采樣方法.doc

1、空氣、物體表面、醫(yī)務人員手的監(jiān)測采樣及檢查原則： 采樣應具有一定數(shù)量和代表性，采樣后必須盡快對樣品按要求指標進行檢測，送檢時間不得6 小時，若樣品保存在冰箱內送檢時間不24 小時。一、空氣監(jiān)測：1、采樣時間：消毒處理后，操作前2、采樣方法：平板沉降法（ 1）布點方法：室內面積 30 2，設內、中、外對角線3 點，兩端距墻1 米；室內面積30 2，設東、西、南、北4 角及中央5 點，其中東、西、南、北均距墻1 米。潔凈手術室9個點。（ 2）采樣方法：將直徑為9cm 普通營養(yǎng)瓊脂平板在室內各采樣點處，采樣高度為距地面0.8-1.5 米，采樣時將平板蓋打開，扣放于平板旁，暴露5-15-30 分鐘，蓋

2、好立即送檢。( 3) 注意事項：采樣前，關好門、窗，在無人走動的情況下，靜止10min 進行采樣。表 4：潔凈手術室靜態(tài)（空態(tài)）時空氣采樣方法（沉降法）等空氣潔凈度級別細菌最大平均濃度級手術區(qū)周邊區(qū)布點要求手術周邊區(qū)區(qū)100 級1000 級0.20.41000100000.751.5級級10000100000級級24輔100000 級5(5) 質控標準：類區(qū)域（潔凈手術室）：細菌總數(shù) 4cfu/m3(30 分鐘 9cm 平皿 )，新風機組2d 清潔一次，初效過濾器1-2 月更換，中效每周檢查3 個月更換，高效每年更換，末端高效每年檢查3 年更換。回風口每周清潔一次、每年更換一次。類區(qū)域：細菌總

3、數(shù)4cfu/m3(15min9cm平皿 )，類區(qū)域：細菌總數(shù)4cfu/m3(5min9cm 平皿 )，二、醫(yī)務人員手的監(jiān)測：1、采樣時間：在接觸病人和從事醫(yī)療活動前進行采樣或消毒后立即采樣。2、 采樣面積及方法：放被檢人（五指并攏） ，用浸有無菌鹽水的棉拭子在雙手指屈面從指根到指端往返涂擦 各 2 次 (雙手涂擦面積約 60 平方厘米），并隨之轉動采樣棉拭子，剪去操作者手接觸部位，將棉拭子投入5ml 無菌鹽水試管內，立即送檢。3、質控標準：工作人員手衛(wèi)生：細菌總數(shù)10cfu/cm2。外科手衛(wèi)生：細菌總數(shù)5cfu/cm2，。三、物體表面監(jiān)測1、 .采樣時間：在消毒處理后4 小時內進行采樣。2、

4、.采樣方法：用5cm5cm 的標準滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，用浸有無菌鹽水的棉拭子 1 支，在規(guī)格板內橫豎往返均勻涂擦各5 次，并隨之轉棉拭子，連續(xù)采樣4 個，采樣面積 100cm2 剪去手接觸部位后，將棉拭子投入5ml 含無菌鹽水試管內，立即送檢。門把手等不規(guī)則物體表面用棉拭子直接涂擦采樣3. .結果判定：、類區(qū)域：細菌總數(shù) 5cfu/cm2，類區(qū)域細菌：總數(shù) 10cfu/cm2，4.注意事項：采集樣本要有足夠的數(shù)量且具有代表性，手術臺、治療車、無影燈把手等）；如層流潔凈手術室， 選擇具有代表性采樣地點（如采樣時，棉拭子處于濕潤狀態(tài)， 如處于飽和狀態(tài)可將多余的采樣液在采樣管壁上擠壓去除。

5、禁止使用干棉拭子采樣。四、消毒液的監(jiān)測1、常用消毒液有效成分含量測定2、使用中消毒液細菌監(jiān)測：1ml使用中消毒液+9ml中和劑3、結果判定：使用中的滅菌用消毒液、無細菌生長。使用中皮膚粘膜消毒液 10cfu/ml他使用中的消毒液細菌總數(shù)10cfu/m五、壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測方法：壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測是一組綜合措施，包括工藝監(jiān)測、化學監(jiān)測、生物監(jiān)測，各個環(huán)節(jié)缺一不可。其1、物理監(jiān)測（又稱程序監(jiān)測）每鍋進行， 并詳細記錄， 包括滅菌設備故障檢查， 滅菌溫度 （波動 +3 度內）、壓力、時間（最低要求）等滅菌參數(shù)。滅菌物品包裝、大小擺放正確等。2、 化學監(jiān)測法：（1）包內化學指示卡監(jiān)測：1）化學指示

6、卡 ( 管)監(jiān)測方法 : 將既能指示蒸汽溫度，又能指示溫度持續(xù)時間的化學指示管(卡 )放入大包和難以消毒部位的物品包中央，經(jīng)一個滅菌周期后，取出指示管 (卡 )，根據(jù)其顏色及性狀的改變判斷是否達到滅菌條件。2）結果判定 : 檢測時， 所放置的指示管(卡 ) 性狀或顏色均變至規(guī)定的條件，判為滅菌合格；若其中之一未達到規(guī)定的條件，則滅菌過程不合格。（2）包外化學指示膠帶監(jiān)測1）監(jiān)測方法 : 將化學指示膠帶粘貼于每一待滅菌物品包外，經(jīng)一個滅菌周期后，觀察其顏色的改變，以指示是否經(jīng)過滅菌處理，而不能作為滅菌效果判定指標。2）結果判定 : 檢測時，所放置的指示管 (卡 )、膠帶的性狀或顏色均變至規(guī)定的條

7、件，判為滅菌合格；若其中之一未達到規(guī)定的條件，則滅菌過程不合格。（ 3） B-D 試驗：用于預真空（包括脈動真空）壓力蒸汽滅菌器冷空氣排放效果的檢測，冷空氣是造成預真空 （包括脈動真空） 壓力蒸汽滅菌失敗的主要因素之一。對預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌，每日進行一次 B-D 試驗。新安裝、移位后連續(xù)三次生物監(jiān)測、 B-D 試驗。1）檢測方法： B-D 試驗要求做前預熱、空載監(jiān)測每天一次，將 B-D 試紙放入標準測試包，中間包好， 水平放入滅菌柜內滅菌車的前底層，靠近柜門與排氣口底前方（上方） 滅菌柜內除測試包無任何物品。2）結果判定 :經(jīng) 134， 3.5 4 分鐘后，取出 B-D 測試紙觀察顏

8、色變化。若變色均勻一致，說明冷空氣排放效果良好，滅菌器可以使用。（4）化學檢測注意事項: 監(jiān)測所用化學指示物須經(jīng)衛(wèi)生部批準，并在有效期內使用。3、生物監(jiān)測法1）指示菌株 : 指示菌株為耐熱的嗜熱脂肪桿菌芽胞(ATCC 7953或 SSIK 31 株 )，在1210.5條件下， D 值為 1.3 min 1.9min ，殺滅時間 (KT 值 ) 19min，存活時間 (ST 值 )為 3.9min。（2）檢測方法 : 將壓力蒸汽滅菌生物培養(yǎng)指示劑放于標準測試包（由 16 條 41cm .66cm 的全棉手術巾制成 ) 中，按照國家規(guī)范，分別將測試包放于鍋內不同位置，滅菌完畢，取出該生物指示劑送檢

9、。3）結果判定 : 每個指示劑接種的溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基都不變色，判定為滅菌合格；指示菌片之一接種的溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基，由紫色變?yōu)辄S色時，則滅菌過程不合格。4）注意事項 : 監(jiān)測所用菌片須經(jīng)衛(wèi)生部認可， 并在有效期內使用。 生物指示物監(jiān)測應每周 1 次。4、質控標準：1）工藝監(jiān)測應每鍋進行。2）化學監(jiān)測：應每包內放置化學指示卡，包外貼化學指示膠帶，監(jiān)測合格方可使用。預真空和脈動真空壓力蒸汽鍋每日做B D 試驗合格后方可使用。3）生物監(jiān)測應每周一次，無菌生長。六、紫外線消毒效果的監(jiān)測1、檢測方法 : 開啟紫外線燈5min 后，將指示卡置紫外燈下垂直距離1m 處，有圖案一面朝上，照射 1mi

10、n（紫外線照射后，圖案正中光敏色塊由乳白色變成不同程度的淡紫色），觀察指示卡色塊的顏色，將其與標準色塊比較，讀出照射強度。2、結果判定: 普通30w直管型紫外線燈，使用中紫外線燈輻照強度 70 W/cm2為合格。3、注意事項：1）因指示卡光敏色塊會隨時間發(fā)生變化，放置時間過久，指示卡會變淡，應及時記錄判斷結果。2）指示卡應用黑色紙包裝，置 4冰箱內儲存，以免光敏色塊遇日光照射不穩(wěn)定變色，而影響監(jiān)測結果。3）指示卡應獲得衛(wèi)生部的衛(wèi)生許可批件，并在有效期內使用。七、使用中消毒劑與無菌物品保存液監(jiān)測用試紙或指示卡檢測化學消毒劑含量是近年來化學消毒劑濃度簡易測定方法的新發(fā)展， 它解決了醫(yī)院進行消毒劑使

11、用過程的濃度監(jiān)測。1、 化學監(jiān)測：（1） G-I 型消毒劑濃度試紙： ：1） 適用于過氧乙酸及其他含氯消毒劑和含次氯酸鈉的清洗消毒劑等的監(jiān)測。2） 使用方法：取試紙條于消毒劑溶液中，片刻取出。半分鐘內，在自然光下與標準色塊比較，直接讀出溶液所含有效成分濃度值，時間超過1 分鐘，著色逐漸消退。（2）戊二醛濃度測試卡使用辦法：從瓶中取出一條測試卡，并旋緊瓶蓋，將指標色塊完全浸沒于待測消毒液中，沾下瓶蓋上的紙墊，去除多余的液體，橫置于瓶蓋上等候58 分鐘（不要將色塊面朝下，以免受到污染），觀察色塊著色變化，若指示色塊變成均勻黃色，表示溶液濃度 2.0% ，若色塊全部或仍有部分白色，表示溶液濃度2.0

12、%；2、 生物監(jiān)測：1） 采樣時間：采取更換前使用中的消毒液與無菌器械保存液。2） 采樣量及方法：用無菌注射器吸取2 毫升被檢液。（加入9 毫升稀釋液中混勻送檢。不同的消毒劑加入相應的中和劑，對于醇類與酚類消毒液， 稀釋液用普通營養(yǎng)肉湯即可， 對于含氯消毒液、含碘消毒液、過氧化物消毒液，需在肉湯中加入中和劑0.1% 硫代硫酸鈉；對于氯己定（洗必泰） 、季胺鹽類消毒液，許在肉湯中加入3%（ w/v ）吐溫 80 和 0.3% 卵磷脂；對于醛類消毒液，需在肉湯中加入0.3%甘氨酸；對于含有表面活性劑的各種復方消毒液，需在肉湯中加入 3%（ w/v ）吐溫 80，以中和被檢液的殘效作用。）3）注意事

13、項：（ 1） 不同消毒劑使用不同的中和劑中和。（ 2） 采集消毒液樣品時應在消毒液內沒有物品或防入物品消毒作用到規(guī)定時間之后進行采樣。4）質控標準：（ 1）、使用中消毒液每季度監(jiān)測一次，細菌菌落總數(shù)應100cfu/ml,不得檢出致病微生物。（ 2）使用中滅菌劑每月監(jiān)測一次，應無菌生長。（ 3）無菌器械保存液必須無菌生長。四、血液透析液監(jiān)測1、標本采集：透析液的采集應采進入透析器的透析液和離開透析器的透析液2、監(jiān)測時間：每月對出入透析器的透析液送檢。疑有透析液污染或發(fā)生嚴重感染病時，應增加采樣點，如原水口，反滲水出口，儲水罐出口，透析液配比機，濃縮透析液等。懷疑或確定病人在透析中熱源反應和菌血癥

14、時，應隨時監(jiān)測。3、控標準：透析器入口液細菌菌落總數(shù)必須 200cfu/ml，出口液細菌菌落總數(shù)必須 2000cfu/ml并不得檢出致病微生物。五、內鏡的消毒滅菌效果監(jiān)測1、化學監(jiān)測：含氯消毒劑、 2%戊二醛濃度等應每日監(jiān)測，監(jiān)測方法使用中化學消毒劑監(jiān)測的化學監(jiān)測部分。1、生物監(jiān)測：采樣部位為內鏡的內腔面采樣方法：用無菌注射器抽取10 毫升含相應中和劑的緩沖液，從待檢內鏡活檢口注入，用15 毫升無菌試管從活檢口收集，及時送檢，2 小時內檢測同時做致病菌監(jiān)測。2、質控標準：（1） 消毒劑濃度監(jiān)測每日定時監(jiān)測并做好記錄，保證消毒效果。 消毒劑使用時間不得超過產(chǎn)品說明書規(guī)定的使用期限。（ 2） 消毒

15、后內鏡（如胃鏡、腸鏡、喉鏡、氣管鏡、鼻竇鏡等）應每季度進行生物學監(jiān)測并做好監(jiān)測記錄，其合格標準為細菌總數(shù)20cfu/ 件，不得檢出致病菌。判斷結果：菌落數(shù)/鏡 =2 個平皿菌落數(shù)平均值x20（ 3）滅菌后內鏡（如腹腔鏡、關節(jié)鏡、膽道鏡、膀胱鏡、胸腔鏡、腦室鏡等）應每月進行生物學監(jiān)測并做好記錄。判斷結果：合格標準為無菌生長第一部分衛(wèi)生標準1、 各類環(huán)境空氣、物體表面、醫(yī)護人員手衛(wèi)生標準2.1、細菌菌落總數(shù)允許檢出值見表1表 1 各類環(huán)境空氣、物體表面、醫(yī)護人員手細菌菌落總數(shù)衛(wèi)生標準境范圍別類層流潔凈手術室、層流潔凈病房普通手術室，產(chǎn)房、嬰兒室、早產(chǎn)兒室、普通保類護性隔離室、 供應室無菌區(qū)、 燒傷

16、病房、 重癥監(jiān)護病房兒科病房、 婦產(chǎn)科檢查室、注射室、換藥室、治類療室、供應室、清潔區(qū)、急診室、化驗室、各類普通病房和房間類傳染病科及病房1.2 致病性微生物不得檢出乙型溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌及其他致病性微生物。相應指標的檢測。標準空氣物 體 表醫(yī)護人員面手cfu/m3cfu/m 3cfu/m3 10 5 52005550010101515在可疑污染情況下進行母嬰同室、 早產(chǎn)兒室、嬰兒室、 新生兒及兒科病房的物體表面和醫(yī)護人員手上，不得檢出沙門氏菌。2、 醫(yī)療用品衛(wèi)生標準2.1 進入人體無菌組織、器官或接觸破損皮膚、粘膜的醫(yī)療用品必須無菌。2.2 接觸粘膜的醫(yī)療用品細菌菌落總數(shù)應20cf

17、u/g 或 100cm2:：致病性微生物不得檢出。3、 使用中消毒劑與無菌器械保存液衛(wèi)生標準3.1 使用中消毒劑細菌菌落總數(shù)應100cfu/ml ，致病性微生物不得檢出。3.2、無菌器械保存液必須無菌4、污物處理衛(wèi)生標準污染物品無論是回收再使用的物品， 或是廢棄的物品， 必須進行無害化處理。 不得檢出致病性微生物。在可疑污染情況下，進行相應指標的檢測。第二部分采樣方法4、采樣及檢查原則采樣后必須盡快對樣品進行相應指標的檢測，送檢時間不得超過6h。若樣品保存 0 4條件時，送檢時間不得超過 24h。5、空氣采樣方法2.1 采樣時間選擇消毒處理后與進行醫(yī)療活動之前期間采樣。2.2 采樣高度與地面垂

18、直高度 80 150cm。2.3 布點方法室內面積 30m2，設一條對角線上取3 點，既中心一點、兩端各距墻1m 處各取一點：室內25 點，其中東、西、南、北點均距墻1m。百級層流 13面積 30m，設東、西、南、北、中個點，萬級層流 9 個點。2.4 采樣方法用 9cm 直徑普通營養(yǎng)瓊脂平板在采樣點暴露5min 、15min 、30min 后送檢培養(yǎng)。6、物體表面采樣方法3.1 采樣時間選擇消毒處理后4h 內進行采樣。3.2 采樣面積被采表面 100cm2，取全部表面：被采表面100cm2，取 100cm 23.3 采樣方法用 5 5cm2 的標準滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，用浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭紙1支，在規(guī)格板內橫豎往返各涂抹5 次，并隨之轉動棉拭紙，連續(xù)采樣1 4 個規(guī)格板面積，剪去手接觸部分，將棉拭紙放入裝10ml 采樣液的試管中送檢。門把手等小型物體則采用棉拭